T_CI 014-2023 厚壳贻贝苗种规范化生产技术指南.docx

《T_CI 014-2023 厚壳贻贝苗种规范化生产技术指南.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《T_CI 014-2023 厚壳贻贝苗种规范化生产技术指南.docx（13页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、ICS65.150CCSB50/59团体标准T/CI014-2023厚壳贻贝苗种规范化生产技术指南TechnicalguideforstandardizedproductionofmusselMytiluscoruscusseedlings2023-2-16发布2023-2-16实施中国国际科技促进会发布T/CI014-2023厚壳贻贝苗种规范化生产技术指南1适用范围本文件规定了厚壳贻贝（Mytiluscoruscus）苗种生产的育苗场地选择和布局、育苗前准备工作、亲贝的选择与促熟培育、幼虫培育、稚贝培育、稚贝出池等技术。本文件适用于厚壳贻贝人工苗种大规模培育。2规范性引用文件本文件没有需要引

2、用的文件。3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4场地选择和布局4.1场地选择场址宜选在背风向阳，紧靠海边，可建高位水池的地方为佳；水源无工业、农业、生活污染，且远离污染源；海水浑浊度低；海水盐度宜在2228，不受降雨突然变化影响；交通、通讯、电源等条件方便。参见附录A.14.2场地布局育苗室和饵料室是整个育苗场的主体，宜采用天然光和自然通风，在布局上宜向阳，周围无山体等遮挡。供水系统包括沉淀池、砂滤池及高位水池依其功能应建在地势较高处，使育苗用水自流。供热系统所用锅炉宜建在主导风向的下风向。发电机房和风机房宜远离育苗室及办公、生活区。4.2.1供水系统4.2.1.1蓄水塘面积10000

3、m2左右为宜，在开启闸门能自然排干的前提下，蓄水深至少在1m；如无条件建蓄水塘，则应在海区设置深水水泵，其深度以在大潮期退潮后能抽到水深1m以下的海水为准。从蓄水塘或海区抽取的海水，应在暗沉淀池中沉淀待用。暗沉淀池总水体，应与育苗水体1：1以上配套，并分隔成23个，池顶搭棚或加1T/CI014-2023盖水泥板。4.2.1.2砂滤池育苗用水应经二级过滤方能使用，通常采用砂滤的办法。砂滤池设计介于暗沉淀池和储水池之间，使滤出的海水能自流入储水池。砂滤面积为40m260m2，隔成2个，有各自独立的输水管道，便于轮换冲洗。砂滤池由卵石层、粗砂层、细砂层组成，每层之间用60目聚乙烯网布隔开。二级砂滤高

4、程低于一级，面积为一级砂滤池的1/2为宜。4.2.1.3蓄水池以每天用水量500m3为准，蓄水池的容量宜为800m3左右，隔成2个池，便于清洗，而不误生产。通过高位水池使生产用水直接自流到育苗室，其池底面高程最好能高于育苗池4m以上，高位水池容量以100m3200m3即可。4.2.2育苗室育苗室一般多用砖墙，屋顶采用钢梁或毛竹架结构，呈“人”字形或圆弧形，加盖玻璃钢瓦或尼龙薄膜。墙上宜多开窗户，可以随时调节光线，并使通风良好。育苗池底钢筋混凝土，池壁水泥浆砌砖块。池底应有10的坡度斜向出水口。育苗池面积以30m240m2为宜，净水深为1.3m1.5m。每24个苗池应配套一个面积约2m23m2的

5、集苗槽，用于经常倒池、换水。育苗室隔断设置观察室，配备的设备主要有显微镜、解剖镜、照度计、测温仪、温度计、比重计和pH计、氨氮比色器及零星的玻璃器皿等。4.2.3饵料室4.2.3.1藻类保种室。面积约20m2，内设置能放置30个3000ml5000ml三角烧瓶的培养架，架上安装白色节能灯或日光灯，阴雨天时补充光源，使光线达到30006000lx。还需配空调机、电热取暖器等控温设备。室外需另配套10m2左右的操作间，建有水槽、煤气灶台等，用于洗刷消毒器具、制备培养液、值班管理等。一级扩种培养室。面积约40m2，顶面用透光材料，安装可调光的遮光帘，沿壁四周建高度80cm的台子，用花岗岩石板作为台面

6、，可放置100个以上的5000ml的三角烧瓶，瓶上方约50cm处悬挂白色节能灯或日光灯，作为人工光源备用。二级扩大培养棚。面积约100m2200m2，要求地面平整，可容纳600800只容量为50L白色聚乙烯塑料桶，每排桶间留80cm的通道，便于藻桶的出入。2T/CI014-20234.2.3.1藻类培养池。要求光线充足，空气流通，四周要开宽大的窗户，外围要开阔，避免背风闷热，屋顶用透光率75%以上的玻璃钢瓦等覆盖。培养池面积以15m225m2为宜，池净深在1.2m左右，共需培养池2025个，总面积为育苗池的1/2。池内壁用白色水泥刷成白色更佳。4.2.4供水管道系统使用无毒无臭的ABS或UPV

7、C材料。高位水池至育苗车间的输水主管道直径须应在160mm200mm，车间主管道配径100mm。每个育苗池，配有2套直径80mm的出水管，需要时可同时加冷、热水。并配有淡水管道，用于调节盐度和冲洗池子。4.2.5供热系统采取提温的办法可以加快亲贝的性腺发育，可促进幼虫的生长发育速度，缩短育苗周期。常用的提温设备是低压蒸汽锅炉，每小时蒸发量应在1吨以上。锅炉房到育苗室需用直径50mm的无缝钢管作为蒸汽输送管道。入育苗池用直径25mm32mm的不锈钢管焊接成环形管道，并用支架撑离池底150mm以上，出气口设在池外。各池均用蒸汽阀控制送气量，以便于自由控制升温速度。4.2.6供氧系统通常采用罗茨鼓风

8、机或涡流式风机，可使用风压400KPa，配备2.5KW7.5KW电动机风机。一个育苗场，至少应配备两套配用机。送气管选用与供水管道相同材质的硬塑料管，送气总管配径100mm以上，各池分管配径50mm，阀门独立控制，分气管用5mm8mm无毒透明聚乙烯软管，末端装散气石，1个/m2，每个气石用小调节阀控制气量。5育苗前准备工作5.1育苗设施的消毒育苗池以及饵料池、预热池、高位水塔、储水池、砂滤池等应彻底清池消毒。用50mg/L100mg/L的漂白粉溶液或20mg/L30mg/L的高锰酸钾溶液泼洒池壁及池底进行消毒。池内的供水管道、气管、气石、加热管道应用100mg/L200mg/L漂白粉或200m

9、g/L的高锰酸钾溶液浸洗消毒。旧的气管、气石等可以采用煮沸消毒。严格检查试漏，发现漏水查找原因，及时修补，防止逃苗。新建水泥池需用淡水浸泡1月以上，并换水数次。3T/CI014-20235.2育苗设施的维护应在育苗前一个月进行全面调试，包括加热、充气、供水设备的运转试用，观察加热性能、充气效果、供水能力等。锅炉应进行年检，合格后方可使用。供电系统要保证育苗期间的用电稳定，自备2套以上发电机组。充气系统除电力带动外，另需配备一台柴油机直接带动的气泵，以备停电又无法自发电时启用。5.3育苗工具的准备与制作育苗器具主要是各种大小塑料桶、盆、水勺等，亲贝的暂养箱框、催产框；幼体检查用的取样器以及幼体计

10、数的计数管；洗刷工具；各种规格的捞网、手抄网、小抄网；换水集苗用的网袋；进水过滤筛绢网，各种网目的筛苗网和洗苗袋。任何工具在使用前都必须清洗消毒彻底，用200mg/L300mg/L的福尔马林消毒后，再用清水立即冲洗。5.4饵料培养生产中用饵料，应是单细胞浮游藻类，培养种类有：金藻类（等鞭金藻、湛江等鞭金藻、绿帕夫金藻等）、硅藻类（小新月菱形藻、三角褐指藻、牟氏角毛藻）和绿藻类（青岛大扁藻、亚心形扁藻、云微藻等）。金藻类因其个体小（5m7m）、无细胞壁、易消化吸收、含有丰富的营养物质，是幼体浮游期的首选饵料生物。育苗季节处于冬春季低温期，造成藻类生长缓慢，培养周期延长，数量上难以满足投喂饵料的需

11、求。每年的12月份翌年2月份需加温培养。整个生产操作工艺分为一级扩种培养、二级扩大培养和三级生产性培养三个阶段。6亲贝的选择与促熟培育。6.1。条件准备。厚壳贻贝在海区自然产卵时间为每年的24月份，主要集中在3月底至4月初，此时海区温度一般在1214，为了赶在性腺自然成熟前育苗，需要通过升温的办法，进行人工促熟，加快发育速度，培育温度可控制在1622，期间慢慢升温。6.2亲贝的选择在11月底，选择生长环境优良，野生的3龄以上健康成贝，要求足丝粗壮，闭壳有力，4T/CI014-2023生长纹间距宽，壳长在8cm10cm，肥满度好。解剖已能区分雌雄，一般雌性的卵巢颜色比较鲜艳，呈橘黄色、砖红色等，

12、而雄性通常为乳白色。可直接利用空闲的育苗池，保持采光良好，光照5000lx左右。蓄水60cm100cm，每3m25m2安装1个散气石，安装有蒸汽加热管道。6.3促熟培育6.3.1亲贝的清洗挑选来的亲贝要先去除壳表的附生生物，用海水反复清洗干净。并用高锰酸钾溶液消毒5分钟后清洗干净。6.3.2培育密度亲贝用塑料篮筐吊挂在水中，密度一般控制在2kg/m33kg/m3。6.3.3饵料投喂投喂小硅藻和三角褐指藻，水中单胞藻密度为20万/ml30万/ml。勤观察，严格控制饵料的投喂量并及时进行调整。注意投喂的藻液与亲贝池之间的水温差异不超过46。6.3.4水温控制在亲贝入池后的4d5d之内，每天提温1，

13、至16时水温持续保持20d，以后随着性腺的发育，再次逐渐提温至18，直至培育结束。6.3.5换水随着藻类的添加，水位增高，应每隔2d3d，换水70，注入的新水需在预热池中预热。至后期性腺接近成熟时，原则上应尽量减少换水刺激，换水时缓排缓进，同时微充气，也要注意投入的藻液的刺激，防止流产。6.4性腺成熟度鉴定厚壳贻贝的性腺发育至成熟，大致可分为3期。6.4.1增生期性腺开始形成，在两侧外套膜的近边缘，隐约可见弥散状的浅黄色性腺，肉眼难以鉴别雌雄。6.3.2生长期性腺分布的面积增大，逐渐布满整个外套膜，颜色加深，肉眼观察可以区分雌雄，仔细看能见成簇分布的卵子。5T/CI014-20236.3.3成

14、熟期性腺继续增厚，并延伸至背嵴部，雌性多呈橘黄色；雄性多呈乳白色。成熟亲贝的鉴别方法：取一载玻片，滴上1滴水，用针轻戳性腺，取少量性腺组织于水滴中，如果性腺立即散开并呈颗粒状则为雌性，如果不能散开或呈雾状则是雄性。此期是进行人工催产选择的最佳时机。6.5催产与孵化6.4.1亲贝用量通常每50Kg的亲贝可以产卵108颗158颗，可获得D型幼虫88个108个。6.4.2阴干将已清洗消毒的亲贝，平铺摊晾在通风良好的竹帘上进行阴干。阴干时间6h12h为宜。6.4.3催产工厂化高密度育苗的催产池通常为育苗池，用漂白粉进行清洗消毒，在进水管口套上一个300目的网袋，一般催产池的进水深度为100cm120c

15、m。盐度在2427较为理想，池水升温到1718。将亲贝分框放入催产池，每框放5Kg为宜，用绳吊或泡沫浮于水表层约30cm处，每框置一个散气头，开大气阀充气，制造人工水流；充气刺激约2h后亲贝既可排放精卵；待少量亲贝开始排放精卵后，将喷出白色烟雾状精液的雄性亲贝捞出弃掉，防止精液过多。6.4.4受精卵密度控制产卵过程中要随时取样检查卵的密度，当池中受精卵密度达到15个/ml左右时，移出亲贝至下一个池继续产卵催产；若发现水体因精液过多，致水混浊池底模糊时，也应立即移出亲贝。催产结束后，池中每立方水体加青霉素40万U，EDTA-2Na5克。6.4.5孵化在水温1819的条件下，经过30h36h，大部

16、分受精卵经孵化发育变态至D型幼虫，大小为105m110m。7幼虫培育7.1幼虫密度1d7d胚胎发育(附录A.2)，D型幼虫阶段以12个/ml15个/ml；812d，壳顶幼6T/CI014-2023虫前期，10个/ml12个/ml；13d18d壳顶幼虫中期，8个/ml10个/ml；19d25d，壳顶幼虫后期，5个/ml8个/ml；23d25d见伸足，25d35d眼点幼虫期（匍匐变态幼虫），5个/ml左右。如密度过高，应结合倒池进行分池。整个浮游幼虫期的培育水温保持在2021，倒池水温差小于1。光照在1000lx左右。7.2倒池幼虫胚胎发育变态至D型幼虫后的当天，须进行第一次换池（或称倒池）。以后

17、根据水质变化情况，每2d3d倒池一次。倒池方法是用直径25cm的筛绢网袋收集，从排水阀将池水带苗放入300目150目的筛绢网袋中，见苗稍多时，从网袋开口的另一端将苗放人提桶，移至另外已放满水，并已投入饵料的新池中。倒池网目变换：1d7d用300目250目；8d12d用250目200目；13d18d用200目150目；20d后用150目。7.3饵料投喂刚变态的D型幼虫，依靠其体内卵黄供给营养，20h后，当卵黄消失，消化系统发育完善，即开始摄食。D型幼虫浮游期，以金藻类为主，开口时投喂藻类密度为1104个ml3104个ml；以后维持在3104个ml6104个ml；壳顶前期，5104个ml8104个

18、ml；到壳顶中期，6104个ml10104个ml，并开始辅以混投角毛藻；壳顶后期保持在10104个ml15104个/ml，匍匐变态期也以投喂金藻为主，适量添加角毛藻和扁藻。每天分24次投喂，总投喂量视摄食量调整，原则上少量多次。7.4日常管理7.4.1计数每天测定幼虫存池密度和数量：用1ml注射器，随机吸取池中幼虫，至直径6cm的表面皿中，滴入1滴碘液，使幼虫静止于皿底，在显微镜下进行计数。全池连续取样6次，取其平均值，然后计算幼虫的密度和幼虫的存池量。7.4.2幼虫的生长速度测定以壳长为测定指标，用网布浓缩取一定数量幼虫，置于表面皿中，滴入1滴碘液固定，供测量。用校正好的显微镜目微尺，逐一正

19、确测定幼虫的壳长。在正常情况下，浮游期幼虫的壳长日增长最大10m，至壳顶后期生长速度减慢为每日3m5m。各日平均壳长参考值分别为第1天110m；第3天125m；第5天145m；第7天165m；第9天195m；第11天218m；第13天230m；第15天255m；第17天265m；第19天280m。7.4.3胃的饱满度观察7附苗期间水体中的幼虫密度以3个/ml4个/ml为宜，附苗密度以200个cm250个cm为宜。应经常观察水中苗的密度，待合适后，及时将浮游幼虫收集，移入另一池中T/CI014-2023镜检可见胃部有与投喂藻类同色的食物团，并且被摄人的藻细胞团在内旋转。饱食时胃饱满，色浓，饥饿时

20、空胃，胃部透明，应及时补投。若水中藻液密度较高，而肠胃仍不饱满，则应考虑水质是否正常。8稚贝培育(附录A.3)8.1幼虫变态附着8.1.1附着时间进入壳顶幼虫后期（第20天）以后，壳长达到260m270m时，幼虫由浮游生活向附着变态阶段过度，进入匍匐幼虫期。25d28d壳长280m300m，幼虫壳呈楔形，面盘开始萎缩，鳃丝发达，足部开始发育，足丝腺形成。即足基部褐色眼点出现。此时，幼虫寻找合适的附着物，放出足丝附着在附着基上，转为底栖匍匐生活。8.1.2附着基准备贻贝的附着基可以用40目的尼龙筛绢串成，也可以用长度60cm100cm的粗棕绳扎成束，还可用透明波纹瓦。投放前应充分浸泡去有害物质，

21、并经煮沸消毒备用。投放时平铺或吊挂在水下层既可。8.1.3附苗器投放时机在生产中一般依据眼点幼虫出现的比例35%，作为投放附着基的标志。一般水温20下，需23d25d，平均壳长350m以上时，可准备投放附着基。8.1.4附苗密度22继续附着。8.2附着稚贝培养8.2.1变态时间投放附着基一周，约35d左右，大部分幼虫会陆续附着变态成稚贝，此后进入稚贝培育阶段。8.2.2稚贝期饵料在前期投喂的藻类仍以金藻为主，占70%，辅助角毛藻和扁藻，可适当加大扁藻的投喂；在后期则以角毛藻、扁藻为主。投喂量以池水能隐约见底为好，一天总投喂量，通常8T/CI014-2023是育苗池水体的5%左右，并根据摄食情况

22、及稚贝的存池量进行调整，以满足稚贝营养需求。原则上一天投喂4次，晚上投喂比例多。藻类供应紧张时，清水时间不能超过8h，否则会影响稚贝生长。8.2.3换水前期隔天彻底换水一次，后期每天换水一次。换水时待水放干后，用水泵轻轻冲去粪便、藻渣等，换水后立即投喂藻类。8.2.4倒池一般7d10d倒池一次，倒池方法是将附着基在原池冲洗后移入新池，并在排水口系上100目大网袋，用压力较大的水泵或洗车高压水枪冲刷池底，将稚贝从出水口冲入网袋中。将贝苗连袋带水荡洗干净，最后将清洗的贝苗均匀地泼洒到新池中继续培养。8.2.5分苗稀养随着贝苗的生长，个体大小差异增大，需及时稀疏培育。结合倒池用80目、60目、40目

23、、20目网筛带水筛选分级，按不同规格大小分池培育。8.2.6日常观察和管理每天从附着基和池底取样品，在解剖镜下观察稚贝的活动、摄食和生长情况，在显微镜下测定规格大小。稚贝在条件适宜，饵料充足的情况下生长迅速，日生长可达80m100m。9稚贝出池9.1出池要求稚贝经过30d40d的培育，平均壳长达到1.5mm以上，每千克约合1.5106粒2106粒，即达销售规格，可以下海保苗培育。9.2出苗准备在出苗前5d开始逐渐降温至自然水温，让苗种适应外界水温。出售苗种用的暂养网袋用60目尼龙筛绢制作，上沿穿一收绳。9.3出苗方法将达到销售规格要求的苗种冲出，用80目网袋反复荡洗，至水基本清。沥干水分后取样

24、0.01g0.05g，仔细计数，计算得到每千克的颗粒。上述暂养网袋每个装苗2104粒，同时放入有弹性的网片或网丝，以撑开袋的内腔，防止贝苗摩擦，然后抽紧收绳后临时吊9T/CI014-2023挂于育苗池中，按稚贝培养要求投喂藻类，直至出厂。9.4装运出厂装运可以采用泡沫箱运输，有条件最好采用活水船运输。如进行长距离运输，应考虑高温的危害，天气好，气温25以上时要适当加冰降温。10T/CI014-2023附录A（资料性）A.1场地选择和布局图A.1场地选择和布局A.场地选择B.育苗场布局A.2胚胎发育图A.2厚壳贻贝胚胎发育过程A.受精卵B.二细胞分裂C.四细胞D.原肠胚E.面盘幼虫F.D型幼虫11T/CI014-2023A.3稚贝培育图A.3厚壳贻贝稚贝培育A.壳顶幼虫晚期B.眼点出现C.听囊和鳃出现D.足出现E.稚贝F.稚贝附着12