2015年生物化学与分子生物学.pdf
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1、478华 南 理 工 大 学 2007年 攻 读 硕 士 学 位 研 究 生 入 学 考 试 试 卷(试 卷 上 做 答 无 效,请 在 答 题 纸 上 做 答,试 后 本 卷 必 须 与 答 题 纸 一 同 交 回)科 目 名 称:生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 适 用 专 业:微 生 物 学 生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 共 6 页 j一.选 择 题(从 备 选 答 案 中 选 出 一 个 正 确 的 答 案,把 答 案 代 码 填 在 答 题 纸 上,每 小 题 1.5分,共 3 0分)1 反 转 录 酶 除 了 有 以 R N A为 模 板 生 成 RNA-DNA杂
2、交 分 子 的 功 能 外,还 有 下 列 活 性()A D N A聚 合 酶 和 RNase A B D N A聚 合 酶 和 S 1核 酸 酶 C D N A聚 合 酶 和 RNase H D S 1核 酸 酶 和 RNaseH2 竣 肽 酶 含 有 的 金 属 离 子 是()A 镁 B 锌 C 铜 D 铁 5、在 pH 10时 的 谷 氨 酸 溶 液 中,下 列 哪 一 种 结 构 形 式 占 优 势?A 竣 基 氨 基 都 解 离:B 竣 基 氨 基 都 不 解 离;C 只 a 段 基 解 离;D 只 Y一 段 基 解 离;E。一 竣 基 Y竣 基 都 解 离。18.A 型 D N A
3、和 B 型 D N A产 生 差 别 的 原 因 是:A.A 型 D N A是 双 链,B 型 D N A是 单 链 C B.A型 D N A是 右 旋,B 型 D N A是 左 旋 C.A 型 D N A与 B 型 DNA碱 基 组 成 不 同 E D.两 者 的 结 晶 状 态 不 同|磷 酸 甘 油 的 来 源 有 两 个,一 是 甘 油 磷 酸 化,二 是 由 磷 酸 二 羟 丙 酮 还 原 产 生 2008 1 7如 果 D N A沿 3,一 5,合 成,那 它 则 需 以 5,三 磷 酸 或 3,脱 氧 核 昔 三 磷 酸 为 末 端 的 链 作 为 前 体。(Y)1 8.转 录
4、因 子 具 有 独 立 的 D N A结 合 和 转 录 激 活 结 构 域。(Y)第 1 页20.已 知 某 一 内 切 核 酸 酶 在 一 环 状 DNA上 有 3个 切 点,因 此,用 此 酶 切 割 该 环 状 DNA,可 得 到 三 个 片 断。(Y)21.根 据 某 一 感 兴 趣 蛋 白 质 的 序 列、抗 原 性 以 及 配 基 结 合 性 质 制 备 探 针,可 从 DNA文 库 筛 选 到 相 应 的 基 因。(Y)3-个 酶 有 多 种 底 物,判 断 其 底 物 专 一 性 强 弱 应 依 据 参 数()A Kcat B Km C Kcat/Km D 其 它 4 胸 腺
5、 嗒 啜 除 了 是 D N A的 主 要 组 份 外,它 还 经 常 出 现 在 有 些 R N A分 子 中,它 是:()A snRNA B tRNA C mRNA D 5S rRNA5 噂 吟 霉 素 的 作 用 是()A 抑 制 D N A合 成 C 抑 制 蛋 白 质 合 成 的 延 伸 B 抑 制 R N A合 成 D 抑 制 蛋 白 质 合 成 的 终 止 6 D N A分 子 上 被 依 赖 于 D N A的 R N A聚 合 酶 特 异 识 别 的 顺 式 元 件 是()A 弱 化 子 B 操 纵 子 C 启 动 子 D 终 止 子 7 组 蛋 白 的 修 饰 可 引 起 核
6、 小 体 的 解 离,这 种 修 饰 是(A 甲 基 化 B 腺 甘 化 C 磷 酸 化)D 糖 基 化 8 蛋 白 质 形 成 三 级 结 构 的 驱 动 力 是:A 范 德 华 力 B 疏 水 作 用()C 氢 键 D 离 子 键 9 利 用 羟 基 磷 灰 石 分 离 提 纯 蛋 白 质 是 属 于()A 离 子 交 换 层 析 B 吸 附 层 析 C 亲 和 层 析 D 分 子 筛 层 析。1 0下 述 哪 种 方 法 不 适 合 用 来 测 定 核 酸 分 子 的 大 小 及 其 分 子 量()A 电 镜 测 量 法 B 沉 降 分 析 法 C 粘 度 法 D 吸 咐 层 析 法。1
7、 1今 有 A,B,C,D四 种 蛋 白 质,其 分 子 体 积 山 大 到 小 的 顺 序 是 ABCD,在 凝 胶 过 滤 柱 层 析 过 程 中,最 先 洗 脱 出 来 的 蛋 白 质 一 般 应 该 是()AA,B B,C C,D D12生 物 体 内 甲 基 的 直 接 供 体 是()AS-腺 甘 蛋 氨 酸 B 半 胱 氨 酸 C 蛋 氨 酸 D 牛 磺 酸 1 3如 果 要 测 定 一 个 小 肽 的 氨 基 酸 顺 序,下 列 试 剂 中 选 择 一 个 你 认 为 最 合 适 的()A 的 三 酮 BCNBr C 胰 蛋 白 酶 D 异 硫 氟 酸 苯 酯 1 4有 个 天
8、然 肽 的 氨 基 酸 顺 序 为:Pro-Ala-Phe-Arg-Ser,你 要 证 实 N 端 第 二 位 A la的 存 在,最 好 的 试 剂 是()A FDNB B PTTC C 无 水 册 D 竣 肽 酶 1 5在 天 然 蛋 白 质 组 成 中 常 见 的 一 个 氨 基 酸,它 的 侧 链 在 pH7.2和 pH 13都 带 电 荷,这 个 氨 基 酸 是()A 谷 氨 酸 B 组 氨 酸 C 酪 氨 酸 D 精 氨 酸 1 6某 蛋 白 质 p l为 7.5,在 pH 6.0的 缓 冲 液 中 进 行 自 由 界 面 电 泳,其 泳 动 方 向 为()A 原 点 不 动 B
9、向 正 极 泳 动 C 向 负 极 泳 动 1 7在 接 近 中 性 的 p H的 条 件 下,下 列 哪 种 基 团 既 可 以 为 H+的 受 体,也 可 为 H+的 供 体()A His-咪 啤 基 B L y s-e-氨 基 C Arg-呱 基 D Cys-筑 基 1 8测 定 蛋 白 质 在 D N A上 的 结 合 部 位 常 用()方 法 AW estern印 迹 B PCR C 限 制 性 图 谱 分 析 D D N asel保 护 足 印 分 析 1 9人 细 胞 D N A含 2.9X 1()9碱 基 对,其 双 螺 旋 的 总 长 度 约 为()A 990mm B 580
10、mm C 290mm D 950mm20 DN A拓 扑 异 构 酶 I 型(转 轴 前)和 n 型(旋 转 酶)的 主 要 差 别 在 于()A I型 使 D N A的 一 条 链 发 生 断 裂 和 再 连 接,而 I I型 使 D N A的 两 条 链 同 时 发 生 断 裂 和 再 连 接 B I 型 使 D N A的 两 条 链 同 时 发 生 断 裂 和 再 连 接,而 H 型 使 D N A的 一 条 链 发 生 断 裂 和 再 连 接 C I 型 和 I I型 都 是 使 D N A的 一 条 链 发 生 断 裂 和 再 连 接,但 前 者 催 化 反 应 不 需 ATP,后
11、者 需 要 ATP提 供 能 量 D I型 和 II型 都 是 使 DNA的 两 条 链 同 时 发 生 断 裂 和 再 连 接,但 前 者 催 化 反 应 不 需 ATP,后 者 需 要 ATP提 供 能 量 二、填 空(共 3 0分,把 答 案 填 在 答 题 纸 上。)1将 丙 氨 酸 溶 液 400m l调 节 到 p H 8.0,然 后 向 该 溶 液 中 加 入 过 量 的 甲 醛。当 所 得 溶 液用 碱 反 滴 定 至 pH 8.0时,消 耗 0.2ml/L N aO H溶 液 2 5 0 m L那 么 起 始 溶 液 中 丙 氨 酸 的 含 量 为()克(丙 氨 酸 分 子
12、量:89.06)(2 分)2 将 含 有 Asp(pl=2.98),Gly(pl=5.97),Thr(pl=6.53),Leu(pl=5.98)和 Lys(pl=9.74)的 pH3.0柠 檬 酸 缓 冲 液,加 到 预 先 用 同 样 缓 冲 液 平 衡 过 的 Dowex-50阳 离 子 交 换 树 脂 中,随 后 用 该 缓 冲 液 洗 脱 此 柱,并 分 部 的 收 集 洗 出 液,这 5 种 氨 基 酸 将 按()次 序 洗 脱 下 来。(2.5分)3 一 个 有 效 的 自 杀 性 抑 制 剂 必 须 具 备:(1)(),(2)(),(3)()。(1.5 分)4 用 AgNC)3对
13、 在 10ml含 有 1.0mg/ml蛋 白 质 的 纯 酶 溶 液 进 行 全 抑 制,需 用 0.342微 摩 尔 AgNCh,该 酶 的 最 低 分 子 量 为()。(2 分)5 当 底 物 浓 度 等 于 0.25Km时,反 应 初 速 度 与 最 大 反 应 速 度 的 比 为()(2 分)6 丙 糖 磷 酸 异 构 酶 被 认 为 是 完 善 进 化 的 醐,它 的 催 化 机 制 是 G lu-165作 为 广 义 碱 和 His-95作 为 广 义 酸 进 行 催 化 反 应,它 的 动 力 学 常 数 的 特 点 是()和()(2 分)7 在 动 物 组 织 中 蛋 白 激
14、酶 就 其 底 物 磷 酸 化 的 残 基 种 类,可 分 为 三 类,它 们 是(),()及()蛋 白 激 酶,而 在 微 生 物 中 还 发 现 磷 酸 化()残 基 的 蛋 白 激 酶。(2 分)8 D N A变 性 后,紫 外 光 吸 收 能 力(),沉 降 速 度(增 加),粘 度()。(2 分)9 一 条 单 链(+)DNA 的 碱 基 组 成 为:A 21%,G29%,C29%,T 2 1%,用 DNA聚 合 酶 复 制 出 互 补 的(一)链,然 后 用 得 到 的 双 链 D N A作 模 板,山 R N A聚 合 酶 转 录 其 中 的(一),产 物 的 碱 基 组 成 是
15、()。(2 分)10 6 型 D N A双 螺 旋 的 螺 距 为 3 4 A,其 中 有(10)对 碱 基,每 对 碱 基 间 的 转 角 是(36)。(2 分)1 1 cccDNA是 指(闭 合 共 价 环 状 DNA)。(2 分)1 2用 于 基 因 克 隆 载 体 的 质 粒 都 具 有(复 制 起 点),(多 克 隆 位 点)和(选 择 性 标 记)三 种 必 需 条 件。(1.5分)1 3真 核 生 物 tR N A的 加 工、成 熟 过 程 包 括:(切 除 5 端 附 加 序 列),(切 除 3 端 附 加 序 列),(片 段 拼 接),(核 昔 修 饰)和(3 末 端 加 上
16、 CCA)。(2.5分)1 4大 肠 杆 菌 色 氨 酸 操 纵 子 的 转 录 受()和()两 种 机 制 的 控 制,前 者 通 过()控 制 转 录 的 起 始,后 者 通 过()控 制 转 录 起 始 后 是 否 进 行 下 去。(2 分)15 T m是 D N A具 有 的 一 个 重 要 特 性,其 定 义 为()。(2 分)三.是 非 题(每 小 题 L 5分,共 3 0分;把 答 案 填 写 在 答 题 纸 上,正 确 的 填“,错 误 的 填“X”)1密 码 的 偏 爱 性 是 指 不 同 种 属 的 生 物 对 简 并 密 码 具 有 不 同 的 使 用 频 率。(Y).2
17、 在 完 整 偶 联 线 粒 体 中 N A D H氧 化 时 生 成 A T P,反 过 来 如 果 外 加 A T P,也 能 使 线 粒 体 内 NAD卡 还 原.(Y)2.所 谓 引 物 就 是 同 D N A互 补 的 一 小 段 R N A 分 子。X3 细 菌 细 胞 壁 中 的 肽 聚 糖 是 一 类 线 性 多 聚 糖 链 通 过 小 肽 的 广 泛 交 联 而 成 的 巨 大 分 子,其 中 氨 基 酸 组 成 既 有 L 型 也 有 D 型.(Y)4 肝 和 骨 骼 肌 一 般 储 存 糖 原,当 动 用 糖 原 功 能 时,在 磷 酸 存 在 下,经 磷 酸 化 酶 的
18、 作 用,首 先 形 成 葡 萄 糖-6-磷 酸.(X)2.Z型 D N A与 B 型 D N A可 以 相 互 转 变。Y:5 澳 乙 锭(EB)与 双 链 D N A和 某 些 有 双 链 螺 旋 区 R N A特 异 结 合 后,产 生 很 强 的 荧 光,是 由 于 E B能 插 入 到 核 酸 碱 基 对 之 间。(Y)6 D N A复 制 时,岗 崎 片 段 的 合 成 需 要 R N A引 物。(Y)7 一 人 工 模 板 CAUGGGGGG.,在 较 高 Mg?+浓 度 情 况 下,无 细 胞 翻 译 系 统 中 可 合 成 一 多 肽 Met-Gly-Gly.。(Y)8 D
19、N A复 制 与 D N A修 复 合 成 一 样,都 是 由 5-3方 向 进 行 的。(Y)9 基 因 中 核 甘 酸 序 列 的 变 化 不 一 定 在 基 因 产 物,即 蛋 白 质 的 氨 基 酸 序 列 中 反 应 出 来。(Y)1 0从 生 物 体 内 分 离 获 得 的 蛋 白 质 和 让 该 蛋 白 质 基 因 用 遗 传 工 程 技 术 在 细 菌 中 表 达 的 产 物,它 们 的 化 学 结 构 是 完 全 相 同 的。(X)1 1类 病 毒 是 一 类 不 含 蛋 白 质 的 R N A病 原 体(Y)1 2用 定 位 点 突 变 方 法 得 到 缺 失 某 一 个
20、氨 基 酸 残 基 突 变 体,这 个 突 变 的 酶 蛋 白 不 再 具 有 催 化 活 性,因 此 可 以 认 为 该 缺 失 残 基 一 定 是 酶 结 合 底 物 的 必 需 基 团。(X)1 3有 的 tR N A反 密 码 子 由 4 个 核 甘 酸 残 基 组 成,从 而 能 校 正 某 些 m RNA插 入 突 变 而 产 生 不 良 作 用。(Y)1 4 凡 有 锌 指 结 构 的 蛋 白 质 均 有 与 D N A结 合 的 功 能。(X)15 D N A的 复 制 方 式 有 多 种,通 常 是 双 向 进 行 的,但 滚 动 式 复 制 却 是 单 向 的。(Y)1 6
21、血 红 蛋 白 与 肌 红 蛋 白 结 构 相 似,均 含 有 一 条 肽 链 的 铁 咋 啾 结 合 蛋 白,所 以 功 能 上 都 有 与 氧 结 合 的 能 力,血 红 蛋 白 与 氧 的 亲 和 力 较 肌 红 蛋 白 更 强。(X)1 7 生 物 膜 上 的 糖 蛋 白,其 含 糖 部 分 是 与 肽 链 中 的 Y-段 基 或 e-氨 基 以 共 价 键 形 式 相 连,并 往 往 埋 没 于 磷 脂 双 分 子 层 中。(X)1 8 免 疫 球 蛋 白 由 两 条 轻 链 和 两 条 重 链 所 组 成,抗 体 与 抗 原 的 结 合 只 涉 及 轻 链,因 为 它 有 可 变
22、区 域,重 链 的 序 列 基 本 上 都 是 恒 定 的,只 起 维 持 结 构 稳 定 的 作 用。(X)1 9用 浚 肽 酶 A 水 解 一 个 肽,发 现 从 量 上 看 释 放 最 快 的 是 L e u,其 次 是 G l y,据 此 可 断 定,此 肽 的 C 端 序 列 是:Gly-Leu.(X)2 0 人 体 需 要 的 烟 酰 胺 可 以 由 色 氨 酸 来 合 成,因 此 在 营 养 上 色 氨 酸 可 以 替 代 烟 酰 胺。(Y)四.分 析 与 计 算(每 小 题 5 分,共 1 5分)1.已 知 一 个 九 肽 的 氨 基 酸 顺 序 是:Ala-Pro-Lys-A
23、rg-Val-Tyr-Glu-Pro-Gly,在 实 验 室 只 有 氨 基 酸 分 析 仪,而 没 有 氨 基 酸 顺 序 测 定 仪 的 情 况 下,如 何 使 用(1)竣 肽 酶 A 或 B,(2)氨 肽 酶,(3)2,4-二 硝 基 氟 苯(FDNB),(4)胰 蛋 白 酶,(5)胰 凝 乳 蛋 白 酶,来 验 证 上 述 肽 段 的 氨 基 酸 顺 序?答 案:用 两 种 竣 肽 酶 和 氨 肽 酶 作 用 此 九 肽,都 不 能 释 放 出 氨 基 酸,证 明 了 第 2 位 和 第 八 位 的 残 基 均 为 肺 氨 酸;用 FDNB可 以 测 得 该 肽 的 N 末 端 为 A
24、 l a,用 胰 蛋 白 酶 作 用 可 得 到 Ala,Pro,Lys组 成 的 三 肽,这 表 明 了 第 三 位 的 残 基 为 Lys;同 时 得 到 一 段 五 肽 和 游 离 的 A r g,这 提 示 了 Arg是 第 四 位 的 残 基。用 胰 凝 乳 蛋 白 酶 作 用 后,可 得 到 一 段 六 肽 和 一 段 三 肽,同 时 也 确 认 了 第 六 位 残 基 是 带 芳 香 性 侧 链 的 Tyr。由 六 肽 的 氨 基 酸 组 成 测 得,确 定 其 中 含 有 V a i,很 自 然 的 可 认 定 这 残 基 应 是 第 五 位 的 残 基。用 FDNB证 明 了
25、 酶 解 后 所 得 三 肽 的 N 末 端,即 九 肽 的 第 七 位 残 基,是 G lu后,九 肽 的 C 末 端 也 肯 定 是 Gly。2.提 纯 醇 脱 氢 酶,用 55%饱 和 度 的 硫 酸 铁 沉 淀。沉 淀 溶 解 于 水 中,其 蛋 白 质 浓 度 为 1.5g/L,500倍 稀 释 后,取 10微 升 的 溶 液 测 定 活 性(总 体 积 为 3.0m l的 pH 9.2的 缓 冲 液 中,用 过 量 的 乙 醇 和 N A D+,测 定 在 340nm光 吸 收 变 化),初 速 度 为 0.11OD单 位/min。硫 酸 镀 沉 淀 后 上 清 液 的 蛋 白 质
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- 2015 生物化学 分子生物学
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