【冻干乙型脑炎灭活疫苗(vero细胞)】.doc
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1、冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)Donggan Yixing Naoyan Miehuoyimiao (Vero Xibao) Japanese Encephalitis Vaccine(Vero Cell),Inactivated, Freeze-dried 本品系用乙型脑炎(以下简称乙脑)病毒接种于Vero细胞, 经培养、收获病毒液、灭活病毒、浓缩、纯化后,加入稳定剂冻干制成,用于预防乙脑。1. 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合 “凡例”有关要求。 2. 制造 2.1 生产用细胞 生产用细胞为Vero细胞。 细胞库的管理及检定应符合 “生物制品生产和检定用
2、动物细胞基质制备及检定规程”规定。各种子批代次应不超过批准的限定代次,取自同批工作细胞库的1支或多支细胞管,经复苏、扩增后的细胞仅用于一批疫苗的生产。 细胞制备取工作细胞库中的1支或多支细胞管,细胞复苏、 扩增至接种病毒的细胞为1批。将复苏后的单层细胞用胰蛋白酶或其他适宜的消化液进行消化, 分散成均匀的细胞, 加入适宜的培养液混合均匀,置3537培养形成致密单层细胞。2.2 毒种名称及来源生产用毒种为乙脑病毒P3株。种子批的建立应符合 “生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。乙脑病毒P3株原始种子应不超过第53代, 主种子批和工作种子批的代次应不超过批准的限定代次。种子批毒种的检定主种子批应
3、进行如下全面检定,工作种子批至少应进行.1-2.2.3.5项检定。 .1鉴别试验将毒种10倍系列稀释,取10-110-5稀释度的病毒液与乙脑特异性免疫血清等量混合作为试验组,取10-410-8稀释度的病毒液与乙型脑炎非特异性血清等量混合作为对照组,于37水浴中和90分钟,试验组和对照组每个稀释度分别接种体重为7-9g 昆明鼠或其他品系小鼠20只,每只脑内注射0.03ml,逐日观察,3日内死亡不计,观察14天,计算中和指数应不低于500。 .2无菌检查 依法检查(附录XII A),应符合规定。.3支原体检查 依法检查(附录XII B),应符合规定。 .4 病毒滴定 将毒种10倍系列稀释,取10-
4、610-9稀释度病毒液脑内接种体重为79g 昆明鼠或其他品系小鼠,每稀释度注射小鼠4只,每只0.03ml,逐日观察,3日内死亡者不计,观察14天,病毒滴度应不低于8.0 Lg LD50/ml。.5 病毒外源因子检查 依法检查(附录XII C),应符合规定。 .6免疫原性检查用主种子批毒种制备原疫苗,腹腔免疫体重为1214g NIH小鼠10只,每只0.3ml,免疫2次,间隔7天,初免后第14天, 对免疫组和未经免疫的对照组小鼠用不低于10 000 LD50病毒量的非生产用乙脑病毒P3株进行腹腔攻击,同时各组小鼠每只脑腔注射0.03ml稀释液。21天后免疫组应100%保护,对照组死亡率应不低于80
5、%。 毒种保存冻干毒种保存于-20以下,液体毒种保存于- 60以下。2.3 原液 细胞制备 按项进行。 培养液 培养液为含有适宜浓度灭能新生牛血清的199或其他适宜培养液。新生牛血清的质量应符合要求(附录XIII D),且乙脑抗体应为阴性。 对照细胞病毒外源因子检查 依法检查(附录XII C),应符合规定。 病毒接种和培养 细胞生长成致密单层时,弃去细胞培养液,用Earles液或其他适宜的洗涤液充分冲洗细胞,除去牛血清后,加入MEM维持液。工作种子批毒种(同一批工作种子批应按同一MOI接种)。 置适宜温度下培养。 病毒收获 经培养60-84小时,澄清过滤后收获病毒液。根据细胞生长情况,可加入新
6、鲜维持液继续培养, 进行多次病毒收获。同一细胞批的同一次病毒收获液检定合格后可合并为单次病毒收获液。2.3.6 单次病毒收获液检定按3.1项进行。 2.3.7 病毒灭活 应在规定的蛋白质含量范围内进行病毒灭活。单次病毒收获液中加入终浓度为200ug/ml甲醛,置适宜温度灭活一定时间。病毒灭活到期后,每个病毒灭活容器应立即取样, 分别进行病毒灭活验证试验。.8 超滤浓缩 同一细胞批制备的多个单次病毒收获液经病毒灭活后, 进行适宜倍数的超滤浓缩至规定的蛋白质含量范围。 2.3.9 纯化 浓缩后的病毒液采用蔗糖密度梯度区带离心法或其他适宜的方法进行纯化。2.3.10脱糖将收集液以截留分子量100kD
7、的膜进行超滤脱糖后,可加入适宜浓度的稳定剂,即为原液。 2.3.11 原液检定 按3.2 项进行。 配制用疫苗稀释液将原液按同一蛋白质含量和抗原含量进行稀释,总蛋白质含量不得超过20ug/ml,加入适宜的稳定剂即为半成品。 半成品检定按3.3项进行。 分批应符合“生物制品分批规程”规定。 分装及冻干应符合“生物制品分装冻干规程”规定。 规格 复溶后每瓶0.5ml,每1次人用剂量0.5ml。 包装应符合“生物制品包装规程”规定。 3检定 3.1 单次病毒收获液检定 无菌检查 依法检查(附录XII A),应符合规定。支原体检查 依法检查(附录XII B),应符合规定。病毒滴定按.4项进行,应不低于
8、7.0 Lg LD50/ml。3.2 原液检定无菌检查 依法检查(附录XII A),应符合规定。3.2.2 病毒灭活验证试验 将病毒灭活后供试品脑内接种体重1214g小鼠8只,每只0.03ml,同时腹腔接种0.5 ml, 为第1代; 7天后将第1代小鼠处死3只,取脑制成10%脑悬液,同法脑内接种1214g小鼠6只,为第2代;7天后将第2代小鼠处死3只,同法脑内接种1214g小鼠6只为第3代, 接种后逐日观察,3日内死亡者不计, 观察14天,全部健存为合格。(动物死亡数量应不超过试验用动物总数的20% )。3.2.3 蛋白质含量应按附录VI B第二法进行测定,应按批准的标准执行。3.2.4 抗原
9、含量采用酶联免疫法,应按批准的标准执行。3.3 半成品检定 无菌检查 依法检查(附录XII A),应符合规定。 抗原含量采用酶联免疫法,应按批准的标准执行。3.4 成品检定除水分测定外, 应按标示量加入灭菌注射用水, 复溶后进行以下各项检定。 鉴别试验 采用酶联免疫法检测, 应证明含有乙型脑炎病毒抗原。 外观应为白色疏松体,复溶后应为无色澄明液体,无异物。 3.4.3水分 应不高于3.0%(附录 VII D)。 3.4.4 游离甲醛含量 应不高于10g/ml(附录VI L)。3.4.5 效价测定采用免疫小鼠中和抗体测定法, 以蚀斑减少中和试验测定中和抗体。 参考疫苗(RA和RB)以及中和试验阳
10、性血清由国家药品检定机构提供。将被检疫苗(T)和参考疫苗(R)分别稀释成1:32,腹腔免疫体重为1214g小鼠10只,每只0.5ml,免疫2次,间隔7天。第2次免疫后第7天采血,分离血清,同组小鼠血清等量混合,于56灭活30分钟。稀释阳性血清、被检苗血清和参考苗血清,分别与稀释病毒(约200PFU/0.4ml)等量混合,同时将稀释后的病毒再1:2稀释作为病毒对照,置37水浴90分钟,接种6孔细胞培养板BHK21细胞,每孔0.4 ml,置37培养90分钟,加入含甲基纤维素的培养基覆盖物,于37培育5天,染色,蚀斑计数,病毒对照组的蚀斑平均数应在50150之间。计算被检疫苗和参考疫苗组对病毒对照组
11、的蚀斑减少率。 蚀斑减少率=(1S/ CV)100% S 为被检苗平均斑数 CV 为病毒对照组平均斑数 按以下公式计算被检苗效力T 值。 T=(Y50)/ 47.762 Lg X T= 被检苗引起50%蚀斑减少的抗体稀释度的对数 Y为被检苗的蚀斑减少数 X 为蚀斑中和试验时所用的血清稀释倍数 结果判定: T (3)不合格: T 3.4.6 热稳定性试验 疫苗出厂前应进行热稳定性试验, 于37放置7天,按3.4.5项进行效价测定,仍应合格。如合格, 视为效价测定合格。 3.4.7牛血清白蛋白残留量应不高于50ng/剂(附录VIII F)。无菌检查依法检查(附录XII A),应符合规定。 3.4.
12、9 异常毒性检查依法检查(附录XII B),应符合规定。 细菌内毒素含量测定应不高于50EU/ml(附录XII E 凝胶限量试验) 抗生素残留量测定细胞制备过程中加入抗生素的应进行该项检查, 采用ELISA法,应不高于10ng/ml。 Vero细胞DNA残留量应不高于100pg/剂(附录IX B)。 Vero细胞蛋白残留量测定采用酶联免疫法, 应不高于2ug/ml, 并不得超过总蛋白含量的10%。 4保存、运输及有效期 于28保存和运输。自生产之日起, 有效期为24个月。5 疫苗稀释剂疫苗稀释剂为灭菌注射用水,应符合对疫苗稀释剂有关要求。5.2 疫苗稀释剂包装5.3 疫苗稀释稀释剂有效期5.4
13、 疫苗稀释剂批准文号5.5 疫苗稀释剂生产企业6说明书 以下是附加文档,不需要的朋友下载后删除,谢谢班主任工作总结专题8篇第一篇:班主任工作总结小学班主任特别是一年级的班主任,是一个复合性角色。当孩子们需要关心爱护时,班主任应该是一位慈母,给予他们细心的体贴和温暖;当孩子们有了缺点,班主任又该是一位严师,严肃地指出他的不足,并帮助他改正。于是,我认为班主任工作是一项既艰巨而又辛苦的工作。说其艰巨,是指学生的成长,发展以至能否成为合格人才,班主任起着关键性的作用,说其辛苦,是指每天除了对学生的学习负责以外,还要关心他们的身体、纪律、卫生、安全以及心理健康等情况。尽管这样,下面我就谈几点做法和体会
14、。一、常规习惯,常抓不懈学生良好的行为习惯的养成不是一节课、一两天说说就行的,它必须贯穿在整个管理过程中。于是我制定出详细的班规,要求学生对照执行,使学生做到有规可循,有章可依。由于低年级学生自觉性和自控力都比较差,避免不了会出现这样或那样的错误,因此这就需要班主任做耐心细致的思想工作、不能操之过急。于是,我经常利用班会对学生中出现的问题进行晓之以理、动之以情、导之以行的及时教育,给他们讲明道理及危害性,从而使学生做到自觉遵守纪律。二、细处关爱,亲近学生爱,是教师职业道德的核心,一个班主任要做好本职工作,首先要做到爱学生。“感人心者,莫先乎情。”工作中,我努力做到于细微处见真情,真诚的关心孩子
15、,热心的帮助孩子。我深信,爱是一种传递,当教师真诚的付出爱时,收获的必定是孩子更多的爱!感受孩子们的心灵之语,便是我最快乐的一件事!”三、具体要求,指导到位心理学研究表明,儿童对事物的认知是整体性的,能熟知轮廓,但不注重细节。我认为,首先要蹲下来,以孩子的视角观察事物,用孩子能听懂的话和他们交流。其次,要注重细节教育,把该做的事指导到位,因为他们很想按照老师的要求去做,很想把事情做好。四、示范带头,直观引导大教育家乌申斯基曾有过这样一段话:“教师个人的范例,对于学生的心灵是任何东西都不能代替的最有用的阳光。”低年级的学生对自己的班主任是一个怎样的老师,他们会留心观察班主任的每一个动作、每一个眼
16、神、每一种表情,会细心倾听班主任的每一句话,他们对班主任有着一种特殊的信任和依赖情感。班主任的自身素质,道德修养,班主任的一言一行,一举一动,无形之中会成为全班几十个孩子的榜样。因此,在班级工作中我时刻注意自身形象,事事从我做起,以良好的形象率先垂范,潜移默化的影响着我的学生。凡要求学生做到的,教师首先自己做到,而且做得更好。要求学生讲卫生,不随便乱扔垃圾,自己就做到随手捡拾垃圾。要求学生不迟到,在我的带动下,我们班的大多数学生都能做到讲卫生不迟到,个个讲文明守纪律。五、及时表扬,延迟批评德国美学家黑格尔说:“不应该使孩子们的注意力长久地集中在一些过失上,对此,尽可能委婉地提醒一下就够了。最重
17、要的是要在学生身上激发出对自身力量和自身荣誉的信念。”教过低年级的老师都知道:孩子小,事儿多,一上课就“告状”。当老师的又不能不公平处理,这样耽误的时间太多,而且学生因为受了批评,注意力长时间集中在自己的过失上,情绪受影响,低落的情绪体验使智力活动水平明显下降,课堂吸收效率变低。针对这一情况,我采取延迟批评,这样既培养学生愉快的情绪体验,又给予其改正和返回的机会,之后老师只要加以指导,就能很好的解决问题.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第二篇:四年级班主任工作总结学生是涌动着无限活力的生命体,是教育的起点和归宿。面对学生,祖国的未来,我们要做一个真正有意义的班主任
18、,素质教育要求我们要面向全体学生,为学生服好务,使学生的思想道德、文化科学、劳动技能、身体心理素质得到全面和谐地发展,我们的班级管理究竟该如何阅读学生个体,提升学生学习生活及生命的质量呢?在过去的一学期里,我们班在学校的统一组织、领导和同学们的共同努力下及任课老师的大力支持和配合下,各项工作顺利开展,安全、学习、工作等方面都取得较突出的成绩,现将我所做的一些工作总结如下:一、做好学生的思想工作,培养学生良好的道德品质,净化学生的心灵,努力培养德智体全面发展的人才做好学生的思想工作从两方面入手,一是重视每周的班会课,开好班会课;二是重视与学生的思想交流,多与学生谈心。重视班会,开好班会,为的是在
19、班中形成正确的舆论导向,形成良好的班风、学风,为学生提供一个好的大环境,重视的是学生的共性。为配合学校各项工作的落实,我们班积极开展了许多有益于学生身心健康发展的活动,让学生在活动中明事理、长见识。学生自尊心也很强,直接的批评换回来的可能是思想的叛逆,利用班会课对学生进行思想教育的好处,就是避免单调重复的批评说教而引起学生的反感,容易为学生接受,能切实帮助学生澄清思想上的模糊认识,提高学生的思想境界。但开班会课不一定都要等到每周二下午第四节,可利用一些零碎的又不影响学科学习的时间开短小精悍的班会也能取得良好的效果。不必长篇大论,班主任把及时发现的不良思想的苗头一针见血地指出来,对事不对人,进行
20、警示性的引导教育,往往能把一些影响班风、学风的不良思想消灭在萌芽阶段。而重视与学生的思想交流,多与学生谈心,注重的是学生的个性和因材施教。我常利用课余时间和学生促膝谈心,及时对学生进行针对性的教育。用个人的魅力征服学生,用自己的热情和朝气感染学生。体现在学习、生活的方方面面。做任何事情,一定要从学生的角度去考虑,为学生利益着想,学生才易于接受。在这个时候,我就是他们的好朋友,尽量为他们排忧解难,也正因如此,我得到了班上大多数学生的喜爱和信任。二、加强班级管理,培养优秀的学风、班风,深入全面地了解学生,努力培养团结、严格、活泼、奋进的班集体四年级的学生思想、心理发展、变化很快。因此,对学生的思想
21、工作显得尤其复杂和重要。在这个学期里,我的班级管理工作主要从三方面实施:一方面,我主要加大了对学生自治自理能力培养的力度,通过各种方式,既注意指导学生进行自我教育,让学生在自我意识的基础上产生进取心,逐渐形成良好的思想行为品质;又注意指导学生如何进行自我管理,培养他们多方面的能力,放手让学生自我设计、自我组织各种教育活动,在活动中把教育和娱乐融入一体;还注意培养学生的自我服务的能力,让学生学会规划、料理、调控自己,使自己在集体中成为班集体的建设者,而不是包袱。在这点上,特别值得一提的是班干部的选用,这是让学生自治的重要途径。班主任的管理代表的是学校的管理,不论班主任如何和颜悦色都带有不容质疑的
22、权威性,也难免有不被理解和接受的时候,通过班干部的协调,往往能够取得意想不到的效果。班干部起的是协助班主任管理班级的作用,他们接受班主任的指导,又及时向班主任反馈班级情况和同学们的思想动态;他们分工管理班级的各项事务,同时又是一个团结合作的整体。选好班干部,不但有利于班级管理,而且有利于全体学生共同发展。培养学生担任班干部,是培养学生能力、提高学生素质的一种很有效的方法,如培养其组织能力、管理能力、社交能力、语言表达能力等,还可以培养其关心集体、关心他人、乐于奉献、积极进取等优良的思想品质。多培养班干部有利于多数学生全面发展.本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。第三篇
23、:特教班主任工作总结本学期在校领导的信任和支持下,我继续担任高考班班主任的工作,为了在今后的工作能够取长补短,特总结如下:(一)抓常规管理规范学生的行为习惯早到校、两操、打扫除、校各项活动的参加都认真组织,严格要求,决不马虎,让学生感到做人就要这样严谨、认真、一丝不苟。至今学生以习惯成自然。例如间操时间一到不用老师强调,都主动自觉去做,赢得任课老师的好评。(二)实行班级管理我们班级发展的目标都是由师生共同商讨确立的,并且分工负责。这样,使管理者和被管理者做到和谐统一。师生能以诚相待,共同决策,使学生感觉到班级的事也有他们的一部分。通过分级管理,班干部承担了一些日常事务的管理工作,并有权独立处理
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