04全程C反应蛋白(CRP)测定试剂盒(荧光免疫层析法)工艺规程.docx

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1、文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控编 制 人：日期：年月日审 核 人：日期：年月日批 准 人：日期：年月日生效日期：年月日颁发部门：质量部颁发份数：2份分发部门：生产部、质量部受控编号：全程 C 反响蛋白CRP测定试剂盒荧光免疫层析法 1.产品名称、剂型、注册分类、规格、定义、组成及用途中文名称：全程C 反响蛋白CRP测定试剂盒荧光免疫层析法 规格：25 人份/盒、40 人份/盒剂型：诊断试剂注册分类：二类 6840 体外诊断试剂定义、组成及预期用途：本产品承受高度特异性的抗原抗体反

2、响及免疫层析分析技术，通过夹心法检测原理 来体外定量测定人血清、血浆样本中C 反响蛋白CRP的含量。依据：全程C 反响蛋白CRP测定试剂盒荧光免疫层析法产品技术要求1文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控目录1. 生产工艺流程图2. 试剂卡制备生产工艺3. 质量掌握点4. 主要原辅料、包装材料消耗定额、能源消耗定额、物料平衡的计算方法5. 包装要求、标签、说明书(附样本)与产品贮存方法及有效期6. 设备一览表7. 技术安全及劳动保护2文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CR

3、P测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控1. CRP 生产工艺流程图.羊抗兔IgG 抗体化学试剂鼠抗C反响蛋白抗体BSA及其他化学试剂BSA及其他化学试剂兔IgG抗体微球偶联物鼠抗人CRP抗体微球偶联物BSA及其他化学试剂万包被液配制包被液配制样品垫处理液配制级C线T线配制.洁净区探针配制十探针稀释液样本稀释液配制.样品垫处理划线NC膜样品垫制作 # 分装十万级枯燥洁环境净NC膜枯燥 # 贴膜组装#区不合格不合格品掌握半成品检验合格切条十干万燥级环洁净境区压卡装袋#不合格半成品检验不合格品掌握万级合格洁标准曲线制作烧数据卡半成品检验净区不合格

4、合格贴签、组装：关键工序：质量掌握点#：湿度30%不合格品掌握成品检验不合格不合格品掌握合格入库.3文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控2. 试剂卡制备生产工艺2.1 工序一：样品垫制作2.2 工序二：膜制备2.3 工序三：样本稀释液制备2.4 工序四： 贴膜组装2.5 工序五： 切条2.6 工序六：压卡装袋2.7 工序七：烧数据卡2.8 工序八：全程C 反响蛋白CRP测定试剂盒荧光免疫层析法试剂盒组装2.1 工序一：样品垫制作2.1.1 探针稀释液2.1.1.1 标准配方名称探针稀释

5、液物料名称三羟甲基氨基甲烷配制1000ml使用量2.4228g75人份使用量调整PH=8.40.2蔗糖150g0.12ml牛血清白蛋白proclin3005g0.3ml纯化水定容至1000ml2.1.1.2 配制方法依据标准配方准确称取三羟甲基氨基甲烷2.4228g，放入干净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个干净的磁力搅 拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在8.40.2范围内，再依次参加蔗糖150g、 牛血清白蛋白5g、proclin300 0.3ml，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶 中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，全部

6、溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml。混合均匀430保存备用， 有效期7天。2.1.2 样品垫处理液2.1.2.1 标准配方4文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控名称物料名称配制1000ml使用量75人份使用量样品垫处理液十二水合磷酸氢二钠5.73g二水合磷酸二氢钠0.62g40ml调整PH=7.40.2纯化水定容至1000ml2.1.2.2 配制方法依据标准配方分别准确称取十二水合磷酸氢二钠5.73g、二水合磷酸二氢钠0.62g，放入干净烧杯中，加纯化水800ml，放入1

7、个干净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7.40.2 范围内，将充分溶解并调好pH的溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀430保存备用，有效期7天。2.1.3 样品垫制作2.1.3.1样品垫处理(1) 将玻璃纤维平铺到水平槽内，倒入足量样品垫处理液，应让玻璃纤维完全浸泡入样品垫处理液中；（2） 浸泡至少15分钟，保证玻璃纤维完全浸透，玻璃纤维外表无气泡；（3） 玻璃纤维浸透后，将玻璃纤维取出，45度恒温枯燥4-6小时；（4） 枯燥完成后430封存备用，有效期7

8、天。2.1.3.2样品垫制作（1） 处理后的样品垫裁切成29mm宽度；（2） 依据兔IgG抗体微球偶联物：鼠抗人CRP抗体微球偶联物：探针稀释液=1:3:20的比例配制探针溶液；（3） 按4ul/cm喷量，将配制好的探针溶液均匀喷点到已裁切的样品垫上。（4） 在45度恒温枯燥、湿度小于30%的环境下枯燥4-6小时。注：枯燥湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在30%以下。（5） 枯燥完成后430封存备用，有效期14个月。注：枯燥后应避开长时间放置于430环境。2.2 工序二：膜制备2.2.1 包被液2.2.1.1标准配方名称物料名称5配制1000ml使用量75人份使用量文件类型：技术标

9、准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控包被液磷酸氢二钾二水合磷酸二氢钠1.82g0.22g2.2.1.2配制方法氯化钠8.76g调整PH=7.20.2蔗糖30g纯化水定容至1000ml0.06ml依据标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g、氯化钠8.76g，放入干净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个干净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7.20.2范围内，再参加蔗糖30g，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为100

10、0ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀430保存备用，有效期7天。2.2.2 C线包被液使用包被液将羊抗兔IgG抗体稀释成终浓度为1mg/ml。充分混合后保存备用。注：现用现配2.2.3 T线包被液使用包被液将鼠抗人C反响蛋白抗体稀释成终浓度为1mg/ml。充分混合后保存备用。注：现用现配2.2.4 NC膜划线（1） 按左图所示，将PVC 底板摆好；除去PVC 底板中间 25mm 处的保护纸，沿上面保护纸的下边缘，将硝酸纤维素膜NC 膜贴在该区；注：1.粘贴上下边缘与相邻区上下边缘齐平；2. 粘贴时留意动作轻柔，避开用手直接按

11、压硝酸纤维素膜NC 膜外表。（2） 贴吸水滤纸：按27mm 的宽度将吸水滤纸切割成条，除去PVC 底板上端 25mm 处的保护纸，将切好的吸水滤纸贴在该区；注：吸水滤纸下边缘超出该区2mm 掩盖硝酸纤维素膜NC 膜；上边缘与底板边缘齐平。（3） 使用划线包被机依据 1l/cm 包被量将 C 线包被液及 T 线包被液包被至 NC 膜适当位置；6文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控（4） C、T 线区域间距应调整足够宽度以保证检测仪可以显著区分，习惯上C 线距 NC 膜上边缘距离为 10m

12、m， CT 线之间间距为 6mm，T 线与 NC 膜下边缘间距为 9mm。注：1、贴膜和包被过程应留意避开膜的污染。2、划线时的湿度条件是NC 膜制备的要点之一，湿度应掌握在4565%。3、制备前需将C 线包被液、T 线包被液与硝酸纤维素膜NC 膜平衡至一样温度。2.2.5 NC 膜枯燥将包被的NC膜放置在相对湿度30%(环境温度1826)条件下枯燥。NC膜枯燥时间至少6小时。枯燥完成后封存备用，有效期14个月。注：1、枯燥时，湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在30%。枯燥后应避开长时间放置于 4 30环境。2.3 工序三：样本稀释液制备2.3.1 标准配方名称物料名称磷酸氢二钾二

13、水合磷酸二氢钠氯化钠配制1000ml使用量1.82g0.22g8.76g75人份使用量样本稀释液S9调 PH 至 7.40.210g37.5ml乙二胺四乙酸二钠 聚乙烯吡咯烷酮40KProclin3000.2g3g 0.3ml牛血清白蛋白5g2.3.2 配制方法依据标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g、氯化钠8.76g，放入干净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个干净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7.40.2范围内，再依次参加S9 10g、乙二胺四乙酸二钠0.2g、聚乙烯吡咯烷酮40K3g、Proclin300 0.

14、3ml、牛血清白蛋白5g，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，全部溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀后4-30保存备用，有效期7天。7文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控2.3.3 分装将上面配制好的样本稀释液依据500ul/支的装量进展分装，4-30条件下保存，有效期12个月。2.3.4标签打印、贴签2.3.5质控工程和标准工程外观净含量pH标准样本稀释液为无色透亮液体，无悬浮物及沉淀物。样本稀

15、释液净含量应在标示值的 90%110%之间。在 7.40.2 范围内。2.4 工序四： 贴膜组装湿度30%（1） 贴样品垫：将样品垫贴在已包被好的NC 膜底板 28mm 处； 注：样品垫上边缘 1mm 掩盖NC 膜；下边缘与底板边缘齐平。（2） 贴好后，应如以下图所示；注：1、避开混淆是本工序的要点，确保指令、样品垫标示和包被好的NC 膜三者之间的完全全都。未经清场，不得贴膜组装不同批号、规格、品种的产品。2、清场在本岗位必需得到强调。3、湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在湿度30%。2.5 工序五： 切条（1） 接通切条机电源，设定切条程序，设定切割宽度为4mm；（2） 将大卡平

16、放入切条机平台轨道中，正面朝上，调整切条机上的螺丝，调整卡槽宽度与大卡宽度一样按操作面板上 “连动” 键，开头切条；4将全部大卡头尾相接，渐渐放于切条机上，收集切好的条子，除去有标记不合格的条子。注： 湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在30%。8文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控2.6 工序六：压卡装袋（1） 装条：将切好的条子放置在底卡的卡槽内，面板加样孔位置对应样本垫； 注：不得直接按压中间部位，如条子上消灭划痕，按不合格品处理。（2） 盖面板：将面板与底板对合，用力

17、按压，使面板与底板吻合。（3） 压卡：按平板压壳机操作规程压卡注：压卡时应使卡竖向排列在传送带上，并严禁将卡重叠放置。（4） 装袋：将 1 份试剂卡、1 袋枯燥剂装入铝箔袋中，按封口机操作规程封好铝箔袋。（5） 标签打印、贴签。4-30条件下保存，有效期 12 个月。（6） 质控工程和标准工程线性范围准确度标准试剂的线性范围为0.5150mg/L，在此线性范围内，线性相关系数r 应不小于 0.990。回收率在 85%115%之间。注：1、避开混淆是本工序的要点。确保指令、包装物标示和待包装产品三者之间的完全全都。未经清场，不得包 装不同批号、规格、品种的产品。2、清场在本岗位必需得到强调。3、

18、湿度的掌握是本岗位的工艺要点之一，湿度应掌握在30%。2.7 工序七：烧数据卡2.7.1 产品校准品赋值用 CRP 工作校准品检测我公司的CRP 试剂，使用 10 个浓度点工作校准品，每个浓度点重复检测3 次，分别求出测定结果的均值，以浓度点为自变量，以测定结果均值为因变量求出线性回归方程，做曲线。随机抽取的同一批号的不同浓度的CRP 产品校准品各重复测定 10 次，分别计算每个浓度的平均值，即为该批CRP 产品校准品的值。测量不确定度：U=Ucy*K，包含因子K=2，置信水平约 95%。2.7.2 产品校准品确认用 CRP 工作校准品和CRP 产品校准品同时定标我公司一样批号的CRP 试剂后

19、，分别测定 30 例血清样本，并计算两组测定数值间的相关系数r 及系统偏差，要求相关系数r 应不低于 0.975，且系统偏差应不超过 15%假设满足以上要求，则该批CRP 产品校准品的值确定；假设无法满足，则需重复赋值过程，以确定该批CRP 产品校准品的值。9文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控2.7.3 产品校准品做曲线用产品校准品检测待检半成品试剂盒，每个浓度点分别在四台荧光仪上【信号测试】模块平行检测三次并点 击【EXCEL】即保存成 EXCEL 格式，将所得每个浓度 12 个检

20、测卡的T/C 数值汇总到一个EXCEL 中并计算每个浓度点的 T/C 平均值；然后将每个浓度点的浓度值和T/C 平均值复制到四台荧光仪中的任一个荧光仪软件【测试试验】模块中，依据需要在【拟合算法】中选择拟合方式并点击【拟合】即生成曲线。2.7.4 数据卡的生成在【生成ID 文件】模块中点击左下方【生成ID 文件】；然后在【HEX 查看】中点击【写ID】，此曲线即烧制到数据卡ID 卡中。2.7.5 烧制工序用 SnartPRO 智能通用编辑器烧数据卡，具体见相关SOP。2.7.6 质控工程和标准工程线性范围准确度标准试剂的线性范围为0.5150mg/L，在此线性范围内，线性相关系数r 应不小于

21、0.990。回收率在 85%115%之间。2.8 工序八：全程C 反响蛋白CRP测定试剂盒荧光免疫层析法试剂盒组装2.8.1 本试剂盒内容物由以下组分构成：组分试剂卡样本稀释液数据卡说明书注：25人份/盒1 人份/袋 25 袋/盒500l/瓶 25 瓶/盒1 张1 份40人份/盒1 人份/袋 40 袋/盒500l/瓶 40 瓶/盒1 张1 份1、避开混淆是本工序的要点。确保指令、包装物标示和待包装产品三者之间的完全全都。未经清场，不得 包装不同批号、规格、品种的产品。2、清场在本岗位必需得到强调。2.8.2 质控工程和标准10文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒

22、文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控工程标准试剂卡外观平坦，材料附着结实；外观样本稀释液为无色透亮液体，无悬浮物及沉淀物。物理净含量样本稀释液净含量应在标示值的 90%110%之间。性状膜条宽度膜条宽度应不小于 3.9mm。液体移行速度 液体移行速度应不低于 25mm/min。空白限 线性范围准确度0.5mg/L。试剂的线性范围为0.5150mg/L，在此线性范围内，线性相关系数r 应不小于 0.990。回收率在 85%115%之间。测量周密度重复性批间差用质控品重复测试，所得结果的变异系数CV15%。用质控品重复测试 3 个批号的试剂盒，所得结果的变

23、异系数CV15%。试剂在 430密封避光保存，原包装存放的试剂有效期为12 个月；取效期稳定性末的样品检测外观、膜条宽度、液体移行速度、空白限、线性范围、重复性、准确度，应分别符合其要求。3. 质量掌握点工序质量掌握点称量加样1、样品垫制作混合喷探针称量2、膜制备加样混合生产过程重量 体积装量、时间、转速速度、喷量重量体积装量、时间、转速11质量掌握项频次中间产品性状外观每批均匀度均匀度性状外观每批均匀度文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控划线速度均匀度称量重量性状加样体积外观贴签品名

24、、位置端正、结实、无皱褶摆管数量与装配数目核对外观分装体积外观、体积准确度封盖严密度、外漏严密、无外漏物3、样本稀释液制每批备4、贴膜组装5、切条6、压卡装袋7、烧数据卡标签打印贴签贴膜切条压卡封口标签打印贴签标 准 曲 线制作装盒速度、位置品名、位置位置速度、位置速度、位置速度、位置速度、位置品名、位置准确、依据操作规程操作、需要复核速度、组分位正、字迹清楚，无错印、漏印端正、结实、无皱褶端正、结实每批宽度每批过紧、过松漏气位正、字迹清楚，无错印、每批漏印端正、结实、无皱褶准确写入数据、复核无误每批组分齐全、无缺漏位正、字迹清楚，无错印、8、试剂盒组装标签打印贴签4. 生产过程物料平衡的计算

25、方法、数据处理4.1 各工序分步收率速度、位置品名、位置每批漏印端正、结实、无皱褶本产品每个批次，每个关键工序生产完毕都必需物料平衡，进展物料平衡是避开或准时觉察过失与混淆的有效措施。4.1.1 NC 膜物料平衡NC 膜物料平衡=实际反响膜制备量/理论反响膜制备量100% 物料平衡限定范围 95-100%。注：理论反响膜制备量=液体配制量/30ul板12文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控4.1.2 样品垫物料平衡样品垫物料平衡率=实际样品垫量/理论样品垫量100% 物料平衡限定范围

26、95-100%。注：理论样品垫量=液体配制量/120ul板4.1.3 样本稀释液物料平衡稀释液物料平衡=实际分装瓶量/理论分装瓶量100% 物料平衡限定范围 95-100%。注：理论分装瓶量= 样本稀释液总量/500ul4.1.4 数据卡物料平衡数据卡物料平衡=实际烧数据卡量/理论烧数据卡量100% 物料平衡限定范围 95-100%4.1.5 包材物料平衡包材物料平衡=实际包材用量/理论包材用量100% 物料平衡限定范围 95-100%4.1.6 成品物料平衡成品物料平衡=实际产量/理论产量100%物料平衡限定范围 95-105%。4.2 数据处理4.2.1 凡收率在合格范围内的，方可“流转”

27、投入下一工序。4.2.2 凡收率高于或低于合格范围内，应马上贴“待验”标志，不能递交下工序，并由觉察人填写偏差处理单， 经质量治理部门按“生产过程偏差处理治理规程”进展调查，实行处理措施，直至调查确认不影响产品最终质量的状况下，方可放行。5. 包装要求、标签、说明书(附样本)与产品贮存方法及有效期5.1 包装规格：25 人份/盒、40 人份/盒。5.1.1 铝箔袋规格：1 人份/袋。5.1.2 试剂盒装量25T:检测卡 25 袋，说明书 1 张、样本稀释液 25 人份、数据卡 1 张。40T:检测卡 40 袋，说明书 1 张、样本稀释液 40 人份、数据卡 1 张。5.2 包装材料、试剂盒及说

28、明书要求(附样本)13文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控5.3 产品贮存方法及有效期产品的储存条件：4-30，枯燥，有效期：12 个月。6.设备一览表1纯水机位制水间CSR-2-500纯化水2切条机切条间CM1010切条3封口机半成品包装间900半成品生产4三维平面点膜喷金仪膜包被间HM3030包被 NC 膜5裁切机贴膜间CT300生产关心6多参数测试仪配液间S220调整 pH7电子分析天平称量间MS204S-01称量89平板压壳机除湿机组半成品组装间空调机房AR100FLC-300

29、0-6000生产除湿序号设备名称生产区域/岗规格型号用途备注10磁力搅拌器配液间PMS-S配液关心11恒温枯燥箱？样品垫处理12恒温枯燥箱？样品垫制作SnartPRO 智能通用编13成品组装间5000U-Plus烧卡辑器广州蓝勃生物科技 手动干式荧AFS-1000 型14？试验光免疫广州蓝勃生物科技 半自动干15？AFS2023A 型试验式荧光免疫14文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控普菲特益斯生物科技北京16手动干式荧光免疫分析仪？试验17普菲特益斯生物科技北京 半自动干式荧光免疫

30、？YSF2023 型试验YSF1000 型7. 技术安全及劳动保护7.1 技术安全7.1.1 设备动力局部，如电机皮带轮应有保护罩。7.1.2 各工序在操作前应检查电源、机器部件，加油润滑，试运转，正常前方能使用。如觉察特别状况，应停顿 操作。7.1.3 操作设备必需严格遵守该设备的操作规程。7.1.4 机械电器设备均应依据不同性能定期检查和测试。7.2 劳动保护7.2.1 各工序操作人员均应按规定穿戴好干净工作服、鞋、帽及劳动保护用品。7.2.2 原料称量、包装过程中应轻，避开起尘。15文件类型：技术标准文件名称: 全程 C 反响蛋白 CRP测定试剂盒 文件编号：荧光免疫层析法工艺规程版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受 控16