生化分离技术1.2 生化分离生产安全技术电子课件 .ppt

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1、生化分离技术1.2 生化分离生产安全技术电子课件 项目二 生化分离生产安全技术【项目简介】生化物质分离生产涉及危险化学品，以及细菌和病毒等生物因子，并且生产过程具有高温、高压、真空、易燃、易爆、易中毒等特点，因此，生产中存在发生中毒、火灾和爆炸等事故，以及发生生物安全事故的隐患。企业能否安全地生产事关生命财产安全和社会稳定。为保证生产安全，生化企业生产人员应当明确并理解自己的职责，熟悉与其职责相关的安全管理要求，掌握安全生产技能。企业需按照相关规定组织员工开展生产安全相关的上岗前培训和在岗继续教育培训。本项目将围绕员工上岗前三级教育和全员安全生产教育的内容开展学习，主要学习安全生产规章制度、危

2、险物质安全管理技术、生产设备与电气安全技术和生产安全分析与评价技术，使生产在符合安全要求的环境和工作秩序下进行，保证人身安全、设备安全、产品安全和环境安全。p 知识要求（1）意识到开展安全生产教育的意义。（2）掌握企业安全生产规章制度。（3）理解生产中的安全术语及常识。（4）掌握生产中危险物质管理的相关知识。（5）熟悉电气安全管理知识。p 技能要求（1）能安全地使用和管理生产中的危险物质。（2）能维护和安全地操作生产设备。（3）能有效开展风险评价并控制风险。（4）能预防和应急处理生产中可能出现的各种危险。学习目标 药品生产质量管理规范（2010 年修订）第十八条明确指出，所有人员应当明确并理解

3、自己的职责，熟悉与其职责相关的要求，并接受必要的培训，包括上岗前培训和继续培训。1 新员工入厂三级教育 参培人员：新员工、特种作业人员、复工人员、转岗人员、“五新”（新工艺、新技术、新设备、新材料、新产品）人员；培训内容：公司（厂）级、车间（分厂）级和班组级三级安全教育。生化分离生产安全技术 2 全员安全生产教育 各部门（车间）每年至少实施一次全员安全操作规程教育。参培人员：所有员工；培训内容：安全生产责任制、标准化管理、各项安全要求、安全生产技术等。生化分离生产安全技术 任务一：员工安全生产教育 任务二：生物制药危险物质安全管理技术 任务三：生物制药设备与电气安全技术培训 任务四：生物安全系

4、统分析与评价技术培训生化分离生产安全技术 公司（厂级）安全教育培训 负责人：企业安技部门 培训内容：公司层级通用的安全生产知识。车间级安全教育培训 负责人：车间负责人和安全员 培训内容：本部门的生产特点、危险区域和 特殊设备操作。班组级安全教育培训 负责人：班组长和安全员 培训内容：岗位安全基础教育。任务一 员工的安全生产教育 1 安全生产中的术语及常识（1）安全生产中的术语 安全：在生产活动过程中，能将人员伤亡或财产损失控制在可接受水平之下的状态。危险：在生产活动过程中，人员或财产遭受损失的可能性超出了可接受范围的一种状态。员工的安全生产教育 事故：在生产和行进过程中，突然发生的与人们的愿望

5、和意志相反的情况，使生产进程停止或受到干扰的事件。事故隐患：生产系统中可导致事故发生的人的不安全行为、物的不安全状态和管理上的缺陷，是一种潜藏的祸患。安全性：确保安全的程度，是衡量系统安全程度的客观量。安全生产：在生产经营活动中，为避免造成人员伤害和财产损失的事故而采取相应的事故预防和控制措施，以保证从业人员的人身安全，保证生产经营活动得以顺利进行的相关活动。（2）造成安全事故的原因p 直接原因：设备的不安全状态+人员的不安全行为 人员的不安全行为产生的原因：不知道正确的操作方法；虽然知道正确的操作方法，却为尽快完工而省略了必要的步骤；按自己的习惯操作。p 间接原因：技术原因；教育原因；身体原

6、因；精神原因；管理原因。p 安全生产的基本方针“安全第一、预防为主”生产经营中，要把安全放在第一位；安全措施的落实上，要把预防放在第一位。p 安全生产的原则 管生产必须管安全的原则；谁主管谁负责的原则；安全生产人人有责(安全生产责任制)。2 安全生产工作的基本思路与措施p 安全生产中的三点控制 p 保障安全生产的“五要素”p 安全生产中的“三违”现象 危险点控制 危害点控制 事故多发点控制安全文化（即安全意识）安全法制安全责任安全科技安全投入违反规章制度违章操作违章指挥p 安全管理中的“四全管理”全员、全面、全过程、全天候。“四全管理”的基本精神是人人、处处、事事、时时都要把安全放在首位。p

7、安全检查的要点 查思想，查管理，查现场、查隐患，查整改，查事故处理。p 调查处理工伤事故的“三不放过”事故原因不清不放过；事故责任者和员工没受到教育不放过；没有防范措施不放过。3 员工安全生产须知（1）虚心学习，掌握技能（2）遵守安全生产的一般规则（3）遵守安全生产规章制度和操作规程 生产过程中做到“五必须”和“五严禁”。p“五必须”：必须遵守厂纪厂规；必须经安全生产培训考核合格后持证上岗作业；必须了解本岗位的危险危害因素；必须正确佩戴和使用劳动防护用品；必须严格遵守危险性作业的安全要求。p“五严禁”：严禁在禁火区域吸烟、动火；严禁在上岗前和工作时间饮酒；严禁擅自移动或拆除安全装置和安全标志；

8、严禁擅自触摸与已无关的设备、设施；严禁在工作时间串岗、离岗、睡岗或嬉戏打闹。（4）“三不伤害”（5）工作前后进行安全检查 p 开工前，要了解生产任务、作业要求和安全事项。工作中，要检查劳动防护用品穿戴、机械设备运转安全装置是否完好。p 完工后，应将气阀、水阀、煤气、电气开关等关好；整理好用具和工组箱并放在指定地点；危险物品应存放在指定场所，填写使用记录，关门上锁。不伤害自己不伤害他人不被他人伤害4 员工的权利和义务（1）“八大权利”：知情权，建议权，批评、检举、控告权，拒绝权，紧急避险权，获得赔偿权，获得教育培训权，获得劳防用品权。（2）三项义务：遵章守纪，服从管理义务；学习安全知识，掌握安全

9、技能义务；险情报告义务。（3）其它权益：预防职业病和职业中毒的权益；享有休息休假的权益；女职工享受特殊保护的权益；发生权益争议，有权提请复议和劳动仲裁。课后自测 为什么要开展生物制药安全生产培训，生物制药安全生产培训的主要内容有哪些？一、认识生物制药企业的危险物质（一）危险物质的分类p 按照在生产中的存在形式分类 原料；辅料：溶剂、冻存保护剂等，如乙酸丁酯、二甲基亚砜；生产用菌株、病毒株或细胞株：如狂犬病病毒；中间体：如7-氨基头孢烷酸(简称7-ACA)；产品：如青霉素、链霉素等；副产物或危险废物：如微生物生成的废气、培养基废渣等。任务二 危险因素安全管理技术p 按照存在形态分类 固体；液体；

10、气体；蒸气：由固体升华、液体挥发或蒸发所形成。沸点低、蒸气压大的物质易形成蒸气；粉尘：能较长时间悬浮在空气中的固体微粒，粒径多在0.1 10m；微生物气溶胶：一群形体微小、构造简单的单细胞或接近单细胞的生物悬浮于空气中所成形的胶体体系。粒径0.01 100m，一般为0.1 30m。生物因子：如细菌和病毒等。（二）危险化学品及其分类 危险化学品是指具有毒害、腐蚀、爆炸、燃烧、助燃等性质，对人体、设施、环境具有危害的剧毒化学品和其他化学品。国家标准GB 13690-2009 和GB 6944-2012 危险货物分类和品名编号等对各类危险化学品的性质、特点进行了详细介绍。28 个大项如下：1.物理危

11、险（1）爆炸物。（2）易燃气体。（3）气溶胶（又称气雾剂）。（4）氧化性气体。（5）加压气体。（6）易燃液体。（7）易燃固体。（8）自反应物质和混合物。（9）自燃液体；（10）自燃固体。（11）自热物质和混合物。（12）遇水放出易燃气体的物质和混合物。（13）氧化性液体。（14）氧化性固体。（15）有机过氧化物。（16）金属腐蚀物。2.健康危害（17）急性毒性。（18）皮肤腐蚀/刺激。（19）严重眼损伤/眼刺激。（20）呼吸道或皮肤致敏。（21）生殖细胞致突变性。（22）致癌性。（23）生殖毒性。（24）特异性靶器官毒性-一次接触。（25）特异性靶器官毒性-反复接触。（26）吸入危害。3.环境

12、危害（27）危害水生环境-急性危害。（28）危害臭氧层。图4 常用危险化学品标志 爆炸品标志 腐蚀品标志 氧化剂标志 有毒品标志 遇湿易燃物品标志 自燃物品标志 易燃液体标志 一级放射品标志 p 生物危害是由生物因子形成的伤害。生物危害的评估依据：实验室感染的可能性；感染后发病的可能性；发病症状轻重及愈后情况；有无致命危险；有无防止感染方法及用一般的微生物操作方法能否防止感染；我国是否有此种菌种及是否曾引起流行、人群免疫力等。（三）生物危害及生物安全警示标识 生物安全警示标志用于指示该区域或物品中的生物物质（致病微生物、细菌等）对人类及环境会有危害。图1 生物安全警示标志 p 生物安全警示标志

13、（四）常见的生物制品生产用菌（毒）种 p 分类依据：病原微生物实验室生物安全管理条例；p 分类标准：病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度；p 共分为四类，其中，第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。分类 菌（毒）种第一类能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物第二类能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类 在通

14、常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。生物制品生产、检定用菌（毒）种的生物安全分类与与实验室生物安全防护水平分级实验室生物安全防护水平分级什么关系？什么关系？常见的生物制品生产用菌（毒）种p 细菌活疫苗生产用菌种p 微生态活菌制品生产用菌种p 细菌灭活疫苗及纯化疫苗生产用菌种p 体内诊断制品生产用菌种p 病毒活疫苗生产用菌种p 病毒灭活疫苗生产用菌种 p 重组产品生产用工程菌株（五）生物制药中的危险废物废物类别行业来源废物代码危险废物危险特性HWO2医药废物生物、生化制品的制造276-001-02利用生物技术生产生物化学药品、基因工程药物过程中的蒸馏及反应残渣毒性276-002-02利用生

15、物技术生产生物化学药品、基因工程药物过程中的母液、反应基和培养基废物毒性276-003-02利用生物技术生产生物化学药品、基因工程药物过程中的脱色过滤（包括载体）物与滤饼毒性276-004-02利用生物技术生产生物化学药品、基因工程药物过程中废弃的吸附剂、催化剂和溶剂毒性276-005-02利用生物技术生产生物化学药品、基因工程药物过程中的报废药品及过期原料毒性二、生物制药企业对危险物质的综合防护措施（一）常见的防护措施（1）替代或排除有毒、高毒物料（2）采用危害性小的工艺（3）隔离 避免作业人员直接与有害因素接触是控制危害最彻底、最有效的措施。隔离的方法：封闭、设置屏障和机械化代替人工操作等

16、（4）通风 通风是控制作业场所中有害或危险性气体、蒸气或粉尘最有效的措施（见下一页）。（5）个体防护 保护健康的辅助性措施，并不能消除工作场所中危害物质的存在（6）定期体检 对职业中毒者早期发现、早期治疗。通风方式p 通风包括排风和进风 排风-在局部地点或整个车间把不符合卫生标准的污浊空气排至室外；进风-把新鲜空气或经过净化符合卫生要求的空气送入室内。通风的应用 点式扩散源-局部通风；面式扩散源-全面通风p 局部通风是把污染源罩起来，对局部地点进行排风或送风，以控制有害物向室内扩散。实验室中的通风橱即为局部排风设备，局部排风时，应使污染源处于通风罩控制范围内。特点：局部通风所需风量小，经济有效

17、，并便于有害物质的净化回收。局部通风的方式：局部进风和局部排风。p 全面通风是对整个车间进行排风或送风，抽出污染空气，提供新鲜空气，降低有害物质浓度。特点：全面通风能有效降低作业场所中有害物质的浓度，但全面通风所需风量大，难以净化回收有害物质。全面通风的方式：全面排风法、全面送风法、全面排送风法和全面送，局部排风混合法等。注意：通风不能消除有害物质，而只是将有害物质分散稀释，所以通风的方法仅适合于低毒性作业场所，不适于有害物质浓度产量、危害性大的作业场所。案例导入-讨论 1.为什么会发生克念菌素中毒事故？过筛室空间狭小，4 名操作工在室内同时打粉操作致人员过于集中，且个别工人未戴防护口罩，粉碎

18、机内的除尘风机也未开启。另外，事后调查发现，发病就诊的3 人都有青霉素过敏史。克念菌素是一种抗生素，抗真菌药，主要不良反应是少数病人用药后有恶心、呕吐等不舒服感。此次发病原因不排除工人操作中吸入过量克念菌素粉尘引起的不良反应。2.如何避免类似事故发生？（1）增大操作室空间，有效运用隔离、通风等保护措施全面改善操作环境；（2）加强职业卫生监督力度，促进企业做好职业卫生管理工作，特别要加强个体防护监督管理，从源头上控制职业中毒的发生；（3）加强中华人民共和国职业病防治法的宣传，加强职业卫生知识培训，提高职工自我保护意识和能力；（4）积极开展上岗前和在岗职工的职业性健康体检和培训工作，建立有害作业场

19、所监测制度，完善安全生产规章制度；配备有效的个人防护器具，做好安全监护工作，防止类似事故发生。（二）微生物气溶胶的控制p 微生物气溶胶的吸入是引起感染的最主要途径p 控制病原微生物感染的重要方法：防止微生物气溶胶扩散。p 防止微生物气溶胶扩散的措施围场操作屏障隔开消毒灭菌定向气流有效拦截控制措施 围场操作是把感染性物质局限在一个尽可能小的空间内进行操作，使之不与人体直接接触，并与开放之空气隔离，避免人的暴露。进行围场操作的设施设备往往组合应用了机械、气幕、负压等多种防护原理。生物安全柜是用于围场操作的主要隔离设备，可以防止有害悬浮微粒的扩散，对实验者、实验物和环境提供保护，安全应用于对高危险微

20、生物、有毒物质和放射寡核苷酸等的操作。（1）围场操作图2 生物安全柜（2）屏障隔离 微生物气溶胶一旦产生并突破围场，要靠各种屏障防止其扩散，因此屏障也被视为第二层围场。例如，生物安全实验室围护结构及其缓冲室或通道，能防止气溶胶进一步扩散，保护环境和公众健康。（3）定向气流 对生物安全三级以上实验室的要求是保持定向气流。要求包括：实验室周围的空气应向实验室内流动，以杜绝污染空气向外扩散的可能，保证不危及公众；在实验室内部，清洁区的空气应向操作区流动，保证没有逆流，以减少工作人员暴露的机会；轻污染区的空气应向污染严重的区域流动。以BSL-3 实验室为例，原则上半污染区与外界气压相比应为-20Pa，

21、核心实验室气压与半污染区相比也应为-20Pa，感染动物房和解剖室的气压应低于普通BSL-3实验室核心区。（4）消毒灭菌 消毒部位：空气、表面、仪器、废物、根据生物因子的特性和消毒对象进行有针对性的选择方法，并注意环境条件对消毒效果的影响。（5）有效拦截 生物安全实验室内的空气在排入大气之前，必须通过高效粒子空气(HEPA)过滤器过滤。HEPA 滤器的滤材是多层、网格交错 排列的，其拦截感染性气溶胶颗粒的原理：过筛：直径大于滤材网眼的颗粒被拦截；沉降：由于重力和热沉降或静电沉降作用，粒子可能被阻拦在滤材上；惯性撞击：气溶胶粒子直径虽小于网眼，但粒子的惯性撞击作用也可能阻拦在滤材上；粒子扩散：对于

22、直径较小的气溶胶粒子，由于粒子扩散作用也可能被阻拦在滤材上。图3 HEPA 过滤器废水等。实验室生物安全通用要求（GB19489-2008）规定了对不同生物安全防护级别实验室的设施、设备和安全管理的基本要求。该标准适用于涉及生物因子操作的实验室。生物因子biological agents 系指微生物和生物活性物质。实验室生物安全防护水平分为四级。一级防护水平最低，四级防护水平最高 以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4（bio-safety level，BSL）表示仅从事体外操作的实验室的相应生物安全防护水平。以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4（animal b

23、io-safety level，ABSL）表示包括从事动物活体操作的实验室的相应生物安全防护水平。（三）生物安全实验室分级 处理对象一级在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物 二级能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物三级能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物 四级能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物 实验室生物安全防护水平分级实验室生物安全防护水平分级(GB19489-200

24、8)生物安全实验室的原理屏障原理屏障原理过滤原理过滤原理消毒灭菌消毒灭菌个人防护个人防护实验室的设施要求 在在实实验验室室设设计计时时，应应特特别别关关注注能能够够造造成成实实验验室生物危害的主要因素，包括：室生物危害的主要因素，包括：气溶胶的形成；气溶胶的形成；处理大容量和或高浓度微生物；处理大容量和或高浓度微生物；人员过多或设备过多；人员过多或设备过多；啮齿动物和节肢动物大量孳生；啮齿动物和节肢动物大量孳生；未经允许人员进入实验室；未经允许人员进入实验室；工作流程中使用一些特殊的样品和试剂。工作流程中使用一些特殊的样品和试剂。BSL1实验室的设施要求 应为安全运行以及清洁和维护提供充足的空

25、间。应为安全运行以及清洁和维护提供充足的空间。实 实验 验室 室的 的墙 墙壁 壁、天 天花 花板 板和 和地 地板 板应 应当 当是 是光 光滑 滑、易 易清 清洁 洁、不 不渗 渗水 水以 以及 及耐 耐化 化学 学品 品和 和消 消毒 毒剂 剂的 的腐 腐蚀 蚀。地 地板 板应 应当 当是 是防 防滑 滑的 的，同 同时应尽可能地避免管线暴露在外。时应尽可能地避免管线暴露在外。实 实验 验台 台应 应当 当密 密封 封于 于墙 墙上 上，不 不渗 渗水 水，并 并可 可耐 耐消 消毒 毒剂 剂、酸 酸、碱 碱、有机溶剂的腐蚀并能适度耐热。有机溶剂的腐蚀并能适度耐热。在 在实 实验 验室

26、室内 内进 进行 行操 操作 作时 时均 均应 应保 保证 证照 照明 明，避 避免 免不 不必 必要 要的 的反 反光 光和闪光。和闪光。实 实验 验室 室内 内的 的设 设备 备应 应当 当摆 摆放 放稳 稳定 定，在 在实 实验 验台 台和 和其 其他 他设 设备 备之 之间 间及其下面要保证有宽敞的空间以备清洗。及其下面要保证有宽敞的空间以备清洗。应 应当 当有 有足 足够 够的 的存 存储 储空 空间 间来 来摆 摆放 放物 物品 品以 以方 方便 便使 使用 用，从 从而 而预 预防 防在 在实 实验 验台 台和 和走 走廊 廊内 内造 造成 成混 混乱 乱。最 最好 好还 还应

27、应当 当在 在实 实验 验室 室工 工作 作区 区域外提供其他长期使用的存储空间。域外提供其他长期使用的存储空间。BSL1实验室的设施要求 应 应当 当为 为安 安全 全地 地操 操作 作及 及储 储存 存溶 溶剂 剂、放 放射 射性 性物 物质 质、压 压缩 缩气 气体 体和液化气提供足够的空间和设备。和液化气提供足够的空间和设备。在实验室的工作区域外应当有存放外衣和私人物品的设备。每个实验室都应该有洗手池，可能的话应供应自来水，洗手池最好安装在出口处。实验室的窗子和门入口处应安装防媒介昆虫和啮齿动物的纱窗和挡板。BSL2实验室的设施要求 在在满满足足BSLBSL11实实验验室室设设施施的的

28、基基础础上上，增增加加以以下内容：下内容：实验室的门应能够自动关闭，有可视窗；实验室的门应能够自动关闭，有可视窗；有适当的火灾报警器。有适当的火灾报警器。实实验验室室不不需需特特殊殊的的通通风风设设备备。但但在在计计划划安安装装新新的的设设备备时时，应应当当考考虑虑要要设设置置通通风风系系统统，使使空空气气向向内内流流动动而而不不发发生生循循环环。如如果果没没有有通通风风系系统统，那那么么实实验室窗户应当能够打开，同时要安装防虫的纱窗。验室窗户应当能够打开，同时要安装防虫的纱窗。应有可靠的动力保证和应急照明设施。应有可靠的动力保证和应急照明设施。（三）生物制药企业安全生产管理（一）危险化学品的

29、管理1 危险化学品的使用2 危险化学品的贮存3 危险化学品的运输（1）防护（2）准备（3）运输工具（4）装卸（5）良好的工作习惯（6）强腐蚀性物品的运输（7）放射性物品的运输（二）生物制品生产、检定用菌毒种管理l 菌毒种，系指直接用于制造和检定生物制品的细菌、立克次体或病毒等，菌毒种参照人间传染的病原微生物名录分类。l 生物制品生产检定用菌毒种管理规程的内容：菌毒种登记程序 菌毒种的检定 菌毒种的保存 菌毒种的销毁 菌毒种的索取、分发与运输（1）菌毒种登记程序 菌毒种由国家药品检定机构统一进行国家菌毒种编号，各单位不得更改及仿冒。未经注册并统一编号的菌毒种不得用于生产和检定。保管菌毒种应有严格

30、的登记制度，建立详细的总账及分类账。收到菌毒种后应立即进行编号登记，详细记录菌毒种的学名、株名、历史、来源、特性、用途、批号、传代冻干日期和数量。在保管过程中，凡传代、冻干及分发，记录均应清晰，可追溯，并定期核对库存数量。收到菌毒种后一般应及时进行检定。用培养基保存的菌种应立即检定。（2）菌毒种的检定 生产用菌毒种应按要求进行检定。所有菌毒种检定结果应及时记入菌、毒种检定专用记录内。不同属或同属菌毒种的强毒株及弱毒株不得同时在同一洁净室内操作。涉及菌毒种的操作应符合国家生物安全的相关规定。应对生产用菌毒种已知的主要抗原表位的遗传稳定性进行检测，并证明在规定的使用代次内其遗传性状是稳定的。减毒活

31、疫苗中所含病毒或细菌的遗传性状应与原始种子批和/或主种子批一致。（3）菌毒种的保存 菌毒种经检定后，应根据其特性，选用冻干或适当方法及时保存。不能冻干保存的菌毒种，应根据其特性，置适宜环境至少保存2 份或保存于两种培养基。保存的菌毒种传代或冻干均应填写专用记录。保存的菌毒种应贴有牢固的标签，标明菌毒种编号、名称、代次、批号和制备日期等内容。（4）菌毒种的销毁 无保存价值的菌毒种可以销毁 销毁一、二类菌毒种的原始种子批、主种子批和工作种子批时，须经本单位领导批准，并报请国家卫生行政当局或省、自治区、直辖市卫生当局认可。销毁三、四类菌毒种须经单位领导批准。销毁后应在账上注销，做出专项记录，写明销毁

32、原因、方式和日期。（5）菌毒种的索取、分发与运输 索取菌毒种，应按中国医学微生物菌种保藏管理办法执行。分发生物制品生产和检定用菌毒种，应附有详细的历史记录及各项检定结果。菌毒种采用冻干或真空封口形式发出，如不可能，毒种亦可以组织块或细胞悬液形式发出，菌种亦可用培养基保存发出，但外包装应坚固，管口必须密封。菌毒种的运输应符合国家相关管理规定。如可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定等。（三）消毒及灭菌 灭菌：用化学或物理的方法杀灭或去除物料及设备、空间中所有生物的技术或工艺过程。消毒：杀灭或清除病原微生物，达到无害化程度，杀灭率99.9%以上。灭菌工艺化学灭菌物理灭菌（1）化

33、学灭菌 用化学物质杀灭微生物的灭菌操作。常见的化学灭菌剂有氧化剂类、卤化物类、有机化合物等。机理：与微生物细胞中的成分反应，使蛋白质变性，酶失活，破坏细胞膜透性，细胞死亡。应用：皮肤表面、器具、实验室和工厂的无菌区域的台面、地面、墙壁及空间的灭菌。使用方法：浸泡、擦拭、喷洒等。生物制药企业常用的化学灭菌剂 化学灭菌剂 杀菌原理 使用浓度高锰酸钾 使蛋白质、氨基酸氧化 0.13过氧乙酸 氧化蛋白质的活性基团0.20.5漂白粉 在水溶液中分解为新生态氧和氯 15%苯扎溴铵（新洁而灭）以阳离子形式与菌体表面结合，引起菌体外膜损伤和蛋白质变性0.25酒精 使细胞脱水，蛋白质凝固变性 75甲醛 强还原剂

34、，与氨基结合 37甲酚皂（来苏尔）蛋白质变性，损伤细胞膜 15（2）物理灭菌 u 辐射灭菌：高能量电磁辐射与菌体核酸的光化学反应能造成菌体死亡，如Co60射线。u 高温干热灭菌法：电热烤箱加热至140 180，维持1-2h 或灼烧，利用氧化、蛋白质变性和电解质浓缩等作用致死微生物；u 高温湿热灭菌法：121 维持15 30 min，利高温和蒸汽的穿透力灭菌。（四）病毒的去除与灭活（1）巴斯德消毒法（巴氏消毒法）（2）干热法（冻干制品）80 加热72 小时，可以灭活HBV、HCV、HIV 和HAV 等病毒。注意：考虑制品的水分含量、制品组成（如：蛋白质、糖、盐和氨基酸）对病毒灭活效果的影响。（3

35、）有机溶剂/去污剂（S/D）处理法 0.3%磷酸三丁脂（TNBP）和1%吐温-80，在24 处理至少6 小时；0.3%TNBP 和1%Triton X-100，在24 处理至少4小时。S/D 处理前应先用1m 滤器除去蛋白溶液中可能存在的颗粒（颗粒可能藏匿病毒从而影响病毒灭活效果）。（4）膜过滤法 膜过滤技术只有在滤膜的孔径比病毒有效直径小时才能有效除去病毒。该方法不能单独使用，应与其它方法联合使用。（5）低pH 孵放法 免疫球蛋白生产工艺中的低pH（如pH4）处理（有时加胃酶）能灭活几种脂包膜病毒。灭活条件（如：pH 值、孵放时间和温度、胃酶含量、蛋白质浓度、溶质含量等因素）可能影响病毒灭活

36、效果，验证试验应该研究这些参数允许变化的幅度。四、生物制药企业的应急措施1 职业中毒的治疗原则（1）病因治疗 解除中毒的病因，阻止毒物继续进入体内，促使毒物排泄以及拮抗或解除其毒作用。（2）对症治疗 缓解引起的主要症状，以促使人体功能恢复。（3）支持治疗 能提高患者抗病能力，促使早日恢复健康。2 急性中毒的救护（1）救护人员的个人防护 佩戴好防毒面具、穿好防护服等呼吸系统和体表的防护用品。（2）现场抢救 立即使患者停止接触毒物，尽快将其移出危险区，转移至空气流通处，保持呼吸畅通。如衣物或皮肤被污染，必须将衣服脱下，用清水洗净皮肤。如毒物进入眼睛，应用大量流水缓缓冲洗眼睛15min 以上。如出现

37、休克、停止呼吸，心跳停止等，立即采取人工呼吸、心肺复苏等急救措施进行抢救。尽快把中毒者送往医院进行专业治疗。（3）毒物的消除 患者到达医院后，如毒物经口食入引起急性中毒，需立即用催吐、洗胃及导泻等消除毒物；如系气体或蒸汽吸入中毒，可给予吸氧，以纠正缺氧，加速毒物经呼吸道排出。（4）消除毒物在体内的作用 尽快使用络合剂或其他特效解毒疗法。金属中毒-二巯基丙醇等络合剂 中毒性高铁血红蛋白血症-美蓝治疗 氨、铜盐、汞盐、羧酸类中毒-喝牛奶、生鸡蛋等缓解剂。3 意外事故的处理（1）伤、割伤及擦伤 受伤人员应脱除防护衣，清洗双手及受伤部位，使用适当的消毒剂消毒，必要时，送医院就医。要记录受伤原因及相关的

38、微生物，并保完整的医疗记录。（2）食入潜在感染性物质 脱下受害人的防护衣并迅速送医院就医。要报告事故发生的细节，并保完整的医疗记录。（3）潜在危害性气溶胶的意外释放 所有人员必须即撤离相关区域，并即向上级领导汇报；张贴“禁止进入”的标志，气溶胶意外释放后一定时间内（如1 小时内）严禁人员进入；经适当隔离后，在专家的指导下，由穿戴防护衣及呼吸保护装备的人员除污；任何现场人员都应接受医学检查。（4）容器破碎导致感染性物质溢出 戴上手套，即用抹布或纸巾覆盖溢出的感染性物质及遭污染的破碎容器；在破碎容器上面倒上消毒剂，并使其作用适当时间；将抹布、纸巾以及破碎物品清掉，玻璃碎片应使用镊子清；使用消毒剂擦

39、拭污染区域；如果使用畚箕清破碎物，应对其进高压灭菌或置入有效的消毒液内浸泡。用于清的抹布、纸巾等均应放于盛装污染性废弃物的容器内。五、生物制药中危险物质的相关知识 职业中毒：在职业活动中，接触一切生产性有毒因素所造成的机体中毒性损害。p 急性中毒 毒物一次或短时间内大量进入人体后引起的中毒。p 慢性中毒 小剂量毒物长期进入人体所引起的中毒。慢性中毒的远期影响必需引起重视。p 亚急性中毒 介于急性中毒和慢性中毒之间，在较短时间内有较大剂量毒物进入人体而引起的中毒。（一）职业中毒（二）毒物毒性及其评价指标 只要达到一定的数量，任何物质对机体都具有毒性，如果低于一定数量，任何物质都不具有毒性。毒物：

40、在一定条件下，较小剂量就能够对生物体产生损害作用或使生物体出现异常反应的外源化学物。常用的毒性评价指标（1）绝对致死剂量或浓度(LD100或LC100)是指引起全组受试动物全部死亡的最低剂量或浓度。（2）半数致死剂量或浓度(LD50或LC50)是指引起全组受试动物半数死亡所需的剂量或浓度。（3）最小致死剂量或浓度(MLD 或MLC)是指使全组受试动物中有个别动物死亡的剂量，其低一档的剂量即不再引起动物死亡。（4）最大耐受剂量或浓度(LD0或LC0)是指使全组受试动物全部存活的最大剂量或浓度。“剂量”的单位以mg/kg 表示“浓度”的单位以mg/m3、g/m3或mg/L 表示 化学物质的急性毒性

41、分级分级大鼠一次经口LD50(mg/kg)6只大鼠吸入4h死亡24只浓度(g/g)兔涂皮LD50(mg/kg)经皮对人可能的单位体重致死剂量(g/kg)剧毒1 10 5 0.05高毒150 10100 544 0.050.5中毒50500 1001000 44350 0.55低毒5005000 100010000 3502180 515微毒5000 10000 2180 15（三）危险化学品进入人体的途径经呼吸道经消化道经皮肤图5 危险化学品进入人体的途径（1）经呼吸道进入 全部职业中毒者中，有95%是由呼吸道吸入引起的。人体肺泡表面积约90 160m2，每天吸入空气约12m3（约15kg）。

42、肺泡上有大量的毛细血管且壁薄，有利于有毒气体、蒸气以及液体和粉尘迅速吸入，溶解于血液，由血液分布到全身各个器官而造成中毒。吸入的毒物愈多，中毒就愈厉害，毒物水溶性越大导致中毒的可能性越大。劳动强度、环境温度、湿度、接触毒物的条件和毒物的性能等因素，都将对吸收量有影响。肺泡内的二氧化碳，也能增加某些物质的溶解度，从而促进毒物的吸收。（2）经皮肤进入l 有些毒物可透过表皮屏障或经毛囊的皮脂腺进入人体。l 表皮的三种屏障：第一道是皮肤的角质层，一般分子量大于300 的物质，不易透过无损的皮肤；第二道是位于表角质层下面的连接角质层，其表皮细胞，富有固醇磷酯，它能阻碍水溶性毒物的通过，而让脂溶性毒物透过

43、，并扩散，经乳头毛细血管而进入血液；第三道是表皮与真皮连接处的基膜。水、脂都溶的物质(如苯胺)，易被皮肤吸收。只脂溶而水溶极微的物质苯，经皮肤吸收量较少（如苯）。l 毒物经皮肤进入毛囊后，可绕过表皮的屏障直接透过皮脂腺细胞和毛囊壁进入真皮，再从下面向表皮扩散。但这个途径不如表皮吸收重要。l 如果表皮屏障的完整性被破坏，如外伤、灼伤等，可促进毒物的吸收。粘膜吸收毒物的能力远较皮肤强，部分粉尘可以通过粘膜吸收。（3）经消化道进入 毒物从消化道进入人体，主要是由于不遵守卫生制度，误服毒物，或毒物喷入口腔等导致。该种中毒情况较少见。（四）病原微生物感染人体的途径 微生物气溶胶的吸入；刺伤、割伤；皮肤、

44、黏膜污染；食入；实验动物咬伤；其他不明原因的感染。p 微生物气溶胶的特点 无色无味、无孔不入，不易发现；来源广泛，许多操作可以产生微生物气溶胶，并随空气扩散而污染实验室的空气，当工作人员吸入后，便可以引相关感染。微生物气溶胶对工作人员都具有严重的危害性，其程度取决于微生物本身的毒力、气溶胶的浓度、气溶胶粒子大小以及当时室内的微小气候条件。一般来说，微生物气溶胶颗粒越多，粒径越小，实验室的环境越适合微生物生存，引起实验室感染的可能性就越大。p 分类飞沫核气溶胶 粉尘气溶胶可产生微生物气溶胶的实验室操作p 轻度产生微生物气溶胶的操作（10 个颗粒）玻片凝集实验、倾倒毒液、火焰上灼热接种环、颅内接种

45、、接种鸡胚或抽取培养液等；p 中度产生微生物气溶胶的操作（11100 个颗粒）：实验动物尸体解剖，用乳钵研磨动物组织，离心沉淀前后注入、倾倒、混悬毒液，毒液滴落在不同表面上，用注射器从安瓿种抽取毒液，接种环接种平皿、试管或三角瓶等，打开培养容器的螺旋瓶盖，摔碎带有培养基的平皿等；p 重度产生微生物气溶胶的操作（100 个颗粒）离心时离心管破裂，打开、打碎干燥菌种安瓿，搅拌后立即打开搅拌器盖，小白鼠鼻内接种，注射器针尖脱落喷出毒液，刷衣服、拍打衣服等。课后自测 生物制药过程中有哪些生物危害，企业和员工应当采取哪些措施避免或减少生物危害？任务三 生物制药设备与电气安全技术 案例导入-案例 XXXX

46、 年X 月X 日上午，某生物制药有限公司发生爆炸并起火，造成5 人被烧死亡，6 人被烧伤和摔伤，2 人轻伤。据安监部门通报，该日上午，某生物制药有限公司工厂三楼片剂车间洁净区段当班职工按工艺要求在制粒室进行混合、制软剂、制粒、干燥等操作。9 时30 分许，检修人员为给空调更换初效过滤器，断电停止了空调工作，净化后的空气无法进入洁净区。同时，由于操作过程中存在边制粒、边干燥的情况，烘箱内循环热气流使粒料中的水分和乙醇蒸发，由于排湿口排出蒸发的水分和乙醇蒸汽的效果明显降低，乙醇蒸汽不能从排湿口排走，烘箱内蓄积了达到爆炸极限的乙醇气体。同时，由于当时房间内空调已停止工作，制 制粒室内制粒物挥发出的乙

47、醇气体与干燥门开关时溢散出的水分、乙醇气体无法被新风置换，也堆积了大量可以燃烧的乙醇气体。加之洁净区所用干燥箱的配套电气设备不防爆，操作人员在烘箱烘烤过程中开关烘箱送风机时产生的电器火花引爆了积累在烘箱中达到爆炸极限的乙醇爆炸性混合气体，炸毁烘箱，所产生的冲击波将该楼层生产车间的各分区隔墙、吊顶隔板、通风设施、玻璃窗、生产设施等全部毁坏；爆炸过程产生的辐射热瞬间引燃整个洁净区其他可燃物。形成大面积燃烧，过火面积遍及整个楼层。爆炸和燃烧发生后，由于工厂安全通道只有一条，部分现场人员和受伤人员不能及时逃生，致使出现人员大量伤亡。一、电气安全管理 电气安全是指电气设备在正常运行及在预期的非正常状态下

48、不会危害人身和周围设备的安全。电气事故是电能作用于人体或电能失去控制所造成的意外事件，即与电能直接关联的意外灾害。电气事故将使正常生产活动中断，并可能造成人身伤亡和设备、设施的毁坏。电气事故包括：人身触电事故、设备烧毁事故、电气引起的火灾和爆炸事故、产品质量事故、电击引起的二次人身事故等。1 触电事故的种类p 按能量施加方式分类 电击:电流通过人体内部，人体吸收能量受到的伤害，称俗“过电”。绝大多数死亡事故都是由电击造成，电击一般不会在人体表面留下大面积明显的伤痕，但电流会引起心室颤动，减弱或丧失其压送血液功能，导致人大脑缺氧而窒息死亡。电击是全身伤害，所以又称全身性电伤。电伤：电流的热效应、

49、化学效应或机械效应对人体造成的伤害，主要有电弧烧伤、电烙印、皮肤金属化三种。电弧烧伤指电弧产生的高温对身体造成的大面积损伤。电烙印是电弧直接打到皮肤上，造成皮肤深黑色。皮肤金属化是指由于金属导体的蒸气渗入皮肤，使皮肤变成金属色。电伤多是局部性伤害，在人体表面留下明显的伤痕。p 按造成事故的原因分类 直接接触触电 人体触及正常运行的设备和线路的带电体时造成的触电。间接接触触电 人体触及发生故障的设备或线路的带电体时造成的触电。p 按触电方式分类 低压触电 低压触电是380V 以下的触电。分为单相触电和两相触电 单相触电是指人体某部位接触地面，而另一部位触及一相带电体的触电事故，由单相220V 交

50、流电引起。图6 单相触电两相触电 人体两部分同时触及两相电源，电流从一相经人体流入另一相导线的触电事故，由电源的380V 线电压引起。两相触电的危害要大于单相触电。图7 两相触电 高压放电 当人体靠近高压带电体时，就会发生高压放电而导致触电，而且电压越高放电距离越远。跨步电压触电 高压电线掉落地面时，会在接地点附近形成电压降。当人位于接地点附近时，两脚之间就会存在电压差，即为跨步电压。跨步电压的大小取决于接地电压的高低和人体与接地点的距离。高压线落地会产生一个以落地点为中心的半径为8 10m 的危险区。当发觉跨步电压的威胁时，应一只脚或双脚并在一起跳着离开危险区。图8 跨步电压触电2 防止触电