(3.3)--培养基制备技术卫生微生物检验实验方法与技能.ppt
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1、培养基的制备技术【实验目的】1掌握常用培养基制备的基本过程。2熟悉常用培养基的种类及用途。3.熟悉高压蒸汽灭菌器及使用方法。【器材和试剂】试剂:营养肉汤,营养琼脂,琼脂粉,蒸馏水等。器材:电子天平、高压蒸汽灭菌锅、电炉、三角烧瓶、量筒、试管、培养皿、移液管、烧杯、玻璃棒、超净台、试管架、称量纸等。【实验内容】1.基础培养基(包括液体培养基、半固体培养基、斜面及平板培养基)制备。2.高压蒸汽灭菌器的使用。一、培养基的种类1.按用途分类基础培养基:仅含细菌生长繁殖所需的最基本成分。营养培养基:在基础培养基中添加某些营养物质。选择培养基:除营养成分以外,还添加了某些抑制物质。鉴别培养基:添加了某些特
2、定的作用底物和指示剂。增菌培养基:一般均含有抑制剂。厌氧培养基:如庖肉培养基。2.按物理性状分类u液体培养基:不含凝固剂,用于增菌和接种纯种细菌。u半固体培养基:含0.51琼脂。用于观察细菌动力、保存菌种。u固体培养基:平板、斜面。含1.52.5琼脂。平板:用于细菌的分离培养。斜面:用于纯培养、保存菌种。二、培养基制备的基本过程调配调配溶解溶解矫正矫正pH过滤澄清过滤澄清分装分装灭菌灭菌检定检定保存保存斜面斜面摆放摆放平板平板倾注倾注(一)调配(一)调配按照培养基配方正确称取各种原料。用量筒量取所需蒸馏水量。注意事项称量准确。(二)溶解(二)溶解在三角烧瓶中先加入少量蒸馏水,再加入称量好的各种
3、原料,以防培养基干粉粘瓶底烧结。玻棒搅匀,加热溶解,补足水量。注意事项容器的材质:可选用玻璃、搪瓷,不可用铁、铜容器。培养基中需加染料、胆盐、指示剂等,应在校正pH后加入。(三)矫正(三)矫正pH将培养基调至其规定的pH值。调整pH的方法可用pH试纸,也可用pH计。(四)过滤澄清(四)过滤澄清调整pH后,于沸水中加热510min后进行。用滤纸或双层纱布过滤。注意事项若培养基无明显沉淀或浑浊,则无需过滤澄清。(五)分装(五)分装液体、半固体、斜面培养基:灭菌前分装于试管,加塞。制备平板的培养基:分装于三角烧瓶,加塞高压。灭菌后冷却50左右,无菌操作倾注灭菌平皿内。注意事项注意分装量。塞好硅胶塞的
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- 3.3 培养基 制备 技术 卫生 微生物 检验 实验 方法 技能
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