基因工程的工具课件(1).ppt

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1、基因工程基因工程操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程结果结果生物体外生物体外基因基因分子水平分子水平剪切剪切拼接拼接导入导入表达表达人类需要的基因产物人类需要的基因产物基因拼接技术或基因拼接技术或DNADNA重组技术重组技术实质：实质：基因重组基因重组（二）基因操作的工具（二）基因操作的工具、基因的剪刀、基因的剪刀限制性内切酶（限制酶）限制性内切酶（限制酶）一种限制酶只能一种限制酶只能识别一种特定的核苷识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的酸序列，并在特定的切割点上将切割点上将DNA DNA 分子分子切断。切断。指一类酶，非一种酶。指一类酶，非一种酶。1、限制性内切酶

2、（3）.举例：大大肠肠杆杆菌菌的的一一种种限限制制酶酶能能识别识别GAATTCGAATTC序列，并在序列，并在G G和和A A之间切开。之间切开。（1 1）作用部位：磷酸二酯键）作用部位：磷酸二酯键（2）特点：专一性，即识别特定核苷专一性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。酸序列，切割特定切点。（4）来源：主要从原核生物中分离）来源：主要从原核生物中分离 原因：原因：限制酶是在生物体限制酶是在生物体(主要是主要是微生物微生物)内的一种酶，能将外来的内的一种酶，能将外来的DNA切断切断，对自，对自己己DNA无害，保护细胞原有遗传信息，由于无害，保护细胞原有遗传信息，由于这种切割作用是在这种切割

3、作用是在DNA分子内部进行的，故分子内部进行的，故名限制性内切酶。名限制性内切酶。而真核生物一般有其他保护措施。而真核生物一般有其他保护措施。（5）作用结果：形成）作用结果：形成DNA片段末端片段末端平末端：平切（相同部位）平末端：平切（相同部位）黏性末端：错位切（不同部位）黏性末端：错位切（不同部位）解析：解析：（1）对象：供体细胞的）对象：供体细胞的DNA和质粒都和质粒都要用限制酶处理。要用限制酶处理。（2）限制酶作用的位点是磷酸二酯，）限制酶作用的位点是磷酸二酯，而不是碱基之间的氢键而不是碱基之间的氢键。什么叫黏性末端？什么叫黏性末端？被限制酶切开的被限制酶切开的DNA两条单链的切口，两

4、条单链的切口，带有几个带有几个伸出的核苷酸伸出的核苷酸，他们之间正好，他们之间正好互互补配对，补配对，这样的切口叫这样的切口叫黏性末端黏性末端。比较1限制酶与解旋酶有什么区别？【分析】限制酶主要作用于两个核苷酸之间的磷酸二磷酸二酯键酯键，而解旋，而解旋酶酶主要主要作用于碱基作用于碱基对对之之间间的的氢键氢键（如（如图图所示）所示）。a处为限制酶作用位点，b处则为解旋酶作用位点。重播重播1.要想获得某个特定性状的基因必须要用限制要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？酶切几个切口？可产生几个黏性末端？要切两个切口，产生四个黏性末端。要切两个切口，产生四个黏性末端。

5、2.如果把两种来源不同的如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶用同一种限制酶来切割，会怎样呢？来切割，会怎样呢？会产生会产生相同的黏性末端相同的黏性末端，然后让两者的，然后让两者的黏性末端黏性末端黏合黏合起来，就可以合成重组的起来，就可以合成重组的DNA分子了。分子了。拓展深化拓展深化:重重播播、基因的针线、基因的针线DNADNA连接酶连接酶（1）连接的部位连接的部位：DNA双链片段间的双链片段间的磷酸二酯键，不是氢键。磷酸二酯键，不是氢键。比较2：DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNADNA聚合酶聚合酶DNADNA连接酶连接酶化学本质化学本质作用部位作用部位模板模板蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质

6、磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键（单个脱氧核（单个脱氧核（单个脱氧核（单个脱氧核苷酸苷酸苷酸苷酸+片段）片段）片段）片段）磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键（DNADNA双链片段双链片段双链片段双链片段+DNADNA双链片段）双链片段）双链片段）双链片段）需要（需要（需要（需要（DNADNA一条链）一条链）一条链）一条链）不需要不需要思考：思考：1.1.细菌的基因之所以能细菌的基因之所以能“嫁接嫁接”到棉花细胞到棉花细胞内，原因是内，原因是 。组成细菌和棉花的组成细菌和棉花的DNADNA分子的分子的空间结构空间结构和和化学组成化学组成相同相同 2.利用基因工程培育抗虫棉，与诱变育

7、种利用基因工程培育抗虫棉，与诱变育种和杂交育种相比，有什么优点？是属于哪和杂交育种相比，有什么优点？是属于哪种变异？种变异？3 3.抗虫棉能抗病吗？抗虫棉能抗病吗？知识小结知识小结几种酶的比较几种酶的比较限制酶限制酶DNADNA连接酶连接酶DNADNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶作用底物作用底物DNADNA分子分子DNADNA分子片段分子片段脱氧核苷酸脱氧核苷酸DNADNA分子分子作用部位作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的碱基对间的氢键氢键作用结果作用结果形成粘性末端或形成粘性末端或平末端平末端形成重组形成重组DNADNA分子链分子链形成新的形成新的DN

8、ADNA分子分子形成单链形成单链DNADNA分子分子作用特点作用特点切割目的基因及切割目的基因及载体，专一性识载体，专一性识别特定的核苷酸别特定的核苷酸序列，使特定部序列，使特定部位的两个核苷酸位的两个核苷酸之间的磷酸二酯之间的磷酸二酯键断开键断开将双链将双链DNADNA片片段段“缝合缝合”起起来，恢复被限来，恢复被限制酶切开的两制酶切开的两个核苷酸之间个核苷酸之间的磷酸二酯键的磷酸二酯键只能将单个只能将单个脱氧核苷酸脱氧核苷酸添加到脱氧添加到脱氧核苷酸链上核苷酸链上将将DNADNA两条链两条链之间的氢键之间的氢键打开打开3 3、基因的运输工具、基因的运输工具运载体运载体3.3.种类：种类：质

9、粒质粒、噬菌体和动植物病毒。、噬菌体和动植物病毒。1.1.作用：作用：将外源基因送入受体细胞。将外源基因送入受体细胞。2.2.条件：条件：1)1)能在宿主细胞内复制并稳定地保存。能在宿主细胞内复制并稳定地保存。2)2)具有一个至多个限制酶切点，使外源基具有一个至多个限制酶切点，使外源基因插入其中。因插入其中。3)3)具有某些标记基因，以便进行筛选。具有某些标记基因，以便进行筛选。如抗如抗如抗如抗菌素抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。菌素抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。菌素抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。菌素抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。4)4)对受体细胞无害，不影响其正常活动。

10、对受体细胞无害，不影响其正常活动。运载体最常用的运载体最常用的运载体-质粒质粒三、基因操作的基本步骤三、基因操作的基本步骤v1、提取目的基因、提取目的基因v2、目的基因与运载体结合、目的基因与运载体结合v3、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞v4、目的基因的检测和表达、目的基因的检测和表达1 1、提取目的基因、提取目的基因取出取出取出取出DNADNADNADNA用限制酶用限制酶用限制酶用限制酶切断切断切断切断DNADNADNADNA目前被较广泛提取使用的目前被较广泛提取使用的目前被较广泛提取使用的目前被较广泛提取使用的目的基因有：目的基因有：目的基因有：目的基因有：苏云金杆菌抗虫基

11、因、苏云金杆菌抗虫基因、苏云金杆菌抗虫基因、苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人胰岛素基因、人胰岛素基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、人干扰素基因、人干扰素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、种子贮藏蛋白基因、种子贮藏蛋白基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。植物抗病基因等。植物抗病基因等。植物抗病基因等。(1)(1)目的基因的概念：目的基因的概念：人们需要的特定基因。人们需要的特定基因。基因文库：储存某种生物基因的菌群的基因文库：储存某种生物基因的菌群的总总 称，不是指生物基因。称，不是指生物基因。基因组文库：某个含有所有基因的受体基因组文库：某个含有所有基因的受体菌。指某个个体。菌。指

12、某个个体。部分基因文库（部分基因文库（cDNA文库）：某个含有文库）：某个含有部分基因的受体菌。部分基因的受体菌。基因库：一个种群所有基因的总称，指基因库：一个种群所有基因的总称，指基因。基因。途径途径供体细胞中的供体细胞中的DNADNA中直接分离基因中直接分离基因人工合成基因（真核细胞）人工合成基因（真核细胞）方法方法根据已知氨基酸根据已知氨基酸序列合成序列合成DNADNA过程过程供体细胞中的供体细胞中的DNADNA 限制酶限制酶许多许多DNADNA片段片段 载入载入运载体运载体 导入导入受体细胞受体细胞 外源外源DNADNA扩增扩增,产生特定性状产生特定性状 分离分离 目的基因目的基因目的

13、基因目的基因mRNAmRNA 反转录反转录单链单链DNADNA 合成合成双链双链DNA(DNA(即目的基因即目的基因)蛋白质的氨基酸序蛋白质的氨基酸序列列 推测推测mRNAmRNA的核苷酸序列的核苷酸序列 推测推测结构基因的核苷酸结构基因的核苷酸序列序列 化学合成化学合成目的基因目的基因鸟枪法鸟枪法反转录法反转录法4）目的基因的扩增：）目的基因的扩增：PCR技术技术原理：原理：DNA复制复制结果：目的基因成指数增长结果：目的基因成指数增长步骤：变性（解旋为单链）步骤：变性（解旋为单链）+引物，退火，引物，退火，延伸（延伸（DNA聚合酶作用），多次重复聚合酶作用），多次重复原料：原料：DNA模板

14、、模板、4种脱氧核苷酸、引物、种脱氧核苷酸、引物、DNA聚合酶、聚合酶、ATP复制方向：只能从复制方向：只能从5端向端向3端延伸端延伸原因：原因：DNA聚合酶不能从头开始合成聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从，而只能从3端延伸端延伸DNA链。链。2 2、目的基因与运载体结合、目的基因与运载体结合-核心步骤核心步骤运载体和表达载体的运载体和表达载体的区别：区别：表达载体的组成：表达载体的组成：目的基因目的基因+启动子启动子+终止子终止子+标记基因标记基因运载体即质粒运载体即质粒表达载体即重组质粒表达载体即重组质粒（2 2）受体种类不同，导入方法不同）受体种类不同，导入方法不同导入植物细胞：导

15、入植物细胞：（卵细胞和体细胞（卵细胞和体细胞都可以）都可以）农杆菌转化法农杆菌转化法基因枪法、花粉管通道法基因枪法、花粉管通道法农杆菌转化法：农杆菌转化法：双子叶植物受伤时，伤口分泌的酚类化合物，双子叶植物受伤时，伤口分泌的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞并进入细胞，将吸引农杆菌移向这些细胞并进入细胞，将目的基因整合到受体细胞染色体目的基因整合到受体细胞染色体DNADNA上。上。受体细胞：细菌受体细胞：细菌细胞壁的通透性增大细胞壁的通透性增大重组质粒进入受体细胞重组质粒进入受体细胞目的基因随受体细胞的繁殖而复制目的基因随受体细胞的繁殖而复制氯化钙氯化钙导入动物细胞导入动物细胞-显微注射法，将

16、目的基因显微注射法，将目的基因注射到卵细胞中，受精后，胚胎移植。注射到卵细胞中，受精后，胚胎移植。导入微生物细胞导入微生物细胞-感受态细胞法感受态细胞法4 4、目的基因的检测和表达、目的基因的检测和表达（1）检测：）检测：通过检测标记基因的有无，来判断目的基因是否导入通过检测标记基因的有无，来判断目的基因是否导入DNADNA分子杂交法：分子杂交法：检测染色体检测染色体DNADNA分子是否插入目的基因分子是否插入目的基因或者目的基因是否转录出或者目的基因是否转录出RNARNA免疫法：免疫法：提取蛋白质用相应的抗体进行提取蛋白质用相应的抗体进行抗体抗体抗原杂交抗原杂交从苏云金芽苞杆菌中提取从苏云金

17、芽苞杆菌中提取抗虫基因抗虫基因从土壤农杆菌中提取带从土壤农杆菌中提取带有选择性标记的质粒有选择性标记的质粒同一种限制同一种限制酶处理酶处理抗虫基因与质粒结合形成抗虫基因与质粒结合形成重组质粒重组质粒将重组质粒导入土壤农杆菌将重组质粒导入土壤农杆菌筛选筛选将土壤农杆菌与棉花将土壤农杆菌与棉花细胞混合培养细胞混合培养侵侵染染重组质粒将抗虫基因导重组质粒将抗虫基因导入棉花细胞并整合到棉入棉花细胞并整合到棉花的花的DNA上上植物组织培养植物组织培养获得抗虫棉获得抗虫棉总结抗总结抗虫棉的培育流程图：虫棉的培育流程图：异想天开异想天开二二、动物基因工程前景广阔、动物基因工程前景广阔（一）用于提高动物生长速

18、度（一）用于提高动物生长速度动物品种改良、建立生物反应器、器官移植等动物品种改良、建立生物反应器、器官移植等导入外源生长激素基因导入外源生长激素基因DNADNA分子杂交分子杂交是基因诊断最基本的方法之一。是基因诊断最基本的方法之一。当用一段已知基因的核苷酸序列作为当用一段已知基因的核苷酸序列作为探针探针，与被测基因进行接触，若两者的碱基完全配与被测基因进行接触，若两者的碱基完全配对成双链，则表明被测基因中含有已知的基对成双链，则表明被测基因中含有已知的基因序列。因序列。知识回顾：基因诊断知识回顾：基因诊断五、基因芯片五、基因芯片 从正常人的基因组中分离出从正常人的基因组中分离出DNADNA与与

19、DNADNA芯片杂交就芯片杂交就可以得出标准图谱；从病人的基因组中分离出可以得出标准图谱；从病人的基因组中分离出DNADNA与与DNADNA芯片杂交就可以得出病变图谱。芯片杂交就可以得出病变图谱。通过比较、分析这两种图谱，就可以得出病变的通过比较、分析这两种图谱，就可以得出病变的DNADNA信息。信息。基因芯片诊断技术以其快速、高效、敏感、经济、基因芯片诊断技术以其快速、高效、敏感、经济、平行化、自动化等特点，将成为一项现代化诊断新平行化、自动化等特点，将成为一项现代化诊断新技术。技术。1、基因治疗概念：基因治疗概念：四四、基因治疗曙光初照、基因治疗曙光初照 把把正常基因正常基因导入病人体内，

20、使该基因的表达导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到产物发挥功能，从而达到治疗疾病治疗疾病的目的，是治的目的，是治疗疗遗传病遗传病的最有效的手段。的最有效的手段。（把特定的（把特定的（把特定的（把特定的外源基因导入有基因缺陷的细胞外源基因导入有基因缺陷的细胞外源基因导入有基因缺陷的细胞外源基因导入有基因缺陷的细胞中，中，中，中，从而达到治疗疾病的目的）从而达到治疗疾病的目的）从而达到治疗疾病的目的）从而达到治疗疾病的目的）2、实例：、实例：将将腺苷酸脱氨酶基因腺苷酸脱氨酶基因转入取自患者的淋转入取自患者的淋巴细胞中，再将这种淋巴细胞转入患者体内。巴细胞中，再将这种淋巴细胞转入患者体

21、内。(1)对严重复合型免疫缺陷症的治疗对严重复合型免疫缺陷症的治疗3 3、基因治疗的类型、基因治疗的类型体外基因治疗体外基因治疗：先从病人体内获得某种细：先从病人体内获得某种细胞，进行培养，然后在胞，进行培养，然后在体外完成基因转移体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。新输入患者体内。体内基因治疗体内基因治疗：直接向人体组织细胞中转移：直接向人体组织细胞中转移的治病方法。（如将治疗囊性纤维病的正常的治病方法。（如将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者肺组织）基因转入患者肺组织）4 4、基因治疗的发展现状：、基因治疗的发展现状：处于

22、初期的临床处于初期的临床试验阶段试验阶段5 5、用于基因治疗的基因种类：正常基因、用于基因治疗的基因种类：正常基因、反义基因和自杀基因反义基因和自杀基因总结：基因工程在农业上的应用总结：基因工程在农业上的应用（1 1）改良农作物的改良农作物的品质品质（培育高产、稳产和具优良品质的品种）（培育高产、稳产和具优良品质的品种）（2 2）培育抗逆性品种）培育抗逆性品种 将细菌的抗虫、抗病毒、抗除草剂、抗盐碱、将细菌的抗虫、抗病毒、抗除草剂、抗盐碱、抗干旱、抗高温等抗性基因转移到作物体内，抗干旱、抗高温等抗性基因转移到作物体内，将从根本上改变作物的特性。如转基因抗虫棉。将从根本上改变作物的特性。如转基因

23、抗虫棉。（三）用转基因的动物生产药物（三）用转基因的动物生产药物设问设问设问设问:就基因药物而言，最理想的表达场所是哪里？就基因药物而言，最理想的表达场所是哪里？就基因药物而言，最理想的表达场所是哪里？就基因药物而言，最理想的表达场所是哪里？转基因动物的转基因动物的乳腺乳腺。（1 1）乳腺是一个外分泌器官，乳汁不进入）乳腺是一个外分泌器官，乳汁不进入体内循环，不会影响转基因动物本身的生理体内循环，不会影响转基因动物本身的生理代谢反应。代谢反应。（2 2）从乳汁中获取目的基因产物，产量高，）从乳汁中获取目的基因产物，产量高，易提纯，表达的蛋白质已经过充分的修饰加易提纯，表达的蛋白质已经过充分的修

24、饰加工，具有稳定的生物活性。工，具有稳定的生物活性。（3 3）从乳汁中源源不断获得目的基因的产）从乳汁中源源不断获得目的基因的产物的同时，转基因动物又可无限繁殖。物的同时，转基因动物又可无限繁殖。设问设问:为什么乳腺能成为基因药物最理想的为什么乳腺能成为基因药物最理想的表达场所呢？表达场所呢？将将 基因与基因与 等等调控组件重组在一起，通过调控组件重组在一起，通过 等方法，等方法，导入哺乳动物的导入哺乳动物的 中，将中，将 其其 送入母体，送入母体，使其发育成转基因动物。转基因动物进入泌使其发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁生产所需要的药乳期后，可以通过分泌乳汁生产所需

25、要的药品，称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。品，称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。乳腺生物反应器乳腺生物反应器乳腺生物反应器的优点：乳腺生物反应器的优点：产量高；产量高；质量好；质量好；成本低；成本低；易提取。易提取。药物蛋白药物蛋白乳腺蛋白基因的启动子乳腺蛋白基因的启动子显微注射显微注射受精卵受精卵利用微生物生产药物的优越性何在利用微生物生产药物的优越性何在?利用微生物生产蛋白质类药物，是指将人们需利用微生物生产蛋白质类药物，是指将人们需要的某种蛋白质的编码基因，构建成表达载体要的某种蛋白质的编码基因，构建成表达载体后导入微生物，然后利用微生物发酵来生产蛋后导入微生物，然后利用微生物发酵

26、来生产蛋白质类药物。有以下优越性：白质类药物。有以下优越性：（1 1）利用活细胞作为表达系统，）利用活细胞作为表达系统，表达效率表达效率高，高，无需大型装置和大面积厂房就可以生产出大量无需大型装置和大面积厂房就可以生产出大量药品。（药品。（2 2）可以解决传统制药中原料来源的可以解决传统制药中原料来源的不足不足。利用基因工程菌发酵生产就不需要从动。利用基因工程菌发酵生产就不需要从动物或人体上获取原料。（物或人体上获取原料。（3 3）降低生产成本降低生产成本，减少生产人员和管理人员。减少生产人员和管理人员。（四）用转基因动物作器官移植的供体（四）用转基因动物作器官移植的供体利用基因工程对猪的器官

27、进行改造利用基因工程对猪的器官进行改造方法：方法：将器官供体基因组导入将器官供体基因组导入 ，以抑制的以抑制的 表达或设法除去表达或设法除去 ，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官反应的转基因克隆猪器官某种调节因子某种调节因子抗原决定基因抗原决定基因抗原决定基因抗原决定基因转基因生物有利的一面转基因生物有利的一面 改改变变传传统统的的育育种种方方式式缩缩短短育育种种时时间间。培培育育出出高高产产优优质质、抗抗病病虫虫害害、抗抗旱旱、抗抗盐盐碱碱，抗抗除除草草剂剂等等特特性的作物新品种。性的作物新品种。克克服服异异源源、远远源源杂杂交交障障

28、碍碍。如如可可以以把把动动物物的的基基因，甚至人的基因组合到植物里去。因，甚至人的基因组合到植物里去。生产有利于健康和抗病的食品。生产有利于健康和抗病的食品。培育出符合人们意愿的动物新品种。培育出符合人们意愿的动物新品种。高考总复习高考总复习生物生物 有有些些转转基基因因食食物物含含的的一一些些物物质质，可可能能会会影影响响人人体健康。体健康。大大量量的的转转基基因因生生物物进进入入自自然然界界后后很很可可能能会会与与野野生生物物种种进进行行杂杂交交，产产生生一一些些超超级级生生物物，从从而而造造成成基基因因污污染。染。如如有有些些作作物物插插入入抗抗虫虫基基因因，杀杀死死环环境境中中有有益益

29、的的生生物。物。基因工程的弊端基因工程的弊端高考总复习高考总复习生物生物小小 结结基因工程的基本内容 基因操作的基本步骤 基因操作的工具限制性内切酶限制性内切酶限制性内切酶限制性内切酶DNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶运载体运载体运载体运载体目的基因与运载体结合目的基因与运载体结合目的基因与运载体结合目的基因与运载体结合目的基因的检测和表达目的基因的检测和表达目的基因的检测和表达目的基因的检测和表达将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞目的基因的提取目的基因的提取目的基因的提取目的基因的提取例题：为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐

30、碱地例题：为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。水稻新品系。（1 1）获得耐盐基因后，构建重组）获得耐盐基因后，构建重组DNADNA分子分子所用的限制性内切酶作用于图中的所用的限制性内切酶作用于图中的 处，处，DNADNA连接酶作用于连接酶作用于 处。（填处。（填“a”a”或或“b”b”）（2 2）将重组）将重组DNADNA分子导入水稻受体细胞的分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和常用方法有农杆菌转化法和 法。法。（3 3）由导入目的基因的水稻细胞培养成

31、植株需）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用要利用 技术，该技术的核心是技术，该技术的核心是 和和 。（4 4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的素标记的 做探针进行分子杂做探针进行分子杂交检测，又要用交检测，又要用 方法从个体水平方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。鉴定水稻植株的耐盐性。aa基因枪法（花粉管通道法）基因枪法（花粉管通道法）植物组织培养植物组织培养脱分化（去分化）脱分化（去分化）再分化再分化耐盐基因（目的基因）耐盐基因（目的基因）一定浓度盐水浇灌一定浓度盐水浇灌（移植到盐碱地中）（移植到盐碱地中）