实验三酶的基本性质.ppt

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1、实验三 酶的基本性质（P85）n酶的定的定义：是生物是生物细胞胞产生的、以蛋白生的、以蛋白质为主要成分的主要成分的生物催化生物催化剂。生物体内的化学反。生物体内的化学反应基本上都是在基本上都是在酶催化下催化下进行的。行的。n酶的特点：的特点：酶具有高效性、具有高效性、专一性、活性可一性、活性可调节控制等控制等特性特性。n温度、温度、pHpH值、激活、激活剂、抑制、抑制剂可影响可影响酶的活性。的活性。一、目的一、目的n通通过检验不同温度下唾液淀粉不同温度下唾液淀粉酶的活性，了解温的活性，了解温度度对酶活性的影响，明确最适温度的概念；活性的影响，明确最适温度的概念；n了解了解pHpH值对酶活力的影

2、响，学活力的影响，学习测定最适定最适pHpH值的的方法；方法；n了解激活了解激活剂、抑制、抑制剂对酶活性的影响，学活性的影响，学习检定定激活激活剂和抑制和抑制剂影响影响酶反反应的方法和原理。的方法和原理。二、原理二、原理n酶的催化作用受温度的影响很大的催化作用受温度的影响很大n提提高高温温度度可可以以增增加加酶促促反反应的的速速度度。通通常常温温度度每每升升高高1010摄氏氏度度，反反应速速度度加加快快一一倍倍左左右右，最最后后反反应速度达到最大速度达到最大值。n酶是是一一种种蛋蛋白白质，温温度度过高高可可引引起起蛋蛋白白质变性性，导致致酶的的失失活活。因因此此，反反应速速度度达达到到最最大大

3、值以以后后，随随着着温温度度升升高高，反反应速速度度反反而而逐逐渐下降，以至完全停止反下降，以至完全停止反应。n反反应速速度度达达到到最最大大值时的的温温度度称称为某某种种酶作作用用的的最最适适温温度度。高高于于或或低低于于最最适适温温度度时，反反应速速度度逐逐渐降低。降低。最适温度最适温度（一）温度（一）温度对酶活性的影响活性的影响二、原理二、原理n酶的活性受的活性受环境境pHpH的影响极的影响极为显著。著。n通常各种通常各种酶只有在一定的只有在一定的pHpH范范围内才表内才表现它的活性。它的活性。一种一种酶表表现其活性最高其活性最高时的的pHpH值，称，称为该酶的最适的最适pHpH。低于或

4、高于低于或高于最适最适pHpH时，酶的活性逐的活性逐渐降低。降低。n不同不同酶的最适的最适pHpH值不同，例如，胃蛋白不同，例如，胃蛋白酶的最适的最适pHpH为，胰蛋，胰蛋白白酶的最适的最适pHpH为8 8等。等。（二）（二）pHpH对酶活性的影响活性的影响n酶的活性常受某些物的活性常受某些物质的影响。的影响。n有些物有些物质能使能使酶的活性增加，称的活性增加，称为酶的激活的激活剂；n有些物有些物质能使能使酶的活性降低，称的活性降低，称为酶的抑制的抑制剂。例如，例如，氯化化钠为唾液淀粉唾液淀粉酶的激活的激活剂，硫酸硫酸铜为其抑其抑制制剂。n很少量的激活很少量的激活剂或抑制或抑制剂就会影响就会影

5、响酶的活性，而且常具有的活性，而且常具有特异性。特异性。n激活激活剂和抑制和抑制剂不是不是绝对的，有些物的，有些物质在低在低浓度度时为某种某种酶的激活的激活剂，而在高，而在高浓度度时则为该酶的抑制的抑制剂。例如，例如，氯化化钠达到达到1/31/3饱和度和度时就可抑制唾液淀粉就可抑制唾液淀粉酶的的活性。活性。二、原理二、原理（三）（三）酶的激活和抑制的激活和抑制二、原理二、原理 本本实验分分别在不同温度、不同在不同温度、不同pHpH值及不同物及不同物质作用的作用的条件下使淀粉条件下使淀粉酶作用于其底物作用于其底物淀粉，并用碘液淀粉，并用碘液检查酶促促淀粉水解程度来淀粉水解程度来说明各条件与明各条

6、件与酶活力之活力之间的关系。的关系。淀粉淀粉糊精糊精麦芽糖麦芽糖淀粉酶淀粉酶淀粉酶淀粉酶大大小小中中碘碘液液碘碘液液碘碘液液碘碘液液碘碘液液蓝色蓝色蓝紫色蓝紫色暗褐色暗褐色红色红色碘色碘色三、仪器和试剂三、仪器和试剂n仪器器移液管、吸耳球、试管、试管架、恒温水浴锅、胶头滴管、白瓷反应盘n试剂1%淀粉溶液（含0.3%NaCl），0.1%淀粉溶液，唾液淀粉酶液，pH7.0、8.0、5.0的磷酸缓冲液（PB），碘液，1%NaCl，1%CuSO4，蒸馏水（dH2O）四、实验方法四、实验方法n（一）温度（一）温度对酶活性的影响活性的影响操作项目操作项目管号管号1 12 23 3唾液淀粉酶液（唾液淀粉酶液

7、（mLmL）1 11 11 1酶液处理酶液处理5min5min003737100100pH7.0pH7.0缓冲液（缓冲液（mLmL）2 22 22 21%1%淀粉液（含淀粉液（含0.3%NaCl0.3%NaCl）（）（mLmL）1 11 11 1反应反应10min10min003737100100冷却冷却3min3min流动水冷却流动水冷却碘液（滴）碘液（滴）1 11 11 1四、实验方法四、实验方法n（二）（二）pHpH值对酶活性的影响活性的影响操作项目操作项目管号管号1 12 23 3pH5.0pH5.0缓冲液（缓冲液（mLmL）3 3/pH7.0pH7.0缓冲液（缓冲液（mLmL）/3

8、3/pH8.0pH8.0缓冲液（缓冲液（mLmL）/3 31%1%淀粉液（含淀粉液（含0.3%NaCl0.3%NaCl）（）（mLmL）1 11 11 1淀粉酶液（淀粉酶液（mLmL）1 11 11 1保温保温将各管混匀将各管混匀37 37 水浴中保温水浴中保温检查淀粉水解程度检查淀粉水解程度保温保温2min2min后，从后，从2 2号试管中取出号试管中取出1 1滴溶液置于白磁盘上，用碘液检滴溶液置于白磁盘上，用碘液检查淀粉的水解程度查淀粉的水解程度碘液（滴）碘液（滴）1 11 11 1四、实验方法四、实验方法n（三）（三）酶的激活和抑制的激活和抑制操作项目操作项目管号管号1 12 23 31

9、%NaCl1%NaCl（mLmL）1 1/1%CuSO1%CuSO4 4（mLmL）/1 1/蒸馏水（蒸馏水（mLmL）/1 1淀粉酶液（淀粉酶液（mLmL）1 11 11 10.1%0.1%淀粉液（淀粉液（mLmL）3 33 33 3保温保温将各管混匀将各管混匀37 37 水浴中保温水浴中保温检查淀粉水解程度检查淀粉水解程度保温保温1min1min后，从后，从1 1号试管中取出号试管中取出1 1滴溶液置于白磁盘上，用碘液检滴溶液置于白磁盘上，用碘液检查淀粉的水解程度查淀粉的水解程度碘液（滴）碘液（滴）2 22 22 2五、结果与分析五、结果与分析n（三）（三）酶的激活和抑制的激活和抑制各各试管中管中现象，解象，解释原因原因n（一）温度（一）温度对酶活性的影响活性的影响各各试管中管中现象，解象，解释原因原因n（二）（二）pHpH值对酶活性的影响活性的影响各各试管中管中现象，解象，解释原因原因六、讨论与心得六、讨论与心得