2023年分子生物学【1166】超详细解析答案.pdf
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1、学习必备 欢迎下载 西南大学网络与继续教育学院课程考试答题卷 学号:1523203313011 姓名:朱水良 层次:专升本 类别:网教 专业:药学 20XX年 6 月 课程名称【编号】:分子生物学【1166】A 卷 题号 一 二 三 四 五 总分 评卷人 得分 (横线以下为答题区)1、细胞通过哪些修复系统对 DNA 损伤进行修复?答:(1)DNA聚合酶的“校正”修复 DNA 复制具有非常高的精确度,平均每复制109个核苷酸,才出现一个核苷酸的差错。虽然复制是以碱基的精确互补配对为基础,但碱基配对有时仍然会出错。DNA聚合酶的“校对”机制可不断地纠正复制过程中可能出现的差错。DNA 聚合酶在复制
2、 DNA 时,首先对新参与合成的核苷酸要进行筛选;其次对错误掺入的核苷酸则利用其35外切酶活性进行切除,使得 DNA 复制中出现配的概率大大减少。另外,DNA 聚合酶53合成方向也是确保 DNA 复制准确的机制之一。(2)光复活修复也称直接修复,紫外线损伤的光复活过程是一种广泛存在的修复作用,从低等单细胞生物到鸟类都有,但高等哺乳动物中没有。紫外线照射可能引起 DNA 链上两个相邻的嘧啶发生聚合反应,形成嘧啶二聚体,其中主要是胸腺嘧啶二聚体,这些二聚体能阻止 DNA 的复制和转录。光复活修复能够修复任何嘧啶二聚体的损伤,其修复过程为:光复活酶识别嘧啶二聚体并与之结合形成复合物;在300600n
3、m可见光照射下,酶获得能量,将嘧啶二聚体的丁酰环打开,使之完全修复;光复活酶从 DNA 上解离。(3)切除修复 是指在一系列酶的作用下,将 DNA 分子中受损伤的部分切除,并以完整的链为模板,合成切去的部分,使 DNA 恢复正常结构的过程。切除修复有以下两种方式:碱基切除修复 主要修复单个碱基缺陷的损伤,即小段 DNA 的损伤。这是在 DNA 聚合酶、DNA 糖苷酶、内切酶和连接酶等参与下完成的。DNA 糖苷酶能特异性识别并将不正常的碱基水解切除,形成无碱基的 AP位点,由 AP核酸内切酶在 AP位点附近将 DNA 链切开,然后外切酶切除包括 AP 位点在内的 DNA 链,聚合酶填补单链缺口,
4、最后连接酶将链连接。核苷酸切除修复:当 DNA链上相应位置的核苷酸发生损伤,导致双链之间无法形成氢键,由核苷酸切除修复系统负责进行修复。这是大段 DNA 损伤修复系统,由 ATP依赖的切除核酸酶进行双切除,即在损伤部位的两侧切开磷酸二酯键,除去损伤的寡核苷酸。留下的缺口由 DNA聚合酶、DNA 聚合酶或进行修补合成,最后由 DNA 连接酶连接。(4)重组修复 光复活修复和切除修复是先修复,后复制,又称为复制前修复,而重组修复是 复 制 后 修 复,是用 DNA 重组的方法修复 DNA 损伤。分三个步骤:复制,损伤的 DNA 仍可复制,但复制到损伤部位时,子链就出现了缺口;重组,从完整的母链将相
5、应的片段移到缺口,而母链上形成缺口;填补和连接,母链上的缺口由 DNA 聚合酶进行填补合成,最后由 DNA 连接酶连接 重组修复是 DNA 的复制过程中所采用的一种有差错的修复方式,修复过程中,DNA 损伤并未除去。但是,随着复制的不断进行,若干代后,损伤部分逐渐被稀释,实际上消除了损伤的影响。(5)错配修复 DNA复制是一个高保真过程,但其正确性毕竟不是绝对的,复制产物中仍会存在少数未被校出的错配碱基。错配修复是一种特殊的核苷酸切除修复,用来切除复制中新合成 DNA 链上的错配碱基。通过对错配碱基的修复将使复制的精确性提高102103倍。现已在大肠杆菌、酵母和哺乳动物中都发现了错配修复系统。
6、复制错配中的错配碱基存在于新合成的子代链中,错配修复是按模板的遗传信息来修复错配碱基的。因此,该修复系统必须有一种能在复制叉通过之后识别模板链与新合成 DNA 链的机制,以保证只从新合成的 DNA 链中去除错配碱基。原核生物主要通过对模板链的甲基化来区分新合成的DNA 链,大肠杆菌通常利用腺嘌呤甲基化酶(Dam甲基化酶)将双链 DNA 的5GATC 序列中的腺嘌呤 N6甲基化,利用胞嘧啶甲基化酶可将5CCAGG 和5CCTGG 序列中的胞嘧啶转变为5甲基胞嘧啶。当复制完成后,在短暂的时间内(几秒或几分钟),只有模板链是甲基化的,而新合成的链是非甲基化的。正是子代 DNA 链中的这种暂时半甲基化
7、,可以作为一种链的识别标志,以区别模板链和新合成的链,从而使存在于 GATC 等序列附近的复制错配将按亲代链为模板进行修复。几分钟后新合成链也将在 Dam甲基化酶作用下被甲基化,从而成为全甲基化 DNA。一旦两条链都被甲基化,这种错配修复过程几乎不再发生。由于甲基化 DNA 成为识别模板链和新合成链的基础,且错配修复发生在 GATC 的邻近处,故这种修复也称为甲基指导的错配修复。真核生物的错配修复与大肠杆菌基本相似,例如哺乳动物也广泛地利用核苷酸甲基化来识别子链和亲链。错配修复是一个非常耗能的修复过程,错配的碱基离5GATC 等序列越远,被切除的核苷酸就越多,重新合成新链消耗的 dNTP就越多
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