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1、猪活体颈部采血猪活体颈部采血技技 术术猪颈部采血技术简介猪颈部采血技术简介 猪疫病监测与免疫抗体监测是掌握猪病发生、流行、净化的重要工作,猪血的采样是进行疫病监测与免疫抗体监测的前提,血清质量的好坏直接关系着实验结果的准确性,因此,如何获得符合卫生要求、高质量的血清,是摆在我们基层兽医工作者面前的实际问题,现根据自己从事猪血采样工作经验,将猪血采样技术及要点总结如下。采血化验和送检是畜牧兽医工作采血化验和送检是畜牧兽医工作者的一项重要工作。目前,在对猪者的一项重要工作。目前,在对猪的采血过程中国内很多都是使用从的采血过程中国内很多都是使用从猪耳静脉抽血的方法采血。这种方猪耳静脉抽血的方法采血。
2、这种方法实际上存在很多缺点:法实际上存在很多缺点:1、采血前的准备器械准备:采样箱,一次性使用510ml注射器和注射针头,75%的酒精棉球,干棉球,10ml离心管,止血钳,猪保定器或保定绳,记号笔,登记表,乳胶手套、防护服、防护帽、一次性手套、一次性鞋套等物品。耳静脉采血技术 耳静脉采血(图一)。适用于40Kg以上的中大猪或种猪。采用站立保定,由1名助手用猪保定器套住猪的上颌骨、收紧,用力向前方牵引,另一助手在猪耳根处用力压住耳静脉近心端,采血员左手拉伸猪耳,右手用酒精棉球反复涂擦耳静脉使血管怒张后,右手持连接9号针头的注射器,沿血管走向刺入,针头与猪耳水平面呈1015度角进针,回血后,缓慢抽
3、取所需血液量后,用干棉球或棉签按压止血。猪耳静脉采血的缺点1猪耳静脉采血,应缓慢回抽注射器活塞,若回抽活塞过快过猛,会使血管壁紧贴针尖,而抽不出血液。3 费时:从耳静脉抽血,每采一头猪需要 10分钟以上,一个大型的猪场,如果送检 40头份猪血,采血起码要 8个小时。4 易失败:由于猪的耳静脉细(特别是小猪),采血过程中猪只又经常晃动,使本来已经扎准的针头经常抽不出血来。前腔静脉采血技术猪颈部采血操作技术猪颈部静脉采血,因有一定的技术难度,采血员必须具备准确而熟练的操作技术。猪前腔静脉采血技术要点:一是根据猪的大小选用不同型号的针头;二是做好保定,注意人畜安全。根据猪体大小,采用不同保定方式。猪
4、保定后应相对稳定,不能骚动、后缩及左右摇摆;三是进针部位准。由于左侧靠近膈神经,故多在右侧进行采血。1.选取合适的针筒和针头 通常都是用一次性5毫升注射用针筒。由于猪的大小不同,前腔静脉的深浅不一样,要求使用的针头也是不一样的。若针头太短,刺不到前腔静脉;针头太长,可能刺穿整条前腔静脉,也是采不到血的。根据我场长期操作的经验,种公母猪选用 16#100毫米针头;30千克以上的中猪,应选择 12#72毫米针头;1030千克小猪,应选择 9#50毫米针头;10千克以下乳猪,应选择9#30毫米针头。2.2 20-30Kg的小猪。一般用仰卧保定法,由一名助手抓握两后肢,尽量向后牵引,另一助手用手将下颌
5、骨下压,使头部贴地,并使两前肢与体中线基本垂直。此时,两侧第一对肋骨与胸骨结合处的前侧方呈两个明显的凹窝。采血员用酒精棉球消毒皮肤后,手持连接79号针头的一次性注射器(1040Kg小猪,选择 925毫米针头;10Kg以下乳猪,选择720毫米针头),向右侧凹窝处,由上而下,稍偏向中央及胸腔方向刺入,见有回血,即可采血,采血完毕,左手拿酒精棉球紧压针孔处,右手迅速拔出采血针管,稍压片刻止血后,解除保定。40Kg以上的中大猪,采用站立式保定,由一名助手用猪保定器套住猪的上颌骨、收紧,用力向前上方牵引,使猪的上颌骨稍稍吊起,两前肢刚刚着地,让猪的胸前凹窝充分暴露,采血员用酒精棉球消毒皮肤后,手持连接1
6、238毫米针头的一次性注射器,朝右侧胸前凹窝最低处,由下而上,且垂直凹窝方向进针,见回血后,标志已刺入血管,轻轻抽动注射器活塞,采取血液。采血完毕,拔出针头,术部用酒精棉球压迫片刻止血后,解除保定。20千克以下的小猪,可由 12名饲养员抓起、倒立,后背紧靠在栏架上(如图 3)。3.找准下针部位 猪的前腔静脉越往头部越浅,但也越细;越靠胸部越粗,但也越深,所以,采血应选择适当的部位。若小猪采血的部位太靠头部,血管太细,很难扎中,即使扎中了也很难抽出血,所以,小猪的采血部位应稍靠后。中大猪和种母猪血管比较粗,靠胸部较深,针头够不到血管,所以,应略靠前。根据我个人的经验,20千克以下的小猪应采两前肢
7、与气管交汇处,种公母猪和 20千克以上的中大猪可选颈部最低凹处。4.下针和抽血 小猪:对准以上描述的部位,用针垂直刺入,拉紧针筒活塞,若针头扎中前腔静脉,可见血液自血管源源流出,一直抽取到所需的血量即可。如果抽不到血液,说明针头没有扎中血管,此时可上下移动针头,直到针筒中见血液流出为止。采血注意事项 1猪耳静脉采血,应缓慢回抽注射器活塞,若回抽活塞过快过猛,会使血管壁紧贴针尖,而抽不出血液。2猪耳静脉采血速度慢,容易被污染,采血量少,血清少,中小猪尽量不用此方法采血。3猪前腔静脉采血,难度较大,采血员必须具备准确而熟练的操作技术。猪前腔静脉采血技术要点:一是根据猪的大小选用不同型号的针头;二是
8、做好保定,注意人畜安全。根据猪体大小,采用不同保定方式。猪保定后应相对稳定,不能骚动、后缩及左右摇摆;三是进针部位准。由于左侧靠近膈神经,故多在右侧进行采血。2.2血清的制备:首先将采集的血液样品置室温半小时,待血液凝固后2000-3000转/分离心5-10分钟,上清夜即为血清;如离心后有轻微的溶血,用牙签将血凝块挑出,将混有红细胞碎片的血清再次离心,用干净吸管收集血清于干燥的指型管中,贴上标签备用。如血清溶血严重,应剔出样品3.血液样品的保存与运送采集的血液样品如不能及时进行检验,必须做适当的处理,防止其成分发生大的变化。通常分离到的血清与血浆样品保存于密闭试管中,存放于4冰箱内或冷冻。全血
9、样品应保存于4冰箱内,检验时,样品必须达到室温,达到室温之后颠倒数次,使血液充分混匀后,方可检验。如果样品能在24小时内送往实验室,可保存于4环境的保温箱内,如果24小时内不能抵达或有些样品送往外地实验室时,样品必须冷冻处理后,并在低温下运送。运送途中防止样品泄漏,密闭封装并加冰袋运送。同时要填写详细的样品记录。血液样品变异因素的控制 严格控制血液样品的 变异因素,是使检测结果尽可能符合客观情况的重要环节。因此,在采血过程中应注意下列问题:1.规定动物的采血时间:有些血液化学成分有明显的昼夜波动,对采血动物,应在禁食12小时后采血,这样可以将食物对血液各种成分的浓度的影响减少到最低程度。在刚进
10、完食动物身上采取的血液样品,往往出现血糖、甘油三酯增高,无机磷降低,麝香草酚浊度增加。进食富含脂肪的饲料,常导致血清混浊而干扰很多项目的生化检测。2.血液样品来源一致:动脉血和经脉学的化学成分略有差异,整个试验期间,采取的血液样品必须一致。3.防止分解:血液内某些化学成分,离体后由于氧化酶或细菌的作用,容易分解,致其含量有所改变。所以,为了防止血液内某些化学成分的分解,血液样品被采集后应立即按规定处理,及时检测或加入适当的保存剂按规定保存。4.防止气体逸散:血液暴露于空气中后,二氧化碳迅速逸出,并吸收氧气提高血氧饱和度,进而引起血浆成分的改变,因此,在采血过程中要根据检测项目的需要来采取适当的
11、采血方式5.防止污染:采血器及样品容器都必须用化学处理并用重蒸馏水冲洗,防止铜、铁等金属离子和污染物对影响检测结果。并且在做作蛋白结合碘测定时,禁用碘酊消毒采血部。6.防止溶血:溶血可以影响许多生化检测项目的结果。红细胞破裂后释放出的物质与血浆中许多成分的浓度不一样,如钠、氯化物、钙等在血浆中的浓度要高于红细胞内的浓度,应予以防止。7引起溶血原因是强力震荡、离心速度过快、温度过低或者过高、加入与血液环境不等渗液体、放置时间过长等等引起红细胞破裂的因素。保存及运输需要注意的事项1.怀疑曾有疫情发生的畜群,错过组织样品采集时机时,可无菌操作采集动物血液,每头不少于5mL。无菌分离血清装入灭菌小瓶中,加盖密封后冷藏保存,通过检测抗体,做出追溯性诊断。2.采集样品时要填写样品采集登记表。3.装样容器必须密封,即防水又不透气。样品容器需加贴防水标签,并写明样品编号、采集地点、动物种类、时间等。4.样品运输前将样品容器装入套筒中,套筒应填充防震材料,加盖密封,与采样记录一同装入专用运输容器中。专用运输容器应隔热坚固,内装适当冷冻剂和防震材料。外包装上要加贴生物安全警示标志谢 谢!
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