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1、2015高考考纲解读】1.从生物材料中提取某些特定的成分II2.植物的组织培养II3.蛋白质的提取和分离1【4.PCR技术的基本操作和应用I2014高考在线】1.(2014 北京卷)在 25 的实验条件下可顺利完成的是()A.光合色素的提取与分离B.用斐林(本尼迪特)试剂鉴定还原糖C.大鼠神经细胞的培养D.制备用于植物组织培养的固体培养基【答案析】A【解析】光合色素的提取和分离实蛉在常温下进行,即 在 2 5 七的条件可顺利完成,A 项正确。用斐林试剂鉴定还原糖实蛉中需要水浴加热,才能出现植红色沉淀,常温条件下不发生反应,B 项错误。哺乳动物和人类神经细胞的培养的生存环境温度是汽二 七,C 项
2、错误。制备用于植物组织培养的固体培养基的温度一般是18 22七,D 项错误。2.(2014四川卷)下列有关实验方法或检测试剂的叙述,正确的是()A.用改良苯酚品红染色观察低温诱导的植物染色体数目变化B.用健那绿和毗罗红染色观察DNA和 RNA在细胞中的分布C.用纸层析法提取菠菜绿叶中的色素和鉴定胡萝卜素提取粗品D.用标志重捕法调查田鼠种群密度及农田土壤小动物的丰富度t 答案】A【解析】改良苯酚品红染液是观察细胞分裂时染色体形态的优良染色剂,可用于染色体数目的观察,A 项正确。健那绿是活细胞中线粒体染色的专一性染料,3 项错误。纸层析法可用来分高色素,而不能提取色素,C 项错误。土壤小动物由于个
3、体小,活动力强,不宜用标志重捕法,常用取样器取样的方法进行采集、调查,D 项错误。3.(2014江苏卷)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是()A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料B.DNA既溶于2 mol/LNaCl溶液也溶于蒸储水C.向鸡血细胞液中加蒸微水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝【答案】C【解析】酵母和菜花都含DNA物质,都可用来提取DNA,A 项正确。DNA在 0.14mol/L的 NaCI溶液中溶解度最小,所以DNA在 2 mol/L的 NaCl溶液或者蒸储水中都能溶解,B 项正确。鸡血细胞加水搅拌,细胞吸水涨破释放
4、出DNA,DNA存在于溶液中,C 项错误。DNA与二苯胺在沸水浴条件卜反应,冷却后变蓝,D 项正确。4.(2014福建卷)牛.物现代生物科技专题&归2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:分离,培养 上皮细胞(1)步骤中,在 核 移 植 前 应 去 除 卵 母 细 胞 的。(2)步骤中,重组胚胎培养到 期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。(3)步骤中,需要构建含有Rag2基因的表达教体。可以根据Rg2基因的 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用,山皿1和Psr I 限制酶分别在片段两侧进行酶切获得汽
5、咫2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。(4)为检测Rag2基因的表达情况,可 提 取 治 疗 后 小 鼠 骨 髓 细 胞 的,用 抗 蛋 白 的 抗体进行杂交实验。比较项目植物组织培养技术花药离体培养技术【答案】,细胞核(2)囊胚 核 甘 酸 序 列 曲 曲 n 和 P sH(4)蛋白质【解析】(1)步骤是核移植过程,是将上皮细胞的细胞核移植到去核卵母细胞。G)重组胚胎培养到囊胚期,可从其内细胞团分离出ES细胞。(3)利 用 P C R 技术扩增目的基因,其条件是模板D A、据 R a g:基因的核甘酸序列设计的引物、四种脱氧核甘酸、热稳定DNA聚
6、合酶等,欲获得目的基因R a g:需要用小,4 1 1 和 P 5 J I 两种限制酶切割,所以选择的表达载体上应具有引,疝H 和 P a l 酶的酶切位点。T)检测Rag:基因是否表达成功就需要检测有无Rag-基因表达产物,又据用抗R a g:蛋白的抗体进行杂交实验,所以应提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质进行检测。【重点知识梳理】一、植物的组织培养技术1.植物组织培养。(1)原理:细胞的全能性。相同点理论依据植物细胞的全能性基本过程外植体f愈伤组织f丛芽f 生根f移栽;无菌技术及接种操作基本相同影响因素选材、营养、激素、pH、温度、光照等不同点选材体细胞生殖细胞(精子)生殖方式无性生殖有性生殖
7、(2)过程:脱分化和再分化。2.植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同。特别提醒:(1)材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝,该部分不仅分生能力强,而且无病毒侵染。月季花粉的培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花药进行培养,且在花蕾期,因为此时质地幼嫩,花瓣未开,微生物不易侵入,容易消毒。(2)剥离花药时,尽量不要损伤花药,同时要彻底去除花丝,防止对实验产生干扰。(3)外植体消毒:所用消毒剂为体枳分数70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。(4)培养过程:在初期,菊花的组织培养需光照,月季的花药培养不需光照,而后期均需
8、光照。3.植物激素与组织培养。生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,其作用及特点为:(1)在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。(2)使用顺序不同,结果不同。(3)用量比例不同,结果也不同。使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用分化频率提高/且 高:利于根的分化、抑制芽的形成细 蒜 爹 嚣 量的值 低:利于芽的分化、抑制根的形成 适中:促进愈伤组织的生长二、DNA的提取与鉴定1.基本原理。(l)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在 0.14 m ol/L
9、的NaCl溶液中的溶解度最低。(2)DNA不溶于酒精溶液。(3)DNA不被蛋白酶所水解。(4)DNA在沸水浴条件下可被二苯胺染成蓝色。2.DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同。2 mol/LNaCl溶液0.14 mol/L NaCl溶液溶解规律DNA溶解析出1V-1-A0.14 mol/L NaCl溶液蛋白质部分发生盐析沉淀溶解NaCl溶液从2 mol/L降低过程中,溶解度逐渐增大3.DNA的析出与鉴定。(1)析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液等体积的冷却酒精溶液(体积分数为95%)静置23 m in,溶液中会出现白色丝状物(此即粗提取的DN A),且玻璃棒沿一个方向搅拌卷起丝状物。
10、鉴定:比较加入物质实验结果图示实验组均加入:4mL二苯胺试剂2 mol/LNaCl 溶液 5 mL出现丝状物(D N A),溶液逐渐变蓝咐照蝌-怂i对照组不变蓝三、蛋白质的提取与分离1.常用的分离蛋白质的方法。蛋白质的理化性质如形状、大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别,由此可提取和分离各种蛋白质。常用的分离蛋白质的方法有凝胶色谱法、凝胶电泳法等。(1)凝胶色谱法的原理:相对分子质量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;相对分子质量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。(2)凝胶电泳法的原理:不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同,在电场中受到的
11、作用力大小、方向、阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。2.血红蛋白的提取和分离程序。(1)样品处理:红细胞的洗涤:除去杂蛋白,以利于后续步骤的分离纯化。血红蛋白的释放:使红细胞破裂,血红蛋白释放出来。分离血红蛋白溶液:经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来,便于下,步对血红蛋白的纯化。(2)粗分离透析:除去样品中相对分子质量较小的杂质。(3)纯化:一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。(4)纯度鉴定:一般用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定蛋白质的相对分子质量,即对血红蛋白进行纯度鉴定。特别提醒:(1)人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核,也没有D N A,不适于作DN
12、 A提取的材料,但却是提取血红蛋白的理想材料。(2)红细胞洗涤过程中,洗涤3 次后,上清液仍有黄色,可增加洗涤次数,否则无法除去血浆蛋白。离心时转速要低,时间要短,否则白细胞等会 同沉淀,达不到分离效果。(3)血红蛋白释放过程中,蒸储水的作用是涨破红细胞,甲苯的作用主要是溶解细胞膜。四、多聚酶链式反应扩增D N A片段1.细胞内D N A复制与体外DNA扩增(PCR技术)的比较。细胞内D N A复制PCR解旋解旋酶,边解旋边复制80100 高温解旋,双链完全分开酶解旋酶,D N A 聚合酶,D N A连接酶Taq D N A 聚合酶不引物RNAD N A 或 RNA同能量ATP不加点温度体内温
13、和条件高温子链合成一条链连续(先导链),另一条链不连续,先合成片段,再由DN A连接酶连接(滞后链)两条子链均连续合成细胞内D N A 复制PCR相提供DNA模板同4 种脱氧核甘酸作原料点子链延伸的方向都是从5 端到3 端2.PCR反应的过程及结果。(l)PCR反应过程:变性:当温度上升到90 C 以上时,双链DN A解聚为单链,如图:5 J I 1.I.H 1.I 11.l l j约95工.5 5.3,复性:系统温度下降至50 左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链D N A结合,如下图:y-JJ-U-Ll 1115,5,1(ILLLUly引物I 引物口延伸:当系统温度上升至72 左右,
14、溶液中的4 种脱氧核甘酸(A、T、G、C)在 D N A聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,如下图:5J I I 1111111 y y-ULLlLLLlJJ-Ly引物i 引物n(2)结果:PCR一般要经历三十多次循环,每次循环都包括变性、复性、延伸三步。两引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。特别提醒:D N A复制需要引物的原因:D N A 聚合酶不能从5,端开始合成D N A,而只能从3,端延伸DNA链。【高频考点突破】考点一、植物的组织培养技术【例 1】下列关于影响植物组织培养的因素的叙述不正确的是()A.幼嫩组织较成熟组织易培养成功B.给外植体消毒用70%的酒精
15、C.接种花药后一段时间内不需要光照,但幼小植株形成后需要光照D.生长素与细胞分裂素含量之比较高时有利于芽的分化解析:生长素与细胞分裂素含量之比较高时,有利于根的分化;较低时,有利于芽的分化;二者相当时,促进愈伤组织的生长。答案:D【举一反三】下列有关植物组织培养的叙述中,正确的是()A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得解析:在普通培养基中添加适量的N aC l,制成选择培养基,可用来筛选植物耐盐突变体,故选项D 正
16、确。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞;二倍体植株的花粉经离体培养后得到单倍体植株,该单倍体高度不肓,不能稳定遗传:用人工懑膜将胚状体等进行包装可制成人工种子,愈伤组织不能作为制作人工种子的材料,故选项A、B、C 错误。答案:D考点二、DNA的提取与鉴定【例 2】在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述中正确的是()A.用蒸储水将NaCl溶液浓度调至0.14m ol/L,滤去析出物B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质C.将丝状物溶解在2 moi/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色D.用菜花替代鸡血作为实验材料
17、,其实验操作步骤相同解析:用蒸储水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L时,滤取析出物;将丝状物溶解在2 moi/L的 NaCl中,加入二苯胺试剂,需沸水浴加热几分钟,才呈蓝色;用菜花替代鸡血为实验材料,需要对材料的细胞壁进行处理。调节NaCl溶液浓度改变不同物质在其中的溶解度,加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质,故 B 正确。答案:B【举一反三】DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,而细胞中的某些物质溶于酒精溶液。下图“DNA的粗提取”实验的相关操作步骤,其操作目的错误的是()鸡血细-胞液蒸福成、含DNA的I浓NaCl溶液黏 稠 物 附2 mol/LN
18、aCl溶 沪=95%酒精含DNA的 浓NaCl溶液A.是洗涤红细胞,去除红细胞表面的杂质B.是稀释NaCl溶液至0.14 m ol/L,析出DNAC.是选用2 moi/LNaCl溶液,溶解黏稠物中的DNAD.是纯化D N A,去除溶于95%酒精的杂质解析:过程是让鸡血细胞吸水涨破释放出DNA;是降低NaCl溶液的浓度,析出DNA:是对析出的DNA再溶解,除去不溶于2 moi/L N aC l溶液中的杂质;用 95%的酒精析出DNAo答案:A考点三、蛋白质的提取与分离【例 3】以下关于猪血红蛋白提纯的描述中,不正确的是()A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器
19、和细胞核,提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢解析:猪成熟红细胞中玦少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白校少,是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步:红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶淹、透析,其中洗涤红细胞时,要用生理盐水反复洗涤,既要将红细胞洗涤干净,又要不破坏红细胞,然后再用薯储水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。分离提纯血红蛋白时用凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质,相对分子质量大的蛋白质移动速度较快;血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况,并据此判断分离效果。故 D
20、不正确。答案:D【举一反三】双选)在血红蛋白的提取和分离实验中,下列操作正确的是()A.分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆B.红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸储水C.分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D.洗脱时,待红色蛋白质接近色谱底端时,用试管收集流出液解析:血红蛋白的释放:加蒸镭水到原血液的体积,再加40%体积的甲苯,充分搅拌10 min,红细胞破裂释放出血红蛋白;分离血红蛋白溶液是以2 000 r/min的速度离心10 m in,从而将溶液分成四层。答案:AD考点四、多聚酶链式反应扩增DNA片段【例 4】多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历三十多
21、次下述循环:95 条件下使模板DNA变性、解链一55 条件下复性(引物与DNA模板链结合)-7 2 条件下引物链延伸(形成新的脱氧核甘酸链)。下列有关PCR过程的叙述,不正确的是()A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋能实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4 种核糖核甘酸D.PCR与细胞内DNA复制相比,其所需要酶的最适温度较高解析:PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应,并且由引物I 延伸而成的D A 单琏会与
22、引物H结合,进 行 DNA的延伸。DNA变性(9。9 5 七):双 捱 DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单椎DNA。复性(55 6 5 七):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双推。延伸 乃 七):在 预 酶 I在 7 2 t!左右活性最高)的作用下,以 4 T P(三磷酸脱氧核糖核苜酸的缩写)为原料,从引物的5,端 向 3端延伸,合成与模板链互补的 DNA链。答案:C:举一反三】标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是()A.94、55 C、72 B.72 50、92 C.50 C、92、72 D.80、50、72 解析:当温度上升到94 13(
23、9 0-9 5 七)左右时,双 链 DNA解聚为单琏,称之为变性;当温度下降到5 5 七(5 5-6 0 七)左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单避DNA结合,称为复性;当温度上升到7 2 七(707$七)左右时,溶液中的四种脱氧核苜酸(A、T、C G)在 预 DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,称为延伸。答案:A【高考真题解析】1.(2012江苏高考,18)下列关于“DNA粗提取与鉴定实验的叙述,正确的是()A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在 N aC l溶液中的溶解度B.将 DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的
24、提取D.用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少解析 洗涤剂可瓦解植物细胞膜,利于释放D X A,但不能增加DNA在 NaC:溶液中的溶解度,A 项错误:合 DNA的丝状物应先溶解在物质的量为2 moi L 的 NaC:溶洒卬,再加入二苯胺试剂在沸水浴条件下检测,冷却后观察变成蓝色,B 项错误;用玻璃棒缓慢搅拌滤港可使DNA分子充分溶解,可提高DNA的获得量,D 项错误。菜花匀浆中含有多种酶,可 影 响 到 的 提 取,C 项正确。答 案 C2.(2013海南,30)根据生物相关知识,回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题:(1)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,通 常 在 萃 取 前 将 胡 萝 卜 粉
25、 碎 和,以提高萃取效率;水 蒸 气 蒸 播 法(填 适合”或 不适合)胡萝卜素的提取,原因是;鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时,通常可采用 法,并以 样品作为对照。(2)若要提高衣物上血渍的去除效果,可在洗衣粉中加入 酶,因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的 和;若要提高衣物上油渍的去除效果,洗衣粉中可添加酶;使用加酶洗衣粉时,水 温 过 低 或 过 高 洗 涤 效 果 不 好 的 原 因 分 别 是。答 案(1)干燥 不适合 水蒸气蒸偌法适用于蒸储挥发性物质,而胡萝卜素为非挥发性物质,不能随水蒸气 蒸 储 出 纸 层 析 标 准 的 胡 萝 I、素(2)碱性蛋白(或蛋白)氨 基 酸 小 分 子
26、 肽 脂 肪 水 温 过 低 时 酶 活性较低,水温过高会使酶变性失活解 析(D 萃取是将粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡,使芳香油溶解在有机溶剂中。水蒸气蒸储法是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来,形成油水混合物,冷却后,混合物又会重新分出油层和水层。胡 萝 I,素粗品通过纸层析法进行鉴定,如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带,说明提取胡萝I、素的实睑成功。仁)血渍中含有蛋白质,可用含蛋白酶的洗衣粉洗涤。其原理是蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸。油渍的主要成分是脂肪,需用含脂肪商的洗衣粉。水温过低抑制酶的活性,水温过高会使酶变性失活。3
27、.(2 0 1 1 高考海南卷)许多植物含有天然香料,如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答问题:薄荷油是挥发性物质,提 取 薄 荷 油 忖 应 选 用(鲜、干)薄荷叶作原料,其原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ O(2)用 萃 取 法 提 取 薄 荷 油 时,采用的溶剂是,原 理 是_ _ _ _ _ _ _ _ _
28、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ O 用 水 蒸 气 蒸 镭 法 提 取 薄 荷 油 时,在 油 水 混 合 物 中 加 入 氯 化 钠 的 作 用 是。常用于分离油层和水层的器皿是 o 分离出的油层中加入 无 水 硫 酸 钠 的 作 用 是,除 去 固 体 硫 酸 钠 的 常 用 方 法 是。解析:本题考查有关提取薄荷油的知识。因为蒲荷油是挥发性物质,所以应选取鲜
29、薄荷叶作为提取材料。用萃取法提取蒲荷油时,应选用有机溶剂,因为薄荷油易溶于有机溶剂。用水蒸气蒸储法提取薄荷油时,在油水混合物中加入氯化钠的作用是增加盐浓度,促进油水分层,常用于分离油层和水层的器皿是分液漏斗。分离出的油层中加入无水硫酸钠吸掉水分后再用过滤法除去固体硫酸钠。答案:鲜薄荷叶中薄荷油易挥发有机溶剂薄荷油易溶于有机溶剂增加盐浓度,促 进 油 水 分 层 分 液 漏 斗 啜 水 过 滤【当堂巩固】1.下列有关花药离体培养,说法错误的是()A.对材料的选择最常用的方法是焙花青一铭机法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色B.材料消毒时需先用酒精浸泡,然后用氯化汞或次氯酸钙溶液浸泡,最后用无菌水
30、冲洗C.接种花药后一段时间内不需要光照,但幼小植株形成后需要光照D.若接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体后,要适时转换培养基,以便进一步分化成再生植株解析:确定花粉发育的时期最常用的方法是醋酸洋红法,有些植物细胞核不易着色时,需采用焙花青一倍矶法。答案:A2.植物组织培养中的“脱分化”过程是指()A.已休眠的种子经过处理使种子尽快萌发的过程B.植物根尖、茎尖等处分生组织细胞有丝分裂产生新细胞后分化为各种组织C.愈伤组织细胞分化为根与芽的过程D.离体的植物组织、细胞培养产生愈伤组织的过程解析:脱分化指让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。A、B、C都是细
31、胞分裂、分化的过程。答案:D3.下 列关于细胞全能性的理解,错误的是()A.大量的科学事实证明,高度分化的植物细胞仍具有全能性B.细胞内含有个体发育所需的全部基因是细胞具有全能性的内在条件C.通过植物组织培养得到的试管苗,是植物细胞在一定条件下表现全能性的结果D.通过动物细胞培养获得细胞株或细胞系,证明了动物体细胞也体现出了全能性解析:动物体细胞大部分为高度分化的细胞,其全能性受到了限制,只有其细胞核在一定条件下可表现全能性。全能性的体现要看是否产生了新个体。答案:D4.红细胞中含有大量血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的
32、叙述,错误的是()A.血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理一粗分离一纯化纯度鉴定”的顺序进行B.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C.粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质D.可经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定解析:蛋白质的提取和分禽一般分为四步:样品处理,粗分离、纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白时,苜先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放 离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品处理;其次通过透析法除去相对分子质量较小的杂质,即样品的粗分离;再次通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去,即样品纯化,纯化过程中凝胶应用蒸僧水充分溶胀后,配制成凝胶悬浮液,而不是用生理
33、盐水;最后经SD J聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。答案:B5.下列有关植物细胞与组织培养的叙述中,错误的是()A.花药、胚不能作为组织培养的材料B.植物细胞具有全能性C.外植体是指用于培养的植物组织或器官D.外植体可诱导出愈伤组织解析:考查植物组织培养的过程和原理。植物的器官、组织和细胞以及花药均可作为组织培养的外植体。故 A 项不正确。答案:A6.在采用鸡血为材料对DNA进行粗提取的实验中,若需进一步提取杂质较少的D N A,可以依据的原理是()A.在物质的量浓度为0.14 mol/L的氯化钠溶液中DNA的溶解度最小B.DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色C.DNA不溶于酒精而细胞中的
34、一些物质易溶于酒精D.质量浓度为0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用解析:考查了 DNA粗提取的实验原理。DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠浓度的变化而变化的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这原理,可以进一步提取H1含杂质较少的DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。答案:C7.关于血红蛋白的提取和分离操作不正确的是()A.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装B.凝胶用自来水
35、充分溶胀后,配成凝胶悬浮液C.为加快凝胶膨胀,可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热,逐渐升温至沸腾,通常只需12 hD.在血红蛋白提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理,是让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能解 析:由于本题中用到的是商品凝胶,为干燥的颗粒,使用前需要用蒸储水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液,再用洗脱酒进行充分洗涤平衡,使凝胶装填紧密,也可在沸水浴中加热膨胀,可节约时间,除去凝胶中微生物,排除胶粒内空气。答案:B8.用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,关于蛋白质的叙述,正确的是()A.相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B.相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分
36、子质量较大的蛋白质C.相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D.两者无法比较解析:相对分子质量较小的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内,所以行程长;而相对分子质量较大的蛋白质则被排阻在颗粒之外,所以行程短。答案:A9.玫瑰精油提取的过程是()A.鲜玫瑰花+水一水蒸气蒸储一油水混合物一分离油层一除水B.鲜玫瑰花+水一油水混合物-水蒸气蒸镭一分离油层一除水C.鲜玫瑰花+水-油水混合物t除水一分离油层D.鲜玫瑰花+水一油水混合物一水蒸气蒸谯一除水解析:玫瑰精油提取的实验流程是:鲜玫瑰花+水一水蒸气蒸僧一油水混合物一分离油层一除水。答案:A1 0.下列有关胡萝卜素的叙述,错误的是()A.胡萝卜
37、素是化学性质稳定,溶于水,不溶于乙醇的物质B.胡萝卜是提取天然p-胡萝卜素的原料C.微生物的发酵生产是工业提取0-胡萝卜素的方法之一D.提取后,干燥过程中,时间不能太长,温度不能太高解析:胡萝卜素的化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油酸等有机溶剂。答案:A1 1.下列有关生物学实验原理和技术操作的叙述中,正确的是()A.提取细胞中的DNA和蛋白质都必须用蒸缁水涨破细胞B.研究某遗传病的遗传方式,一定要调查患者家系的情况C.与利用鲜酵母相比,等量酵母菌制成的凝胶珠发酵生产酒精更迅速D.用显微镜观察细胞时,若细胞为无色透明,可调节通光孔使视野暗一些解析:提取细胞中的DNA利蛋白质可以
38、用研磨后离心分离等方法;酵母菌制成的凝胶珠可重复利用,但发酵较慢。通光孔的大小是固定的,无法调节,可以通过调节光圈和反光镜使视野变暗。答案:B12.下列关于实验叙述中,不正确的是()A.血红蛋白的提取和分离实验中使用的交联葡聚糖凝胶G-7 5,其中“75”表示每克凝胶膨胀时吸水7.5克B.在色素的提取和分离的实验中,叶绿素b 在层析液中的溶解度最低,扩散速度最慢C.用洋葱作实验材料进行DNA的粗提取与鉴定实验时,加入一定的食盐的目的是有利于溶解DNAD.制取细胞膜、血红蛋白的提取和分离均以鸡血细胞作为实验材料解析:血红蛋白的提取和分离以鸡血细胞作为实验材料;制取细胞膜不能用鸡血细胞,鸡血细胞有
39、核膜。答案:D13.草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代,导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下:外植体一工愈伤组织上二芽根一 植株请回答:微 型 繁 殖 培 育 无 病 毒 草 售 时,-一般 选 取 作 为 外 植 体,其 依 据 是(2)在过程中,常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和,在配制好的培养基中,常 常 需 要 添 加,有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后25d,若发现外植体边缘局部污染,原因可能是。在过程中,愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是解析:植物组织培养时常采
40、用根尖或茎尖部位,原因是该部位含病毒极少。MS培养基的成分包括大量元素、微量元素和有机物,在配制好的培养基中,常需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素。植物组织培养也应注意无菌操作。生长素与细胞分裂素的比例低时有利于芽的分化,生长素与细胞分裂素的比例高时有利于根的分化。答案:茎尖域根尖j茎尖(或根尖病毒极少,甚至无病毒有机物植物激素外植体消毒不彻底培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低1 4.根据PCR反应系统模式图回答下列问题:|微 h tD N A 样D A 互 补)分 开 为 单 链 片循环似 单 链 为 模 板 合 成 代|一PC R 反应需要在一定的 溶液中进行,除了
41、调控温度外,溶液中还需要提供哪些条件?。(2)如把一个用15N 标记的某个DNA样品,以14N 标记的脱氧核昔酸为原料,经 过 PCR仪 5 次循环后,将产生 个 DNA分子,其中含14N 标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为。在研究IN 标记的一个DNA分子中,发 现 35%腺喋吟,则 由-N 标记的这个DNA分子的一条链上,鸟 噂 吟 的 最 大 值 可 占 此 链 碱 基 数 的。分别以不同生物DN A样品为模板合成的各个新DN A之间存在差异,这些差异是什么?。PCR扩增得到的DNA序列长度是固定的,原因是。某个DNA分子的碱基总数中腺喋吟为200个,利用PCR技术循环数次后,
42、消耗周围环境中腺喋吟脱氧核苜酸3000个,该 DNA分子已循环了 次。解析:PCR反应需要在定的缓冲溶液中进行,除了调控温度外,溶液中还需要提供DNA模板,分 别 与 两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苜酸、耐热的DNA聚合酶;5次循环后,将产生25个DNA分子,即32个DNA分子;由 于DNA分子是半保留式复制,所以每个DNA分子都含有二N标记的链,故 含14N标记 的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为100%;DNA分子中35%是腺噫吟,则鸟噫吟的最大值可占此琏碱基数为1-35%X2=3O%;DNA的差异性表现在脱氧核苜酸的数目、比例和排列顺序的不同;DNA聚合酶只能从引物的3端开
43、始延伸,所以特异性的复制处于两个引物之间的DNA片段。设 该DNA分子循环了 n次,消耗环境中的A为200(21即2 0 0(2-1)=3 0 0 0,得 出=4。答案:缓 冲DNA模板、分别与两条模板道相结合的两种引物、四种脱氧核苜酸、耐热的DNA聚合酶(2)32 100%30%脱氧核苜酸的数目、比例和排列顺序的不同DNA聚合酶只能特异性的复制处于两个引物之间的DNA片段(4)41 5.下图为提取胡萝卜素的装置示意图,请回答有关问题:一般来说,要想萃取效果好,需保证。(2)萃取过程应该避免明火加热,采用水浴加热,其原因是。在 加 热 瓶 口 安 装 冷 凝 回 流 装 置 的 目 的 是。通过什么现象可以证明实验的成功?。解析:原料颗粒小、萃取温度高、时间长,需要提取的胡萝卜素就能充分溶解,萃取效果就好;因为有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热易引起燃烧爆炸,所以应该避免明火加热,采用水浴加热;为防止加热时有机溶剂挥发,在加热瓶口安装冷凝回流装置;如果萃取样品中出现了和标准样品样的层析带,则说明提取胡萝卜素的实验成功。答案:(1)原料颗粒小,萃取温度高,时间长(2)因为有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热容易引起燃烧爆炸防止加热时有机溶剂挥发是否出现对应的层析带,如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带,说明提取胡萝卜索的实验成功
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