第5章-转录与转录后加工(下)-药学分子生物学课件.ppt
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1、第五章 转录与转录后加工 Part 2 第一节 转录的基本原理 第二节 与转录起始和终止有关的DNA结构 第三节 原核生物和真核生物转录及抑制剂 第四节 转录后加工及其机制 总RNA编码RNA,占总量的4%非编码RNA,占总量的94%hnRNA mRNApre rRNA rRNAPre tRNAtRNAsnRNAsnoRNAscRNAtmRNA细胞内的RNA组分:一、原核生物转录的起始原核生物mRNA不需要加工,通常在转录完成之前就开始翻译.1.全酶与模板的DNA接触,生成非专一的,不稳定的复合物在模板上移动;2.起始识别:全酶与35序列结合,产生封闭的酶-启动子二元复合物(closed bi
2、nary complex);3.全酶紧密地结合在-10序列处,模板DNA局部变性,形成开链式的启动子二元复合物(open binary complex);4.酶移动到+1,连续合成6-9个核苷酸,因子释放,形成酶-DNA-RNA三元复合物(ternary complex)。转录的起始过程:三、原核生物转录的终止不依赖因子的转录终止 依赖因子的转录终止RNA Pol转录RNA因子附着到RNA因子跟在RNAPol后沿RNA移动RNA Pol在终止位点停下,并被因子追上在转录泡中因子使DNA-RNA杂种双链解开转录终止,释放出RNA Pol,因子和 RNA识别位点上依赖因子的转录终止四.真核生物的转
3、录 机制不详 第一节 转录的基本原理 第二节 与转录起始和终止有关的DNA结构 第三节 原核生物和真核生物转录及抑制剂 第四节 转录后加工及其机制第五章 转录与转录后加工 Part 2 第四节 转录后加工及其机制 p169 转录后加工:RNA聚合酶合成的原初转录物经过一系列的包括5与3的切除,特殊结构的形成、碱基修饰和糖苷键的改变及剪接等过程,变为成熟的RNA分子的过程。原核生物mRNA一般经转录后通常立即进行翻译,少数多顺反子需要切成小的单位,但rRNA和tRNA需要加工。真核生物的转录和翻译不同步,并且需要间接过程的加工。hnRNA mRNA mRNA5帽子0首先转录初产物的5端三磷酸脱下
4、一个磷酸基团,与GTP通过形成5-5三磷酸二酯键连接(GpppN1),由S-腺苷甲硫氨酸(SAM)提供甲基,使碱基及核糖甲基化。2.mRNA帽子的生理功能 a.为核糖体对mRNA的识别提供了信号。b.增加mRNA的稳定性。c.促进某些RNA的合成。2.3末端的产生:切离酶识别切点上游13-20bp AAUAAA motif,切点后GU-rich motif,在特异性因子CPSF(切割与多聚腺苷酸化专性因子)和CstF(蛋白切割激发因子)的协助下完成切离作用,产生3末端。3.加Poly(A)尾巴 Poly(A)尾巴大约200nt。反应如下:多聚核糖核苷酸+nATP 多聚核糖核苷酸(A)n+nPP
5、i需RNA末端腺苷酸转移酶(RNA terminal riboadenylate transferase)催化。(三)mRNA的甲基化 真核生物mRNA分子中甲基化的碱基主要是N6甲基腺嘌呤,约1/1000的几率1.原核生物rRNA前体的切割二.rRNA前体的加工2.真核生物rRNA前体的加工三、tRNA前体的加工 原核生物中tRNA基因常常插在多基因转录单元中,必须切割才能释放。tRNA的切割(原核和真核都有)核酸内切酶在tRNA两端切断核酸外切酶RNAaseD识别CCA末端序列,一个个切除7个核苷酸RNAaseP在5端切断,RNAaseD除去3末端的2个核苷酸核苷修饰 甲基化、脱氨基、核苷
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