烹饪化学第六章烹饪食品中的-酶课件.ppt
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1、5/31/20231第六章烹饪食品中的酶第六章烹饪食品中的酶吉林农业科技学院陈福玉吉林农业科技学院陈福玉5/31/20232一、引言一、引言二、酶的化学本质和分类二、酶的化学本质和分类三、酶催化反应动力学三、酶催化反应动力学四、四、食品原料中的内源酶的作用对食品质量的影响食品原料中的内源酶的作用对食品质量的影响&教学重点和难点:教学重点和难点:酶的化学本质和分类酶的化学本质和分类催化反应动力学催化反应动力学食品和烹饪中重要的酶及其应用食品和烹饪中重要的酶及其应用本章内容本章内容5/31/20233一、概念一、概念 酶是由生物活细胞所产生,具有高效的催化活性和酶是由生物活细胞所产生,具有高效的催
2、化活性和高度特异性(专一性)的蛋白质。高度特异性(专一性)的蛋白质。二、重要性二、重要性F控制着所有重要的生物大分子的合成、分解控制着所有重要的生物大分子的合成、分解 F食品加工的主要原料是生物材料食品加工的主要原料是生物材料,生物材料中含有大生物材料中含有大量的酶量的酶F酶的作用酶的作用 有益的:皱胃酶、蛋白酶有益的:皱胃酶、蛋白酶 有害的:果胶酶、脂酶有害的:果胶酶、脂酶 F有效地使用和控制内源酶和外源酶有效地使用和控制内源酶和外源酶 引引 言言5/31/20234 酶的化学本质与分类一、酶的化学本质:一、酶的化学本质:F八十年代以前八十年代以前:酶是一类由活性细胞产生的具有催化作用酶是一
3、类由活性细胞产生的具有催化作用和高度专一性的特殊和高度专一性的特殊蛋白质蛋白质。F八十年代以后八十年代以后:酶是一类由活性细胞产生的生物催化剂。酶是一类由活性细胞产生的生物催化剂。如:核糖核酸分子如:核糖核酸分子食品工业使用的酶都是蛋白质。食品工业使用的酶都是蛋白质。5/31/20235说明酶的化学本质是蛋白质的证据:说明酶的化学本质是蛋白质的证据:1 1、酶的元素组成与蛋白质相同:酶的元素组成与蛋白质相同:C,H,O,N C,H,O,N。2 2、酶的化学结构、空间构象与蛋白质相同:、酶的化学结构、空间构象与蛋白质相同:3 3、酶的两性离子的性质与蛋白质相同:、酶的两性离子的性质与蛋白质相同:
4、4 4、酶的胶体性质与蛋白质相同:、酶的胶体性质与蛋白质相同:5 5、酶的其它性质也与蛋白质相同:、酶的其它性质也与蛋白质相同:酸碱性、酸碱性、降解反应、颜色反应、变性反应等。降解反应、颜色反应、变性反应等。5/31/20236酶的活性中心酶的活性中心 酶为什么会与底物形成中间产物?酶为什么具酶为什么会与底物形成中间产物?酶为什么具有高效率、专一性、可调节等特性?都与酶本身有高效率、专一性、可调节等特性?都与酶本身的特殊结构直接相关。的特殊结构直接相关。由少数必需基团组成的能与底物分子结合并完成由少数必需基团组成的能与底物分子结合并完成特定催化反应的空间小区域,称为特定催化反应的空间小区域,称
5、为酶的活性中心酶的活性中心。必需基团有:结合基团、催化基团。必需基团有:结合基团、催化基团。酶活性中心出现频率最高的氨基酸:酶活性中心出现频率最高的氨基酸:&丝氨酸(丝氨酸(-OH-OH),组氨酸(咪唑基),),组氨酸(咪唑基),&半胱氨(半胱氨(-SH-SH),天冬氨酸(),天冬氨酸(-COOH-COOH),),&谷氨酸(谷氨酸(-COOH-COOH)和赖氨酸()和赖氨酸(-NH-NH3 3)。)。结合基团结合基团结合基团结合基团决定酶决定酶决定酶决定酶的专一性。的专一性。的专一性。的专一性。催化基团催化基团催化基团催化基团决定酶决定酶决定酶决定酶所催化反应的性所催化反应的性所催化反应的性所
6、催化反应的性质质质质。5/31/20237二、酶的催化特性:二、酶的催化特性:F共性:共性:加快反应速度;加快反应速度;不改变平衡常数;不改变平衡常数;降低反应的活化能;降低反应的活化能;自身不参与反应。自身不参与反应。5/31/20238F特性:特性:1 1、高效性、高效性 为一般催化剂的为一般催化剂的10001000万倍万倍1010万亿倍。万亿倍。2 2、专一性、专一性(specificity)(specificity)酶对底物具有高度专一性。(酶对底物具有高度专一性。(绝对、相绝对、相对、立体)对、立体)3 3、不稳定性:、不稳定性:易受各种因素的影响,在活易受各种因素的影响,在活细胞内
7、受到精密严格的调节控制。细胞内受到精密严格的调节控制。4 4、条件温和:、条件温和:常温、常压、中性常温、常压、中性pHpH。绝对专一性:绝对专一性:绝对专一性:绝对专一性:有些酶只作用于一种底物,催有些酶只作用于一种底物,催有些酶只作用于一种底物,催有些酶只作用于一种底物,催化一个反应,而不作用于任何其它物质。化一个反应,而不作用于任何其它物质。化一个反应,而不作用于任何其它物质。化一个反应,而不作用于任何其它物质。相对专一性:相对专一性:相对专一性:相对专一性:这类酶对结构相近的一类底物这类酶对结构相近的一类底物这类酶对结构相近的一类底物这类酶对结构相近的一类底物都有作用。包括键的专一性和
8、基团的专一性。都有作用。包括键的专一性和基团的专一性。都有作用。包括键的专一性和基团的专一性。都有作用。包括键的专一性和基团的专一性。立体异构专一性:立体异构专一性:立体异构专一性:立体异构专一性:这类酶只对底物的某一种这类酶只对底物的某一种这类酶只对底物的某一种这类酶只对底物的某一种构型起作用,而不催化其他异构体。包括旋光异构型起作用,而不催化其他异构体。包括旋光异构型起作用,而不催化其他异构体。包括旋光异构型起作用,而不催化其他异构体。包括旋光异构专一性和几何异构专一性。构专一性和几何异构专一性。构专一性和几何异构专一性。构专一性和几何异构专一性。5/31/20239三、酶催化专一性的学说
9、三、酶催化专一性的学说&酶催化作用的中间产物学说酶催化作用的中间产物学说 酶如何降低活化能:酶先与底物结合酶如何降低活化能:酶先与底物结合形成不稳定的的形成不稳定的的中间产物,这种中间产中间产物,这种中间产物具有较高的活性,不仅容易生成,而且物具有较高的活性,不仅容易生成,而且容易变成产物,并释放出酶容易变成产物,并释放出酶。5/31/202310酶催化作用的中间络合物学说示意图酶催化作用的中间络合物学说示意图:酶(酶(E E)与底物()与底物(S S)结合生)结合生成不稳定的中间产物(成不稳定的中间产物(ESES),),再分解成产物(再分解成产物(P P)并释放)并释放出酶,使反应沿一个低活
10、化出酶,使反应沿一个低活化能的途径进行,降低反应所能的途径进行,降低反应所需活化能,所以能加快反应需活化能,所以能加快反应速度。速度。E+SP+EES能能量量水水平平反应过程反应过程 G E1 E25/31/202311四、四、酶的命名与分类酶的命名与分类酶的分类:酶的分类:19711971年国际生化协会酶命名委员会根据酶所催年国际生化协会酶命名委员会根据酶所催化的反应类型将酶分为六大类。化的反应类型将酶分为六大类。1 1、氧化还原酶类、氧化还原酶类 即催化生物氧化还原反应的酶,如脱氢即催化生物氧化还原反应的酶,如脱氢酶、氧化酶、过氧化物酶、羟化酶以及加氧酶、氧化酶、过氧化物酶、羟化酶以及加氧
11、酶类。酶类。2 2、转移酶类、转移酶类 催化不同物质分子间某种基团的交换或转催化不同物质分子间某种基团的交换或转移的酶,如转甲基酶、转氨基酶、已糖激酶、移的酶,如转甲基酶、转氨基酶、已糖激酶、磷酸化酶等。磷酸化酶等。5/31/2023123 3、水解酶类、水解酶类 利用水使共价键分裂的酶,如淀粉酶、蛋白酶、酯利用水使共价键分裂的酶,如淀粉酶、蛋白酶、酯酶等。酶等。4 4、裂解酶类、裂解酶类 由其底物移去一个基团而使共价键裂解的酶,如脱羧由其底物移去一个基团而使共价键裂解的酶,如脱羧酶、醛缩酶和脱水酶等。酶、醛缩酶和脱水酶等。5 5、异构酶类、异构酶类 促进异构体相互转化的酶,如消旋酶、顺反异构
12、酶促进异构体相互转化的酶,如消旋酶、顺反异构酶等如:等如:6-6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。6 6、合成酶类、合成酶类 促进两分子化合物互相结合,同时使促进两分子化合物互相结合,同时使ATPATP分子中的高分子中的高能磷酸键断裂的酶,如谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽合能磷酸键断裂的酶,如谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽合成酶等。成酶等。5/31/202313酶的命名:酶的命名:1 1、国际系统命名法国际系统命名法 在系统命名法中,一种酶只可能有一个名称和在系统命名法中,一种酶只可能有一个名称和一个编号。在科技文献中,一般使用酶的系统名称。一个编号。在科技文献中,一般使用酶的系统
13、名称。系统名称包括底物名称、构型、反应性质,最后加系统名称包括底物名称、构型、反应性质,最后加一个酶字。例如:一个酶字。例如:系统名称系统名称:丙氨酸:丙氨酸:-酮戊二酸氨基转移酶,酮戊二酸氨基转移酶,它所催化的反应它所催化的反应:谷氨酸谷氨酸+丙酮酸丙酮酸 -酮戊二酸酮戊二酸+丙氨酸丙氨酸 但因某些系统名称太长,为方便起见,有时仍但因某些系统名称太长,为方便起见,有时仍用酶的习惯名称。用酶的习惯名称。5/31/202314 2 2、习惯命名法、习惯命名法:A.A.根据作用底物来命名,根据作用底物来命名,如淀粉酶、蛋白酶等。如淀粉酶、蛋白酶等。B.B.根据所催化的反应的类型命名,根据所催化的反
14、应的类型命名,如脱氢酶、转移如脱氢酶、转移酶等。酶等。C.C.两个原则结合起来命名,两个原则结合起来命名,例如丙酮酸脱羧酶等例如丙酮酸脱羧酶等。D.D.根据酶的来源或其它特点来命名,根据酶的来源或其它特点来命名,如胃蛋白酶、如胃蛋白酶、胰蛋白酶等。胰蛋白酶等。这在一定程度上造成很多酶有多种名称的情况。这在一定程度上造成很多酶有多种名称的情况。5/31/202315五、酶的组成类型单体酶单体酶寡聚酶寡聚酶多酶复合体多酶复合体据酶蛋白据酶蛋白特征分类特征分类据酶分子据酶分子组成分类组成分类单纯蛋白质酶类单纯蛋白质酶类结合结合蛋白质酶类蛋白质酶类酶蛋白酶蛋白辅因子辅因子金属离子金属离子有机小分子有机
15、小分子5/31/202316 酶催化反应动力学酶催化反应动力学一、底物浓度的影响一、底物浓度的影响 1 1、在酶浓度,、在酶浓度,pHpH,温度等条件不变的温度等条件不变的情况下研究底物浓情况下研究底物浓度和反应速度的关度和反应速度的关系。如右图所示:系。如右图所示:?影响酶促反应速度的因素影响酶促反应速度的因素5/31/202317F2.2.米氏方程米氏方程 RNase-底物复合物底物复合物5/31/20231819131913年,德国化学家年,德国化学家MichaelisMichaelis和和MentenMenten根根据据中间产物学说中间产物学说对酶促反映的动力学进行研对酶促反映的动力学
16、进行研究,推导出了表示整个反应中底物浓度和反究,推导出了表示整个反应中底物浓度和反应速度关系的著名公式,称为应速度关系的著名公式,称为米氏方程。米氏方程。K Km m 米氏常数米氏常数V Vmax max 最大反应速度最大反应速度5/31/202319米氏常数的意义:由米氏方程可知,当反应速度等于最大反应速度一半由米氏方程可知,当反应速度等于最大反应速度一半由米氏方程可知,当反应速度等于最大反应速度一半由米氏方程可知,当反应速度等于最大反应速度一半时时时时,即即即即V V V V=1/2 =1/2 =1/2 =1/2 V V V Vmaxmaxmaxmax,K K K Km=Sm=Sm=Sm=
17、S 上式表示上式表示上式表示上式表示,米氏常数是米氏常数是米氏常数是米氏常数是反应速度为最大值的一半时的反应速度为最大值的一半时的反应速度为最大值的一半时的反应速度为最大值的一半时的底物浓度。底物浓度。底物浓度。底物浓度。因此因此因此因此,米氏常数的单位为米氏常数的单位为米氏常数的单位为米氏常数的单位为mol/Lmol/Lmol/Lmol/L。不同的酶具有不同不同的酶具有不同不同的酶具有不同不同的酶具有不同KmKmKmKm值,它是酶的一个重要的特征物值,它是酶的一个重要的特征物值,它是酶的一个重要的特征物值,它是酶的一个重要的特征物理常数。理常数。理常数。理常数。KmKmKmKm值只是在固定的
18、底物,一定的温度和值只是在固定的底物,一定的温度和值只是在固定的底物,一定的温度和值只是在固定的底物,一定的温度和pHpHpHpH条件下,一条件下,一条件下,一条件下,一定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的定的缓冲体系中测定的,不同条件下具有不同的KmKmKmKm值。值。值。值。KmKmKmKm值表示酶与底物之间的值表示酶与底物之间的值表示酶与底物之间的值表示酶与底物之间的亲和程度:亲和程度:亲和程度:亲和程度:KmKm愈小,愈小,E E对对S S的的亲合力愈大,亲合力愈大,KmKm愈大,愈大,E E对对
19、S S的亲合力愈小。的亲合力愈小。5/31/202320二、酶浓度的影响二、酶浓度的影响 在一定条件下酶反应的速度与酶的浓度在一定条件下酶反应的速度与酶的浓度成正比。因为酶催化反应时,首先要与底成正比。因为酶催化反应时,首先要与底物形成所谓中间产物,即酶底物复物形成所谓中间产物,即酶底物复ESES。当底物浓度大大超过酶浓度时,反应达当底物浓度大大超过酶浓度时,反应达到最大速度到最大速度VmVm,如果此时增加酶的浓度,如果此时增加酶的浓度,可增加反应速度,酶反应速度与酶浓度成可增加反应速度,酶反应速度与酶浓度成正比关系。正比关系。5/31/202321三、温度的影响三、温度的影响温度对酶反应的影
20、响是双重的:温度对酶反应的影响是双重的:(1 1)随着温度的增加,反应速)随着温度的增加,反应速度也增加,直至最大速度为止。度也增加,直至最大速度为止。(2 2)随温度升高而使酶逐步变)随温度升高而使酶逐步变性。性。故酶总有一个最适反应温度,故酶总有一个最适反应温度,在这个温度时,酶的活力最高。在这个温度时,酶的活力最高。在在10-8010-80常温范围内,酶活常温范围内,酶活力随着反应温度的变化趋势一般力随着反应温度的变化趋势一般可表示如右图。可表示如右图。最适温度最适温度动物细胞的酶最适温度为动物细胞的酶最适温度为3750 3750 植物细胞的酶最适温度为植物细胞的酶最适温度为5060 5
21、060 5/31/202322四、四、pHpH的影响的影响 在一定的在一定的pHpH下下,酶具有最酶具有最大的催化活性,通常称此大的催化活性,通常称此pHpH为为最适最适pHpH。但是需指出,所。但是需指出,所谓谓“最适最适pH”pH”实际上是一个实际上是一个操作参数。操作参数。在不同pH时活性发生变化的原因主要在于:(1)pH能影响酶分子结构的稳定性。(2)pH能影响酶分子的解离状态。大多数酶的最适大多数酶的最适PHPH为为4848植物、微生物酶的最适植物、微生物酶的最适PH4.56.5PH4.56.5动物酶最适动物酶最适PHPH为为6.586.58特殊:胃蛋白酶为特殊:胃蛋白酶为1.531
22、.53 精氨酸酶为精氨酸酶为10.610.65/31/2023231.1.抑制剂抑制剂对酶促反应的影响对酶促反应的影响n有些物质能与酶分子上某些必需基团结合(作用有些物质能与酶分子上某些必需基团结合(作用),),使酶的活性中心的化学性质发生改变,导致酶使酶的活性中心的化学性质发生改变,导致酶活力下降或丧失,这种现象称为活力下降或丧失,这种现象称为酶的抑制作用酶的抑制作用。n能够引起酶的抑制作用的化合物则称为能够引起酶的抑制作用的化合物则称为抑制剂。抑制剂。n酶的抑制剂一般具备两个方面的酶的抑制剂一般具备两个方面的特点:特点:na.a.在化学结构上与被抑制的底物分子或底物的过在化学结构上与被抑制
23、的底物分子或底物的过渡状态相似。渡状态相似。nb.b.能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物。成比较稳定的复合体或结合物。五、抑制剂和激活剂的影响五、抑制剂和激活剂的影响5/31/2023242.2.激活剂激活剂对酶促反应的影响对酶促反应的影响n凡是能提高酶活性的物质均称为凡是能提高酶活性的物质均称为激活剂激活剂。n其中大部分是一些无机离子和小分子有机其中大部分是一些无机离子和小分子有机化合物。化合物。n如:如:NaNa+、K K+、Ca2Ca2+、MgMg2+2+、CuCu2+2+、ZnZn2+2+、CoCo2+2+、CrC
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