微生物实验07.微生物的接种及培养特征观察.ppt

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1、淀粉培养基淀粉培养基(g/L)(g/L)牛肉膏牛肉膏 5g蛋白胨蛋白胨 10gNaCl 5g淀粉淀粉 2g 琼脂琼脂 18g水水 1000ml121灭菌灭菌20min注：先用小烧杯称取注：先用小烧杯称取淀粉，加少量水调成淀粉，加少量水调成糊状，再加到沸水，糊状，再加到沸水，加热溶化，再加其它加热溶化，再加其它成分。成分。明胶培养明胶培养白白基基(g/L)(g/L)牛肉膏牛肉膏 3g 蛋白胨蛋白胨 10gNaCl 5g 明胶明胶 120-180g 水水 121灭菌灭菌20min注：先称取明胶，加适量水，加热溶注：先称取明胶，加适量水，加热溶化后再加其它成分化后再加其它成分乳糖蛋胨培养液乳糖蛋胨培

2、养液蛋白胨 10g 乳糖 5g NaCl 5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml蒸馏水 注：最后加溴甲酚紫。115灭菌20min实验七实验七 微生物的接种及培养特征观察微生物的接种及培养特征观察一、目的要求：一、目的要求：1、学习、掌握微生物的接种技术。、学习、掌握微生物的接种技术。2、了解不同微生物在固体斜面、液体和半固、了解不同微生物在固体斜面、液体和半固体培养基中的生长特征体培养基中的生长特征二、实验原理二、实验原理 微生物的培养特征是指微生物培养在培养微生物的培养特征是指微生物培养在培养基中所表现的基中所表现的群体形态群体形态和和生长情况生长情况。不同微生物在相同培养基上培养，群体形态不

3、同微生物在相同培养基上培养，群体形态和生长情况不同。和生长情况不同。在斜面固体培养基上：呈丝绒状、刺毛在斜面固体培养基上：呈丝绒状、刺毛状、串珠状、舒展状、树枝状、假根状等状、串珠状、舒展状、树枝状、假根状等 在液体培养基内：呈均匀混浊、絮状、粘在液体培养基内：呈均匀混浊、絮状、粘液状，液面形成菌膜，或上层清晰而底部呈液状，液面形成菌膜，或上层清晰而底部呈沉淀状等。沉淀状等。在半固体培养基内：可以沿接种线向四周在半固体培养基内：可以沿接种线向四周蔓延（有鞭毛）；仅沿线生长；或底部长的蔓延（有鞭毛）；仅沿线生长；或底部长的好、上层不长；或上层生长而底部不生长等好、上层不长；或上层生长而底部不生长

4、等 利用微生物的培养特征，可以作为利用微生物的培养特征，可以作为种类鉴定和识别纯培养是否被污染种类鉴定和识别纯培养是否被污染的参考。的参考。三、实验材料三、实验材料菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌培养基：牛肉膏蛋白胨的液体培养基、半固培养基：牛肉膏蛋白胨的液体培养基、半固体培养基和固体斜面培养基体培养基和固体斜面培养基器材：接种环、接种针、酒精灯等器材：接种环、接种针、酒精灯等四、操作步骤四、操作步骤（一）接种技术（一）接种技术1.斜面接种：从已长好微生物的菌种管移接到另斜面接种：从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。此法用于好氧微生物的接种。一斜面管的方法。此

5、法用于好氧微生物的接种。左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。用右手先将棉塞拧转松动，灼烧接种环，放平。用右手先将棉塞拧转松动，灼烧接种环，用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧，用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧，同时将管口在火焰上灼烧一圈，接种环灼烧灭菌同时将管口在火焰上灼烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划线部，沿斜面划线 曲线：用于培养菌种曲线：用于培养菌种 直线：用于观察培养特征直线：用于观察培养特征2.液体接种：液体接种：由斜面菌接种到液体培养基（如

6、试管或三由斜面菌接种到液体培养基（如试管或三角瓶等）中的方法。角瓶等）中的方法。操作与上法基本一致，只是在将接种环送操作与上法基本一致，只是在将接种环送入液体培养基中时入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉，使菌体分散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。如果菌种是在液体培养基培养时，一般用无如果菌种是在液体培养基培养时，一般用无菌移液管、移液枪或滴管接种菌移液管、移液枪或滴管接种,也可用接种环。也可用接种环。3.3.穿刺接种（半固体培养基）：穿刺接种（半固体培养基）：用接种针挑取菌种后，从

7、中间插入深层培养用接种针挑取菌种后，从中间插入深层培养基内，（不要刺到底部，基内，（不要刺到底部，3/43/4），再沿原路拔出，），再沿原路拔出，此法用于厌氧细菌接种、检查细菌的运动能力。此法用于厌氧细菌接种、检查细菌的运动能力。4.4.平板接斜面：平板接斜面：一般是将经平板分离培养得到的单菌落接种一般是将经平板分离培养得到的单菌落接种到斜面，以便作鉴定或扩大培养、保存之用。到斜面，以便作鉴定或扩大培养、保存之用。类似斜面接种。类似斜面接种。（二）在培养箱中培养（二）在培养箱中培养细菌细菌36培养培养真菌和放线菌在真菌和放线菌在28培养培养（三（三)结果观察（细菌结果观察（细菌2d后看结果，放

8、线菌后看结果，放线菌和真菌下周上课时观察）和真菌下周上课时观察）注意事项1、接种时严格无菌操作。、接种时严格无菌操作。2、每次接种完毕要灼烧接种环（针）、每次接种完毕要灼烧接种环（针）3、斜面接种时，不要划破培养基，菌种不要、斜面接种时，不要划破培养基，菌种不要沾到管壁上。沾到管壁上。4、液体培养基接种时培养基不要流出来或沾、液体培养基接种时培养基不要流出来或沾染管口染管口5、穿刺时，手要稳，使穿刺线整齐。、穿刺时，手要稳，使穿刺线整齐。作业作业详细描述所用微生物在：详细描述所用微生物在：固体斜面培养基、固体斜面培养基、液体培养基液体培养基半固体培养基上的生长特征，并分析原因。半固体培养基上的生长特征，并分析原因。