2023年医学细胞生物学笔记.pdf
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1、第四章、细胞生物学的研究技术(简朴了解,考试题目较简朴)一显微镜1普通显微镜(light microsco p e):重要用于染色标本的观测2相差显微镜(phase c o n t ra s t mic r o sc o p e):用于观测培养的活细胞(无色的细胞)倒置相差显微镜合用于观测体外培养的活细胞的结构和活动3微分干涉差显微镜(D IC显微镜):合用于活细胞之类的无色透明标本的观测,广泛应用于各种细胞工程中的显微操作4暗视野显微镜:合用于无色透明标本的观测(活细胞),但不可以观测到细胞的内部结构5激光扫描共聚焦显微镜:荧光检测、细胞结构的三维重建;、微操作、定点破坏培养物中的某些细胞,
2、实现对某些特定细胞的保存6荧光显微镜:检测细胞表面或内部特定的抗原二.亚显微结构的观测1电子显微镜(elec t ron m i erose o p e):透射电镜T E M用于观测和研究细胞内部细微结构;扫描电镜SEM用于观测标本表面精细的三维形态结构;高压电镜2扫描探针显微镜:扫描隧道显微镜;原子力显微镜三.细胞的分离与培养(1)细胞的分离:运用物理性质不同(沉降和离心);运用不同类型细胞与玻璃或塑料的黏附能力不同;运用抗体特异性结合的特性;采用带有荧光染料的特异性抗体来标记悬液中的某些特定细胞,然后采用流式细胞仪将被标记的细胞分离出来(悬液:用蛋白质水解酶解决组织块,并加入一定量的乙二胺
3、四乙酸EDTA以结合溶液中的Ca2+,再通过轻微振荡使组织解散)细胞的培养(cell culture):从组织分离出来特定的细胞在一定条件进行培养,使之可以继续生存生长以至增殖的一种方法,分为原代培养和传代培养细胞在体外生长的条件:培养基;支持物;其 他(C02浓度、适宜的温度、PH)A原代培养:由起始实验材料所进行的细胞培养B对已有的细胞(原代培养所得的培养物或已有的培养物)进行继续培养C细胞系:通过原代培养所得的细胞培养物(可以具有原代培养所用的起始实验材料的所含细胞)D细胞株(c ell str a in):由单一类型的细胞所组成的细胞系四.细胞融合(cell fusion):是指两个或
4、两个以上的细胞互相接触并且合并而形成一个细胞(基因型相同的细胞形成融合称为同核融合,基因型不同的细胞形成的融合称为并核融合);细胞融合的方法:生物诱导法,化学诱导法,物理诱导法五.细胞连接(ce 1 I junction):A 封闭连接 occludi n g junction(又称紧密连接 tig h t ju n cti o n)B锚定连接a nc h orin g ju n ct i o n:与肌动蛋白相连的锚定连接(隔状连接、黏合带、黏合斑);中间丝相连的锚定连接(桥粒、半桥粒)C通讯连接:间隙连接、化学突触、胞间连丝第五章、细胞膜及其表面(重点内容)、第一节、细胞膜的分子结构和特性(
5、-)膜的化学组成(1)膜脂1、磷 脂(了解分类)A、磷脂酰胆碱(含量最多),也称为卵磷脂J B、磷脂酰乙醇胺(含量另一方面)C、磷脂酰丝氨酸D、磷脂酰肌酶E、鞘磷脂2、胆固醇(知道胆固醇的作用:,、提高脂双层的力学稳定性Yb、调节脂双层的流动性C、减少水溶性物质的通透性3、糖脂(具有一个或者几个糖基的脂类,存在于膜的非细胞质表面,糖基暴露于细胞表面,并且存在于所有细胞膜中)【注意】(膜脂的特点:一头亲水,一头疏水的兼性分子或者称为双亲酶分子,其中亲水的一头为极性头,疏水的一头为非极性头)(2)、膜 蛋 白(membrane p ro te in s)跨膜蛋白(tra n smembra n e
6、 p ro t eins)膜周边蛋白(p eriph e r a 1 prot e in)分布在膜的内表面,为水溶性的蛋白质脂瞄定蛋白(lipid-a n ch o r a 1 protei n)位于膜的两侧(作用:有机械支持的作用,也可以作为载体蛋白、受体,抗原、酶在运送物质、信号传导、免疫反映、细胞连接)(3)膜糖(只有真核细胞才有,重要分布在细胞膜的外表面)细 胞 被(糖萼):在大多数真核细胞的表面,富含糖类的周边区,重要涉及细胞膜连接的糖蛋白与糖脂的寡糖侧链和膜蛋白聚糖上的多聚糖。(作用:保护细胞表面,与外界联系,信息交流,细胞辨认)(二)、膜的分子结构(蛋白质-脂质-蛋白质)A、片层
7、结构模型B、单位膜模型(:、液态嵌镶模型(1)优点:强调膜的动态性和蛋白质分子的嵌镶关系(2)缺陷:不能说明具有流动性的质膜怎么样保持摸的相对完整性和稳定性(3)内容(重点):A、流动的脂质双分子层构成了膜的骨架、B、膜蛋白嵌镶或者附着在脂质双分子层中C、糖分子分布于膜的外表面(三)、膜的理化特性1、不对称性:膜的内外两层在结构和功能上有很大的差异A、膜蛋白的不对称分布B、膜脂的不对称分布2、流动性A、膜脂的流动性 B.膜蛋白的流动性r膜脂分子的旋转运动.莫蛋白分子的侧向扩散运动YJ膜脂分子的翻转运动、膜脂分子的弯曲运动 膜蛋白分子的旋转运动膜脂分子的伸缩震荡运动膜脂分子的旋转异构膜脂分子侧向
8、扩散3、影响膜脂流动性的因素脂肪酸链的长度和不饱和度;胆固醇与磷脂的比值;卵磷脂与鞘林子的比值;膜蛋白的影响;其他因素(温度、P H、离子强度、金属离子)二、细胞膜的跨膜运送(U 、小分子和离子的穿膜运送与细胞膜有关的物质运送活动重要有两种方式(2)、大分子和颗粒的膜泡运送 载体蛋白:改变构想(积极,被动运送)(1 )膜转运蛋白 通道蛋白:形成通道(被动运送)(2)运送方式A.被动运送(p a s s i v e tr a n s p o r t):顺浓度梯度,转运蛋白。ac(O,1)简朴扩散(s i mp l e di ffuc t i on):脂溶性物质(如苯,醇,类固醇激素及0小2等错误
9、!离子通道扩网 电压门控通道(受膜电压控制)配体门控通道(受化学物质控制)(N a,K;C a之+等极性很强的水化离子)机械门控通道错误!易化扩散(f a c i l i t a ted d i ff u c t i on):凭借载体蛋白的帮助穿过细胞膜,但不耗细胞的代谢能,顺浓度梯度转运(非脂溶性的小分子,极性分子,离子或亲水性的物质 如糖,氨基酸,核甘酸,金属离子等)B.积极运送错误!离子泵钠泵:是一种蛋白质(N a-K A T P酶),具有载体和酶的活性附向运送|在细胞膜内侧,有N a;M g/存在下,A TP酶被N a*激活,将A T P分解为A D P和高能磷酸根.酶磷酸化,改变构想
10、的A T P酶,在膜外侧有K 存在时,与K,亲和力大,与之结合,发生去磷酸作用,同时酶又恢复到本来的构象,将移至膜内释放.|水解一个A T P可转运3个NJ和2个K +意义:a.维持细胞的渗透压,保持细胞的体积 b.为葡萄糖协同运送泵提供了驱动力c.维持细胞的静息电位(2)钙泵(Ca A T P 酶)C.随着运送(协同运送):由钠泵(或H泵)与载体蛋白协同作用靠间接消耗A T P所完毕积极运送的能量来源:水 解A TP,协同运送中的离子梯度(另一物质的电化学梯度)动力(2)膜泡运送(一)胞 吞 作 用(e n d o c y t o s i s)A.吞噬作用(p h a g o c y t o
11、 s i s):(细胞内吞入较大的固体颗粒或分子复合物)B.饱饮作用(p i n o c y t o s i s):(细胞吞入溶液物质或极微小颗粒物)一无特异性C.受体介导的胞吞作用:大分子与细胞膜上特异性受体相辨认并结合,然后通过膜囊泡系统完毕物质的传送-特异性很强(二)胞吐作用(e x o c y t o s i s):是一种与胞吐作用相反的物质运送方式,以转运囊泡的形式从内质网出发,经高尔基体后与细胞膜融合分泌到细胞外,此外经细胞内消化后的残质体也通过细胞膜排出细胞外,这些过程称为胞吐作用.胞吐作用需要耗A TP,属细胞膜的积极运送,是通过膜的一系列膜泡融合完毕的.基本过程:细胞内被运送
12、的物质由膜包围成小泡,小泡运送至质膜下方并与质膜融合,将内容物分泌或排出细胞外三.膜受体 胞外区域:调节部位胞内区域:活性部位(一)化学成分:糖蛋白,糖脂,唐脂蛋白结构:辨认部(调节单位),效 应 部(催化单位),转换部或传导部(转换单位)(二)分 类J离子通道受体:靠启动离子通道来转导信号。Y 催化受体:靠自身的TP K活性来转导信号,其第二信使是磷酸化的靶蛋白G蛋白偶联受:通过G蛋 白将信号传给效应酶(三)特异性:A.特异性与非决定性B.饱 和 性C.高 亲 和 度D.可 逆 性E.特定的组织定位(四)功能:参与细胞与外界的通讯,细胞与细胞之间的辨认,细胞的免疫辨认和细胞功能的调节和控制四
13、.细胞的化学信号分子及其受体(1)信号转导:由胞外信号(第一信使)转换为细胞内信号的过程第二信使:由细胞膜表面受体接受信号后转换而来的胞内信号胞内重要信号通路A.c AMP信号通路:(细胞外信号分子)配体一G蛋白偶联受体一G蛋白 一 被 活-腺昔环化酶,AC(效应蛋白)一cAMP(第二信使)一 蛋白激酶A,P KA一一系列蛋白磷酸化一基因转录,代谢变化B.磷脂酰肌醇信号通路胞外信号分子与膜受体结合一G蛋白活 化 磷脂酶C (效应蛋白)f 4,5一二磷酸酰肌f 二酰甘油(DAG)-PKC1,4,5一三磷酸肌醇(I P3)-C浓度升高第六章、细胞质和细胞器细胞质基质(C y toplasmi c
14、mat r i t):细胞中可分辨的结构以外的无形胶状物质细胞器(Org anelle):存在于细胞基质中,具有一定的化学组成,一定的形态结构,执行特定的生理功能,并且为细胞所固有的有形结构小体。一、细胞质基质1、化学组成:错误!无极小分子类物质(水和离子等)错误!中分子物质(单糖、氨基酸、单核甘酸等)大分子物质(蛋白质、多糖、核酸等)2、理化特性3、功能a.为细胞生命运动提供相对独立、稳定的环境J b.是细胞内各种生化反映的场合,又是细胞内营养物质贮存以及代谢产物的分散介质c.对细胞内外的物质的互换转运具有一定的调节控制作用d.参与细胞表面特化结构的形式及其功能活动过程e.为各种细胞器的完整
15、结构的维持与正常功能活动的行驶提供必需的环境基质和作用底物f.对于细胞的分列繁殖,细胞的分化具有重要的作用二.核糖体(Rib o s ome R i)1、形态结构:不规则的颗粒状小体f 北亚基、J 结合部之间,有一特殊间隙结构,是mRNA结合、穿越的部位小亚基2、类型:y 原核细胞核糖体 II真核细胞质核糖体J 重要根据核糖体的沉降系数来区别真核细胞器核糖体3、核糖体的理化特性r r蛋白质:40%核糖体的表面 不同类型的核糖体的r蛋白和rRNA两组分,无论是种类J 还是数量均不同,即便是同类型的核糖体,其大小亚rR N A:6 0%核糖体内部 基中的rR N A、r蛋白质的种类、数量也有较大的
16、差异4、核糖体的形成和组装(自组装)核仁组织区编码rR N A的基因(rDNA)45 S 前体 rRNAt18 S r RNA被32S rR N A上 屋 合细胞质中特定的小亚基r播白整合y40S小亚基颗粒5.8SrRNA+28Sr R NA 核仁体外rD N A转 录 的5S rRNA细胞质中特%的大亚基蛋白60S大亚基颗粒5、核糖体的4个重要的功能活性部位a、氨酰基位点(受点或者A点):结合新掺入的氨酰-r R N A的位点b、肽酰基位点(结合点或者P点):肽酰一rR N A的结合位点c、肽酰基转移酶位点:d、G D P酶位点:水解GDP,供应催化肽酰基一 r RN A由A位点移到P位点所
17、需能量e、E位点(出口位):肽酰转移后,与即将释放的tR N A的结合位点6、核糖体的存在形式在功能状态重要以豕聚核植体的形式存在A游离核糖体:结构蛋白B附着核糖体:跨膜蛋白,分泌蛋白,溶酶体蛋白,驻留蛋白7、R N A的作用1)mRNA:蛋白质合成的模板2)t RNA:转运特定的氨基酸3)rRNA:核糖体的重要组分,决定核糖体的空间结构8、蛋白质的合成肽链合成的起始1k链的延长F连合成的终止三、内膜系统(e n d o m e m b r a n e s y s t em)细胞内结构、功能及至发生关联的所有膜性结构细胞器统一称为内膜系统。涉及内质网、高尔基复合体、溶酶体、过氧化酶体、各种转运
18、小泡及核膜等功能结构。早(一)、内质网(en d o p l a s m i c r et i cu l u m)1、化学组成A、内质网膜的脂质组成 B、内质网膜的蛋白质组成 C内质网网腔中的蛋白质.D、内质网膜所含的重要酶系:葡萄糖6磷酸酶(参与糖代谢),细胞色素P4 5 02、形态结构A、由一层单位膜围成的连续网状膜系统,遍布细胞质B、内质网的基本单位结构:由一层单位膜所形成的大小、形状各异的管、泡、扁囊C(一)糙面内质网(R E R)错误!形态:a.有许多颗粒状核糖体附着在其表面;多为板层状排列的扁囊b.在具有肽类激素或蛋白质分泌功能的细胞中分泌较多(分泌限度高的细胞中分布丰富)错误!功
19、能:核糖体附着的支架;新生肽链的折叠与装配;蛋白质的糖基化;蛋白质的胞内运送;蛋白质的合成糖基化:是指单糖或寡糖与蛋白质之间通过共价键结合形成的糖蛋白的过程(二)光面内质网(S E R)错误!形态:膜表面没有核糖体附着,多呈管、泡样网状结构错误!功能:脂类的合成(磷脂,胆固醇,肾上腺皮质素);糖原代谢;解毒作用;参与骨骼肌收缩(肌质网是C a 2+贮存场合,可通过释放和吸取C a七调节肌肉收缩);胃酸,胆汁的合成分泌3.肽链穿越内质网的转移机制:A.S P R结合信号肽:信号肽一SRP核糖体复合U 多肽链合成暂停B.核糖体锚着于内质网:信号肽一SRP核糖体一 S RP受体复合物匚法糖体被带到E
20、R膜上信号肽-移位子 程 赢 锚 着 到R E R,继续合成肽链C.新合成的多肽链进入内质网腔D.信号肽被剪切E.肽链在E R网膜腔内发生修饰加工,随后核糖体大小亚基解聚,移位子通道关闭早(二)高尔基复合体(Go 1 g i complex)1.形态结构他镜下,一般为不规则的网状,颗粒状或线状电镜下,由扁平囊和大小不等的囊泡组成由成簇的Gol g i c ap p ara t u s(bo d y)聚集而成,是一个封闭的膜性囊泡状结构,又称高尔基堆。福误!顺面高尔基网(凸面,朝向细胞核或内质网):高尔基体的入口区域,接 受ER合成蛋Y白j (Cis go 1 gi netw o r k)质和脂
21、质,并分选O,2反面高尔基网(凹面,朝向细胞膜):高尔基体的出口区域,参与蛋白质的分选与包装,(Tran s g olgi netw o rk)最后输出错误!中间膜囊:重要执行多数糖基的修饰,糖脂的形成,多糖合成2.化学组成:脂质和蛋白质a.脂质含量介于质膜和内质网膜之间b.具有重要的酶类:糖基转化酶(最具特性的酶)3.功能:胞内物质转送运送和细胞的分泌活动;糖蛋白的加工合成;蛋白质水解;蛋白质的分选和胞内膜泡运送帛(三)溶酶体(lysos o m e)1.结构特性:a,由一层单位膜包裹而成的囊球状结构小体b,具有丰富的水解酶(酸性磷酸酶是溶酶体的标志酶)c.膜蛋白高度糖基化,有助于防止溶酶体
22、所含的酸性水解酶对其自身膜结构的消化分解d.溶酶体膜上嵌有质子泵,形成和维持溶酶体囊腔内酸性的内环境e.膜上有许多载体蛋白2.溶酶体的类型A.内体性溶酶体:(G C的运送小泡+内吞体)运送小泡先由T ra in s G C N形成,再被以内格蛋白变成有被小泡从高尔基体脱落后,网格蛋白被脱掉,成为表面光滑的运送小泡与内吞体合并后演变为内体性溶酶体B.吞噬性溶酶体:自噬性溶酶体:内吞性溶酶体+内源性物质异噬性溶酶体:内吞性溶酶体+外源性物质残余体3.溶酶体的形成与成熟:E R上核糖体合成溶酶体酶蛋白进入ER腔进行N-连接糖基彳进入CG顺面膜囊一 素糖链上甘露糖残基磷酸化,形呼 一 磷酸一甘露糖(M
23、 6 P)与反面膜囊上的M 6 P受体结合芽形成特异性运送小泡融合出+内吞体内体性Ly4.功能:对自身物质的分解;对细胞内吞物的消化;参与激素形成;细胞营养作用;防御保护功能;骨骼发生重的消除旧骨质;在器官组织变态与萎缩中的作用;协助精子与卵细胞受精(四)过氧化物酶体(p e r ox i some/m i c ro b o d y M b)1.形态结构:异质性,中央常有类核体A.M b中经常具有电子致密度较高,排列规则的晶格结构,称作类核体/类晶体B.在M b界膜内表面可见一条称为边沿板的高电子致密度条带状结构2.M b中的酶:氧化酶类,过氧化氢酶类(标志酶),过氧化物酶3.功能:解毒作用,
24、氧化脂肪酸,调节细胞氧张力四.线粒体(Mi t ochondri o n/mitoc h ondria)(-)线粒体的结构1.形态与数量分布 光镜下一般呈线状、杆状、粒状;YI线粒体的形态随Cel 1发育阶段不同而异;生理活动旺盛的细胞中线粒体数目较多,哺乳动物成熟红细胞中没有线粒体 2.亚微结构:由两层高度特化的单位膜套叠而成的封闭性膜囊结构。两层膜将线粒体内部空间与细胞质隔离,形成两个独立的线粒体室,构成线粒体的支架a.外 膜(o u t memb r a n e):是一层单位膜,厚5-7nm,光滑有弹性;富含转运蛋白(孔蛋白);通透性较高;标志性酶是单胺氧化酶b.内膜(inner mem
25、brane):是一层单位膜;蛋白质:脂质=3:1;高度特化,通透性小3.基质腔:由内膜直接包围形成的空间,具有基质膜间隙:内外膜间的空间崎:内膜向内腔突起的折叠 于夫内膜面积,提高AT P合成的效率需能较多的细胞,线粒体数量较多,喳也多4.基 粒(elem e n t a r y partic 1 e):内膜(涉及喳)的内表面附着的凸向内腔,排列规则的球形小体A.形态结构,头部:扁球体(F1偶联因子)-催化ATP合成。部:基部:(F0偶联因子)一连接F1与内膜,是质子通道B.功能:将呼吸链电子传递过程中释放的能量用于ADP磷酸化生成ATP的关键装置C.内外膜转位接触点:内外膜上存在一些内膜与外
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- 2023 医学 细胞生物学 笔记
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