二轮高三生物实验专题ppt课件 .ppt
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1、二轮高三生物实验专题二轮高三生物实验专题PPT实验实验1.使用高倍显微镜观察几种细胞(使用高倍显微镜观察几种细胞(1-P7)镜筒镜筒压片压片夹夹载物台载物台遮光器与光圈遮光器与光圈反光镜反光镜镜座镜座镜柱镜柱镜臂镜臂细准焦螺旋细准焦螺旋粗准焦螺旋物镜物镜目目镜镜一、显一、显微镜的微镜的结构:结构:取口腔上皮细胞制片取口腔上皮细胞制片(0.9%的的NaCl涂片涂片烘干烘干)水解水解 冲洗涂片冲洗涂片 染色染色 观察观察(先低倍镜再高倍镜(先低倍镜再高倍镜/选择染色均匀、色泽浅的区域)选择染色均匀、色泽浅的区域)(8%8%的的HCl,能改变细胞膜的通透,能改变细胞膜的通透性,同时使性,同时使DNA
2、DNA与蛋白质分离)与蛋白质分离)人口腔上皮细胞人口腔上皮细胞DNADNA、RNARNA分布分布洋葱鳞片叶洋葱鳞片叶内表皮内表皮细胞细胞DNADNA、RNARNA分布分布(蒸馏水)(蒸馏水)染色染色10分钟分钟实验三、实验三、观察线粒体和叶绿体观察线粒体和叶绿体(1-p7)一、实验原理一、实验原理 1.高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中,叶绿体一般是基质中,叶绿体一般是 色的,扁平的色的,扁平的 形或形或 形,可以用高倍显微镜观察它的形形,可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。态和分布。2.健那绿健那绿染液是专一性的染线粒体的活染液是专一性的染线粒体的活细胞染
3、料。可以使活细胞的细胞染料。可以使活细胞的线粒体呈现线粒体呈现 色,而细胞质几乎为无色。色,而细胞质几乎为无色。绿绿蓝绿蓝绿球球椭球椭球二、方法步骤与注意事项二、方法步骤与注意事项 观察叶绿体装片:观察叶绿体装片:取材:取材:(叶片薄且叶绿体大,数目少)(叶片薄且叶绿体大,数目少)制片:制片:载玻片中央滴一滴清水,将叶片放入,加上盖玻片,载玻片中央滴一滴清水,将叶片放入,加上盖玻片,制成临时装片(制成临时装片(临时装片随时保持有水状态临时装片随时保持有水状态)观察:观察:先先 倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体(形倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体(形态和分布)(态和分布)(光强度的变化与叶绿
4、体的位置关系光强度的变化与叶绿体的位置关系)绘图:绘图:用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞藓类小叶藓类小叶或或黑藻叶黑藻叶或或波菜叶稍带叶肉的下表皮波菜叶稍带叶肉的下表皮 低低显微镜下的黑藻细胞显微镜下的黑藻细胞(20082008,广东)用高倍显微镜观察黑藻叶,广东)用高倍显微镜观察黑藻叶绿体时,可见叶绿体绿体时,可见叶绿体A A具有双层膜具有双层膜B B呈绿色带状呈绿色带状C C内部有许多基粒内部有许多基粒D D呈绿色椭球形呈绿色椭球形【线粒体的观察通常可选用易取材的【线粒体的观察通常可选用易取材的人的口腔上皮细胞】人的口腔上皮细胞】
5、若是水绵细胞呢?若是水绵细胞呢?细胞细胞 清水清水蔗糖溶液蔗糖溶液(液泡)(液泡)渗入渗入渗出渗出(低浓度)(低浓度)(高浓度)(高浓度)细胞液细胞液(较高浓度)(较高浓度)观察植物的质壁分离与复原观察植物的质壁分离与复原1 1实验四、观察植物细胞的质壁分离与复原实验四、观察植物细胞的质壁分离与复原(1-P61)(1-P61)细胞液浓度细胞液浓度 外界溶液浓度时外界溶液浓度时:细胞吸水,质壁分细胞吸水,质壁分离复原。离复原。原生质层原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性,因而收伸缩性大于细胞壁伸缩性,因而收缩幅度大,造成质壁分离。缩幅度大,造成质壁分离。1实验原理实验原理紫色洋葱磷片叶(液泡大且有颜色
6、易观察)紫色洋葱磷片叶(液泡大且有颜色易观察)2、实验材料及试剂、实验材料及试剂0.3g/ml0.3g/ml的蔗糖溶液的蔗糖溶液正常细胞正常细胞初始质壁分离初始质壁分离显著质壁分离显著质壁分离观察植物的质壁分离与复原观察植物的质壁分离与复原2 2 某同学在做某同学在做“观察植物细胞的质壁分离和复原观察植物细胞的质壁分离和复原”实验过程中,实验过程中,分别采用质量分数为分别采用质量分数为30%30%和和50%50%的蔗糖溶液,的蔗糖溶液,1mol/L KNO1mol/L KNO3 3溶液和溶液和lmol/Llmol/L的盐酸溶液制作了的盐酸溶液制作了4 4组临时装片,并用显微镜随时观察。组临时装
7、片,并用显微镜随时观察。发现前发现前3 3组在组在23min23min后发生部分质壁分离,后发生部分质壁分离,5min5min后质壁分离现象后质壁分离现象明显,而第明显,而第4 4组无质壁分离现象。组无质壁分离现象。观察到前观察到前3 3组出现明显的质壁分离现象后,再过组出现明显的质壁分离现象后,再过5min5min观察,观察,发现发现1 1、2 2组无变化,而第组无变化,而第3 3组自动发生了质壁分离复原现象。然组自动发生了质壁分离复原现象。然后对前后对前2 2组装片滴加清水,用显微镜观察,发现第组装片滴加清水,用显微镜观察,发现第1 1组组45min45min后后恢复原状,而第恢复原状,而
8、第2 2组无变化,不能发生复原。组无变化,不能发生复原。请分析各组实验装片发生变化的原因。请分析各组实验装片发生变化的原因。思考题思考题如果使用的是一定浓度的尿素或者如果使用的是一定浓度的尿素或者甘油溶液,其结果呢?为什么?甘油溶液,其结果呢?为什么?、实验原理、实验原理、方法步骤、方法步骤实验五:观察植物细胞的有丝分裂(实验五:观察植物细胞的有丝分裂(1-p115)1-p115)(1)(1)根尖根尖、茎尖的分生区、茎形成层、愈伤、茎尖的分生区、茎形成层、愈伤组织可观察到有丝分裂。组织可观察到有丝分裂。(2)(2)细胞核细胞核内的染色体容易被内的染色体容易被碱性染料碱性染料着色着色(1 1)根
9、尖培养(材料)根尖培养(材料)(2 2)装片制作装片制作:解离:解离漂洗漂洗染色染色制片制片(顺序不能交换)(顺序不能交换)(3 3)观察观察:低倍镜观察:低倍镜观察 高倍镜观察高倍镜观察 (4 4)绘图绘图:、注意事项注意事项培养根尖:培养根尖:应每天应每天换水换水(防止水中缺氧烂根防止水中缺氧烂根)取材取材:取生长旺盛、带有取生长旺盛、带有分生区的根尖分生区的根尖,长度,长度 为根尖的为根尖的2-3mm(2-3mm(时间:上午时间:上午1010时至下午时至下午2 2时最佳)时最佳)解离解离:目的:目的:使组织细胞分离开,杀死并固定细胞;使组织细胞分离开,杀死并固定细胞;解离液:解离液:15
10、%15%盐酸盐酸95%95%酒精溶液酒精溶液1111;时间:时间:室温室温3-53-5分钟,至根尖酥软(分钟,至根尖酥软(时间短则细时间短则细胞没有完全分离,长则可能使根尖烂掉)胞没有完全分离,长则可能使根尖烂掉)漂洗漂洗:用用清水清水漂洗漂洗10min10min,目的目的是洗去组织中的解是洗去组织中的解 离液,便于染色离液,便于染色(防止酸碱中和防止酸碱中和)。压片压片:目的目的是使细胞分散开。是使细胞分散开。方法方法(用镊子弄碎(用镊子弄碎根尖,盖上盖玻片,再放上一块根尖,盖上盖玻片,再放上一块载玻片载玻片,压片),压片)(压片过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则细(压片过重过猛可能将组织
11、压碎、压烂;过轻则细胞未充分分散开而重叠。)胞未充分分散开而重叠。)低倍镜观察:低倍镜观察:找到找到分生区分生区细胞(特点:细胞呈正细胞(特点:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂)方形,排列紧密,有的细胞正在分裂)高倍镜观察:高倍镜观察:找各时期细胞。可见找各时期细胞。可见处于间期的细胞处于间期的细胞最多最多,中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程,中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程,因细胞在解离时已被杀死。因细胞在解离时已被杀死。染色染色:染液染液(0.01g/mL0.01g/mL的龙胆紫或的龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋酸的醋酸洋红)洋红);时间时间为为3 35
12、 5分钟;分钟;目的目的是使染色体或染色质是使染色体或染色质被碱性染料染成深色,便于观察。被碱性染料染成深色,便于观察。回顾:回顾:(1)(1)解离的目的是什么?如果解离时间过短会造成什么解离的目的是什么?如果解离时间过短会造成什么后果?后果?(2)(2)如果漂洗不干净会有什么结果?如果漂洗不干净会有什么结果?(4)(4)在分生区能不能看到细胞正在分裂?有何特点在分生区能不能看到细胞正在分裂?有何特点?(5)(5)观察有丝分裂,视野中处于什么时期的细胞最多观察有丝分裂,视野中处于什么时期的细胞最多?为什么?为什么?不能不能 ,细胞排列整齐细胞排列整齐、呈正方形、呈正方形 如果解离时间过短,就不
13、能使细胞之间的连接分开,如果解离时间过短,就不能使细胞之间的连接分开,造成压片失败,细胞不能均匀地在装片上铺成一层。造成压片失败,细胞不能均匀地在装片上铺成一层。如果漂洗不干净,沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就如果漂洗不干净,沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就会和龙胆紫反应,造成根尖细胞染色体不能染上颜色会和龙胆紫反应,造成根尖细胞染色体不能染上颜色A A染色体未着上颜色,无法看清染色体未着上颜色,无法看清 B B细胞重叠,看不到染色体细胞重叠,看不到染色体C C染色体着上颜色,清晰可见染色体着上颜色,清晰可见 D D染色体着色很浅,模糊不清染色体着色很浅,模糊不清 甲观察到的实验结果是甲观察到的实验结
14、果是 乙观察到的实验结果是乙观察到的实验结果是 丙观察到的实验结果是丙观察到的实验结果是 BDA实验六实验六:观察细胞的减数分裂观察细胞的减数分裂(2-p21)(2-p21)一、实验材料一、实验材料蝗虫精巢蝗虫精巢精母细胞(染色体数目少,体精母细胞(染色体数目少,体积大,易观察)积大,易观察)减数分裂固定装片等减数分裂固定装片等三、实验原理三、实验原理减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的细胞分裂,它包括连续两次程中发生的一种特殊的细胞分裂,它包括连续两次的细胞分裂阶段:第一次分裂为染色体数目的减数的细胞分裂阶段:第一次分裂为染色体
15、数目的减数分裂,第二次为染色体数目的等数分裂。两次分裂分裂,第二次为染色体数目的等数分裂。两次分裂可根据可根据染色体变化特点染色体变化特点分为前期、中期、后期和末分为前期、中期、后期和末期。期。实验七:低温诱导染色体加倍(2-p88)进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞,进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞,在有丝分裂在有丝分裂_期,染色体的期,染色体的_分裂,子染色体在分裂,子染色体在_的作用下,的作用下,分别移向两极,最终被平均分配到两个子细分别移向两极,最终被平均分配到两个子细胞中去。胞中去。用低温处理植物分生组织细胞,能够抑用低温处理植物分生组织细胞,能够抑制制_形成,以至影响形成,以至影
16、响_被被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是植物细胞染色体数目发生变化。(秋水于是植物细胞染色体数目发生变化。(秋水仙素类似)仙素类似)一、实验原理一、实验原理后后着丝点着丝点纺锤体纺锤体纺锤体纺锤体染色体染色体二、实验过程二、实验过程 1 1、材料用具、材料用具 洋葱或大葱、蒜(均为二倍体,体细洋葱或大葱、蒜(均为二倍体,体细胞中染色体数为胞中染色体数为1616),培养皿、滤纸、纱布、),培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、冰箱、冰箱、卡诺氏液卡诺氏液、改良苯酚品红染液改良苯酚品红
17、染液、体积分、体积分数为数为15%15%的盐酸溶液,体积分数为的盐酸溶液,体积分数为95%95%的酒精溶的酒精溶液液。2 2、方法步骤、方法步骤低温诱导:低温诱导:固定形态:固定形态:制作装片:制作装片:观察:观察:培养洋葱根尖,待根长出约培养洋葱根尖,待根长出约1cm左左右将整个装置放入冰箱低温室内右将整个装置放入冰箱低温室内(4),诱导培养诱导培养36小时小时剪取诱导处理的根尖约剪取诱导处理的根尖约0.5-1cm,放放入入卡诺氏卡诺氏液浸泡液浸泡0.5-1小时,以固小时,以固定形态,然后用体积分数定形态,然后用体积分数95%酒精酒精冲洗冲洗2次次解离解离漂洗漂洗染色染色制片(同有丝分制片(
18、同有丝分裂)裂)3 3、注意事项、注意事项1)低温处理必须在培养出低温处理必须在培养出1cm左右不定根之后左右不定根之后。如若生根前就送进冰箱,低温抑制新陈代谢也就抑制如若生根前就送进冰箱,低温抑制新陈代谢也就抑制了根尖分生区的形成,不会发生根尖分生区的有丝分了根尖分生区的形成,不会发生根尖分生区的有丝分裂受低温影响的过程。裂受低温影响的过程。2)剪取根尖时间一般在)剪取根尖时间一般在中午中午10点点左右,此时分裂左右,此时分裂旺盛,受低温影响较大,实验效果明显。旺盛,受低温影响较大,实验效果明显。3)染色时间染色时间要严格控制,不足时染色体看不清,要严格控制,不足时染色体看不清,染色过度,染
19、色体一团糟,无法分辨。染色过度,染色体一团糟,无法分辨。第二类:验证性实验第二类:验证性实验(2(2个)个)检测检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质(1-(1-p18)p18)叶绿体色素的提取和分离叶绿体色素的提取和分离(1-p97)(1-p97)实验八:检测实验八:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(白质(1-p18)1、实验原理:、实验原理:蛋白蛋白质质+双双缩脲试剂缩脲试剂 紫色反紫色反应应脂脂 肪肪+苏苏丹丹IV 红红色色脂脂 肪肪+苏苏丹丹III 橘黄色橘黄色还还原糖原糖+斐林斐林试剂试剂 砖红砖红色沉淀色沉淀2 2、实验材料、实
20、验材料还原糖还原糖:应选含糖高,颜色为应选含糖高,颜色为白色白色的植物组织,的植物组织,如苹果、梨等如苹果、梨等脂肪:脂肪:选择富含脂肪的种子,如花生、蓖麻种子选择富含脂肪的种子,如花生、蓖麻种子(实验前一般需浸泡(实验前一般需浸泡3-43-4小时)小时)蛋白质(二肽、多肽):蛋白质(二肽、多肽):可选富含蛋白质的黄可选富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等豆或鸡蛋清等 葡萄糖、葡萄糖、果糖果糖、麦芽糖、乳糖麦芽糖、乳糖都是还原性都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。3 3、实验步骤、实验步骤1 1)可溶性还原糖的鉴定)可溶性还原糖的鉴定原理:原理:-CHO
21、+Cu(HO)2加热加热-COOH+Cu2O砖红色砖红色 制备组织样液:制备组织样液:检测样液:检测样液:加入加入2ml2ml组织样液组织样液 加入加入1ml1ml新配制新配制斐斐林试剂(淡蓝色)林试剂(淡蓝色)水浴煮沸水浴煮沸2min2min左右左右观察颜色变化:观察颜色变化:(淡蓝色(淡蓝色 棕色棕色 砖红色)砖红色)空白对照问题空白对照问题3 3)蛋白质鉴定)蛋白质鉴定 原理:原理:-CO-NH-CO-NH-(类似双缩脲(类似双缩脲H H2 2NOC-NH-CONHNOC-NH-CONH2 2结构)结构)与与CuCu2+2+作用形成紫色络合物作用形成紫色络合物双缩脲反应双缩脲反应 制备样
22、液:制备样液:检测与观察:检测与观察:取取2ml2ml样液样液 加入双缩脲试剂加入双缩脲试剂A A液液1ml1ml(0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液,溶液,创设碱性创设碱性环境环境)摇匀)摇匀 加入双缩脲试剂加入双缩脲试剂B B液液(0.010.01g/mlg/ml的的CuSOCuSO4 4溶液,溶液,提供提供CuCu2+2+)4 4滴滴,摇匀摇匀 观察(紫色)观察(紫色)(NH2-CO-NH-CO-NH2)(双缩脲)(双缩脲)NHHCONHCONHHNHHCONHH+NHHCONHH(NH3)斐林试剂与双缩脲试剂有何区别?斐林试剂与双缩脲试剂有何区别?2 2)脂肪检测与鉴
23、定)脂肪检测与鉴定染色:染色:滴苏丹滴苏丹染液染液2-32-3滴与花生子叶切片上滴与花生子叶切片上 染染色色2-3min2-3min后吸去染液后吸去染液 滴体积分数滴体积分数50%50%的酒的酒精洗去浮色精洗去浮色 洗去多余酒精,再滴蒸馏水洗去多余酒精,再滴蒸馏水1-21-2滴,盖盖玻片滴,盖盖玻片观察:观察:低倍镜低倍镜 高倍镜(橘黄色(红色)脂肪颗高倍镜(橘黄色(红色)脂肪颗粒)粒)制作切片:制作切片:生物组织中脂肪的鉴定生物组织中脂肪的鉴定在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择叙述中,错误的是实验中,对实验材料的选
24、择叙述中,错误的是()A甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根、马铃薯块甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根、马铃薯块茎等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用予茎等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用予进行可溶性还原糖的鉴定进行可溶性还原糖的鉴定B花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料鉴定的理想材料C大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料的理想植物组织材料D鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料物材料A下列关于实验一操作步骤的叙述中,正确的是下列关于实验一操
25、作步骤的叙述中,正确的是()A用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定液,可直接用于蛋白质的鉴定B脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴黄色的脂肪滴C鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试荆甲液鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试荆甲液摇匀后,再加入乙液摇匀后,再加入乙液D用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与液与B液要混液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现混现合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现混现用用(苏丹(苏丹使使细胞中细胞中出现着色的颗粒)出现着色的颗
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