动物学复习总结(全部).doc
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1、.绪论 实验动物科学1、实验动物科学包含的内容分为两个领域1、实验动物学实验动物2、比拟医学动物实验包括 1个研究通过人工培育或人工改造等研究3个控制对动物携带的微生物及其遗传、营养、环境等因素实行控制; 使实现动物的来源清楚,遗传背景明确; 为科学研究、教学、药品和生物制品的生产及其质量检定,以及其他科学实验提供专用的标准化实验动物。 内容包括:1、实验动物遗传育种学2、实验动物医学 3、比拟医学 4、实验动物环境生态学 5、动物实验技术2、实验用动物的分类经济动物 野生动物 欣赏动物 实验动物3、实验动物的定义 指经过人工培育和改造,对其携带的微生物、遗传及营养、环境因子实行控制,来源清楚
2、,遗传背景明确;为满足科学研究,教学,药品,生物制品的生产及检定,及其他科学实验的需要而驯养,繁殖,育成的动物。4、我国第一部实验动物法规,1988年?实验动物管理条例?卫生部2项法规?医学实验动物管理实施细那么? ?医学实验动物标准? 第二章 遗传学质量控制1. 实验动物的遗传学分类原生动物门海绵动物门腔肠动物门扁形动物门线性动物门环节动物门软体动物门节肢动物门棘皮动物门原索动物门 11 脊椎动物门2.近交系动物 (1)近交系动物的定义 3点 经连续20代以上的全同胞兄妹或亲子交配培育而成,同品系内所有个体都可追溯到起源于20代或以后的一对共同祖先的遗传群体,近交系数达98.6%,该品系称为
3、近交系。 (2)近交系动物的命名 一般以大写英文字母命名,亦可以用大写英文字母加阿拉伯数字命名,阿拉伯数字与英文字母等高,符号应尽量简短。C3H BALB/c (3)近交系动物的遗传学特性 基因纯和性同基因性表现型的均一性遗传稳定性个体性分布广泛性背景资料和数据比拟完整可分辨性 (4)近亲交配的弊端 意义:实验动物获得遗传均一性的典型方法。使用较少的近交系动物,即可到达统计学要求的精密度 同一近交系的全部动物,在遗传上相同,从而减少了表现型的变异在个体之间能相互接受皮肤和肿瘤移植弊端:在固定基因时,有害的隐性基因也会纯合,出现不利的性状而造成育种失败近交还可能导致多基因之间丧失平衡,从而使高度
4、纯化的动物对不良环境的调节适应能力降低 近交使动物失去为保持足够生物适合度所必需的最低水平的基因杂合性,从而影响动物生长率,寿命,对疾病的感受性,生活力,体力及繁殖能力。 5近交系数 Fn=1-(1-F)n n:d代数 F 每一代近交系数的上升率,连续合同胞的兄弟妹交配,每代 F=19% 举例:近交系数F20=1-1-0.1920=3.封闭群动物1.封闭群动物的定义以非近交交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群,在不从其外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上,称为一个封闭群,或叫远交群。 2.封闭群动物的命名封闭群由24个大写英文字母命名,种群名称前标明保持者的英文缩写名称,第一个字母须
5、大写,后面的字母小写,一般不超过4个字母。保持者与种群名字之间用冒号分开。Ssmu:KM 3.封闭群动物的遗传学特性基因库大,杂合率高 群体基因频率根本保持稳定 在封闭群体内,个体间差异程度主要取决于其祖代起源 封闭群动物每代近交系数上升率必须低于1%。随机交配时,至少200对4.实验动物遗传学质量控制 严格的繁育制度和遗传学质量检测1.遗传学质量检测的“四E原那么四E原那么:准确 exact、简便 easy、有效 efficient、经济 economic 2.遗传学质量检测的方法: 生化标志基因位点测定 鉴定某个品系或个体的根本方法 皮肤移植 同品系的个体间能互相接受皮肤移植(对淘气肤,旋
6、转180度)常用尾部皮肤移植法,植皮后至少观察100天,只有在100天以上植皮双方均不发生排斥,才能正式待测小鼠或大鼠的遗传纯和性。在对品系检测时,假设急性排斥占手术例数30%,须重新考虑采样,以确认是技术性还是其他原因造成的结果。两块皮肤同时长好,可能无遗传污染。两块皮肤均脱落,手术失败。两块皮肤,自体移植的正常生长,异体移植的排异脱落,说明一定发生了遗传污染。 下颌骨形态学分析下颌骨的形态是高度遗传的性状,由多态性位点确定。 毛色基因交配试验A-B-C 野生色 A-bb-C 桂皮色 aaB-C 黑色 aabbC 棕色 -cc 白化通常将待测小鼠雌鼠与有所谓基因结构的DBA/2aabbCC棕
7、色雄鼠杂交 ,根据F1的毛色确定待测小鼠主要毛色基因,检定是否纯和。如待测小鼠A、B位点是纯和的,那么杂交F1的毛色只出现一种颜色。 第三章 微生物和寄生虫学质量控制1.实验动物的微生物学和寄生虫学分类普通动物(CV)的概念普通动物须不携带主要人兽共患病原体和动物烈性传染病的病原体;通常饲养在开放环境里的动物。清洁动物CL的概念此类动物必须是不携带主要人兽共患病原体和动物烈性传染病的病原体;又不携带对动物危害大和对科学研究影响大的病原体。通常饲养在屏障环境。无特定病原体动物SPF的概念不携带主要人兽共患病原体和动物烈性传染病的病原体;又不携带对动物危害大和对科学研究影响大的病原体;还不携带主要
8、潜在感染或条件致病菌和对科学实验影响大的病原体的动物。通常饲养在屏障环境。无菌动物GF与悉生动物(GN) 的概念无菌动物:指动物体内外无可检出的一切生命体的动物。此种动物在自然界中并不存在,必须用人为的方法培育出来。通常饲养在封闭环境。悉生动物:指动物体内外携带的生命体是的。此种动物原是无菌动物,系人为的将指定微生物丛定居其体内外。2.CV 普通动物中的弓形虫污染,必须排除。动物易感染流行性仙台病毒和小鼠肝炎病毒,必须排除。动物易感染绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌,必须排除。第四章 环境对动物实验的影响1.实验动物的环境因素组成。1物理因素:温度、湿度、气流包括换气次数和压强梯度、光
9、照、噪声和空气洁净度。2化学因素:营养饲料、饮水、空气质地氨浓度、消毒剂、杀虫剂。3生物因素:同种生物间、异种生物间的影响。4居住因素:建筑设备、笼具、饲养设备、供食器、供水器等2.物理因素7项、空气质地氨浓度的根本含义照度,空气洁净度和国标要求。实验动物设施环境指标温度(1) 物理因素:温度、湿度、换气次数、气流速度、压强梯度、噪声、光照和空气洁净度。(2) 空气质地有害气体:主要来源:动物粪、尿对室内空气的污染。特征指标:氨浓度NH3,我国对有害气体的控制标准和检测工程均以氨浓度为主。(3) 照度和照度单位:勒克司LX-离1国际烛光光源1米远直角面的照度为1LX。(4) 空气洁净度是衡量空
10、气中尘埃颗粒浓度的计量单位。空气洁净度计量单位级:每立方英尺空气中含有大于等于0.5微米尘埃粒子数尘埃粒子数/ft3。国际单位:尘埃粒子数/升;1 ft3 = 级个/ft3= 个/升 大鼠对湿度要求很高,在空气相对湿度低于40%时易患环尾症。尾巴出现圆形环尾纹,初期呈现水肿,出血,皮肤坏死及脱皮,严重者尾根及尾巴成干性坏疽病变,留下永久性环行。3居住因素:1、 主要设施的类型、根本操作要求,相应的微生物和寄生虫级别动物。a.按环境净化控制程度分类:1.开放环境 Open System:室内正压,保持温度,空气洁净度不作要求。一般室内配备独立空调,用以调节温度,并设有进气风扇和排气风扇,要求室内
11、保持正压进气量排气量。一般没有空气过滤、净化装置,对操作实验人员、物品、气流等也不作单向流程要求。可饲养普通级动物或进行普通级动物实验。2.屏障环境Barrier System:空气洁净度10000级。恒温。空气通过调节形成清洁走廊、动物实验室、污染走廊和外界的空气压强梯度差20帕。屏障环境设施内动物生活环境受气候影响较小,设施内外空气由专门通道送入和排出。屏障环境空气实施过滤净化,送入内部区域的空气洁净度要求到达10000级。恒温处理后的空气通过调节形成清洁走廊、动物实验室、污染走廊和外界的空气压强梯度差20帕。操作人员穿戴灭菌衣帽鞋和手套、口罩,并遵循单向流程进、出。饲料、垫料、笼器具等动
12、物生产和实验所需物品必须进行灭菌。有条件的地方实行电脑监控。在屏障环境设施内可以进行SPF级或清洁级动物饲养和实验。3.隔离环境Isolation System:空气经过超高效过滤滤过率达99.97%,静态空气洁净度为100级。恒温恒湿。正压100-150帕。隔离环境动物实验设施是在普通环境下利用专用动物实验隔离器Isolator进行动物饲养和动物实验。隔离器内送入和排出的空气都经过超高效过滤到达99.97%滤过率,静态空气洁净度为100级。操作人员通过透明薄膜或有机玻璃进行观察,通过附设在隔离器上的手套进行实验和饲养操作。物品经过严密包装、高压灭菌传入,而温湿度需要室内空调或中央空调控制调节
13、。b.按设施用途和主要功能分类:实验动物生成设施,动物实验设施,特殊动物实验设施。2、屏障环境操作要求人员、物品、气流等 人员走向 物品走向 “箭头指向不可逆行n 人员移动路线(双走廊或三走廊式) 脱衣更衣室1穿衣更衣室2淋浴风淋清洁走廊饲养室或动物实验室污染走廊更衣外部区域n 物品的移动路线(双走廊或三走廊式) 物品高压蒸汽灭菌器传递窗 清洁走廊动物实验室污染走廊外部区域 渡槽 n 动物的移动路线(双走廊或三走廊式) 外来动物传递窗检疫室或健康动物观察室清洁走廊动物实验室污染走廊外部区域n 空气的流动路线(双走廊或三走廊式) 清洁走廊动物实验室污染走廊外部区域压力依次递减20Pa4 .居住因
14、素: 主要设备的结构、工作原理和环境控制原理屏障设施中的一般饲养设备、层流架、IVC、隔离器、根本操作要求,相应的微生物和寄生虫级别动物。(1) 不锈钢平板架+塑料饲育盒:用途:啮齿类动物实验观察。对环境要求:安放在屏障系统内,可到达清洁级标准。(2) 不锈钢兔笼+托盘:用途:兔子、豚鼠等动物实验观察。对环境要求:安放在屏障系统内,可到达清洁级标准。(3) 自动水冲式不锈钢兔笼架:用途:兔子、豚鼠等动物实验观察。对环境要求:安放在开放环境内,可到达普通级标准。(4) 消化笼、代谢笼:动物实验中定量收集粪尿。(5) 洁净层流柜Laminar Air Flow Rack,层流架:层流架可看作是一个
15、小型屏障系统,是一种动物实验饲育的专用设备。层流架通过连续送入高效过滤空气,在动物饲养层内及玻璃移门前相应范围形成20帕以上的正压,为实验动物提供并保持了平安、洁净、舒适的清洁级或SPF级生活环境,尤其适合进行各种啮齿类动物实验。结构:层流架主要由送风机、空气过滤系统、动物饲养层和控制指示系统等局部组成。一般层流架设有操作层,双体层流架还配有操作台和物品储藏室。工作原理:以36型层流架为例:室内恒温空气由送风机从进风口吸入,经初效过滤膜、中效过滤袋、高效过滤器三级过滤,洁净空气进入静压仓,再送入各个动物饲养层;废气通过回风槽聚集后,经位于顶端的排风口集中排出室外。层流架的风量、风速和换气次数可
16、以通过控制面板上的调速器进行调节。根本操作要求:有关动物饲养和动物实验的操作都应在层流架操作层或配套超净工作台内行。 饲养和实验所需的物品如笼具、饮水瓶、实验器械等必须进行灭菌处理。 饲料可选用小包装真空Co60辐照灭菌料。 6 独立通气笼盒系统Individually Ventilated Cages,简称IVC: IVC是一种新型的动物饲育和动物实验设备。 IVC主要由笼盒、笼架和控制机箱等三局部组成。 动物饲养和动物实验操作在配套设备-超净工作台中进行。 7 无菌隔离器:是一个相对封闭的环境,内部保持正压100-150帕斯卡,静态环境隔离器室内空气洁净度到达100级。隔离器只需放置于一般
17、干净室内,对环境要求相对低。室内空气经超高效滤过,由送风机送入隔离器室。动物饲养和根本实验操作通过附着于隔离器上的手套进行。微生物级别 饲育环境要求普通动物 开放环境清洁动物 屏障环境、层流架、IVC无特定病原体动物 屏障环境、层流架、IVC无菌动物及悉生动物 隔离环境隔离器5.生物因素:1同种生物-掌握群内地位分类; A群内地位:直线型-即地位上下呈一、二、三单个直线排列,如猴、兔、犬和猪;专制型-即经过争夺,产生一个首领,其余动物地位根本不分上下,如猫、鼠。 B.性别影响:雄性成年动物好斗,撕咬打斗等。用成年雄性动物做实验,陌生动物个体在一起往往会引起斗殴,尤以犬、猴、小鼠中的津白1号多见
18、,有条件应当单个饲养。室笼、盒内饲养动物过多,会造成局部温度过高,有害气体浓度增加并积聚不散,动物容易患病死亡,并导致打斗、撕咬。在有条件的情况下,动物实验以单只盒笼养为好,尤其是大动物、肿瘤接种动物和成年雄性动物。2动物性别和饲养密度对实验的影响。饲养密度不同,会使动物的实验反响产生差异,传染病的发生率随饲养密度的增加而上升。局部温度过高,废气多,潮湿,饲料缺乏,易打斗。书P56 表4-5第 五 章 饲料营养对实验动物的影响1. 动物的营养和食性;营养-动物从外界摄取自身所需要的食物,经消化、吸收,用来维持生命活动的行为或作用。食性-因消化器官结构和生理功能上的差异,动物对选择食物的不同习性
19、。标准化饲料-根据不同动物的营养需求和动物的食性,经人工配合、加工而成的营养全面、适口性好、符合微生物要求的饲料。2. 掌握实验动物饲料概略养分的组成。饲料分为:有机饲料:蛋白质、脂肪、碳水化合物无氮浸出物、粗纤维、维生素。 无机饲料:水分、灰分无机盐。3. 熟悉草食、杂食、肉食动物对某些营养成分的需求量的区别。 脂肪、蛋白质:草食动物杂食动物杂食动物肉食动物 4.了解各类动物常规营养要求,掌握各种动物对营养的特殊要求。特殊营养要求:大小鼠 大鼠和小鼠对营养需要大致相同。 粗蛋白质要求在20%以上,消化能15910KJ/kg。 为提高繁育母鼠的受孕率,饲料中应有足够的维生素E。 大小鼠自身能够
20、合成维生素C,无须在饲料中特意添加。豚 鼠 属草食动物,怀孕期长,成熟较晚。饲料粗蛋白含量要求20%左右。 由于盲肠兴旺,能有效地消化利用粗纤维,饲料粗纤维在16%左右。 豚鼠体内不能合成维生素C,必须在饲料中添加。兔 子 亦属草食动物。兔饲料中粗纤维含量不低于15%,粗蛋白质比例也在15%左右。 一般兔饲料中参加一定量的干草,以提高粗纤维百分比,这对防止兔腹泻这种常见病是至关重要的。 兔子有“食粪癖。犬 属于肉食动物,饲料中粗蛋白含量要求到达25-30%,而粗纤维相比照例低一些。 犬对维生素A、D、B1、B2需要量较大。猴 属于非人灵长类,食性与人相近,对营养要求比拟高。 一般以面粉、豆粉、
21、玉米粉、鸡蛋、食盐等制成饼干作为主食。 猴饲料中粗蛋白质含量占24-26%左右。猴对维生素C特别敏感,如果缺乏可造成牙龈出血,精神萎靡,长期缺乏或缺乏会导致死亡。 每天定量供应新鲜水果和蔬菜,或在主食中参加维生素添加剂,可以防止猴维生素缺乏症的产生。 5.实验动物的饮水要求一般要求、灭菌要求、酸化要求。 水质要求:城市饮用水三级标准 净化处理:过滤;净水 酸化处理:用盐酸将饮水pH调整到,抑制细菌的生长 灭菌处理:普通级动物可直接给饮自来水,清洁级以上实验动物将自来水瓶装后,进行灭菌处理。6.掌握物品饲料、饮水等主要灭菌方法。 消毒-主要用化学方法在一般环境中抑制或杀死微生物 灭菌-在特殊包装
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