水产动物育种学资料 (16).pdf

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1、Y Y 超雄黄颡鱼和全雄黄颡鱼规模化繁育刘汉勤1，一，管波1，徐江2，侯昌春2 田华1，陈宏溪2 1 水利部中国科学院水工程生态研究所，湖北武汉4 3 0 0 7 9；2 武汉百瑞生物技术有限公司，湖北武汉4 3 0 0 7 9摘要：本研究利用激素性逆转技术、雌核发育技术和测交验证技术，筛选到Y Y 超雄黄颡鱼和雌性Y Y 超雄黄颡鱼，实现了Y Y 超雄黄颡鱼和全雄黄颡鱼规模化生产。利用X Y 生理雌性黄颡鱼进行人工雌核发育，同时取部分雌核发育后代用l7 D 雌二醇进行性逆转；然后进行测交验证筛选出Y Y 超雄黄颡鱼及Y Y 生理雌鱼；再将Y Y 生理雌鱼与Y Y 超雄鱼交配批量获得Y Y 超

2、雄黄颡鱼，同时实施雌激素性逆转批量获得Y Y 生理雌鱼；将批量的Y Y 超雄黄颡鱼和Y Y 生理雌鱼交配，实现Y Y 超雄黄颡鱼规模化繁育，将规模化生产的Y Y超雄鱼与普通X X 雌鱼交配实现全雄鱼规模化生产。2 0 0 8 2 0 1 0 年累计生产Y Y超雄黄颡鱼达到1 2 3 万尾，累计生产全雄黄颡鱼达到8 1 0 0 万尾，苗种雄性率为1 0 0。因此，本研究证实Y Y 超雄黄颡鱼及其生理雌鱼均能存活而且是可育的，且利用Y Y 超雄黄颡鱼技术进行单性育种是稳定可靠的，Y 超雄育种技术具有较大的应用前景。1 1 前言黄颡鱼(P e l t e o b a g r u$u l v i d

3、r o c oR i c h a r d s o n)，属鲶形目，鳞科，黄颡鱼属因其肉质细嫩、肉味鲜美、无肌间细刺而颇受消费者欢迎，2 0 0 8 年中国黄颡鱼养殖产量达到1 3 4 4 4 8 吨，2 0 0 9 年中国黄颡鱼养殖产量达到1 6 3 5 5 6 吨，年增幅达2 1 6 s 黄颡鱼已经成为中国重要的淡水养殖品种【I j 根据我们的调查，在相同养殖条件下，雄性黄颡鱼比同胞雌鱼的生长速度在当年快3 0-5 0，二龄黄颡鱼雄性比雌性的生长快1-2 倍因此，如能采用鱼类性别控制技术，在生产上推广全雄性黄颡鱼养殖，可大幅度提高渔产品的质量、产量与效益，具有重大的现实经济意义为此，刘汉勤等

4、(2 0 0 7)利用鱼类激素性逆转技术获得)(Y 生理雌鱼，然后通过)(Y 生理雌鱼雌核发育产生了Y Y 超雄鱼，Y Y 超雄鱼与普通)()(雌性黄颡鱼交配获得了雄性率为1 0 0 全雄黄颡鱼2 1 大量的研究人员对Y Y 基因型超雄鱼及其生理雌鱼的生存力和繁殖力存在一定的争议，关于r Y 超雄鱼及其生理雌鱼是否存活和可育的问题一直以来研究人员比较关注Y a m a m o t o(1 9 5 5)通过激素性逆转和选育技术首次在青鳝(O r y z i a sl a t i v e s)=i E 实w 超雄鱼存在【射随后通过激素性逆转、雌核发育、雄核发育和选育技术获得Y Y 超雄鱼，如虹辅(

5、P o e c i l i ar e t i c u l a t a)1 4】，金鱼c a r 口s s 觚o u r o t u$如c)【5 l，斑点叉尾鲴(c 幻f u，u sp u n c t a t u s)旧，罗非鱼(O r e o c h r o m i sn i l o“c u s)阮8，9 1 乘(O r e o c h r o m i s m o s s a m b i c u s)t 1 0 1，虹鳟鱼(5 a m og a i r d n e r i)1 1 i鱼里鱼_ _(C y p r i n u sc a r p i oL)1 2 1，玫瑰鲫鱼(P u 删协c o

6、n c h o n i u s)1 3 1，证实W 超雄鱼能够存活且可育也有，Y 超雄鱼不能存活的报道，如暹罗色_(B e t t as p l e n d e n s)1 4 1，玫瑰鲷(C i c h l a s o m an i g r o f a s c i a t u m)习科学家希望利用激素性逆转技术将Y y 超雄鱼雌性化，获得Y Y 生理雌鱼，然后将Y Y 生理雌鱼与r Y 超雄鱼交配可实现Y Y 超雄鱼规模化繁育，这样批量生产得到的Y Y 超雄鱼与普通x 雌鱼交配可实现全雄鱼规模化生产，因此，利用Y Y 超雄鱼雌性化是实现Y Y 超雄鱼规模化繁育关键的一步，也是制约全雄鱼模化生

7、产的关键点扭1 6 1 关于利用雌性激素性逆转w 超雄鱼产生w 生理雌鱼也有少量的报道，可能一个最主要的原因为Y Y 生理雌鱼不能存活或者不育如Y Y 虹鲥生理雌剑1 7 l 和Y Y 的斑点叉尾鲴【1 8 l 等D a v i s 等(1 9 9 5)报道了基因型为Y Y 的斑点叉尾鲴雌鱼和雄鱼交配仅仅能产生1 的能够存活的卵，其中主要的原因为Y y生理雌鱼存在严重的生殖问题【1 剐，随后虽然有w 超雄斑点叉尾鲴的报道，但是没有关于Y y斑点叉尾鲴雌鱼的报道【堍2 0】V e r aC r u ze ta 1，(1 9 9 6)报道外源雌性激素己烯雌酚(D i e t h y l s t i

8、 l b e s t r o l，D E S)性逆转w 基因型罗非鱼，转性率低于6 4 f 1 6】，而普通X Y 雄鱼转性率高于9 0，认为利用雌激素进行人工性别逆转过程中Y Y 幼鱼雌性化比正常雄鱼要困难，可能与正常雄鱼比较w 幼鱼在性分化过程中分泌高水平的睾丸酮相关慨堋虽然我们已经获得w 超雄黄颡鱼，但是如何实现Y Y 超雄黄颡鱼雌性化以及Y y 生理雌鱼是否能存活和可育有待进一步研究，是制约Y Y 超雄黄颡鱼和全雄黄颡鱼模化生产的关键点。本文重点研究如何筛选稳定可靠的Y Y 超雄黄颡鱼繁育家系和w 超雄黄颡鱼和全雄黄颡鱼规模化繁育1 2 材料与方法1 2 1 Y Y 超雄黄颡鱼和全雄黄

9、颗鱼规模化繁育技术路线介绍2w 超雄黄颡鱼繁育系的建立技术路线如下(图1)：第一步，利用Y Y 超雄黄颡鱼与普通雌鱼交配获得)(Y 全雄黄颡鱼；第二步。将全雄黄颡鱼用1 7 B 雌二醇进行性逆转获得)(Y 生理雌性黄颡鱼；第三步，利用)(Y 生理雌性黄颡鱼进行人工雌核发育，同时取部分雌核发育后代用1 7 B 雌二醇进行性逆转，另一部分单独饲养：第四步，进行候选、，Y 超雄黄颡鱼及Y y生理雌鱼的测交验证(见图2)，每个家系分别同时实施3 种交配方法，从测交后代雌雄鱼性比推断该侯选雄鱼的基因型，筛选3 种交配方法后代均为1 0 0 雄鱼的家系；第五步，Y Y 超雄黄颡鱼与Y Y 生理雌鱼交配实现

10、超雄黄颡鱼批量繁殖；同时用1 7 1 3 雌二醇进行性逆转批量繁殖的w 超雄黄颡鱼，获得批量的Y Y 生理雌鱼；第六步，w 超雄黄颡鱼与普通)(Y 雌鱼交配，实现超雄黄颡鱼规模化繁殖圆圆S t e pl圆JE：眙x 删e n a ls t e p2阿田I _ J回亍回网I JS t e p3S t e p4S t e p5S t e p63I 正常雄鱼Il(杏x I：=：二：二：二：=：f 广一。一一。fI 方法2l方法3图2Y Y 超雄黄颡鱼及r Y 生理雌鱼的测交验证示意图1 2 2 Y Y 超雄黄颡鱼及Y Y 生理雌鱼的测交验证、筛选及繁育系建立2 0 0 5 年6 月，参照图1 方法获

11、得全雄黄颡鱼，鱼苗在开口后第S 天，采用浓度为2 0 0I l g L 的z 7 1 3-雌二醇(E 2)浸泡的卤虫(B r n eS h r i m p，也称丰年虫)投喂，持续3 0 天，每天投喂三次，8：0 0、1 3：0 0 和1 8：0 0 各一次，饱食投喂(量以半小时内吃完为准)，将全雄鱼用进行性逆转获得)(Y 生理雌鱼2 0 0 6 年6 月，选用长吻觥(L e i o c a s s i s I o n g i r o s t r i s G O n t h e r)遗传灭活精子激活)(Y 生理黄颡雌鱼鱼卵采用冷休克处理方法阻断减数分裂第二极体的排出，恢复成雌核二倍体，黄颡鱼人工

12、雌核发育具体方法见刘汉勤等(2 0 0 7)【2 1 同时取部分雌核发育后代用1 7 1 3 雌二醇进行性逆转，另一部分正常饲养2 0 0 7 年6 月1 日7 月1 日期间取性成熟的人工雌核发育后代及其雌激素性逆转的后代实施的测交验证，交配方法见图2，测交获得的后代按不同家系单独饲养，约3 个月后即可取出一部分幼鱼，解剖后观察性腺，鉴定精巢或卵巢，记录不同家系测交后代雌雄鱼性别的比例，从测交后代雌雄鱼性比推断该侯选雄鱼的基因型，筛选3 种交配方法后代均为1 0 0 雄鱼的家系1 2 3 Y Y 超雄黄颡鱼的小批量雌性化2 0 0 8 年6 月1 日-7 月1 日期间，利用经测交验证后筛选到Y

13、 Y 超雄黄颡鱼及其生理雌鱼交配获得w 超雄黄颡鱼鱼苗，鱼苗在开口后第5 天，采用浓度为2 0 0p g L 的1 7 1 3 一雌二醇(E 2)浸泡的卤虫(B r i n eS h r i m p，也称丰年虫)投喂，每天投喂三次，8：0 0、1 3：0 0、1 8：0 04各一次，饱食投喂(以半小时内吃完为准)，持续3 0 天，将Y Y 超雄黄颡鱼幼鱼进行性逆转获得w 生理雌鱼1 2 4 Y Y 超雄黄颡鱼和全雄黄颡鱼规模化繁育一般规模化繁殖黄颡鱼均采用全人工方法，即人工催产、人工受精、人工孵化人工挑选经强化培育发育较好的雌鱼与雄鱼，催产剂采用鱼用绒毛膜促性腺激素H C G 2 0 0 0I

14、 U+L H R H A2 0u g+鲤鱼垂体1m g k g 雌性亲鱼，雄鱼减半注射将注射过催产剂的黄颡鱼亲本放入池中，到达效应时间后，用剪刀剖开雄鱼腹部，取出精巢，剪碎加入H a n k s 液或鱼用生理盐水稀释保存，在剪碎精巢的同时将顺产的雌鱼卵挤入瓷盆中，然后精卵混合均匀，加入经曝气的自来水激活授精，最后将卵均匀洒在鱼巢上，放在池子中进行孵化1 尾催产发育好的雄鱼精巢液平均可配5 7 尾雌鱼的卵人工授精完成后，鱼苗孵化和管理为常规方法产后雌性亲鱼放回专池培育来年可再繁殖黄颡鱼雄性率检测是评估规模化生产过程中全雄黄颡鱼苗种质量的重要方面，黄颡鱼雄性率检测有2 种方法：1)利用特异的性别连

15、锁分子标记进行P C R 检测适合日龄大子3 天的鱼苗刚j2)性腺解剖性别鉴定，适用于日龄大于3 0 天幼鱼【2】1 2 5 数据处理与分析侯选的”Y Y”黄颡鱼雌鱼与正常雄鱼)(Y 后代测交的性比。理论上后代雌雄性比为0：N(N表示测交后代总数)，经过卡方检验，0 9 5 P 值 1 0 0,即出现理论上后代雌雄性I：t(o：N)概率在9 5 1 0 0 之间，侯选亲本可确认为”Y Y”黄颡鱼雌鱼同样，侯选的”Y Y”超雄黄颡鱼与正常)o(雌鱼后代测交的性比，理论上后代雌雄性比为0-N(N 表示测交后代总数)，经过卡方检验，0 9 5 P 值 1 0 0,即出现理论上后代雌雄性比(0-N)概

16、率在9 5-1 0 0 之间，侯选亲本可确认为“w”黄颡鱼雄鱼。1 3 结果1 3 1 Y Y 超雄黄颓鱼及其生理雌鱼的测交验证、筛选及繁育系建立)(y 生理雌鱼雌核发育后代实施1 7 1 3 一雌二醇性逆转后获得雌鱼包括w 生理雌鱼和)。(雌鱼，对其中3 3 尾侯选雌鱼成功实施了与正常)(Y 雄鱼进行测交，依据后代性比通过卡方检验，共鉴定出r Y 生理雌鱼5 尾(表1 1 对3 0 尾)(Y 生理雌鱼雌核发育后代雄鱼成功实施了与S正常雌鱼进行测交依据后代性比通过卡方检验，共鉴定出1 2 尾Y Y 超雄鱼(表2)在测交确定为Y y 生理雌鱼5 尾中有2 尾与确定为Y Y 超雄鱼交配成功(表3)

17、，获得一组子一代7 0余尾，其中3 0 尾用于1 7 1 3 雌二醇性逆转雌性化，另一部分饲养至性成熟后作雄性亲本备用表1 侯选的”Y Y 懵 颡鱼雌鱼与正常雄鱼)c Y 后代测交的性比编号检查雌鱼雄鱼雄性率2 值P 值基因型鱼苗5 2 4 4 8 6 8 5 7 i 0 8 6 4 9 3 6 8 0 6 1 0 8 5 7 9 5 29 7 5O 2 9O 0 8 20 1 92 5 20 0 2 91 05 82 83 05 1 7 1 3 5 11 13 21 41 85 6 3 6。1 31 28 64 64 04 6 S 2 4 6 01 31 4 1 53 21 34 91 0O

18、1 72 21 33 26 8 8 1 O 6 5 3 3 1 3O 5 1 62 S1 31 24 8 0 6 7 61 73 01 31 75 6 7 5 6 31 87 43 44 05 4 1 1 5 6 2P 0 0 0 2P 0 0 0 2P 0 5 9P 1 0 0P 0 3 7P 0 6 6P 0 1 1P 1 0 0P 0 5 9P 0 0 0 2P 0 0 1 3PP 0 0 7 7P 1 0 0Y YP 0 0 1 5P 0 0 0 9 3P 0 0 1 8P 0 0 0 0 0 7 71 93 42 592 6 5 1 8 3 8P6挖您心盯骆甜弘9n均2O63坞O2鸵

19、钉M盯舛盯盱9l23矿567铲92 0 9091 0 0 0 0 0 02 18 24 04 25 1 2 1 9 5 12 22 3*2 42 5*2 6*5 32 l5 54 32 11 70OO3 62 l3 74 32 16 7 9 1 0 0 0 6 7 3 1 0 l 0 5 4 50 5 8 90 O 0 02 78 44 24 25 0 0 2 1 0 02 82 52 94 43 03 681 761 72 73 06 8 0 6 1 4 8 3 3 2 5 66 5 71 0 03 l5 72 82 95 0 9 1 3 7 53 23 35 25 32 295 7 7 8

20、 3 0 9 3 11 5 3 0 0 0 0 0 1 8P 1 0 0Y YP 0 0 0 0 0 1P 0 0 2P 1 0 0P O 0 1 5P 1 0 0P 1 0 0P 0 0 0 0 0 0 5P 0 1 1P 0 0 1P 0 3 2P 0 0 0 0 2P 0 0 0 2P 0 2 2注：，经过卡方检验，0 9 5 P 值 1 0 0，即出现理论上后代雌雄性比(0-N)概率在9 5 1 0 0 之间，侯选亲本可确认为“1 r Y”黄颡鱼雌鱼表2 侯选的”r Y 馏雄黄颡鱼与正常默雌鱼后代测交的性比编号检查鱼苗雌鱼雄鱼雄性率z 值P-值基因6 S2 84 82 41 31 4

21、7S O2 28 876 3 7 4 5 2 6 6 7 3 4 8 4 1 9 l O 1 O 3 5 5 1 0 1 3 4 21 8 6 58 0 0 02 9 3 41 0 4 5O 0 2 5 8 00 P 0 0 0 0 2PP 0 0 0 5P 0 0 0 0P 0 0 0 1P 1 0 0P 1 0 0P 0 0 0P 1 0 0Y Y1 r Y耵弘M帖惦ooo砣2291盯O28抛酡砣的n懈酡船12345 矿矿8 鲈1 0 1 11 21 3 1 4 1 S1 61 71 8 1 9 2 02 12 2*2 32 42 5*2 6 2 72 82 93 0*6 4O6 41 0

22、 O 0 02 11 01 15 2 4 4 7 67 41 85 67 5 7 4 3 8艏O艏1 0 0 S 4OS 41 0 O 0 04 S1 43 16 8 9 4 3 S5 63 22 44 2 9 1 8 2 85 22 32 95 5 8 1 0 1 73 2O3 21 O O 0 0S 80S 81 0 0 0 0 5 02 42 65 2 0 1 1 5 24 71 63 16 6 0 5 4 4O1 0 O 2 191 25 7 1 3 8 63 51 61 95 4 3 7 3 17 0O7 0l 0 0 O O1 2O1 2l 0 O O O3 01 11 96 3

23、3 4 0 35 52 62 95 2 7 1 2 2 94 82 l2 75 6 3 9 1 93 2O3 2l O O P 1 0 0P 0 0 2 9P 0 0 3 6P 1 0 0P 1 0 0P 0 0 3 6PP O 0 0 1P 1 0 0P 1 0 0P 0 0 0 0 7P 0 0 2 0P 1 0 0P 0 0 4 9P 0 0 0 6P 1 0 0P l。0 0P 0 0 4 4PP 0 0 0 2P I 0 0r YY YY YWWr YWY Y注：，经过卡方检验，0 9 5 P 值 1 0 0,即出现理论上后代雌雄性L 七(O-N)概率在9 5 1 0 0 之间，侯选

24、亲本可确认为w 黄颡鱼雄鱼表3 侯选的 W t t m 鱼雌鱼与侯选的”、Y”黄颓鳞鱼交配后代的性比8鲫眦邮m媳邮咖mmm耵9 加约n08 心1nS40O62OO0骆M均鲍盯28n1888 彬埘nn 心n 地127S961t鼍一【，rD7Bi9注：Y 表示由于测交验证数据缺失没有家系记录或子代数据缺失，”表示基因型为w 的黄颡鱼家系；，表示被保留用于建立超雄黄颡鱼繁育系组合1 3 2 Y Y 超雄黄颡鱼的小批量雌性化2 0 0 7 2 0 0 9 年期间实施了5 批用1 7 1 3 雌二醇对w 超雄黄颡鱼进行性逆转累计对5 2 2 0尾Y Y 超雄黄颡鱼进行性逆转，平均转性率达9 6，约4 0

25、 日龄统计平均成活率达8 6，共获得Y Y 生理雌性黄颡鱼4 5 6 8 尾(表4)表41 7 1 3-雌二醇对Y Y 超雄黄颡鱼转性率和成活率影响1 3 3 Y Y 超雄黄颡鱼和全雄黄颡鱼规模化繁育2 0 0 8 2 0 1 0 年累计生产超雄黄颡鱼达到1 2 3 万尾(图3)，累计生产全雄黄颡鱼达到8 1 0 0万尾(图4)，苗种雄性率高于1 0 0(表S)哑、一咖赧唧、_，咖簌6 x 1 0 75 x 1 0 74 x 1 0 73 x l0 72 x 1 0 71 0 7O2 0 0 8 年2 0 0 9 年2 0 10 年图3w 超雄黄颗鱼的规模化繁育2 0 0 8 年2 0 l o

26、 年表5 历年Y Y 超雄黄颡鱼繁育全雄黄颡鱼抽样数据统计表0 8 年0 9 年(1)2 1 08 11 11 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 00 9 年(2)0 9 年(3)0 9 年(4)0 9 年(5)0 9 年6)0 9 年(7)0 9 年(8)0 9 年(9)0 9 年(1 0)0 9 年(1 1)1 0 年(1)1 0 年(2)1 0 年(3)1 0 年(4)1 0 年(5)1 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0

27、0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0。01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 0 0 01 4 讨论1 4 1 黄颡鱼性别决定机制Y Y 超雄鱼育种技术与鱼类性别决定机制息息相关刘汉勤等(2 0 0 7)报道过利用普通雌性黄颡鱼实施了雌核发育实验，其雌核发育后代中雌性比例为9 7(n=3 4 6 3 5 7)，雄性比例为3(n=1 1 3 5 7)，由此推测黄颡鱼性别决定机制为)(Y 性别决定型【2 1 按照孟德尔遗传规律推测，理论上)(y 生理雌鱼雌核

28、发育雄性后代应该均为Y Y 基因型，可与普通雌鱼进行测交验证但本研究利用X Y 生理雌性黄颡鱼进行雌核发育，其雄性后代与普通)()(雌性进行交配，发现其测交后代雄性率分布范围为3 4 8-1 0 0 之间，其中测交后代雄性率为1 0 0 个体占所有测交后代比重只有4 0 通过大量鱼类有丝分裂和减数分裂雌核发育研究也发现雌核发育后代基因型或性别比例与理论值不一致的现象，推测鱼类性别决定机制很复杂，受)(Y或z w 性别决定控制体系、常染色体遗传因子或者环境因子等多种因子控制，如美洲白鲟(A c i p e n s e rt r o n s m o n t o n u s)i 2 2 l、鲤鱼【确

29、托瑚、美国黄金鲈(E s o xm a s q u i n o n g y)2 6 D a b r o w s k ie ta 1，2 0 0 0)、斑点叉尾鲴鲫、启罗罗嚣鱼嘲、奥利亚罗非鱼2 9 1 等由此，我们推测黄颡鱼性乳“撤鸲帖敢的躬韶弘甜盯钉别决定机制为Y 性别决定型，可能有常染色体部分基因参与了性别决定和分化，至于温度等环境因子是否影响到黄颡鱼的性别决定还有待进一步研究M a i r 等报道实现Y Y 超雄罗非鱼的模化繁育并将w 超雄鱼技术应用于水产实践中其中，w 超雄鱼与普通雌鱼交配子代平均雄性率为9 5 6，部分Y Y 超雄鱼与普通雌鱼交配的后代雄性率最高也能达到1 0 0 E

30、 g J 本研究利用筛选获得的w 超雄黄颡鱼繁育家系规模化繁育获得Y Y 超雄黄颡鱼，利用w 超雄鱼与普通雌鱼交配实现规模化生产全雄黄颡鱼，发现w 超雄鱼与普通雌鱼交配子代平均雄性率为1 0 0(至少目前抽样检查没有发现雌性个体)之所以有这样的差异，可能的原因是：本研究通过大量测交验证，分别筛选到后代均为1 0 0 雄鱼的Y Y 超雄黄颡鱼个体和w 生理雌鱼个体，然后经过Y Y 超雄黄颡鱼个体和Y Y 生理雌鱼个体交配后其后代均为1 0 0 雄鱼的配对组合得以保留规模化生产全雄黄颡鱼(其雄性率为1 0 0)，保证了全雄黄颡鱼生产的稳定性和可靠性我们推测其机制为本研究得到的超雄黄颡鱼繁育系把常染

31、色体对性别的影响降低到最低或者Y Y 超雄黄颡鱼是显性纯合子，其常染色和性染色体上有关性别分化和性别决定的基因在同一位点(1 0 c u s)上为两个相同显性等位基因，从而实现Y Y 超雄鱼与普通雌鱼交配其子代平均雄性率为1 0 0 1 4 2 Y Y 超雄鱼及其生理雌鱼能够存活而且是可育的Y Y 超雄鱼及其生理雌鱼是否能够存活和可育是制约实现w 超雄鱼繁和全雄黄颡鱼的规模化生产最为核心的内容，研究相关的内容也有助于揭示性染色体的起源和进化S c o t t等推测罗非鱼X 和Y 性染色体在进化上分化程度较低，可能导致r Y 超雄罗非鱼能够存活引不同的鱼类在性染色体的分化程度不同，鱼类Y 染色体

32、分化处于比较原始的阶段，仍然携带大量的功能基因【3 0 L 可能也是导致Y Y 超雄鱼及其生理雌鱼能够存活和可育的原因自1 9 5 3 年Y a m a m o t o 等首次成功通过雌性激素对硬骨鱼类实施雌性化性逆转以来曙_通过雌性激素从遗传雄性鱼向表型雌性鱼性逆转成功的鱼类有3 5 种之多瞰】广接术钵系堵犊完善w 基因型鱼类雌性化是实现建立Y Y 超雄鱼繁育群体最关键的一步，也是制约Y Y超雄鱼技术体系实现规模化繁育超雄鱼关键点的一步，但是一般认为r Y 幼鱼雌性化比正常)(Y 雄鱼要困难隗坷目前成功利用雌性激素性逆转r Y 超雄鱼产生可育的Y Y 生理雌鱼仅有2例的报道，且实现了w 超雄

33、鱼批量生产，如：Y Y 青鲻生理雌鱼f 3 3，3 4 1 和Y Y 罗非鱼生理雌鱼【垌目前我们利用最低剂t；为2 0 0 9 9E f f L 浸泡卤虫作为活饲料投喂开口后第S 天的Y Y 雄性黄颡鱼，平均转性率达9 6，平均成活率达8 6，转性效率高于V e r aC r u z 等的报道1 6 1，至1 3于Y Y 超雄黄颡鱼幼鱼雌性化是否比正常)(Y 雄鱼要困难需要进一步研究本研究建立了稳定可靠的Y Y 超雄黄颡鱼繁育系，实现Y Y 超雄黄颡鱼规模化繁育和全雄黄颡鱼的规模化繁育，说明Y Y 超雄黄颡鱼及其生理雌鱼能够存活而且是可育的实现r Y超雄黄颡鱼批量雌性化，这对于建立w 超雄黄颡

34、鱼和全雄黄颡鱼的规模化生产具有非常重要的意义围绕Y Y 超雄黄颡鱼及其生理雌鱼的繁殖力的初步研究揭示它们具有与普通黄颡鱼雄鱼和雌鱼相似繁殖力，它们之间是否存在显著性差异还有待进一步研究(未发表数据)同时由于W 超雄黄颡鱼及其生理雌鱼之间的近交也可能带来繁育系的生殖力衰退的可能，需要进一步研究1 4 3 全雄黄颡鱼的应用前景生产单性雄鱼有几种方法可供选择：如人工挑选、雄性激素直接诱导性逆转、种间杂交、温度调控、人工雄核发育和Y Y 超雄鱼技术等【3 5 1 其中，部分鳞科鱼类存在雄性比雌性生长快的生理特性，因此生产单雄性鱼具有较大经济价值P a r ke ta 1，(2 0 0 4)利用激素性逆

35、转获得9 0 的雄性大鳍鳢(M y s t u sm o c r o p t e r u sB l e e k e r)【3 副，但是用雄性激素诱导性逆转的方法有激素残留与污染水环境的风险林丹军等报道高温可诱导条件下实现江黄颡鱼(P s e u d o b a g r sv a c h e l l i(R i c h a r d s o n)鱼苗雄性率可达7 8【3 7 1，但是，该实验室随后用高温控制方法再次试验出现雌性化现象，雄性率仅为2 6 4【3 8】，温度调控控制鱼类性别通常不稳定，不适宜商业上大规模生产雄性近几年来，中国部分养殖户从采用人工挑选或留大剔小的办法，人工筛选淘汰雌鱼获得

36、较高雄性率的单性雄鱼，但人工挑选的劳动强度大，成本高，不能大规模地进行全雄鱼商业化生产Y Y 超雄鱼技术采取遗传学手段，无激素残留，可实现规模化生产，本研究利用Y y 超雄鱼技术实现了Y Y 超雄黄颡鱼规模化繁育和全雄黄颡鱼的规模化繁育，是除了全雄罗非鱼(G M T,g e n e t i c a l l ym a l et i l a p i a)例外另一个成功案例，Y Y 超雄鱼技术具有较大的理论价值和应用价值2 0 0 9 年中国黄颡鱼养殖产量达到1 6 3 5 5 6 吨，产值达4 2 5 亿元(人民币)，全国苗种需求约为4 9 6 亿尾，而且中国黄颡鱼养殖产量年增幅达2 1 6 5，

37、黄颡鱼已经成为中国重要的淡水养殖品种随着黄颡鱼成鱼养殖技术的日趋成熟，中国黄颡鱼的养殖业得到迅猛发展，各地对黄颡鱼苗种的需求量将大大增加，预计需求量将达到约5 0-1 0 0 亿尾以上2 0 0 8 2 0 1 0年，在湖北、湖南、广东、天津、广西、贵州、辽宁、新疆等地开展了全雄黄颡鱼中试养殖，累计提供全雄黄颡鱼苗种8 1 0 0 万尾，养殖面积累计5 1 7 0 亩，平均增产约为3 5 以上，1 4适宜中国大多数淡水水域进行池塘养殖、网箱养殖和稻田养殖(未发表数据)全雄黄颡鱼于2 0 1 0 年1 2 月通过中华人民共和国农业部审定(品种名称：黄颡鱼“全雄1号”(G S 0 4 0 0 1

38、2 0 L O)，该品种具有全雄性、规格整齐、生产速度快和产量高等优点，具有良好的市场应用前景因此，全雄黄颡鱼以其优越的养殖生产性能有望提高单位水体养殖生产产量和生产经济效益致谢：公益性行业(农业)科研专项经费项目(编号：2 0 0 9 0 3 0 4 6)、湖北省自然科学基金I 编号：2 0 0 9 C D A l 2 1，2 0 1 0 C B B 0 2 1 0 1)和农业科技成果转化资金项目(编号：2 0 1 0 G B 2 3 3 2 0 6 3 3)资助参考文献：1 农业部渔业局中国渔业年鉴北京：中国农业出版社，2 0 1 0 2 8 2 刘汉勤，崔书勤，侯昌春，徐江，陈宏溪从Y

39、雌鱼雌核发育产生Y Y 超雄黄颡鱼水生生物学报2 0 0 7，3 1(5)：7 1 8-7 2 53Y a m a m o t oTP r o g e n yo fa r t i f i c i a l l yi n d u c e ds e x-r e v e r s a l so fm a l eg e n o t y p e(X Y)i nt h em e d a k a(O r y z i o sl a t i p e s)w i t hs p e c i a lr e f e r e n c et oW-m a l e G e n e t i c S，1 9 5 5，4 0：4 0

40、6-4 1 94K a v u m p u r a t hS&P a n d i a nTJ P r o d u c t i o no fWm a l ei ng u p p y(P o e c i l i ar e t i c u l a t a)b ye n d o c r i n es e xr e v e r s a la n dp r o g e n yt e s t i n g Ja s i a nF i s hS c i，1 9 9 2，5：2 6 5-2 7 65Y a m a m o t oTAY Ym a l eg o l d f i s hf r o mm a t i n

41、 ge s t r o n e i n d u c e dX Yf e m a l ea n dn o r m a lm a l e JH e r e d，1 9 7 5，6 6：2-46G o u d i eC 八K h a nG P a r k e rN G y n o g e n e s i sa n ds e xm a n i p u l a t i o nw i t he v i d e n c ef o rf e m a l eh o m o g a m e i t yi nc h a n n e lc a t f i s h(I c t a l u r u sp u n c t

42、o t u s)1 9 8 5A n n u a lP r o g r e s sR e p o r t,1O c t-3 0S e p t，U S F W S，S o u t h e a s t e r nF i s hC u l t u r eL a b o r a t o r y,M a r i o n，A L7B a r o i l l e rJF J a l a b e r tB C o n t r i b u t i o no fr e s e a r c hi nr e p r o d u c t i v ep h y s i o l o g yt ot h ec u l t u

43、 r eo ft i l a p i a s A q u a t L i v i n gR e s o u r，1 9 8 9，2：1 0 5 1 1 68S c o t tAG P e n m a nDJ lB e a r d m o r eJ e ta i，T h e|ts u p e r-m a l ei nO r e o c h r o m i sn i l o t i c u sa n di t sp o t e n t i a lf o ra q u a c u l t u r e A q u a c u l t u r e，1 9 8 9，2 8：2 3 7-2 5 19M a

44、i rGCA b u c a yJS，S k i b i n s k iDOEe ta 1 G e n e t i cm a n i p u l a t i o no fs e xr a t i of o rt h el a r g es c a l ep r o d u c t i o no fa l l m a l et i l a p i aO r e o c h r o m i sn i l o t i c u sLC a n a d i a nJ o u r n a lo f1 5F i s h e r i e sa n dA q u a t i cS c i e n c e s，1

45、 9 9 7，S 4(2)：3 9 6 4 0 41 0V a r a d a r a jKP a n d i a nTJ F i r S tr e p o r to np r o d u c t i o no fs u p e r-m a l et i l a p i ab yi n t e g r a t i n ge n d o c r i n es e xr e v e r s a lw i t hg y n o g e n e t i ct e c h n i q u e C u r rS c i，1 9 8 9，5 8：4 3 4 4 4 11 1C h e v a s s u s

46、B，D e v a u xA，C h o u r r o u tD，e ta 1 P r o d u c t i o no fY Yr a i n b o wt r o u tm a l e sb ys e l f-f e r t i l i z a t i o no fi n d u c e dh e r m a p h r o d i t e s JH e r e d，1 9 8 8，7 9：8 9 9 21 2B o n g e r sAB 上Z a n d i e h D o u l a b iB，R i c h t e rCJ，e ta 1 V i a b l ea n d r o

47、g e n e t i cY Yg e n o t y p e so fc o m m o nc a r p C y p r i n u sc a r p i oL)JH e r e d，1 9 9 9，9 0：1 9 5 1 9 81 3K i r a n k u m a rS，A n a t h yVP a n d i a nTJ，e ta 1 H o r m o n a li n d u c t i o no fs u p e r-m a l eg o l d e nr o s yb a r ba n di s o l a t i o no fY-c h r o m o s o m es

48、 p e c i f i cm a r k e r s G e nC o m pE n d o c r i n o，2 0 0 3，1 3 4：6 2 7 11 4G e o r g etP a n d i a nT 上K a v u m p u r a t hS I n v i a b i l i t yo ft h eY Yz y g o t eo ft h ef i g h t i n gf i s h，B e t as p l e n d e n s I s r a e lJA q u a c u l t,1 9 9 4，4 6：3 81 5G e o r g etP a n d i

49、a nTJ。H o r m o n a li n d u c t i o no fs e xr e v e r s a la n dp r o g e n yt e s t i n gi nt h ez e b r ac i c h l i dC i c h l a s o m an i g r o f a s c i a t u m JE x pZ o o l，1 9 9 6，2 7 5：3 7 4-3 8 21 6V e r a C r u zEM，M a i rGC，M a r i n oRRF e m i n i z a t i o n o fg e n o t y p i c a l

50、 l yY YN i l et i l a p i aO r e o c h r o m i sn i l o t i c u sL A s i a nF i s h e r i e sS c i e n c e，1 9 9 6，9：1 6 1 1 6 71 7K a v u m p u r a t hS&P a n d i a n1：J，1 9 9 3 P r o d u c t i o no fY Yf e m a l eg u p p y(P o e c i l i ar e t i c t i l a t a)b ye n d o c r i n es e xr e v e r s a