2015年生物化学与分子生物学重点掌握内容.pdf

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1、第 一 章 蛋白质的结构与功能1、蛋白质的基本组成单位和平均含氮量。基本组成单位为氨基酸。组成蛋白质的元素：主要有c、H、0、N 和 S。有些蛋白质还含有少量的 P、F e、C u、Mn、Zn、S e、I 等。各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16%2、20种氨基酸的结构及三字母英文缩写。(P9)含羟基的氨基酸：S e r、T y r、T hr,其易被磷酸化。含硫的氨基酸：半胱氨酸(-S H)、胱氨酸、蛋 氨 酸(-S C H3,又叫甲硫氨酸)。芳香族氨基酸：T y r、T r p、Phe天冬酰胺、谷氨酰胺：酰胺基团(Y0NH2)腼氨酸：属于亚氨基酸(-NH-)酸性氨基酸：A sp、G l u碱

2、性氨基酸：A r g、Ly s、Hi s3、氨基酸的理化性质。氨基酸具有两性解离的性质：等电点(i soe l e c tr i c poi nt,pl)在某一 pH 的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。含共辄双键的氨基酸具有紫外线吸收性质：测定蛋白质溶液28 0nm 的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。氨基酸与荀三酮反应生成蓝紫色化合物，最大吸收峰在57 0nm 处。4、蛋白质一级、二级、三级和四级结构的概念及维系其稳定的化学键。氨基酸的排列顺序决定蛋白质的一级结构(pr i m ar y str

3、uc tur e of pr ote i n)：指蛋白质多肽链从N-端至C-端的氨基酸残基排列顺序，即氨基酸的线性序列。在基因编码的蛋白质中，这种序列是由m R NA 中的核甘酸序列决定的。一级结构主要的化学键：肽键多肽链的局部主链构象为蛋白质二级结构(se c ond ar y str uc tur e of pr ote i n)：蛋白质分子中某段肽链的局部空间结构，即该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，不涉及氨基酸残基侧链的构象。维系二级结构的化学键：氢键三级结构是指整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置，即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。主要的化学键次级键。疏水作用、离子键、氢 键

4、、V an d e r W aal s力。含有二条以上多肽链的蛋白质才可能具有四级结构：蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用，称为蛋白质的四级结构。亚基之间的结合力主要是氢键和离子键-非共价键5、肽单元和蛋白质二级结构的主要类型。肽单元：参与肽键的6 个原子C a 1、C、0、N、I I、Ca 2 位于同一平面，此同一平面上的6个原子构成了所谓的肽单元(p e p t i d e u n i t)。这一平面又被称为肽平面(p e p t i d e p la n e)或酰胺平面(a m i d e p la n e)。肽单元是肽链折叠盘曲的基本单位。二级结构的类型：a-螺

5、旋、B-折叠、B-转 角、无规卷曲6、蛋白质超二级结构、模体、结构域、亚基、蛋白质等电点的概念。超二级结构：在许多蛋白质分子中，可发现二个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个有规则的二级结构组合，被称为超二级结构。模体：是蛋白质分子中具有特定空间构象和特定功能的结构成分，其中一类就是具有特殊功能的超二级结构。一个模体总有其特征性的氨基酸序列，并发挥特殊的功能。结构域：分子量较大的蛋白质常可折叠成多个结构较为紧密且稳定的区域，并各行其功能，称为结构域亚 基(subunit)：有些蛋白质分子含有二条或多条多肽链，每一条多肽链都有完整的三级结构，称为蛋白质的亚基。单独的亚基一般没有生

6、物学功能。蛋白质等电点：在某一 pH值溶液中，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH值称为蛋白质的等电点(isoelectric point,p l)o7、蛋白质变性的概念及影响因素。概念：在某些物理和化学因素作用下，蛋白质特定的空间构象被破坏，即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。本质：空间构象破坏，次级键(非共价键和二硫键)断裂；一级结构不变，肽键不断裂。影响因素：物理因素：高温、高压、紫外线、剧烈振荡。化学因素：强酸、强碱、有机溶剂、生物碱、尿素及重金属离子等。8、蛋白质沉淀及维持蛋白质胶体溶液的稳定因素。蛋白质

7、沉淀：在一定条件下，蛋白质的水化层被破坏，使蛋白疏水侧链暴露在外，肽链融会相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。变性的蛋白质易于沉淀，有时蛋白质发生沉淀，但并不变性。维持蛋白质胶体溶液的稳定因素：水化膜、蛋白质胶体颗粒表面电荷。熟悉 氨基酸的 分 类(P 8),肽的概念和基本结构(P 1 1),生物活性肽(P 1 1),蛋白质一级结构和空间结构与蛋白质功能之间的关系(P13)。氨基酸和蛋白质的紫外吸收作用(280nm)。第 二 章 核 酸 的结构与功能1、核酸的基本组成单位和核酸的水解产物：核酸是以核甘酸(n u cleo tid e)为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。核酸的水解产

8、物是磷酸、戊糖和碱基。2、核酸分子中核昔酸的连接方式：核甘酸之间通过3,5-磷酸二酯键相连,构成多聚核背酸链。3、D N A 和R N A 的一级结构和基本组成单位：核酸的一级结构是核苜酸的排列顺序。DNA的基本组成单位是脱氧核糖核甘酸，RNA的基本组成单位是核糖核甘酸4、D N A 二级结构双螺旋结构的特点：LDNA山两条多聚脱氧核苜酸链组成2.脱氧核糖与磷酸位于外侧3.DNA双链之间形成了互补碱基对4.碱基对的疏水作用力和氢键共同维持着DNA双螺旋结构的稳定5、基因和基因组的概念：基 因(g en e)：指携带遗传信息的DNA区段，其中的核甘酸排列顺序决定了基因的功能。基 因 组(geno

9、m e)：指生物体的所有编码RNA和蛋白质的序列及所有的非编码序列，即DNA的全部核音酸序列。6、m R N A、tRNA、rRNA 的结构特点及功能：mRNA:l.真核生物mRNA的5、端有特殊帽结构2.真核生物mRNA的3、末端有多聚腺甘酸尾3.mRNA碱基序列决定蛋白质的氨基酸序列mRNA：R 3(末端为一CCA-OH 2、含1020%稀有碱基3、其二级结构呈“三叶草形”4.tRNA的反密码子能够识别mRNA密码子rRNA：rRNA的结构为花状，rRNA与核糖体蛋白结合组成核糖体(ribosome),为蛋白质的合成提供场所。rRNA单独存在不执行其功能。7、核酶的概念：催化性小RNA亦被

10、称为核能(ribozyme),是细胞内具有催化功能的一类小分子R N A,具有催化特定RNA降解的活性，在RNA的剪接修饰中具有重要作用。8、核酸的紫外吸收作用：紫外吸收A260nm,单核甘酸AssDNA dsDNA。DNA纯品：A260/A280=L8RNA纯品：A260/A280=2.09、D N A 的变性与复性：DNA变性(denaturation)是指在某些理化因素(温度、pH、离子强度等)作用下，DNA双链的互补碱基对之间的氢键断裂，解开成两条单链的现象。DNA变性的本质是双链间氢键的断裂，只改变其二级结构，不改变其核甘酸排列顺序。在去除变性因10、11、12、13、14、15、1

11、6、17、18、19、素，并在适当条件下，变性DNA的两条互补单链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性(renaturation)。10、DNA的增色效应和解链温度的概念：增色效应(hyperchromic effect):在DNA解链过程中，由于有更多的共甄双键得以暴露，DNA在260nm处的吸光度随之增加。在解链过程中，紫外吸光度的变化 A260达到最大变化值的一半时所对应的温度称为DNA的解链温度(融解温度)，又称Tm。其大小与G+C含量成正比。熟悉：DNA的超螺旋结构(P43)核酸的分子杂交(P53)。第三章酶1、酶：酶是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质

12、，是机体内催化代谢反应最主要的催化剂。2、单纯酶：有些酶其分子结构仅由氨基酸残基组成，没有辅助因子。这类酶称为单纯酶(simple enzyme)。3、结合酶：结 合 酶(conjugated enzyme)是除了在其组成中含有由氨基酸组成的蛋白质部分外，还含有非蛋白质部分。酣的分子组成，醐蛋白和辅因子的作用。4 必需基团：必需基团(essential group)酶分子氨基酸残基侧链的化学基团中，一些与酶活性密切相关的化学基团。5、酶活性中心的概念：酶的活性中心或活性部位(activesite)是酶分子中能与底物特异地结合并催化底物转变为产物的具有特定三维结构的区域。6、同工酶的概念：同工酶

13、(isoenzyme/,aisaifenzaim/)是指催化相同的化学反应，但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一 组酣。7、酶促反应的特点：1、酶促反应具有极高的效率:2、酶促反应具有高度的特异性3、酶促反应具有可调节性4、酶促反应高度的不稳定性8、酶促反应特异性的类型：绝对特异性(absolute specificity)：只能作用于特定结构的底物，进行一种专-的反应，生成一种特定结构的产物。相对特异性(relative specificity)：作用于一类化合物或一种化学键。9、影响酶促反应速度的因素：酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。10、米氏方程及Km的意义

14、：v=vmaxs/(km+s)S：底 物 浓 度 V：不同S时的反应速度 Vmax：最大反应速度(maximum velocity)Km：米氏常数(Michaelis constant)1.Km值等于能促反应速率为最大反应速率一半时的底物浓度2.Km值是酷的特征性常数3.Km在一定条件下可表示酶对底物的亲和力.Km越大，表示酶对底物的亲和力越小；K m越小，表示酶对底物的亲和力越大。4.Vmax是酶被底物完全饱和时的反应速率11、不可逆抑制作用：抑制剂以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活。12、可逆性抑制作用：竞争性抑制作用：抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争结合酶的活性中心，从而

15、阻碍酶底物复合物的形成，使酶活性受到抑制，称为竞争性抑制作用。抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力和与底物浓度的相对比例。非竞争性抑制作用有些抑制剂与酶活性中心外的必需基团相结合，不影响酶与底物的结合，酶和底物的结合也不影响醐与抑制剂的结合。底物和抑制剂之间无竞争关系。但醐-底物-抑制剂复合物(ESI)不能进一步释放出产物。这种抑制作用称作非竞争性抑制作用。反竞争性抑制作用：抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物(ES)结合，使中间产物ES的量下降。这样，既减少从中间产物转化为产物的量，也同时减少从中间产物解离出游离酶和底物的量。这种抑制作用称为反竞争性抑制作用。1 3、变构酶：一些代谢物可与某些酶

16、分子活性中心外的某部分非共价可逆结合，使酶构象改变，从而改变酶的活性，此种调节方式称别构调节，又称变构调节(allosteric regulation)。受变构调节的酶称变构酶(allosteric enzyme)。1 4、酶原与酶原激活：醐原(zymogen)：有些能在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，此前体物质称为酶原。酶原的激活：在一定条件下，酶原向有活性醐转化的过程称为醐原的激活。酶原的激活实际上是酶的活性中心形成或暴露的过程。15、全酶的组成：前蛋白决定反应的特异性辅因子决定反应的种类与性质 熟悉 辅因子与金属离子和维生素之间的关系(P5 6-5 7)。酶促反应机理诱导契合学说

17、(P6 1)o第五章维生素和无机盐1、维生素的定义和分类：维生素(vitamin)是人体内不能合成，或合成量甚少、不能满足机体的需要，必须由食物供给，维持正常生命活动过程所必需的一组低分子量有机化合物。分类：脂溶性维生素(lipid-soluble vitamin)、水溶性维生素(water-soluble vitamin)：B族维生素和维生素C。2、B 族维生素：B 1：维生素B1形成辅酶焦磷酸硫胺素；TPP是 a-酮酸氧化脱竣酶的辅酶，在反应中转移醛基；TPP也是转酮酣的辅酷，参与转糖醛基反应。维生素B1缺乏可引起脚气病 B2：维生素B2是FAD和FMN的组成成分；FMN和FAD是体内氧化

18、还原酶的辅基；维生素B2缺乏病是一种常见的营养缺乏病PP：维生素PP是NAD+和NADP+的组成成分；NAD+和NADP+是多种不需氧脱氢酶的辅酶；维生素PP缺乏可引起癞皮病泛酸：泛酸是辅酶A和酰基载体蛋白的组成成分：辅醐A和酰基我体蛋白参与酰基转移反应；泛酸缺乏可引起各种胃肠功能障碍等疾病生物素：生物素是多种竣化的的辅基；生物素参与细胞信号转导和基因表达：生物素缺乏也可诱发机体不适 B 6：维生素B6包括毗哆醇、毗哆醛和毗哆胺，体内活性形式磷酸毗哆醛和磷酸毗哆胺；磷酸毗哆醛的辅酶作用多种多样；维生素B6过量可引起中毒叶酸：四氢叶酸是叶酸的活性形式；四氢叶酸是碳单位的载体；叶酸缺乏可导致巨幼红

19、细胞性贫血B 1 2：维生素B12又叫钻胺素(cobalamin/kaubo:1amin/),是唯一含有金属元素的维生.素，仅山微生物合成。体内活性形式是甲基钻胺素和已脱氧腺背钻胺素。维生素B12影响一碳单位的代谢和脂肪酸的合成。维生素B12缺乏可导致巨幼红细胞性贫血等多种疾病3、维生素C的性质与功能：维生素C又称L-抗坏血酸(ascorbic acid),是L-己糖酸内酯，具有不饱和的一烯二醇结构，具有酸性和较强的还原性。维生素C是对热不稳定的酸性物质，维生素C既是一些羟化酶的辅酶又是强抗氧化剂，维生素C具有增强机体免疫力的作用，维生素C严重缺乏可引起坏血病。熟悉 辅酶在酶促反应中的作用，脂

20、溶性维生素的作用，维生素缺乏症。第六章 糖代谢1.糖分解代谢的主要途径。糖分解代谢分为糖的无氧氧化、糖的有氧氧化、磷酸戊糖途径。2.糖 酵 解（概念，反应部位，反应过程，关键酶及限速酶，主要反应步骤，生理意义）。概念：一分子葡萄糖在胞液中可裂解为两分子丙酮酸，是葡萄糖无氧氧化和有氧氧化的共同起始途径，称为糖酵解（glycolysis/glaikolisis/）反应部位：胞液。反应过程：葡萄糖磷酸化为葡糖-6-磷 酸（G-6-P）、葡糖-6-磷酸转变为果糖-6-磷酸（F-6-P）、果糖-6-磷酸转变为果糖-1,6-二磷酸（F-1.6-BP）、果糖-1,6-二磷酸裂解成2 分子磷酸丙糖、磷酸二羟丙

21、酮转变为3-磷酸甘油醛、3-磷酸甘油醛氧化为1,3-二磷酸甘油酸、1,3-二磷酸甘油酸转变成3-磷酸甘油酸、3-磷酸甘油酸转变为2-磷酸甘油酸、2-磷酸甘油酸脱水生成磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）、磷酸烯醇式丙酮酸将高能磷酸基转移给ADP生成ATP和丙酮酸、丙酮酸被还原为乳酸关键酶及限速酶：己糖激酶 磷酸果糖激酚-1（最重要，为限速酶）丙酮酸激酚生理意义：1.糖无氧氧化最主要的生理意义在于迅速提供能量，这对肌收缩更为重要。2.是某些细胞在氧供应正常情况下的重要供能途径。3.底物水平磷酸化的概念及有关反应。底物分子内部能量重新分布，生成高能键，使 ADP磷酸化生成ATP的过程，称为底物水平磷酸化（s

22、ubstrate level phosphorylation）。糖酵解的第七步1,3-二磷酸甘油酸转变成3-磷酸甘油酸产生ATP的过程为该形式。4.糖有氧氧化（概念，反应阶段，进行部位，关键酶，丙酮酸脱氢酶复合体的组成及作用，三竣酸循环的概念、反应过程、生理意义，有氧氧化过程中ATP的生成概念：机体利用氧将葡萄糖彻底氧化成H 20和 C 0 2的反应过程，称为糖的有氧氧化。反应阶段：第一阶段：糖酵解；第二阶段：丙酮酸的氧化脱竣（丙酮酸进入线粒体氧化脱竣生成乙酰CoA）；第三阶段：三竣酸循环。关键酶：糖酵解：己糖激酶、磷酸果糖激酶-1（限速的）、丙酮酸激酶 丙酮酸的氧化脱竣：丙酮酸脱氧酶复合体

23、三按酸循环：柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶（限速酶）、a-酮戊二酸脱氢酶复合体丙酮酸脱氢酶复合体的组成及作用：组成：三种酶：E1：丙 酮 酸 脱 翅 酶（12个）、E2：二氢硫辛酰胺转乙酰酶（60个）、E3：二氢硫辛酰胺脱氢酶（6 个）。五种辅酶：TPP、硫辛酸、FAD、NAD+、CoA 作用：催化丙酮酸在线粒体中经过五步反应氧化脱竣生成乙酰CoA部位：胞液及线粒体三装酸循环的概念：乙酰CoA和草酰乙酸缩合生成含三个竣基的柠檬酸，反复的进行脱氧脱竣，又生成草酰乙酸的过程。三酸酸循环的反应过程：乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸；柠檬酸经顺乌头酸转变为异柠檬酸；异柠檬酸氧化脱段转变为a-酮戊二酸；a-

24、酮戊二酸氧化脱竣生成琥珀酰CoA；琥珀酰CoA合成酶催化底物水平磷酸化反应；琥珀酸脱氢生成延胡索酸；延胡索酸加水生成苹果酸；苹果酸脱氢生成草酰乙酸生理意义：1.柠檬酸循环是三大营养物质分解产能的共同通路2.柠檬酸循环是糖、脂肪、氨基酸代谢联系的枢纽3.柠檬酸循环为其他物质合成代谢提供小分子前体有氧氧化过程中ATP的生成：由 1 分子葡萄糖总共获30或 32 ATP5.磷酸戊糖途径（概念，反应部位，限速酶及生理意义）。概念：是指从糖酵解的中间产物葡糖-6-磷酸开始形成旁路，通过氧化、基团转移两个阶段生成果糖-6-磷酸和3-磷酸甘油醛，从而返回糖酵解的代谢途径反应部位：胞液 限速酶：葡糖-6-磷酸

25、脱氢酶（NADP+）生理意义：为核甘酸的合成提供核糖-5-磷酸；提供NADPH+H+作为供氢体参与多种代谢反应6.糖原合成与分解（概念，反应过程，限速酶，肌糖原与肝糖原分解的不同点）。概念：指由葡萄糖合成糖原的过程。糖原合成时，葡萄糖先活化，再连接形成直链和支链。反应过程：（一）葡萄糖活化为尿甘二磷酸葡萄糖：1.葡萄糖磷酸化生成葡糖-6-磷酸2.葡糖-6-磷酸转变成葡糖-1-磷酸 3.葡糖-1-磷酸转变成尿甘二磷酸葡萄糖（二）尿甘二磷酸葡萄糖连接形成直链和支链 4.a4-糖首键式结合 5.糖原分支的形成肌糖原与肝糖原分解的不同点：肌糖原分解的前三步反应与肝糖原分解过程相同，但是生成 G-6-P

26、之后，由于肌肉组织中不存在葡糖-6-磷酸酶，所以生成的G-6-P不能转变成葡萄糖释放入血，提供血糖，而只能进入酵解途径进一步代谢。限速酶：糖原合酶7.糖 异 生（概念、原料、组织和细胞定位，反应过程，关键酶，生理意义概念：糖异生（gluconeogenesis）是指从非糖化合物转变为葡萄糖或糖原的过程原料：主要有乳酸、甘油、生糖氨基酸组织和细胞定位：主要在肝、肾细胞的胞浆及线粒体反应过程：（一）丙酮酸经丙酮酸竣化支路生成磷酸烯静式丙酮酸（-）果糖-1,6-二磷酸转变为果糖-6-磷酸（三）葡糖-6-磷酸水解为葡萄糖关键酶：葡糖-6-磷酸酶、果糖二磷酸酶-1、丙酮酸竣化酶、磷酸烯醇式丙酮酸竣激酶生

27、理意义：（）维持血糖恒定是糖异生最重要的生理作用（二）糖异生是补充或恢复肝糖原储备的重要途径（三）肾糖异生增强有利于维持酸碱平衡8.乳酸循环（概念及生理意义）。概念：肌肉通过糖无氧氧化产生的乳酸，经血液进入肝脏而糖异生为葡萄糖，葡萄糖释入血液后又可被肌摄取，这种乳酸、葡萄糖在肌肉、肝脏组织间的循环互变称为乳酸循环（lactatecycle,Cori cycle）生理意义：防止乳酸堆积引起酸中毒避免乳酸的浪费（有利于乳酸的再利用）促进肝糖原的不断更新9.2,3-BPG 支路。红细胞内的糖酵解过程中，1,3-二磷酸甘油酸（1,3-BPG）经 2,3-二磷酸甘油酸（2,3-BPG）转变为 3-磷酸甘

28、油酸的途径，称为2,3-BPG旁路。该过程需二磷酸甘油酸变位酶（BPGM）和2,3-BPG磷酸酶（BPGP）催化。2,3-BPG功能：降低Hb对氧的亲和力。1 0.血糖及其调节（血糖的概念，正常人空腹血糖的水平，血糖来源和去路，激素对血糖水平的调节）。血糖的概念：血液中葡萄糖称为血糖。正常人空腹血糖的水平：3.89 6.11mmol/L（邻甲苯胺法）血糖来源：食物糖在小肠内消化吸收、肝糖原在肝内分解、非糖物质在肝和肾内糖异生 血糖去路：氧化供能、合成糖原、转变为脂肪、非必需氨基酸、转变成其它糖及衍生物、血糖 8.9mmol/L形成尿糖 激素对血糖水平的调节：降低血糖：胰岛素 升高血糖：胰高血糖

29、素（glucagon）；糖皮质激素；肾上腺素【熟悉】糖的生理功能（P1 1 1）,糖酵解的调节（P U 5）,巴斯德效应（P1 2 5）。血糖水平异常（P1 3 9）o 糖化血红蛋白（P1 4 0）。糖的消化吸收（P1 1 2）。第七章 脂质代谢1 .必需脂肪酸的概念及其种类。人体需要，但又不能合成，必需从食物中获得的脂肪酸。人体的必需脂肪酸包括亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸。2.脂肪动员（概念及过程，激素敏感性脂肪酶的概念和作用，脂解激素和抗脂解激素）。概念：储存于脂肪细胞中的脂肪，在三种脂肪酶作用下逐步水解为游离脂肪酸（FFA）和甘油，并释放入血供其他组织氧化利用的过程，称脂肪动员。甘油三酯脂

30、肪醐是脂肪动员的限速酶。过程:甘油三酯脂肪能催化甘油三酯分解产生的甘油二酯被甘油二酯脂肪能进一步水解产生脂肪酸和甘油一脂，甘油一脂被甘油一脂脂肪酶水解生成甘油和脂肪酸。激素敏感性脂肪酶的概念和作用：甘油三酯脂肪醐是脂肪动员的限速酶，其活性受多种激素调节，故称激素敏感性脂肪酶。有水解甘油三酯的作用。脂解激素：增加脂肪动员限速酶活性，促进脂肪动员的激素。胰高血糖素、肾上腺素、去甲肾上素、促肾上腺皮质激素、促甲状腺素等。对抗脂解激素因子：抑制脂肪动员。胰岛素、前列腺素E2、烟酸。3 .甘油的代谢。甘油转变为3-磷酸甘油后被利用，在甘油激醐的作用下甘油转变为3-磷酸甘油，然后脱氢生成磷酸二羟丙酮，循糖

31、代谢途径分解或转变为葡萄糖。4 .脂 肪 酸 的 氧 化。P-氧化是脂肪酸分解的核心过程脂肪酸氧化的定义：脂肪酸在胞液中活化成脂酰C o A,在肉碱帮助下进入线粒体基质进行B-氧化，每次B-氧化可产生1 分子乙酰CoA、1 分子FADH2、1 分子NADH和比原来少两个碳原子的脂酰C o A,偶数碳脂肪酸最终产生乙酰C o A,奇数碳脂肪酸除乙酰CoA外，还 有 1分子丙酰CoA。部位：脑和成熟红细胞不行。肝脏、肌肉最重要。亚细胞：胞液、线粒体过程：（1）脂肪酸的活化（胞液）（2）脂酰CoA进入线粒体（3）脂酰CoA的 6-氧 化（线粒体）5 .酮 体（概念，酮体的生成、利用及意义）。概念：脂

32、肪酸在肝脏中不完全氧化的产物乙酰乙酸、B-羟丁酸和丙酮三者的总称为酮体。酮体的生成：酮体在肝生成：肝脏的线粒体；原料：乙酰CoA；限速酶：HMGCoA合 酶（羟甲基戊二酸单酰辅酶A 合酶）利用：酮体在肝外组织氧化利用，利用部位：心、肾、脑、骨 骼 肌（线粒体）；利用酮体的酶:琥珀酰CoA转 硫 酶（心、肾、脑、骨骼肌），乙酰乙酰CoA硫 解 酶（心、肾、脑、骨骼肌），乙酰乙酸硫激酶（心、肾、脑）意义：1.在饥饿、运动条件下，酮体是脑组织和肌肉的主要能源。2.酮体利用的增加可减少糖的利用，有利于维持血糖水平恒定，节省蛋白质的消耗。6.内源性脂肪酸的合成代谢（原料，部位，限速酶）。原料：乙酰CoA

33、（主要来自糖代谢）NADPH+H+（供氢体）ATP、HCO3-（CO2）,Mn2+、生物素部位：胞液：1 6 碳的软脂酸合成的场所。肝线粒体、内质网：碳链延长。限速酶：乙酰C o A 竣化醐7 .甘油三脂的合成代谢。不同来源脂肪酸在不同器官以不完全相同的途径合成甘油三酯（一）肝、脂肪组织及小肠是甘油三酯合成的主要场所（二）甘油和脂肪酸是合成甘油三酯的基本原料（三）甘油三酯合成有甘油酯和甘油二酯两条途径8 .磷脂的种类、功能及组成特点组成：磷 脂（p h o s p h o l i p i d s）由甘油或鞘氨醇、脂肪酸、磷酸和含氮化合物组成。种类：甘油磷脂：由甘油构成的磷脂（体内含量最多）鞘磷

34、脂：由鞘氨醇构成的磷脂功能：磷脂是重要的结构成分和信息分子：磷脂是构成生物膜的重要成分；磷脂酰肌静是第二信使的前提9 .胆固醇的 合 成（部位、原料、限速酶、重要的反应步骤及调节），胆固醇在体内的转化。体内胆固醇合成的主要场所是肝，乙酰C o A 和 N A D P H 是胆固醇合成基木原料，胆固醇合成由以H M G-C o A 还原能为关键前的一 系列醐促反应完成重要的反应步骤：1.由乙酰C o A 合成甲羟戊酸（胞液），2.甲羟戊酸经1 5 碳化合物转变成 3 0 碳鲨烯，3.鲨烯环化为羊毛固醇后转变为胆固醉（内质网）调节：胆固醇合成通过H M G-C o A 还原酶调节胆固醇在体内的转化

35、：转化为胆汁酸是胆固醇的主要去路1 0 .血浆脂蛋白（分类及组成特点，合成部位及功能，载脂蛋白概念及功能）。CM VLDL_LDL_HDL密度 小干扰 RNA(small interfering RNA,siRNA)是细胞内一类双链 RNA(double-strandedRNA,dsRNA)在特定情况下通过一定酶切机制，转变为具有特定长度(2123个碱基)和特定序列的小片段RNA。由siRNA介导的基因表达抑制作用被称为RNA干涉。第二十章 常用分子学技术的原理及其应用1、分子杂交 有互补特定核甘酸序列的单链DNA或 RNA混在一起时，其相应同源区段将会退火形成双链结构。2、DNA变性是指核酸

36、双螺旋碱基对的氢键断裂，双链变成单链3、DNA复性指变性DNA在适当条件下，二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。4、探 针(Probe):一段带有检测标记的与目的基因或目的DNA特异互补的已知核甘酸序列。5、印迹技术的类别及应用 DNA印 迹(Southern blotting)用于DNA的定性定量分析。RNA印 迹(Northern blotting)用于RNA的定性定量分析。蛋白质的印迹(Westernblotting)用于蛋白质定性定量及相互作用研究。6、PCR技术：在体外模拟体内DNA的复制过程复制DNA。步骤：变性、退火和延伸。7、基因文库(gen

37、e lib rary)是指一个包含了某一生物体全部DNA序列的克隆群体。分为基因组 DNA 文 库(genomic DNA library)和 cDNA 文库(cDNA library)8、基因组DNA文库 基因组DNA文库是指生物的基因组DNA的信息(包括所有的编码区和非编码区)以DNA片段形式贮存的克隆群体。9、cDNA文库 cDNA文库是包含某一组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA经逆转录而合成的cDNA序列的克隆群体，它以cDNA片段的形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。第二H 一章 DNA重组及重组DNA技术1、DNA重 组(DNA recombination)是指不同DNA分子

38、断裂和连接而产生DNA片段的交换并重新组合形成新DNA分子的过程。2、重组DNA技 术(recombinant DNA technology)是指在体外将两个或两个以上DNA分子重新组合并在适当细胞中增殖形成新DNA分子的过程。3、发生在同源序列间的重组称为同源重组(homologous recombination),又称基本重组(general recombination)是最基本的DNA重组方式，通过链的断裂和再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换。4、位点特异重组(site-specific recombination)是由整合酶催化，在两个DNA序列的特异位点间发生

39、的整合。5、可移动的DNA序列包括插入序列和转座子。由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)。6 插入序列(insertion sequences,IS)组成：二个分离的反向重复(inverted repeats,IR)序列特有的正向重复序列-一个转座前(transposase)编码基因7、转座形式保守性转座和复制性转座8、转座子组成：反向重复序列转座酶编码基因抗生素抗性等有用的基因9、接合作用 当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质 粒 DNA从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌)的DNA转移称为接合作用(conjugation)。10、转导作用 当

40、病毒从被感染的(供体)细胞释放出来、再次感染另一(供体)细胞时，发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用(transduction)。11、转 化 作 用 通过自动获取或人为地供给外源DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，称为转化作用(transfonnation)o12、克隆(clone):来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。13、限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶(restriction endonuclease,RE)是一类核酸内切酶，能识别双链DNA分子内部的特异序列，并裂解磷酸二酯键。分 为 I、II、ID型。切口：平端切口、粘端切口14、载体为携带目

41、的基因，实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。按功能分为克隆裁体和表达载体。15、克隆载体应具备的基本特点 自主复制至少有一个选择标志有适宜的R E的单一切点16、DNA重组技术的基本原理目的基因的获取克隆载体的选择和构建外源基因与载体的连接DNA导入受体细胞重组体的筛选克隆基因的表达17、重组DNA转入受体细胞转化、转染和感染18、重组体的筛选与鉴定R E的切法PCR法核酸杂交法DNA测序法 蓝白筛选第二十三章 癌基因、肿瘤抑制因子与生长因子1、癌基因 基因组内正常存在的基因，其编码产物通常作为正调控信号，促进细胞的增殖和生长。癌基因的突变或表达异常是细胞恶性转化(癌变)

42、的重要原因。癌基因又被称为细胞癌基因或原癌基因。存在于病毒中的被称为病毒癌基因2、癌基因 活 化 的 机 制 获得启动子与增强子染色体易位基因扩增点突变甲基化程度降低(去甲基化)而激活(DNA甲基化与基因表达呈反比关系。甲基化程度高，基因表达则降低。去甲基化，可使基因激活，表达增加。)3、肿瘤抑制基因 是调节细胞正常生长和增殖的基因4、生长因子 一类由细胞分泌的、类似于激素的信号分子，多数为肽类(含蛋白类)物质，具有调节细胞生长与分化的作用。5、生长因子与心血管疾病 原发性高血压动脉粥样硬化心肌肥厚第二十五章基因诊断和基因治疗1、基因 诊 断 是指利用分子生物学技术和方法直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对疾病作出诊断的方法。2、基因 治 疗 是以改变人遗传物质为基础的生物医学治疗，即通过一定方式将人正常基因或有治疗作用的DNA片段导入人体靶细胞以矫正或置换致病基因的治疗方法。第二十六章组学与医学1、基因组学2、转录组学3、蛋白组学阐明整个基因组的结构、结构和功能关系以及基因之间相互作用的科学。在整体水平上研究细胞编码基因转录情况及转录调控规律的科学以蛋白质为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态规律的一门科学。