超氧化物歧化酶SOD活性测定ppt课件.ppt

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1、超氧化物歧化酶(SOD)活性测定(NBT法)一、测定意义二、目的要求三、原理四、仪器设备五、试剂配制六、植物材料七、操作步骤八、结果计算九、注意事项十、思考题篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统一、意义：细胞内自由基的产生和消除处于动态平衡状态，自由基水平很低，不会伤害细胞。植物正常情况下植物逆境胁迫下O-.2、H2O2、OH的产量增加；SOD、CAT、POD活性降低；VtE、VtC、CAR、GSH含量降低；从而伤害细胞。植物体内活性氧代谢系统的平衡被打破篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮

2、球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统什么叫逆境？逆境是指对植物生存生长不利的各种环境因素的总称.逆境的种类?篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统为什么要测定完全液和缺素苗的SOD活性？篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统二、目的要求：1.了解SOD活力测定的实践意义；2.掌握SOD测定的原理及操作要点；3.比较完全液溶液和缺素溶液培养的 玉米苗叶片SOD活性的差异。篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分

3、系统是一种得分类型的系统三、原理：篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统五、试剂配制 1、提取介质50mmol/L(pH7.0)磷酸缓冲液。2、反应介质 50mmol/L(pH7.8)磷酸缓冲液,内含77.12mol/L硝基四唑蓝,0.1mmol/L EDTA,13.37mmol/L蛋氨酸。3、80.2mol/L

4、核黄素溶液:用含有0.1mmol/L EDTA的50mmol/L(pH7.8)的磷酸缓冲液配制。SOD反应混合液3.9ml反应介质0.1ml 80.2mol/L核黄素溶液篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统六、植物材料:玉米叶片:完全液培养苗 缺素液培养苗篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统七、操作步骤将玉米叶片剪细混合均匀称0.2g(用保鲜膜包好放低温冰箱预冻)研磨成匀浆再加入3ml缓冲液,研磨均匀后,将匀浆液倒入聚乙烯离心管中低温(04)下、480

5、0rpm离心10min上清液即为酶液，将上清液倒入小青霉瓶，低温下贮存，供SOD活性测定。1、酶液的提取：加入2ml冰冷的0.05mol/LpH7.0磷酸缓冲液及少量的石英砂 研钵篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统 2.SOD活性测定：取6支试管,编号,按下表加入试剂。将1号管用黑纸袋套上,与其它试管一起放荧光灯下,光强3000Lx照光10min,到时间后关灯,用黑布罩上试管(如室内光线不强,不罩黑布也可),以1号试管溶液为参比,测定样品在560nm处的吸光度。不加酶的2号试管溶液颜色最深;加入酶的由于SOD抑制了硝基四

6、唑蓝的光还原,颜色变浅。篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统2、活性测定：取6支干燥的、玻璃质量一致的普通试管，按下表顺序加入试剂篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统式中：Ack为2号对照管溶液在560nm处的吸光度值;AE为样品测定管溶液在560nm处的吸光值;V为酶液总体积（ml)；W为提取酶液的植物材料的鲜重（g)；Vt为测定时酶液的用量(

7、ml)。八、结果计算：（Ack-AE)V SOD活性(U/g鲜重)AckWVt50 一个酶活单位定义为将硝基四唑蓝的还原抑制到对照一半(50)时所需的酶量。篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统 九、注意事项:1.所用试管的玻璃质量要一样。包括厚度、直径、质量等。2.照光条件要一致。照光时试管放的高度、背景等。3.要多做对照消除日光灯管的光质差异。4.植物组织中的酚类物质对测定有干扰，对酚类含量高的材料提取酶液时可加入聚乙烯吡咯烷酮消除。5.结果计算时要用相邻对照管代入公式计算。篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统 十、思考题:1.在SOD活性测定中为什么设照光和暗中两个对照管。2.影响本实验准确性的主要因素是什么？应如何克服？篮球比赛是根据运动队在规定的比赛时间里得分多少来决定胜负的，因此，篮球比赛的计时计分系统是一种得分类型的系统1.下次实验：改良半叶法测定植物光合速率2.请按植物生理生化实验B补充材料认真书写预习报告！3.实 验 适 宜 时 间：晴 天 上 午 89点 开 始。具体时间要看气候，如果本周日晴天，就先测定光合速率，“叶绿体色素定量测定”可以调到下周上。请转告今晚请假的同学。柯2011.5.6通知：