实验十四糖发酵试验.ppt

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1、实验十四、糖十四、糖发酵酵试验目的要求目的要求v了解糖了解糖发酵的原理和在酵的原理和在肠道道细菌菌鉴定中定中的重要作用的重要作用v掌握通掌握通过糖糖发酵酵鉴别不同微生物的方法不同微生物的方法基本原理基本原理v糖糖发酵是常用的酵是常用的鉴别微生物的生化反微生物的生化反应，在，在肠道道细菌的菌的鉴定上尤定上尤为重要。重要。v绝大多数大多数细菌都能利用糖菌都能利用糖类作作为碳源和能源，碳源和能源，但不同的但不同的细菌分解糖菌分解糖类物物质的能力不同。的能力不同。v有些有些细菌能分解某种糖菌能分解某种糖类产生有机酸和气体，生有机酸和气体，有些有些细菌只菌只产酸而不酸而不产气。气。例如：例如：大大肠杆菌

2、能分解乳糖和葡萄糖杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并酸并产气；气；伤寒杆寒杆菌分解葡萄糖菌分解葡萄糖产酸不酸不产气，不能分解乳糖；普通气，不能分解乳糖；普通变形杆形杆菌分解葡萄糖菌分解葡萄糖产酸酸产气，不能分解乳糖。气，不能分解乳糖。v发酵培养基酵培养基含有蛋白含有蛋白胨、指示、指示剂（溴甲酚（溴甲酚紫）、倒置德紫）、倒置德汉氏小管和不同的糖氏小管和不同的糖类。v当当发酵酵产酸酸时，溴甲酚紫指示，溴甲酚紫指示剂可由紫色可由紫色（pH6.8）变为黄色（黄色（pH5.2）。）。v气体的气体的产生生可由倒置的德可由倒置的德汉氏小管中有无氏小管中有无气泡来气泡来证明。明。糖糖发酵酵试管管德德汉氏小管氏小管发

3、酵培养基：酵培养基：含蛋白含蛋白胨、溴、溴甲酚紫和糖甲酚紫和糖产酸使培酸使培养基养基变黄黄产酸使培酸使培养基养基变黄黄德德汉氏小管中有氏小管中有气体气体证明明产气气器材器材v菌种：菌种：大大肠杆菌、普杆菌、普通通变形杆菌斜面。形杆菌斜面。v培养基：培养基：葡萄糖葡萄糖发酵酵鉴定管和乳糖定管和乳糖发酵酵鉴定管各定管各3 3支。支。v仪器和其它用具：器和其它用具：酒酒精灯、接种精灯、接种针等。等。各种各种细菌生化微量菌生化微量鉴定管定管操作步操作步骤v在在3 3支葡萄糖支葡萄糖发酵酵鉴定管和乳糖定管和乳糖发酵酵鉴定管上定管上分分别标明大明大肠杆菌、普通杆菌、普通变形杆菌和形杆菌和对照。照。v在作好在作好标记的葡萄糖的葡萄糖发酵酵鉴定管中相定管中相应接入大接入大肠杆菌、普通杆菌、普通变形杆菌，留形杆菌，留1 1支作支作对照管不接照管不接菌；乳糖菌；乳糖发酵酵鉴定管定管进行同行同样操作。操作。v将接菌的将接菌的鉴定管和定管和对照管一起置照管一起置3737 C C培养培养242448hr.48hr.v观察各管中的察各管中的颜色色变化及有无气泡。化及有无气泡。作作业v书P116P116结果表果表Micro-ID Enterotube微量多微量多项试验鉴定系定系统