生物工程设备教案.pdf
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1、第一章生物细胞培养基制备过程与设备所有的生物细胞都要不断地同外界进行物质和能量交换,都要进行新陈代谢,才能表现出生命活动,这时,就需要营养物质。营养物质包括碳源、氮源、微量元素、维生素等。利用生物细胞进行生物加工时,需要根据不同的细胞配制多种多样的培养基,有的细胞能利用淀粉,这时直接向培养基添加淀粉:有的仅能利用葡萄糖,这时就要用纤维素、半纤维素或各种工农业副产物来制备培养基。生物技术产业中大多数都利用纯种培养技术,这就要求对培养基中已有的杂菌进行去除或杀灭。第一节液体培养基的灭菌灭菌是指利用物理或化学方法杀灭或除去物料及设备中一切有生命物质的过程。常用的灭菌方法大致有以下几种:化学灭菌法,电
2、磁波、射线灭菌法,干热灭菌法,湿热火菌法,过滤除菌法,火焰灭菌法。发酵工业自从采用纯种培养以后,产物的产量和质量都有了很大的提高,同时对防止染菌的要求也更高了。目前的各种培养过程往往都要求在没有杂菌污染的条件下进行,由于培养过程中通常含有比较丰富营养物质,且培养基中常常带有各种微生物,因此很容易受到杂菌的污染,进而会产生各种不良的后果。(1)由于杂菌的污染,使生物反应中的基质或产物因杂菌的消耗而损失,造成生产能力的下降;(2)由于杂菌所产生的一些代谢产物,或在染菌后改变了培养液的某些理化性质,使产物的提取和分离变得困难,造成收率降低或使产品的质量下降;(3)杂菌会大量繁殖,会改变反应介质的P
3、H值,从而使生物反应发生异常变化;(4)杂菌可能会分解产物,从而使生产过程失败;(5)发生噬菌体污染,微生物细胞被裂解,而使生产失败等等。一、湿热灭菌原理和影响灭菌的因素(-)灭菌动力学微生物受热而破坏是指其生活能力丧失,微生物热死灭原因是细胞内的反应。(1)对数残留定律微生物受热死亡的原因,主要是因高温使微生物体内的一些重要蛋白质,如酶等,发生凝固、变性,从而导致微生物无法生存而死亡。微生物受热而丧失活力,但其物理性质不变。在一定温度下,微生物的受热死亡遵照分子反应速度理论。在灭菌过程中,活菌数逐渐减少,其减少量随活菌数的减少而递减,即微生物的死亡速率与任一瞬时残留的活菌数成正比,如 图 1
4、-1 所示,大肠杆菌的死亡曲线为线性关系,称之为对数残留定律,也即反映为一级化学反应动力学为:式中 N残存的活菌数:t-灭菌时间,s;K灭菌速度常数(J),也称反应速度常数或比死亡速度常数,此常数的大小与微生物的种类与加热温度有关;活菌数瞬时变化速率,即死亡速率。d t上式通过积分可得:丛=e k,N。1 ,N。2.3 0 3,/、=I n2-=-1 g (1-2)K N,K Nt式中 N o 开始灭菌(t=0)时原有活菌数;N,经时间t后残存活菌数。上式是计算灭菌的基本公式,灭菌速度常数K是判断微生物受热死亡难易程度的基本依据。各种微生物在同样的温度下K值是不同的,K值越小,则此微生物越耐热
5、。若要求灭菌后绝对无菌,即 N,=0,则从上面公式可以看出灭菌时间将等于无穷大,这是不可能的,故培养液灭菌后,以在培养液中还残留一定活菌数进行计算。工程上,通常以N,=1 0-3 个/罐,即杂菌污染降低到被处理的每1 0 0 0 罐中只残留1 个活菌的程度,此数已满足生产要求。(2)温度对死亡速率的影响微生物的受热死亡属于单分子反应,其灭菌速率常数K与温度之间的关系可用啊累尼乌斯公式表示:(1-4)I n K=I n A-R T式中 A频率常数,也称阿累尼乌斯常数;R气体常数,8.3 1 4 J/mol K;T绝对温度,K;E-培养基成分分解所需,J/mol(1-5)二、连续灭菌流程及设备培养
6、基灭菌应尽量采用高温短时间的连续灭菌。培养基经连续加热、维持和冷却后进入发酵罐。连续灭菌具有如下的优点:(1)提高产量。与分批灭菌相比培养液受热时间短,可缩短发酵周期,同时培养基成分破坏较少。(2)产品质量较易控制。(3)蒸汽负荷均衡,锅炉利用率高,操作方便。(4)适宜采用自动控制。(5)降低劳动强度。以下介绍几种国内外较为常用的连续灭菌流程,由于灭菌过程是加热和冷却的过程,所以这些设备所组成的流程并不是固定的。如采用喷射加热器加热而采用真空冷却有困难,也可采用其它冷却 方 式(如喷淋冷却器或板式换热器等)。(一)连消塔喷淋冷却流程图2-4 连 续 灭 菌 设 备 流 程 示意图1-配 料 罐
7、(拌 料 雄)2-蒸 汽入口 3-连 消 塔 4-维 持罐5-培 养 基出口 6-喷 淋 冷 却 7-冷却水(-)喷射加热真空冷却流程(三)板式换热器灭菌流程图2-6 薄 板 换 热 器 连 续 灭 菌 流 程培养基连续灭菌的优点是灭菌的温度较高,灭菌时间较短,培养基的营养成分受破坏的程度较低,从而保证了培养基的质量,同时由于连续灭菌过程不在发酵罐等设备中进行,提高了发酵罐等设备的利用率。当然与间歇灭菌过程相比,连续灭菌过程的不足之处是过程所需的设备较多,操作较为麻烦,染菌机会也相应较多。(四)设备构造和计算1.连消塔又称加热器,是培养基于蒸汽混合加热至灭菌温度的设备。要求在2030s或更短的
8、时间内将料液加热至130140。生产中一般用0.50.8Mpa的活蒸汽与预热后的料液直接接触而加热。连消塔计算:培养液在管间流动,线速度为卬,则:Gw=-(1-7)3 6 0 0 x(0 2 一/)式中 w培养液流速,m/s;G培养液流量,m3/h,姑冷凝量使培养液量增加,但对灭菌设备中有关因素的影响是很小的,可以略而不计:D外管直径,m;d内管直径,m o则塔高H-TW式中 H连消塔高,0 1;T-灭菌时间,S o内管蒸汽喷孔总面积和孔数计算:根据蒸汽消耗量(n?/h)等于从小孔喷出的蒸汽量(n?/h)得(1-8)则3 6 0 0 w式中 F蒸汽喷孔的总面积,n Aw蒸汽喷孔的速度,m/s,
9、通常采用2 5 4 0 m/sV 加热蒸汽消耗量,m3/h o加热蒸汽喷孔数为:0.7 8 5(1-9)(1-10)式中 n一 喷 孔数,个;4喷孔直径,m。2.维持罐维持罐容积由下式计算:式中 y 一维持罐容积,m3;v 料液体积流量,m3/h;r 维持时间,m i n,取经验数据为8 2 5 m i n,不同类型的发酵维持时间不同:。充满系数,取 0.8 5 0.9。3 .喷射加热器I-喷 嘴2-吸 入 口 3-吸 入 室4-混 合 喷 嘴5-混 合 段6-扩 大 管4 .冷却设备冷却设备是将已灭菌的培养基加以冷却的设备,通常采用的是喷淋冷却器,也可考虑用套管冷却器。喷淋冷却器是将水通过喷
10、淋装置均匀地淋在水平的排管上,以冷却管内的培养基。套管冷却器是一种内管走热培养基,内外管间的管隙中走冷却水的冷却器。三、分批灭菌过程与设备培养基的分批灭菌就是将配制好的培养基放在发酵罐或其他装置中,通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过程,通常也称为实罐灭菌。规模较小的发酵罐往往采用分批灭菌的方法。这种方法不需要其它设备,操作简单易行,故获得较普遍采用。其缺点是加热和冷却所需时间较长,增加了发酵前的准备时间,也就相应地延长了发酵周期,使发酵罐的利用率降低。所以大型发酵罐采用这种方法在经济上是不合理的。同时,分批灭菌无法采用高温短时间灭菌,因而不可避免地使培养基中营养成分遭到一定程度的破
11、坏。但是对于极易发泡或粘度很大难以连续灭菌的培养基,即使对于大型发酵罐也不得不仍然采用分批灭菌的方法。分批灭菌仍被许多工厂采用。第二节淀粉质原料的蒸煮与糖化生物质原料中所含的淀粉存在于原料的细胞之中,受到细胞壁的保护,不呈溶解状态。生物质原料进行蒸煮的目的是使植物组织和细胞膜彻底破裂,淀粉成为溶解状态进行液化;同时对进料进行灭菌;排除原料中的一些不良成分及气味。淀粉质原料通过蒸煮以后,把颗粒状态的淀粉变成了溶解状态的糊精,如果这时的糊精还不能被细胞直接利用,还必须采取添加糖化剂(数曲、液体曲、糖化酶)的办法,把酸液中的淀粉、糊精转化为可发酵性糖等物质,作为生物细胞的碳源发酵产生酒精。这个将可溶
12、性淀粉、糊精转化为糖的过程,生产中就叫做糖化。淀粉糖化的目的,是通过糖化酶将淀粉、糊精进行水解。糖化的作用也就是把溶解状态的淀粉、糊精转化为能够被生物细胞利用的可发酵性物质(当然也有不发酵性物质生成,这主要是由于转移葡萄糖首酶等的作用),降低醪液的粘度,有利于酵母的发酵和酵液的输送。一、连续蒸煮糖化连续糖化工艺流程如图1-12所示:1*1 2-1 2 坯 续 栅 化 1:把 工 程1-兀7 蝌挪2-戊中函3-混 介 冷 凝 糕 4-水 馈,寸 池 5 一 克 卒 然 发 辎6郴化纲7 版域8淞 间 峨 9 4;夕 料 氽 1 O 啖 淋 冷 却 形连续蒸煮糖化设备有罐式、管式和柱式三种形式。罐
13、式连续蒸煮糖化,蒸煮温度较低,可节省煤耗,操作容易控制,设备结构简单,制造方便,为大、中型工厂广泛采用。(-)蒸煮糖化设备1.罐式蒸煮设备1*1 2-1 3 痴 成 毓1-粉 浆 入 r i 2 加 热 熬 产(曾 3 制 化 a4 次 合 阀)妾 I15-EK 力 表 6-制 液 体 I I I I:8-涵“戈 i l!J济A I I 9-人 孑 L图2 T 4 最后 个 后 熟 瑞(气液分的器)1-糊化醪入口 2-糊化醪出口 3-耳 架 4-门控液位仪衣接口5-压 力 衣 6-1 次蒸汽进口 7-A-fL 8-安 全 线 9-液位指示器2 .柱式连续蒸煮设备I .流程柱式连续蒸煮设备是在管
14、式连续蒸煮设备的基础上改建的,比间歇蒸煮提高了出酒率。它的流程如图1-1 5 所示。112 1 5 村 弋 比 续 热 煮 济 奉,!I到1松密2-宓 3-力”於*4 一 绦 71,%*5-+:1;f-6-后 交 4 Z*图 2-1 6 力 口 热 罂柱式连续蒸煮的特点是高温快速蒸煮,预热后的粉浆经泵送入加热器,被高压蒸汽从相对方向喷射进行瞬间高温蒸煮,然后流入缓冲器,再均匀地流入后面几根柱子内,在一定温度下继续蒸煮。3 .管式连续蒸煮管式连续蒸煮的主要特点是高温快速,糊化均匀,糖分损失少,设备紧凑,易于实现机械化和自动化操作。但由于蒸煮温度高,加热蒸汽消耗量大,并形成较大数量的二次蒸汽,因而
15、只有在充分利用二次蒸汽的条件下,才能提高其经济效益。又由于蒸煮时间短,蒸煮质量不够稳定,生产上操作难度大不易控制,有时在管道上还会出现阻塞现象。设备流程如图1/7所示。图 2-1 7 管 式 连 续 熬 煮 设 浴 流 程图1-输 送 机 1-斗式提升机3-贮料斗2-锤式粉碎机3螺旋输送机&粉 浆 罐 7-泵 8-预热锅9-近料控制阀10过滤器II-泥 浆 泵 11-单 向 阀 13-三套管加热器12-蒸煮管道13-压力控制阀16-后 熟 器 17-蒸汽分 离 牯 18-真空冷凝器19-蒸汽冷凝器20-糖化锅工艺流程和工艺操作要求:原料粉碎T搅拌和加热预煮-加热器T管式连续蒸煮T后热器一蒸汽分
16、离器一送至糖化工序4.真空冷却器酒精生产中,蒸煮醪液的冷却,主要是以蛇形管水冷却和真空冷却为主。真空冷却指的是醪液在一定的真空度下(即醪液进入负压状态)醪液本身产生大量蒸气(二次蒸气),并被抽出,这样便消耗了醪液大量的热量,因而醪液很快冷到与真空度相应的温度,这种醪液冷却法就称为真空冷却。(1)真空冷却器的工作原理和结构。蒸汽空气混合气体图2-18真空冷却器1-真空冷却器2-脱式塔3-1喷射器真空冷却器是外压容器,器壁必须有一定的温度,要保持真空冷却器内的真空度,般需借助于水喷射器或蒸汽喷射器,连续地将真空冷却器中的二次蒸汽抽走。若采用水喷射器抽真空,对一些生产能力较低的工厂,真空冷却器可直接
17、与水喷射器连接,无需装置膜式塔。5.糖化罐(1)连续糖化罐无的图2-19连续珈化狒1一糊化限进管2-水和液体曲或曲乳或树化断进入3-无曲JK缩空气管4-人孔5-温度计测温LI6-杀的蒸汽进口管7-植化酸出口 8-搅拌器(2)真空糖化罐L汽液分肉器(最后1个后热器)b栩化曲液计状彼C乩空融化罐d-冷凝器级真空冷却器f-激冷凝器g-桶化酎泉1.2,8-阀3,4,6,7,9-控制脚及管 钎测温管二、间歇蒸煮糖化(一)间歇蒸煮1.蒸煮设备近年来,用淀粉质原料生产酒精的工厂,大多采用连续蒸煮工艺,但尚有一部分小型酒精厂和液体白酒厂,还采用间歇蒸煮方法。此法虽有不少缺点,但是所用的设备比较简单,操作容易掌
18、握,在一些小型工厂中容易推广,虽然连续生产方法不断取代间歇生产方法,向近代化的生产发展,但在目前来讲,间歇生产法在一部分酒精工厂中还起着一定的作用。通常采用锥形蒸煮锅(立式蒸煮锅),其外形和结构简单,如 图 1-2 1 所示。它是用钢板制成的圆柱圆锥体联合形式,上部是圆柱形,下部是圆锥形,用 焊 接(或柳接)制成,材料可采用A 3 号钢,锥底用法兰连接,以便于检修和更换。蒸煮锅承受的压力大多数是在3 9.2 x l()4 p a 左右,蒸煮锅上面的部件有加料口 1、排汽阀2,锅耳 3 是用来安装锅体的固定器件,加料口盖以自由向上盖为好,当锅内压力升高时,加料口的密封更为可靠,加料口盖的材料也用
19、A 3 钢,由于锥形锅壁常被沙石磨损,经常是放入衬套7,衬套厚3 m m,其接缝处用沿壁插入的盖板盖住。下部还有取样孔4,加热蒸汽管5,下面是醪液排出室和排醪管。刀n t图2-2 1傩形然点钠1-力11米41二1 2-4作ycRW 3-5W 11-d一耳乂,手 器5-加|热然六曾6 T用?竹7-衬食8-JK力 表2.间歇蒸煮工艺目前我国酒精工厂常采用间歇加压蒸煮和添加淀粉酶液化后间歇加压蒸煮两种方法:(1)间歇加压蒸煮工艺流程加水入蒸煮锅一投料一升温一蒸煮一吹醪(2)加淀粉酶加压蒸煮随着酶制剂工业的发展,近几年来,我国有一些酒精工厂采用先加细菌淀粉酶液化后,再进行加压蒸煮,这样,蒸煮压力可以降
20、低,蒸煮时间也可缩短。淀粉酶用量大约是粉碎原料的0.1 0.2%,采用不同的原料,所需的淀粉酶用量也不同,例如:薯类粉状原料,淀粉酶用量可以少些,谷类原料和野生植物原料,淀粉酶用量则要适当加大些,而且需要事先将细菌淀粉酶加水浸渍0.5 1 小时,以备应用。(二)间歇糖化工艺间歇糖化法在整个糖化过程中主要有前冷却、糖化、后冷却以及将糖醪送入发酵罐等操作,间歇糖化的生产操作是在一个具有搅拌和冷却装置的糖化锅内完成的,因此设备利用率低,冷却用水量与动力消耗都较大。间歇糖化法的工艺流程:蒸煮醪t糖化锅+加 水+冷 却(1 2 0 6 0 )+加酸十加曲十糖化十冷却(6 0 3 0)一发酵罐(或酒母罐)
21、第四节糖蜜原料的稀释与澄清糖蜜是制糖厂的一种副产品,里面含有大量的可发酵性糖,这些糖分在目前制糖工业技术或经济核算上已不能或不宜用结晶方法加以回收。糖蜜是一种非结晶糖分,因其本身就含有相当数量的可发酵性糖,无需糖化,因此是微生物工业大规模发酵生产酒精、甘油、丙酮丁醇、柠檬酸、谷氨酸、食用酵母及液态饲料等的良好原料。由于原糖蜜的浓度一般都在8(T B x 以上,胶体物质与灰分多,产酸细菌多,所以糖蜜酒精发酵前需进行稀释、酸化、灭菌、澄清等处理过程。正常的操作过程,在很大程度上,决定于糖液的所有营养物料的彻底混合。供这用途的设备为糖蜜稀释器。一、糖蜜稀释器(一)水平式糖蜜连续稀释器(二)立式糖蜜连
22、续稀释器(三)错板式连续稀释器冷 水i ll I IA-AI冬1230立 上 弋 机 连 续 柿 梆 在 不1-K 鬲 及 文 2 一口另定市F如 图 1-31错板式糖蜜连续稀释器是在一般的圆形管内装上交错排列的挡板,挡板倾斜安装以减少流动阻力,挡板的数目一般为1015块。糖蜜和水从稀释器的上部自上而下以并流方向流动,经过器内各挡板的作用,糖液反复改变流向,使糖蜜和水得到均匀的混合。(四)胀缩式糖蜜连续稀释器胀缩式糖蜜连续稀释器如图1-32为一个中间突然收缩的中空圆筒。水和糖蜜从器身底端进入,糖液在器内因器径的几次改变使流速随着发生多次的改变,促进了糖液的均匀混合,最后从顶部获得符合工艺需要的
23、糖液。(五)变管径式连续稀释器如 图 1-33,是用几种不同管径的直管段连接而成。作用原理与胀缩式相同,利用糖液流过不同管径截面时流速发生改变,致使器内流动的糖蜜与水经几次的膨胀、收缩作用而达到均匀混合。(六)间歇式稀释设备第五节啤酒生产中麦芽汁的制备设备啤酒是生物加工产业中的一个典型产品,我国的啤酒生产已位于全世界第三位。影响啤酒的产量和质量的关键因素之一是麦芽汁的制备。麦芽汁是啤酒酵母的培养基。啤酒糖化设备的组合方式是随着生产规模的不断扩大而变化的。根据组成糖化系统设备的数目,可分为以下几种组合方式:二器组合常见于小型啤酒厂,由一只糖化过滤槽和一只糊化煮沸锅构成一套单式糖化系统,每天可糖化
24、2次左右。四器组合常见于中型啤酒厂,由糊化锅、糖化锅、过滤槽和煮沸锅4只专用设备构成一套复式糖化系统,每天可糖化4次左右。该套组合的特点是设备分工明确,利用率极不均衡。五器组合常见于中型啤酒厂的技术改造中。在四器组合的基础上,增加一只暂贮罐,用于暂贮过滤后的麦汁,以此缩短等待煮沸锅的时间,提高整个系统的生产效率,使每天的糖化能力增加到6次。六器组合常见于大型啤酒厂。随着发酵工艺技术的不断发展,对糖化工艺的要求也越来越高。在单批产量一定的前提下,须实现尽可能多的日糖化批次,才能满足发酵工艺技术要求。因此,在四器组合的基础上,再添一只过滤槽和一只煮沸锅就构成了一 套六器组合的双元糖化系统,每天可糖
25、化8次左右,该套组合的特点是糊化锅与糖化锅的利用率已达到极限。一、糊化锅糊化锅的主要作用是用于煮沸大米粉和部分麦芽粉醪液,使淀粉糊化和液化。1.糊化锅的构造图2-34糊化锅1-大米粉进口 2-热水进口 3-搅 拌 器4-加热蕤汽管进口 5蒸汽冷凝水出口6-糊化幡铝口 7不凝性气体出口 8-耳 架9-麦芽粉液或糖化醪入口10-环 形 槽11-污 水 排 出 口 管12-风门从 图 1-35可以看出球形锅底对流体传热循环的影响。靠近锅倾斜壁仃液柱h 2,但仃较大的加热面积f 2,而中心部位具有较深的液柱E,但加热面积R 较小,因此在锅底部周围较快发生气泡,将液体向上推,而形成中心的液体向下的自然循
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