实验6-a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测概要课件.ppt

《实验6-a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测概要课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验6-a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测概要课件.ppt（19页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、第二部分:酶的应用实验目的:1.制备固定化a-淀粉酶2.进行淀粉水解的测定1、酶制剂的概念和种类（一）酶制剂含有酶的制品定义：多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶种类：A、液体酶制剂治疗某些胃病的胃蛋白酶液B、固体酶制剂2、酶的生产提取法定义：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来优点：简单易行，在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值实例：在屠宰厂，可以从家畜胰脏中提取出胰酶；在水果加工厂，可以从菠萝皮中提取出菠萝蛋白酶缺点：要有充足的原材料，广泛应用受到限制发酵法常用方法定义：通过微生物发酵获得所需要的酶。如果是胞外酶，可以从发酵液中直接提取；如果是细胞内酶，则可将

2、细胞弄碎再经过提取纯化而得到。易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。优点：提取方式：在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂，说明酶制剂使用有很多优点，你能思考后举出一些吗？催化效率高、低能耗、低污染等。酶制剂的使用有缺点吗？3、酶制剂的优点 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活；2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。(难分离）4、酶制剂的缺点1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术（如固定在不溶于水的载体上）。2、固定化酶技术的优点：（1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；（2）固定在载体上的没

3、可以被反复利用。（二）固定化酶固定化酶：就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化的方法：吸附法、交联法、包埋法、共价偶连法等3.固定化酶方法实验原理：本实验是用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成淀粉-淀粉酶 淀粉酶糊精 淀粉酶 淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶 糖化淀粉酶麦芽糖这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶，其作用的最适温度为5075；最适PH为5.57.5遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色（三）实验设备及用品:5ml塑料注射器 50ml烧杯

4、滴管 自行车用气门心及夹子 注射器架 试管及微量离心管3支材料:1.-淀粉酶的固定化:在烧杯中将5mga-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中.由于酶不纯,可能有些不溶物.再加入5g石英砂,不时搅拌,30min后装入1支下端接有气门心并用夹子封住的注射器中(石英砂体积约4ml).用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器以除去未吸附的游离淀粉酶,流速为1ml/min.2.可溶性淀粉溶液:取50ml可溶性淀粉溶于100ml热水中,搅拌均匀.3.5mmol/L KI-I2溶液：称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水100ml完全溶解后装入滴瓶中反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器步骤:1.将灌注了固定化酶的注射

5、器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入12滴KI-I2溶液,观察颜色.用水稀释1倍后再观察颜色.反应柱固定化酶气门心夹子5ml注射器淀粉2.实验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4冰箱中,几天后再重复上述实验,看是否有相同的结果.课后练习 1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?可在试管中加入1ml可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色，则流出液中没有淀粉酶了。可以在高温下使淀粉水解快，而且酶不会因高温上而失活，所以可在一些需要高

6、温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。1、研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的（）A、温度 B、PHC、水分 D、营养D2、目前，日用化工厂大量生产的酶制剂，其中的酶大都来自A、化学合成 B、动物体内 C、植物体内 D、微生物体内 D3.酶的固定方法不包括()。A.将酶吸附在固体表面上 B将酶相互连接起来C将酶包埋在细微网格里 D将酶制成固体酶制剂，如加酶洗衣粉中的酶D5.关于固定化酶的叙述不正确的是()。A既能与反应物接触，又能与反应物分离 B固定在载体上的酶可被反复利用C可催化一系列反应 D酶的活性和稳定性受到限制C