芸苔素内酯原药(T-ZZB 0901—2018).pdf

《芸苔素内酯原药(T-ZZB 0901—2018).pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《芸苔素内酯原药(T-ZZB 0901—2018).pdf（16页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、ICS 71.100.99 G 25 ZZB 浙 江 制 造 团 体 标 准 T/ZZB 09012018 芸苔素内酯原药 Brassinolide technical material 2018-12-24 发布 2018-12-31 实施 浙江省品牌建设联合会 发 布 T/ZZB 09012018 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 基本要求.1 4 技术要求.2 5 试验方法.2 6 检验规则.6 7 标志、标签、包装、贮运、安全和验收期.6 8 质量承诺.7 附录 A（资料性附录）芸苔素内酯的名称、结构式和基本物化参数.8 附录 B（资料性附录）麦角甾醇质

2、量分数测试方法.11 T/ZZB 09012018 II 前 言 本标准依据GB/T 1.12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由浙江省品牌建设联合会提出并归口。本标准由浙江方圆检测集团股份有限公司牵头组织制定。本标准主要起草单位：浙江世佳科技有限公司。本标准参与起草单位：浙江农林大学。本标准主要起草人：胡剑锋、徐丽娟、周月霞、沈学锋、翟金凤、郑锋、陈安良。本标准由浙江方圆检测集团股份有限公司负责解释。T/ZZB 09012018 1 芸苔素内酯原药 1 范围 本标准规定了芸苔素内酯原药的基本要求、技术要求、试验方法、检验

3、规则、标志、标签、包装、贮运、安全和验收期、质量承诺。本标准适用于以麦角甾醇为起始原料经化学合成的芸苔素内酯产品。注：芸苔素的名称、结构式和基本物化参数参见附录A。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 16002001 农药水分测定方法 GB/T 16052001 商品农药采样方法 GB 3796 农药包装通则 GB/T 66822008 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 81702008 数值修约规则与极限数值的表示和判定 GB/T 191

4、38 农药丙酮不溶物测定方法 GB/T 275672011 工业用吡啶 GB/T 327762016 农药密度测定方法 NY/T 1860.1 农药理化性质测定试验导则 第1部分：pH NY/T 1860.202016 农药理化性质测定试验导则 第20部分：熔点/熔程 3 基本要求 3.1 设计研发 应具备自主研发生物碱手性催化剂的能力。3.2 原材要求 3.2.1 麦角甾醇应符合表 1 要求。表1 麦角甾醇的质量要求 指标名称 指标 试验方法 外观 白色晶体 目测 熔点/157164 按 NY/T 1860.202016 中 4.4 进行 水分/%0.5 按 GB/T 16002001 中

5、2.1 进行 麦角甾醇质量分数/%97.0 见附录 B T/ZZB 09012018 2 3.2.2 吡啶应符合表 2 要求。表2 吡啶的质量要求 指标名称 指标 试验方法 外观 清亮透明液体 目测 吡啶含量/%99.9 按 GB/T 275672011 中 4.4 进行 水分/%0.1 按 GB/T 275672011 中 4.6 进行 蒸发残渣/%0.01 按 GB/T 275672011 中 4.7 进行 氯化物（以 Cl 计）/%0.0005 按 GB/T 275672011 中 4.8 进行 硫酸盐（以 SO4计）/%0.001 按 GB/T 275672011 中 4.9 进行 氨

6、/%0.002 按 GB/T 275672011 中 4.10 进行 密度/（g/cm3）0.9800.985 按 GB/T 275672011 中 4.12 进行 还原高锰酸钾物质试验 通过试验 按 GB/T 275672011 中 4.13 进行 与水混合试验 通过试验 按 GB/T 275672011 中 4.14 进行 3.3 生产工艺及装备 3.3.1 生产工艺应采用经甲磺酰化、水解、氧化、还原、开环、双羟化、内酯化七步反应工序。3.3.2 中间体产物纯化采用柱层析提纯工艺。3.3.3 还原反应应具备超低温控制实施。3.4 检测能力 应具备对原料及产品全项目检验能力。4 技术要求 4

7、.1 白色至类白色粉末，无可见外来杂质。4.2 芸苔素内酯原药应符合表 3 要求。表3 芸苔素内酯原药控制项目指标 项 目 指 标 芸苔素内酯质量分数/%96.0 24-表芸苔素内酯质量分数/%95.0 水分/%0.5 pH 值范围 4.07.0 熔点/256258 丙酮不溶物/%0.2 5 试验方法 T/ZZB 09012018 3 5.1 警示 使用本标准的人员应有实验工作的实践经验，本标准并未指出所有的安全问题，使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规的规定。5.2 一般规定 本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 66822008中规定的三

8、级水。5.3 鉴别试验 高效液相色谱法：本鉴别试验可与芸苔素内酯质量分数的测定同时进行，在相同的色谱操作条件下，试样溶液中被测物质谱峰的保留时间与芸苔素内酯标样溶液中芸苔素内酯色谱峰的保留时间的相对差值应在1.5%以内。5.4 外观 在自然光下目测。5.5 芸苔素内酯质量分数、24-表芸苔素内酯质量分数的测定 5.5.1 方法提要 试样用甲醇溶解，在室温下与苯硼酸衍生化反应30 分钟，以乙腈+水为流动相，使用以C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器（222 nm），对试样中芸苔素内酯进行高效液相色谱分离，外标法定量。5.5.2 试剂和溶液 试剂和溶液如下：a)甲醇：色谱级；b)乙腈：色谱级；c)苯

9、硼酸：已知质量分数，W98.0%；d)苯硼酸溶液：1.0 mg/mL 苯硼酸甲醇溶液；e)24-表芸苔素内酯标样：已知质量分数，W95.0%。5.5.3 仪器 试验仪器如下：a)高效液相色谱仪：具有紫外可变波长检测器；b)色谱数据处理机或色谱工作站；c)色谱柱：ZORBAX SB-C18 柱，4.6150 mm，粒径：5 m（或具有同等效果的色谱柱）；d)过滤器：滤膜孔径约 0.45 m；e)微量进样器：10 L；f)超声波清洗器；g)电子天平；h)真空泵。5.5.4 高效液相色谱仪操作条件 5.5.4.1 高效液相色谱仪操作条件如下：a)流动相：（乙腈水）=7525，经滤膜过滤，并进行脱气；

10、T/ZZB 09012018 4 b)流速：1.0 ml/min；c)柱温：室温；d)检测波长：222 nm；e)进样体积：5 L；f)保留时间：22，23，24-表芸苔素内酯约 10.7 min，24-表芸苔素内酯约 13.7 min。5.5.4.2 上述操作参数是典型的，可根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当调整，以期获得最佳效果，典型的芸苔素内酯高效液相色谱图见图 1、图 2。图1 芸苔素内酯标样液相色谱图 图2 芸苔素内酯原药液相色谱图 5.5.5 测定步骤 5.5.5.1 标样溶液的配制 T/ZZB 09012018 5 称取芸苔素标准品约0.01 g（精确至0.00002 g）

11、置于25 mL容量瓶中，用10 mL甲醇溶解，加入浓度为1.0 mg/mL的苯硼酸甲醇溶液10 mL，置于室温下反应0.5 小时，反应完毕，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过孔径0.45 m滤膜即得标样溶液。5.5.5.2 试样溶液的配制 称取芸苔素试样约0.01 g（精确至0.00002 g）置于25 mL容量瓶中，用10 mL甲醇溶解，加入浓度为1.0 mg/mL的苯硼酸甲醇溶液10 mL，置于室温下反应0.5 小时，反应完毕，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过孔径0.45 m滤膜即得试样溶液。5.5.5.3 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，待相邻两针的

12、相对响应值变化小于1.5%，分别进样标样溶液、试样溶液进行测定。5.5.6 计算 5.5.6.1 芸苔素内酯质量分数计算 将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中芸苔素峰面积分别进行平均，试样中芸苔素的质量分数按式(1)计算：（1）式中：X 试样中芸苔素的质量分数，以%表示；AS 标样溶液中芸苔素内酯峰面积；试样溶液中芸苔素内酯峰面积总和；ms 芸苔素内酯标样的质量，单位为克（g）；m 试样的质量，单位为克（g）；w 标样中芸苔素内酯的质量分数，数值以“%”表示。5.5.6.2 24-表芸苔素内酯质量分数计算 将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中24-表芸苔素峰面积分别进行平均

13、，试样中24-表芸苔素的质量分数按式(2)计算：（2）式中：X1试样中24-表芸苔素的质量分数，以%表示；As标样溶液中芸苔素内酯峰面积；A1试样溶液中24-表芸苔素内酯峰面积；ms芸苔素内酯标样的质量，单位为克（g）；m 试样的质量，单位为克（g）；w 标样中芸苔素内酯的质量分数，数值以“%”表示。T/ZZB 09012018 6 5.5.7 允许差 两次平行测定结果之差，应不大于0.6%，取其算术平均值，作为测定结果。5.6 水分的测定 按GB/T 16002001中2.1规定的方法进行测试。5.7 pH 值的测定 按NY/T 1860.1规定执行。5.8 熔点的测定 按NY/T 1860

14、.202016中4.4规定的方法进行测试。5.9 丙酮不溶物的测定 按GB/T 19138规定执行。6 检验规则 6.1 组批 一次交付的同一类型、规格、批号的产品组成一批。6.2 抽样 按GB/T 16052001中5.3.1方法进行，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量不少于30 g。6.3 出厂检验 出厂检验项目为外观、芸苔素内酯质量分数、水分、pH值范围、熔点、丙酮不溶物，按批检验放行。6.4 型式检验 型式检验为全项目检验，正常情况下6 个月检验一次，有下列情形之一时，应进行型式检验：a)当本产品的原料、工艺、设备有大的改变，可能影响产品的质量时；b)产品停产 6 个月后，恢复生

15、产时；c)批量生产时，每 6 个月周期性进行一次；d)出厂检验结果与上述型式检验有较大差异时；e)当用户对产品质量有较大的异议时；f)当国家产品质量监督管理机构提出要求时。6.5 判定规则 技术指标检验结果的判定按GB/T 81702008进行修约，如有一项指标不符合本标准要求时，应重新加倍采样，对不合格进行复检，如复检结果符合标准规定，则判该批产品合格，如仍不合格，则判该批产品不合格。7 标志、标签、包装、贮运、安全和验收期 T/ZZB 09012018 7 7.1 标志、标签 芸苔素内酯原药的标志、标签和包装，应符合GB 3796中的有关规定。7.2 包装 芸苔素内酯原药包装应用自封袋加铝

16、箔袋包装，每袋净重可根据用户要求或订货协议而定；芸苔素内酯原药包装件应贮存在通风、干燥的库房中。7.3 贮运 贮运时，避免高温，严防潮湿和日晒，不得与食物、种子、饲料混放，避免与皮肤、眼睛接触，防止由口鼻吸入。7.4 安全和验收期 使用过程中应注意防护，如本品接触到皮肤和眼睛，应立即用肥皂和水洗净；如发生中毒现象，应立即送医院对症治疗；在规定的贮运条件下，芸苔素内酯原药的验收期，从生产日期起为一个月，完成产品质量验收。8 质量承诺 8.1 在符合产品特性运输和贮存条件下，验收期内出现质量问题，制造商无偿退货或补货。8.2 若用户对产品提出异议，制造商应在 24 小时内作出处理和相应；应用户操作

17、不当或其他非质量导致产品无法正常使用，制造商应根据用户的需要组织或协助解决。T/ZZB 09012018 8 A A 附 录 A（资料性附录）芸苔素内酯的名称、结构式和基本物化参数 A.1 24-表芸苔素内酯（24-表BR）24-表芸苔素内酯（24-表BR）的名称、结构式和基本物化参数如下：a)英文名称：24-epibrassinolide；b)CAS 登录号：78821-43-9；c)化学名称：(22R，23R，24R)-2，3，22，23-四羟基-高-7-氧杂-5-麦角甾烷-6-酮；d)结构式：OHOHOOHOHOH e)分子式：C28H48O6；f)相对分子质量（按 2016 国际相对原

18、子质量计）：480.7。A.2 22，23，24-表芸苔素内酯（22，23，24-表BR）22，23，24-表芸苔素内酯（22，23，24-表BR）的名称、结构式和基本物化参数如下：a)英文名称：22，23，24-trisepibrassinolide；b)CAS 登录号：78821-42-8；c)化学名称：(22S，23S，24R)-2，3，22，23-四羟基-高-7-氧杂-5-麦角甾烷-6-酮；d)结构式：OHOHOOHOHOH e)分子式：C28H48O6；f)相对分子质量（按 2016 国际相对原子质量计）：480.7。T/ZZB 09012018 9 A.3 28-表高芸苔素内酯（2

19、8-表高BR）28-表高芸苔素内酯（28-表高BR）的名称、结构式和基本物化参数如下：a)英文名称：28-epihomobrassinolide；b)CAS 登记号：80483-89-2；c)化学名称：(22S，23S，24S)-2，3，22，23-四羟基-24-乙基-高-7-氧杂-5-麦角甾烷-6-酮；d)结构式：OHOHOOHOHOH e)分子式：C29H50O6；f)相对分子质量（按 2016 年国际相对原子量计）：494.8。A.4 28-高芸苔素内酯（28-高BR）28-高芸苔素内酯（28-高BR）的名称、结构式和基本物化参数如下：a)英文名称：28-homobrassinolide

20、；b)CAS 登记号：82373-95-3；c)化学名称：(22R，23R，24S)-2，3，22，23-四羟基-24-乙基-高-7-氧杂-5-麦角甾烷-6-酮；d)结构式：OHOHOOHOHOH e)分子式：C29H50O6；f)相对分子质量（按 2016 年国际相对原子质量计）：494.8。A.5 14-羟基芸苔素甾醇（14-羟基BR）14-羟基芸苔素甾醇（14-羟基BR）的名称、结构式和基本物化参数如下：a)英文名称：14-hydroxylated brassinosteroid；b)CAS 登记号：457603-63-3；T/ZZB 09012018 10 c)化学名称：(20R，22

21、R)-2，3，14，20，22，25-六羟基-5，8-胆甾-6-酮；d)结构式：HHOOHHOOOOHHOOOOHHHHOOOOHHHHHH e)分子式：C27H46O7；f)相对分子质量（按 2016 年国际相对原子质量计）：482.7。T/ZZB 09012018 11 B B 附 录 B（资料性附录）麦角甾醇质量分数测试方法 B.1 方法提要 试样用甲醇溶解，以纯甲醇为流动相，使用以C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器（282 nm），对试样中的麦角甾醇进行高效液相色谱分离和测定，外标法定量。B.2 试剂和溶液 试剂和溶液如下：a)甲醇：色谱级；b)麦角甾醇标样：已知麦角甾醇质量分数，W9

22、8.0%。B.3 仪器 试验仪器如下：a)高效液相色谱仪：具有紫外可变波长检测器；b)色谱数据处理机或色谱工作站；c)色谱柱：150 mm4.6 mm(i.d.)不锈钢柱，内装 C18、5 m 填充物；d)过滤器：滤膜孔径约 0.45 m；e)微量进样器：10 L；f)超声波清洗器。B.4 高效液相色谱仪操作条件 B.4.1 高效液相色谱仪操作条件如下：a)流动相：纯甲醇；b)流速：1.0 ml/min；c)柱温：室温；d)检测波长：282 nm；e)进样体积：5 L。B.4.2 上述操作参数是典型的，可根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当调整，以期获得最佳效果，典型的24-表芸苔素内酯高

23、效液相色谱图见图B.1、图B.2。T/ZZB 09012018 12 图B.1 麦角甾醇标样液相色谱图 图B.2 麦角甾醇试样液相色谱图 B.5 测定步骤 B.5.1 溶液的配制 称取麦角甾醇样品与标准品各约0.01 g（精确至0.00002 g）分别置于25 mL容量瓶中，加入约20 mL甲醇超声溶解，置于至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过孔径0.45 m滤膜即得标样溶液和样品溶液。B.5.2 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，待相邻两针的相对响应值变化小于1.5%，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。B.6 计算 将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中麦角甾醇峰面积分别进行平均，试样中麦角甾醇的质量分数按式(B.1)计算：T/ZZB 09012018 13 2112A m wXA m=（B.1）式中：X 试样中麦角甾醇的质量分数，以%表示；A1标样溶液中，麦角甾醇峰面积B；A2试样溶液中，麦角甾醇峰面积B；m1麦角甾醇标样的质量，单位为克（g）；m2B试样的质量，单位为克（g）；w 标样中麦角甾醇的质量分数，数值以“%”表示。_