【高中生物】植物细胞工程课件 2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx
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1、选择性必修选择性必修3 生物技术与工程生物技术与工程2023-05-262023-05-26第第2章章 细胞工程细胞工程新课导入新课导入马铃薯植株能在地下结马铃薯块茎,番茄植株在马铃薯植株能在地下结马铃薯块茎,番茄植株在地上部分会结番茄果实,我们能否培育成一种新型地上部分会结番茄果实,我们能否培育成一种新型植株,让它在地上结番茄,地下结马铃薯?植株,让它在地上结番茄,地下结马铃薯?能否能否用传统的有性杂交方法?用传统的有性杂交方法?因为不同种生物之间存在因为不同种生物之间存在着生殖隔离,所以用传统的着生殖隔离,所以用传统的有性杂交方法是不可能做到有性杂交方法是不可能做到这一点的。这一点的。新课
2、讲解新课讲解细胞工程的概念:细胞工程的概念:细胞工程是指应用细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学细胞生物学、分子生物学和和发育生物学发育生物学等多学科的原等多学科的原理和方法,通过理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平细胞器、细胞或组织水平上的操作,上的操作,有目的地获得特定的有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性生物工程。的一门综合性生物工程。1.原理方法:原理方法:_;2.操作水平:操作水平:_;3.目的:目的:_;4.分类:分类:_;细胞生物学、分子生物学和发育生物学细胞生物学、分子生物学和发育生物学细胞器、细胞或组织水平细胞器、细胞或
3、组织水平获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品植物细胞工程、动物细胞工程植物细胞工程、动物细胞工程新课讲解新课讲解19021902年,年,年,年,哈哈哈哈伯兰特伯兰特伯兰特伯兰特提出了提出了提出了提出了细胞全能性的细胞全能性的细胞全能性的细胞全能性的理论理论理论理论,但相关,但相关,但相关,但相关的的的的实验实验实验实验尝试尝试尝试尝试没没没没有成功有成功有成功有成功19581958年,年,年,年,斯图尔斯图尔斯图尔斯图尔德德德德等发现等发现等发现等发现胡萝卜胡萝卜胡萝卜胡萝卜的的的的体细胞可以分化为体细胞可以分化为体细胞可以分化为体细胞可以分化为胚,
4、胚,胚,胚,为细胞全能性为细胞全能性为细胞全能性为细胞全能性理论提供了强有力理论提供了强有力理论提供了强有力理论提供了强有力的支持的支持的支持的支持19601960年,年,年,年,科金科金科金科金用真菌的用真菌的用真菌的用真菌的纤维纤维纤维纤维素酶素酶素酶素酶分解番茄分解番茄分解番茄分解番茄根的细胞壁,根的细胞壁,根的细胞壁,根的细胞壁,成功获得了成功获得了成功获得了成功获得了原原原原生质体生质体生质体生质体19641964年,古哈等年,古哈等年,古哈等年,古哈等在培养毛曼陀罗在培养毛曼陀罗在培养毛曼陀罗在培养毛曼陀罗的花药时,的花药时,的花药时,的花药时,首次首次首次首次得到了由花药中得到了
5、由花药中得到了由花药中得到了由花药中的的的的花粉粒发育而花粉粒发育而花粉粒发育而花粉粒发育而来的胚来的胚来的胚来的胚19711971年,年,年,年,卡尔卡尔卡尔卡尔森森森森诱导烟草诱导烟草诱导烟草诱导烟草种种种种间原生质体融间原生质体融间原生质体融间原生质体融合合合合,获得了,获得了,获得了,获得了第第第第一株体细胞种一株体细胞种一株体细胞种一株体细胞种间杂种植株间杂种植株间杂种植株间杂种植株19741974年,年,年,年,土壤土壤土壤土壤农杆菌的农杆菌的农杆菌的农杆菌的TiTi质粒质粒质粒质粒被发现,之后,被发现,之后,被发现,之后,被发现,之后,该质粒应用于植该质粒应用于植该质粒应用于植该
6、质粒应用于植物分子生物学领物分子生物学领物分子生物学领物分子生物学领域,域,域,域,促进了植物促进了植物促进了植物促进了植物细胞工程与分子细胞工程与分子细胞工程与分子细胞工程与分子生物学技术的紧生物学技术的紧生物学技术的紧生物学技术的紧密结合密结合密结合密结合植物细胞工程的发展历程植物细胞工程的发展历程新课讲解新课讲解植物细胞工程的技术手段和理论基础植物细胞工程的技术手段和理论基础植物组织培养植物组织培养植物体细胞杂交植物体细胞杂交1.植物细胞工程的技术手段:植物细胞工程的技术手段:2.细胞全能性:细胞全能性:(1)概念:概念:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完
7、整生物体或分化成各种细胞的潜能。完整生物体或分化成各种细胞的潜能。(2)细胞具有全能性的原因:细胞具有全能性的原因:经分裂和分化的细胞具有该物种的全套遗传物经分裂和分化的细胞具有该物种的全套遗传物质,具有发育成为完整个体所必需的全部基因。质,具有发育成为完整个体所必需的全部基因。(3)植物细胞实现全能性的条件:植物细胞实现全能性的条件:离体。离体。提供营养物质、激素提供营养物质、激素(生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素)的诱导。的诱导。无菌无毒、温度、无菌无毒、温度、PH适宜等条件。适宜等条件。(4)生物体生长发育过程中细胞不表现全能性的原因:生物体生长发育过程中细胞不表现全能性的原因:在特
8、定的时间时间和空间条件下,细胞中的在特定的时间时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达基因会选择性地表达(从而形成生物体的不同组织和器官从而形成生物体的不同组织和器官)。课堂训练课堂训练1.1.下列有关细胞全能性的含义,正确的是(下列有关细胞全能性的含义,正确的是(下列有关细胞全能性的含义,正确的是(下列有关细胞全能性的含义,正确的是()A.A.每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能B.B.生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部
9、功能生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 C.C.生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D.D.未脱离母体的细胞也可能发育成完整的个体未脱离母体的细胞也可能发育成完整的个体未脱离母体的细胞也可能发育成完整的个体未脱离母体的细胞也可能发育成完整的个体C2.2.在生物体内,细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,在生物体内,细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,在生物体内,细
10、胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,在生物体内,细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,是因为(是因为(是因为(是因为()A.A.细胞丧失了全能性细胞丧失了全能性细胞丧失了全能性细胞丧失了全能性 B.B.基因的表达有选择性基因的表达有选择性基因的表达有选择性基因的表达有选择性C.C.不同的细胞内基因不完全相同不同的细胞内基因不完全相同不同的细胞内基因不完全相同不同的细胞内基因不完全相同D.D.在个体发育的不同时期,细胞内的基因发生了变化在个体发育的不同时期,细胞内的基因发生了变化在个体发育的不同时期,细胞内的基因发生了变化在个体发育的不同时期,细胞内的基因发生了变化B3.
11、3.以下不能说明细胞全能性的实验是(以下不能说明细胞全能性的实验是(以下不能说明细胞全能性的实验是(以下不能说明细胞全能性的实验是()A.A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株胡萝卜韧皮部细胞培育出植株胡萝卜韧皮部细胞培育出植株胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B.B.紫色糯性王米种子培育出植株紫色糯性王米种子培育出植株紫色糯性王米种子培育出植株紫色糯性王米种子培育出植株 C.C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株D.D.克隆羊多莉的培育克隆羊多莉的培育克隆羊多莉的培育克隆羊多莉的培育B特别提示:特别提示:植物的种
12、子发植物的种子发育成成熟的植株,并没有体现育成成熟的植株,并没有体现出细胞的全能性。出细胞的全能性。新课讲解新课讲解一、植物组织培养一、植物组织培养(一一)植物组织培养的概念:植物组织培养的概念:就是在无菌和人工控制条就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制件下,将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株的技术。织、丛芽,最终形成完整的植株的技术。菊花的组织培养菊花的组织培养实验探究实验探究(二二)植物组织培养的过程植物组织培养的过程菊花的组
13、织培养菊花的组织培养实验原理实验原理1.植物细胞的全能性:植物细胞的全能性:植物的根、茎、叶细胞一般都具有植物的根、茎、叶细胞一般都具有全能性。因为这些细胞都含该种生物的全套遗传信息,具有全能性。因为这些细胞都含该种生物的全套遗传信息,具有个体发育所必需的全部基因。个体发育所必需的全部基因。2.细胞表现出全能性需要一定的条件:细胞表现出全能性需要一定的条件:(1)离体;离体;(2)提供一定的营养物质:提供一定的营养物质:有机营养:蔗糖、氨基酸、维生素等;有机营养:蔗糖、氨基酸、维生素等;无机营养:多种矿质元素无机营养:多种矿质元素(无机盐无机盐)。(3)激素的诱导激素的诱导(生长素和细胞分裂素
14、等植物激素生长素和细胞分裂素等植物激素);(4)无菌、无毒、温度和无菌、无毒、温度和PH适宜适宜等。等。实验探究实验探究材料用具材料用具幼嫰的菊花茎段;幼嫰的菊花茎段;经过灭菌的培养基;经过灭菌的培养基;体积分数为体积分数为70%的酒精,质量分数为的酒精,质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液;左右的次氯酸钠溶液;无菌水;无菌水;50mL锥形瓶或大试管、烧杯;锥形瓶或大试管、烧杯;酒精灯;酒精灯;恒温箱;恒温箱;超净工作台(或接种箱);超净工作台(或接种箱);高压灭菌锅;高压灭菌锅;封口膜、滤纸、标签;封口膜、滤纸、标签;消毒用酒精棉球;消毒用酒精棉球;培养皿、解剖刀、镊子等。培养皿、解剖刀、镊子等
15、。实验探究实验探究方法步骤方法步骤1.外植体:外植体:把用于把用于离体离体培养的植物体培养的植物体的的一部分组织、一部分组织、器官或细胞,叫外植体。器官或细胞,叫外植体。常用的外植体常用的外植体是根尖、茎尖或花粉、子房等。是根尖、茎尖或花粉、子房等。2.植物组织培养中常使用根尖和茎尖植物组织培养中常使用根尖和茎尖作为外植体作为外植体的的理由:理由:(1)根尖和茎尖根尖和茎尖细胞细胞分裂、分化能力强,分裂、分化能力强,全能性较全能性较高。高。(2)根尖、茎尖可用于培养无病毒植株根尖、茎尖可用于培养无病毒植株(脱毒苗脱毒苗)。例:例:下列不能作为植物组织培养的材料是(下列不能作为植物组织培养的材料
16、是()A.秋海棠的叶秋海棠的叶B.马铃薯的块茎马铃薯的块茎C.成熟的花粉成熟的花粉 D.木质部中的导管细胞木质部中的导管细胞D实验探究实验探究3.对外植体和操作人员要进行对外植体和操作人员要进行消毒消毒,一般来说用,一般来说用酒精酒精溶液溶液和和次氯酸钠溶液次氯酸钠溶液。而对培养基和器械而对培养基和器械(如镊子、解剖刀等如镊子、解剖刀等)要进行要进行灭菌灭菌,一般用一般用高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌的方法。的方法。4.在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌灭菌和实验人员的和实验人员的无菌操作?无菌操作?提示提示:防止杂菌污染,防止杂菌污染,培养基一旦被
17、污染,迅速生长培养基一旦被污染,迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养,而且这些杂菌生的各种杂菌不但会和培养物争夺营养,而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质,导致培养长的过程中会生成大量对培养物有害的物质,导致培养物迅速死亡。物迅速死亡。5.取材时,切取菊花的幼嫩茎段时要注意切取含有取材时,切取菊花的幼嫩茎段时要注意切取含有形形成层成层部分。部分。提示:提示:这是因为形成层部分细胞分裂旺盛,容易诱导这是因为形成层部分细胞分裂旺盛,容易诱导产生愈伤组织。产生愈伤组织。实验探究实验探究6.配制培养基配制培养基固体培养基固体培养基:(1)有机营养成分:有机营养成分:碳源:碳源:2%
18、5%的蔗糖。的蔗糖。(常用的是蔗糖:常用的是蔗糖:其作用是其作用是提供营养和调节渗透压提供营养和调节渗透压)。含含氮氮物质:维生素和氨基酸物质:维生素和氨基酸.(2)无机营养成分无机营养成分:多种:多种矿质元素矿质元素(无机盐无机盐)。(3)生长调节物质生长调节物质(植物激素植物激素或其类似物或其类似物):主要是生长:主要是生长素素(或其类似物或其类似物)、细胞分裂素。、细胞分裂素。(4)琼脂:作为凝固剂,起固定和支持作用琼脂:作为凝固剂,起固定和支持作用。7.接种:接种:将培养物将培养物(即外植体即外植体)插入插入到到(诱导诱导)培养基培养基中中培养。培养。实验探究实验探究8.脱分化脱分化(
19、又叫去分化又叫去分化):外植体接种在外植体接种在诱导培养基诱导培养基上后,在一定的外部因素上后,在一定的外部因素(适适宜的温度、激素、宜的温度、激素、避光避光)的作用下,会恢复细胞分裂能力,的作用下,会恢复细胞分裂能力,并通过细胞分裂,形成愈伤组织。并通过细胞分裂,形成愈伤组织。(1)脱分化的概念脱分化的概念:已经分化的细胞,经过诱导后,失已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。(2)愈伤组织的特点:愈伤组织的特点:细胞分裂速度快,结构疏松,颜细胞分裂速度快,结构疏松,颜色浅而透明,细胞高度液泡化,细胞排列无序,
20、由色浅而透明,细胞高度液泡化,细胞排列无序,由一群一群活的薄壁细胞组成。活的薄壁细胞组成。(3)脱分化形成愈伤组织的培养条件:适宜的温度、激脱分化形成愈伤组织的培养条件:适宜的温度、激素诱导、避光等。素诱导、避光等。特别提醒:特别提醒:1.细胞分化本是不可逆的,但细胞分化本是不可逆的,但植物组培中的植物组培中的脱分化现象说脱分化现象说明了在一定条件下,分化又是可逆的。明了在一定条件下,分化又是可逆的。2.培养物培养物(外植体外植体)与经脱分化形成的愈伤组织相比较,愈与经脱分化形成的愈伤组织相比较,愈伤组织的全能性更高,分化程度又变得更低。伤组织的全能性更高,分化程度又变得更低。3.在植物的组织
21、培养中,脱分化是一个非常关键的步骤。在植物的组织培养中,脱分化是一个非常关键的步骤。实验探究实验探究9.再分化:再分化:通过脱分化产生的愈伤组织接种到通过脱分化产生的愈伤组织接种到生芽生芽培养基培养基上继上继续培养,又可以分化,形成各种不同的细胞,进而重续培养,又可以分化,形成各种不同的细胞,进而重新形成芽新形成芽,再转接到,再转接到生根培养基生根培养基上,继续分化形成上,继续分化形成根根等器官等器官(或形成胚状体或形成胚状体),形成试管苗,形成试管苗,这一过程叫再这一过程叫再分化。分化。再分化的概念:再分化的概念:愈伤组织接种到愈伤组织接种到分化培养基分化培养基上产生上产生芽、根等器官芽、根
22、等器官(或形成胚状体或形成胚状体),进一步形成试管苗的,进一步形成试管苗的过程,叫再分化。过程,叫再分化。愈伤组织愈伤组织根、芽根、芽(胚状体胚状体)再分化再分化植物组织培养的流程图:植物组织培养的流程图:植物组织培养的流程图:植物组织培养的流程图:知识拓展知识拓展影响脱分化和再分化形影响脱分化和再分化形成根、芽的一个重要因素:成根、芽的一个重要因素:生长素和细胞分裂素及其生长素和细胞分裂素及其它们的比例它们的比例(配比配比)。生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在脱分化形成愈伤组织时,需要高生长素,因为在
23、脱分化形成愈伤组织时,需要高生长素,因为生长素主要被用于诱导生长素主要被用于诱导愈伤组织形成、诱导根的分化和促进细胞伸长生长愈伤组织形成、诱导根的分化和促进细胞伸长生长。在再分化形成芽时,细胞分裂素在再分化形成芽时,细胞分裂素/生长素的比例需要较高。而在再分化生长素的比例需要较高。而在再分化形成根时,细胞分裂素形成根时,细胞分裂素/生长素的比例则较低。因为细胞分裂素有诱导芽的生长素的比例则较低。因为细胞分裂素有诱导芽的分化作用,而生长素有利于根的分化。分化作用,而生长素有利于根的分化。观看视频观看视频知识拓展知识拓展“激素杠杆激素杠杆”:生长素用量:生长素用量/细胞分裂素用量,比值高时,有利于
24、根的细胞分裂素用量,比值高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化、抑制根的形成;比值分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化、抑制根的形成;比值适中时,促进愈伤组织的形成。适中时,促进愈伤组织的形成。课堂训练课堂训练1.下列有关植物细胞与组织培养的叙述中,错误的是(下列有关植物细胞与组织培养的叙述中,错误的是()A.花药、胚不能作为组织培养的材料花药、胚不能作为组织培养的材料B.植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性C.外植体是指用于培养的植物组织或器官外植体是指用于培养的植物组织或器官D.外植体可诱导出愈伤组织外植体可诱导出愈伤组织2.下列关于植物组织培养的叙述中,错误
25、的是(下列关于植物组织培养的叙述中,错误的是()A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因型相同同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因型相同AD3.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的
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