(57)--14.1.1法医鉴定临床分子生物学检验技术.ppt

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1、法医鉴定中的应用法医鉴定中的应用2.熟悉亲子鉴定和个体识别的鉴定技术和方法评价。3.了解法医物证学的发展历程和应用前景。法医物证学的概念和范围；亲子鉴定的基本原理；人类的遗传特征。1.掌握章节目标一、法医物证学相关的概念法医法医学学法医物法医物证学证学法医毒法医毒理学理学法医病法医病理学理学法医临法医临床学床学法医毒法医毒物分析物分析学学法医精法医精神病学神病学刑事科刑事科学技术学技术法医物证学是以法医物证为研究对象，以提供法医物证学是以法医物证为研究对象，以提供科学证据为目的，研究应用生命科学技术解决科学证据为目的，研究应用生命科学技术解决案件中与人体有关的生物检材鉴定的一门学科案件中与人体

2、有关的生物检材鉴定的一门学科法医物证学个体识别亲子鉴定法医物证学检验的目的（1）确定该生物学检材的种类、种属，主要确定其是人类性来源）确定该生物学检材的种类、种属，主要确定其是人类性来源或动物性来源；或动物性来源；（2）通过遗传学标记系统的分型对人源性或动物来源的生物学检）通过遗传学标记系统的分型对人源性或动物来源的生物学检材进行检验。材进行检验。一个人有一个人有23对（对（46条）染色体，同一对染色体同一位置上的一对基因称为条）染色体，同一对染色体同一位置上的一对基因称为等位基因，一般一个来自父亲，一个来自母亲。如果检测到某个等位基因，一般一个来自父亲，一个来自母亲。如果检测到某个DNA位点

3、的等位点的等位基因，一个与母亲相同，另一个就应与父亲相同，否则就存在疑问了。位基因，一个与母亲相同，另一个就应与父亲相同，否则就存在疑问了。利用利用DNA进行亲子鉴定，只要作十几至几十个进行亲子鉴定，只要作十几至几十个DNA位点作检测，如果全部位点作检测，如果全部一样，就可以确定亲子关系，如果有一样，就可以确定亲子关系，如果有3个以上的位点不同，则可排除亲子关系，个以上的位点不同，则可排除亲子关系，有一两个位点不同，则应考虑基因突变的可能，加做一些位点的检测进行辨别。有一两个位点不同，则应考虑基因突变的可能，加做一些位点的检测进行辨别。DNA亲子鉴定，否定亲子关系的准确率几近亲子鉴定，否定亲子

4、关系的准确率几近100%，肯定亲子关系的准确率可，肯定亲子关系的准确率可达到达到99.99%基本原理7二、法医物证学发展历程不科学近代亲子鉴定的发展蛋白质遗传标记（血型检查）由等位基因决定的红细胞表面抗原的差异，为最早用由等位基因决定的红细胞表面抗原的差异，为最早用于亲子鉴定的遗传标记，有于亲子鉴定的遗传标记，有ABOABO、MNMN、P P、RhRh等等2121个血个血型系统。型系统。通过对血型的检验比对来确亲子关系。检验通过对血型的检验比对来确亲子关系。检验的血型系统越多，其准确性就越高。的血型系统越多，其准确性就越高。如果血型检验的结果表示如果血型检验的结果表示无遗传关系无遗传关系，可作

5、出，可作出否定亲否定亲子关系的结论子关系的结论，但结果存在遗传关系，但结果存在遗传关系却不能完全确定却不能完全确定是亲子关系。是亲子关系。二十世纪七十年代，人们发现可以用二十世纪七十年代，人们发现可以用白血细胞的抗原白血细胞的抗原来进行亲子鉴定，准确性可达来进行亲子鉴定，准确性可达80%80%。再结合血型检验，。再结合血型检验，能达到较高的准确程度。能达到较高的准确程度。三、个体识别和亲子鉴定技术三、个体识别和亲子鉴定技术法医血清学检验法医分子生物学检验10蛋白标记：蛋白标记：蛋白标记：蛋白标记：红细胞红细胞红细胞红细胞ABO,Ph,MN,Kell,Duffy,PABO,Ph,MN,Kell,

6、Duffy,P等等等等2121个血型系统个血型系统个血型系统个血型系统 白细胞白细胞白细胞白细胞HLA-AHLA-A，-B-B，-C-C，-D-D，-DP-DP，-DQ-DQ，-DR-DRDNADNA标记：标记：RFLPRFLP，VNTRVNTR，STR STR，SNPSNP蛋白标记：蛋白标记：血清型血清型 HpHp，GcGc,Bf,Bf,TfTf,C2,C2,酶型酶型 PGMPGM，EsDEsD，ACPACP，GPTGPT遗传标记分类11亲子鉴定与遗传标记亲子鉴定与遗传标记亲子鉴定：亲子鉴定：应用生物学技术方法来检测应用生物学技术方法来检测遗传标记遗传标记，并依据，并依据遗传学理论遗传学理论

7、进行分析，从而对被检者之间是否存在生物学进行分析，从而对被检者之间是否存在生物学亲缘关系所作的科学判定，实质是一种特殊的个体识别亲缘关系所作的科学判定，实质是一种特殊的个体识别血液细胞表面的标记血液蛋白质的标记蛋白质标记 DNA标记u 限制性酶切片段多态性u DNA长度多态性（微卫星STR）u DNA序列多态性蛋白质遗传标记检测的特点蛋白质遗传标记检测的特点遗传性状简单，符遗传性状简单，符合孟德尔遗传规律合孟德尔遗传规律遗传多态性，不易遗传多态性，不易受年龄、性别、疾受年龄、性别、疾病影响病影响操作简单、重复性操作简单、重复性好，结果明确好，结果明确优势优势对检材需要量大，对检材需要量大，且对

8、时限要求较高，且对时限要求较高，蛋白质容易失活而蛋白质容易失活而得不到理想的结果，得不到理想的结果，不适用于陈旧、微不适用于陈旧、微量检材（量检材（HLAHLA分型分型要求采血后要求采血后16-2416-24小时内必须检验）小时内必须检验）多态性信息含量有多态性信息含量有限，鉴别能力有限，限，鉴别能力有限，只能用于父权排除，只能用于父权排除，准确率较低，不宜准确率较低，不宜用于父权肯定和同用于父权肯定和同一认定一认定存在生理或病理性存在生理或病理性变异（如：变异（如：A A、O O型型血的人受大肠杆菌血的人受大肠杆菌感染后感染后B B抗原的检抗原的检测可能呈阳性）测可能呈阳性）局限局限DNAD

9、NA分子遗传标记的检测分子遗传标记的检测vDNADNA指纹技术（指纹技术（RFLPRFLP）：v第一代遗传标记第一代遗传标记vPCRPCR分型技术分型技术（现代（现代DNADNA亲子鉴定方法）亲子鉴定方法）v第二代遗传标记：第二代遗传标记：PCR扩增长度多态性扩增长度多态性标记（标记（PCR-STR分型）分型）v第三代遗传标记：第三代遗传标记：PCRPCR扩增序列多态性扩增序列多态性标记（标记（PCR-SNPPCR-SNP分析）分析）13线粒体DNA SNP 核内染色体 STR 优点：快速、简便、灵敏、特异，优点：快速、简便、灵敏、特异，适用于微量陈旧的生物学检材适用于微量陈旧的生物学检材1、

10、DNA指纹技术（RFLP）1985 英国英国 Jefferys Nature人源小卫星人源小卫星 DNA 用作基因探针，同人体核用作基因探针，同人体核 DNA 的酶的酶切片段杂交，获得了由多个位点上的等位基因组成的切片段杂交，获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹，这种图纹极少有两个人完全长度不等的杂交带图纹，这种图纹极少有两个人完全相同，故称为相同，故称为 DNA指纹指纹 实验程序：实验程序：14基因组基因组DNADNA的提的提取取限制性限制性内切酶内切酶消化酶消化酶切切电泳分电泳分离离印迹转印迹转移移探针制探针制备和标备和标记记分子杂分子杂交和自交和自显影显影1、DNA指纹

11、技术（RFLP）优点：群体多态性高，稳定遗传，优点：群体多态性高，稳定遗传，孟德尔遗传孟德尔遗传缺点：操作繁琐、对检材的质、量缺点：操作繁琐、对检材的质、量要求较高、灵敏度低、没有种属特要求较高、灵敏度低、没有种属特异性异性实验结果（实验结果（DNADNA指纹图谱）：指纹图谱）：152、PCR扩增长度多态性标记l短串联重复序列（短串联重复序列（short tandem repeat，STR），也称微卫星），也称微卫星DNA（microsatellite DNA）l是一种是一种广泛分布广泛分布在人类基因组中具有长度多态性的在人类基因组中具有长度多态性的DNA序列。由序列。由2-6bp的的核心序列

12、头尾相连串联核心序列头尾相连串联重复构成，通常重复重复构成，通常重复4-60次不等次不等16TAGATAGATAGATAGATAGATAGA 1 2 3 4 5 17STR等位基因命名等位基因通过等位基因通过PCR产物长度来区分和命名产物长度来区分和命名18STR的特点多态性（Polymorphism）：主要由核心序列拷贝数目即重复次数的变化，产生长度多态性多态性信息含量大，准确率高达99.99999%，可用于个体识别和亲子鉴定目前国内外最广泛应用的遗传标记扩增片段较短（100-300bp），易于检测，适用的生物检材类型广泛灵敏度高，50pg，对于检材要求不高STR基因座同时也有较高的突变率，

13、父系来源的突变比例较高19DNA条带、重复次数与遗传的关系20 样本收集DNA提取多重PCRABI3130毛细管电泳结果分析签发报告亲子鉴定（STR检测）的流程21检材的收集n血液n精液n颊粘膜n病理切片n头发n牙齿n骨骼n组织n石蜡包埋组织血痕Only a very small amount of blood is needed to obtain a DNA profile22ORGANICFTA PaperCHELEXBlood stainPUNCHWASH Multiple Times with extraction bufferPERFORM PCRPCR ReagentsSDS,D

14、TT,EDTA and proteinase KINCUBATE(56 oC)Phenol,chloroform,isoamyl alcoholQUANTITATE DNAApply blood to paper and allow stain to dryBlood stainVORTEX(NO DNA QUANTITATION TYPICALLY PERFORMED WITH UNIFORM SAMPLES)WaterINCUBATE(ambient)5%ChelexINCUBATE(100 oC)REMOVE supernatantINCUBATE(56 oC)QUANTITATE DN

15、APERFORM PCRPERFORM PCRCentrifugeCentrifugeCentrifugeCentrifugeREMOVE supernatantTRANSFER aqueous(upper)phase to new tubeCONCENTRATE sample(Centricon/Microcon-100 or ethanol precipitation)CentrifugeTE bufferFigure 3.1,J.M.Butler(2005)Forensic DNA Typing,2nd Edition 2005 Elsevier Academic PressDNA的提取

16、23多重荧光PCR24D3S1358TH01D21S11D18S51Penta ED5S818D13S317D7S820D16S539CSF1POPenta DAMELVWAD8S1179TPOXFGAPowerPlex 16 kit(Promega Corporation)ILS600 CXR size standardCXR(Red)FL(Blue)JOE(Green)TMR(Yellow)PCR product size(bp)Figure 5.4,J.M.Butler(2005)Forensic DNA Typing,2nd Edition 2005 Elsevier Academic

17、 PressD3S1358TH01D21S11D18S51Penta ED5S818D13S317D7S820D16S539CSF1POPenta DAMELVWAD8S1179TPOXFGAPowerPlex 16 kit(Promega Corporation)ILS600 CXR size standardCXR(Red)FL(Blue)JOE(Green)TMR(Yellow)D3S1358TH01D21S11D18S51Penta ED5S818D13S317D7S820D16S539CSF1POAMELVWAD8S1179TPOXFGAPowerPlex 16 kit(Promeg

18、a Corporation)ILS600 CXR size standardCXR(Red)FL(Blue)JOE(Green)TMR(Yellow)D3S1358TH01D21S11D18S51Penta EAMELVWAD8S1179TPOXFGAPowerPlex 16 kit(Promega Corporation)ILS600 CXR size standardCXR(Red)FL(Blue)JOE(Green)TMR(Yellow)D3S1358TH01D21S11D18S51Penta EAMELVWAD8S1179TPOXFGAPowerPlex 16 kit(Promega

19、Corporation)ILS600 CXR size standardCXR(Red)FL(Blue)JOE(Green)TMR(Yellow)AmpFlSTR Identifiler kit(Applied Biosystems)6-FAM(Blue)VIC(Green)NED(Yellow)PET(Red)D8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358TH01D13S317D16S539D2S1338D19S433D18S51TPOXVWAAMELD5S818FGAGS500 LIZ size standardLIZ(Orange)AmpFlSTR Identifile

20、r kit(Applied Biosystems)6-FAM(Blue)VIC(Green)NED(Yellow)PET(Red)AMELD5S818FGAGS500 LIZ size standardLIZ(Orange)25LaserInletBuffer Capillary filled with polymer solution5-20 kV-+OutletBuffer Sample trayDetection window(cathode)(anode)Data AcquisitionSample tray moves automatically beneath the cathod

21、e end of the capillary to deliver each sample in successionFigure 12.3,J.M.Butler(2005)Forensic DNA Typing,2nd Edition 2005 Elsevier Academic Press扩增产物电泳和检测在基因分析仪上完成26技术核心（电泳与检测同时进行）技术核心（电泳与检测同时进行）毛细管电泳技术：毛细管电泳技术：PCR产物片段越长，迁移越慢，到达荧光产物片段越长，迁移越慢，到达荧光检测窗口所需要的时间越长检测窗口所需要的时间越长荧光检测技术：荧光检测技术：CCD（将收集到的荧光信号转

22、换为电信号传（将收集到的荧光信号转换为电信号传输入电脑）输入电脑）遗传分析仪的基本原理272829结果的判定结果的判定每个位点都符合遗传规律，则肯定每个位点都符合遗传规律，则肯定大于三个位点不符合，则排除大于三个位点不符合，则排除小于三个位点不符合，则考虑是遗传变异小于三个位点不符合，则考虑是遗传变异30肯定案例肯定案例肯定案例31位点父親小孩母親血型(ABO)AAAD16S53911,1112,1112,12D7S82011,1011,1112,11D13S31712,912,913,9CSF1PO12,912,1213,12TPOX11,811,1111,9TH019,89,99,9F13

23、A016,3.23.2,3.26,3.2FES/FPS11,1111,1111,11vWFA31/A 17,1617,1618,17HPRTB13,1314,1314,13F13B10,1010,1010,10FABP10,910,1011,10LPL12,1010,1012,10CYAR0411,77,711,7CD47,77,712,7GPP3A096,66,66,6D8S117911,1016,1016,12排除案例32排除案例排除案例33STR位点拟父小孩母親血型(ABO)BOBD16S53911,1013,913,13D7S82012,1110,911,10D13S31713,121

24、2,1011,10CSF1PO10,1011,1011,11TPOX10,98,811,8TH0110,99,99,9F13A013.2,3.26,44,3.2FES/FPS12,1111,1111,10vWFA31/A 19,1818,1616,16HPRTB14,1413,1213,13F13B9,910,1010,9CYAR0411,76.1,6.111,6.1CD47,712,1212,7STR分型检测的应用已婚夫妇，丈夫怀疑孩子非己已婚夫妇，丈夫怀疑孩子非己所生所生私生子私生子超生子女血缘鉴定超生子女血缘鉴定移民案件移民案件怀疑育婴室调错婴儿怀疑育婴室调错婴儿拐卖儿童，失散儿童拐卖儿

25、童，失散儿童u大型灾难中受难者身份识别大型灾难中受难者身份识别u无名尸体身份鉴定无名尸体身份鉴定u移植鉴定移植鉴定u病理切片来源鉴定病理切片来源鉴定u刑事案件中犯罪现场生物检材刑事案件中犯罪现场生物检材来源鉴定来源鉴定u34亲权鉴定个体识别Y Y染色体染色体STRSTR的应用的应用男性所特有的性染色体，它处于半合子的单倍体状态，呈男性所特有的性染色体，它处于半合子的单倍体状态，呈男性所特有的性染色体，它处于半合子的单倍体状态，呈男性所特有的性染色体，它处于半合子的单倍体状态，呈父系遗传父系遗传父系遗传父系遗传，同一父系的所有后代均具有相同的同一父系的所有后代均具有相同的同一父系的所有后代均具有

26、相同的同一父系的所有后代均具有相同的Y Y染色体特异性基因（除非是发染色体特异性基因（除非是发染色体特异性基因（除非是发染色体特异性基因（除非是发生了突变生了突变生了突变生了突变）作为常规亲子鉴定的有力补充，用于父子单亲鉴定，叔侄，兄弟，作为常规亲子鉴定的有力补充，用于父子单亲鉴定，叔侄，兄弟，祖孙亲缘关系的鉴定祖孙亲缘关系的鉴定性侵犯案件发生性侵犯案件发生48小时后仍可以检出，男女混合斑的检查小时后仍可以检出，男女混合斑的检查个体识别：刑侦过程中确定性别，提供线索，缩小侦查范围个体识别：刑侦过程中确定性别，提供线索，缩小侦查范围人类迁移的研究：父系进化史人类迁移的研究：父系进化史3536Mo

27、dern Use of Y-STR TestingCaptured December 13,2003Is this man really Sadaam Hussein?Uday and Qusay Hussein Killed July 22,2003Matching Y-STR Haplotype Used to Confirm Identity(along with allele sharing from autosomal STRs)Butler,J.M.(2005)Forensic DNA Typing,2nd Edition,Box 23.1,p.534 3、SNP技术DNA序列多态

28、性标记SNP是指基因组是指基因组DNA上特定的核上特定的核苷酸位置上存在两种不同碱基，苷酸位置上存在两种不同碱基，是由单个核苷酸变异而导致的是由单个核苷酸变异而导致的序列多态性。序列多态性。在人类基因组中在人类基因组中SNP多态位点多态位点频率较频率较STR要高得多要高得多37SNP的优点SNP多态信息分布的高密度弥补了信息量的不足；多态信息分布的高密度弥补了信息量的不足；能稳定遗传的早期突变，突变频率较低，较能稳定遗传的早期突变，突变频率较低，较STR等多态性遗传标记等多态性遗传标记具有更高的遗传稳定性；具有更高的遗传稳定性；基于自身的双等位标记，通过测序直接进行序列比对来发现差异，基于自身

29、的双等位标记，通过测序直接进行序列比对来发现差异，结果只有阳性和阴性两种，易于分型和确定基因频率。结果只有阳性和阴性两种，易于分型和确定基因频率。摆脱电泳分型的瓶颈，提高了自动化检测水平，也提高了检出率摆脱电泳分型的瓶颈，提高了自动化检测水平，也提高了检出率SNP序列较短，尤其适用于高度腐败、降解、陈旧的法医生物检材。序列较短，尤其适用于高度腐败、降解、陈旧的法医生物检材。母子鉴定同胞兄妹鉴定母系血缘鉴定4、线粒体DNA多态性在亲子鉴定中的应用39线粒体线粒体DNADNA特征特征l稳定的母系遗传：稳定的母系遗传：母系血缘亲属具有完全相同的母系血缘亲属具有完全相同的mtDNAmtDNAl拷贝数多

30、：拷贝数多：有利于微量检材；检测敏感度高有利于微量检材；检测敏感度高l片段短：片段短：抗降解，有利于降解检材，如角化组织（毛发等）抗降解，有利于降解检材，如角化组织（毛发等）l突变率高：突变率高：多态性高，个人识别能力强多态性高，个人识别能力强4041Control region(D-loop)1/16,569cyt bND5ND6ND4ND4LND3COIIIATP6ATP8COII12S rRNA16S rRNAND1ND2COIOH9-bp deletionOLFVL1IQMWANCYS1DKGRHS2L2EPTHV1HV216024163657334016024576“16,569”b

31、p122 tRNAs2 rRNAs13 genesHeavy(H)strandLight(L)strandFigure 10.1,J.M.Butler(2005)Forensic DNA Typing,2nd Edition 2005 Elsevier Academic PressCoding Region42线粒体DNA多态性分析DNA提取提取引物设计合成和引物设计合成和HVI和和HVII的的PCR扩增扩增PCR产物测序产物测序序列比对序列比对线粒体DNA序列分析结果解读l若两份检材的若两份检材的DNADNA序列相同，则表明这有可能来自同一个母系亲属序列相同，则表明这有可能来自同一个母系亲属

32、l检材和嫌疑人检测结果有检材和嫌疑人检测结果有1-21-2个个bpbp不一致，而且碱基的位置为异质不一致，而且碱基的位置为异质性热点，则倾向于不排除性热点，则倾向于不排除l3 3个碱基序列不同时，在排除污染、细胞核假基因扩增产物的情况个碱基序列不同时，在排除污染、细胞核假基因扩增产物的情况下，并按照国际法医遗传学会下，并按照国际法医遗传学会mtDNAmtDNA标准操作方法执行的，可以做标准操作方法执行的，可以做出排除结论。出排除结论。435、全基因组扩增技术全基因组扩增技术（全基因组扩增技术（Whole Genome Amplification，WGA）是对全）是对全部基因组序列进行非选择性扩

33、增的技术，其目的在于没有序列倾向部基因组序列进行非选择性扩增的技术，其目的在于没有序列倾向性的前提下大幅度增加性的前提下大幅度增加DNA总量。总量。两种类型：两种类型：基于以热循环基于以热循环PCR的扩增技术，如简并寡核苷酸引物的扩增技术，如简并寡核苷酸引物PCR（DOP-PCR）、连）、连接反应介导的接反应介导的PCR（LM-PCR）、扩增前引物延伸反应（）、扩增前引物延伸反应（PEP）等；）等；基于等温反应，不以基于等温反应，不以PCR为基础的扩增技术，如多重置换扩增（为基础的扩增技术，如多重置换扩增（MDA）、）、基于引物酶的全基因组扩增（基于引物酶的全基因组扩增（pWGA）和多次退火环

34、状循环扩增技术）和多次退火环状循环扩增技术（MALBAC）。）。（1）DOP-PCR扩增使用简并配对引物，使用简并配对引物，3端为端为6bp退化退化寡核苷酸，寡核苷酸，5端为正常的碱基。端为正常的碱基。3端和端和DNA链随机结合，最初几个循链随机结合，最初几个循环退火温度要低（环退火温度要低（30左右），然后左右），然后延伸直到延伸直到5端引物配对处。端引物配对处。特点是扩增均一性差和片段长度不特点是扩增均一性差和片段长度不定定（2）MDA扩增使使用用多多种种引引物物六六聚聚体体和和29DNA聚聚合合酶。酶。引物六聚体由引物六聚体由6个随机核苷酸组成个随机核苷酸组成29DNA聚聚合合酶酶是是一

35、一种种高高保保真真聚聚合合酶酶，具具有有3到到5外外切切酶酶校校读读能能力力，并并且且具具有特殊的多重置换和连续合成特性。有特殊的多重置换和连续合成特性。特特点点是是扩扩增增长长度度50-100bp，指指数数扩扩增，存在扩增偏倚性增，存在扩增偏倚性（3）MALBAC技术利利用用29聚聚合合酶酶的的前前链链移移开开功功能能，以以原始基因组为模版进行复制原始基因组为模版进行复制扩扩增增产产物物具具有有完完整整的的末末端端，因因此此可可以以发发生生环环化化，不不被被复复制制，保保证证了了线线性性扩扩增增以以降降低低扩扩增增偏偏倚倚性性，同同时时有有较高的扩增效率较高的扩增效率主要的WGA方法比较方法

36、方法类型类型产物长度产物长度优点优点缺点缺点应用应用PEP基于PCR2kb操作简单，对模板质量要求低使用随机引物易产生扩增偏差及片段丢失CGH、LOH分析、STR分型等DOP-PCR基于PCR2kb产物产量较高，操作较为简单实验条件需要较多优化，起始模板数量少时易产生扩增偏差FISH、探针制备、SNP分 型、SSCP分析等LM-PCR基于PCR2kb灵敏度高，使用通用引物扩增均衡，对模板质量要求低、产物产量高操作步骤相对繁琐，复杂模板时易丢失片段CGH、建立文库、SNP、STR分型、基因检测等MDA恒温扩增法100kb产物片段长、忠实度高，不需要特殊仪器，扩增均衡对模板质量要求高，可能产生非特异扩增NGS、RFLP、单细胞测序、SNP、STR分型等pWGA恒温扩增法40kb不需要使用任何引物以及对模板进行预变性处理使用的蛋白（酶）以及试剂较多，效果有待验证制备探针、DNA污染检测、CGH等MALBAC结合恒温扩增与PCR法2kb灵敏度高，扩增均衡度高，操作，产物产量高模板拷贝数极低时易扩增偏差，可能出现非特异性扩增单细胞测序、CGH、SNV、CNV分析等谢谢观看