实验三-病原性球菌.ppt

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1、注意:不要打开培养皿!实验三 病原性球菌病原生物学教研室涂 增实验目的：了解病原性球菌的分离鉴定程序 掌握常见病原性球菌（三种葡萄球菌、三型链球菌）的形态染色特征、菌落特征及致病性鉴定 熟悉血浆凝固酶实验原理、方法及结果判定实验内容：病原性球菌（录像）革兰染色观察乙型链球菌的形态特征 三种葡萄球菌、三型链球菌的菌落特征观察 细菌致病性鉴定-凝固酶试验1、病原性球菌（录像）2、病原性球菌的分离鉴定程序临床症状脓液、痰、咽分泌物血液、脑脊液、穿刺液涂片，革兰染色，镜检根据形态、染色性、排列进行初步诊断分离、培养根据菌落特征进行进一步诊断增菌生化反应 最终鉴定 致病性鉴定、药敏试验由脑脊液标本中发现

2、中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊断为脑膜炎球菌由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G-双球菌，可初步诊断为淋球菌3、病原性球菌革兰染色观察菌种：链球菌步骤：制片（涂片、干燥、固定）涂片:液体培养基，沉淀生长，取管底1-2环 染色（初染、媒染、脱色、复染）观察（染色性、形态、排列）4.常见病原性球菌的菌落观察菌种：葡萄球菌、链球菌葡萄球菌菌落主要特性 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌色素 金黄色 白色 柠檬色溶血环-溶血无 无其它中等大小，圆形，光滑，湿润菌落.链球菌菌落主要特性 甲型溶血性链球菌 乙型溶血型链球菌 丙型链球菌色素 无 无 无溶血环-溶血（草绿色，半透明溶血环）-溶血（宽大，透明溶血环）无其它圆型，光滑，湿润，细小菌落.注意:不要打开平板金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌乙型溶血性链球菌丙型链球菌甲型溶血性链球菌5.凝固酶试验（玻片法）原理：血浆凝固酶主要由致病性的金黄色葡萄球菌产生的，能使含有肝素或枸橼酸钠等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的物质。它是鉴定葡萄球菌有无致病性的重要指标。游离凝固酶 结合凝固酶 方法：（1）讲台取一张玻片;（2）划分3个位置;（3）挑取3-5 环兔血浆到1、2位置，3-5 环生理盐水到3位置;（4）无菌操作，挑取1环细菌（菌种如右图所示)在相应位置，均匀涂开，观察细菌团块物出现否。凝固酶试验阳性 阴性 阴性THANKS