枸杞中枸杞多糖含量的测定.docx

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1、枸杞中枸杞多糖含量的测定一、试验内容用分光光度法测定枸杞中枸杞多糖的含量。二、试验目的与要求把握用分光光度法测定枸杞中枸杞多糖含量的原理及方法。娴熟把握分光光度计的原理及使用方法。三、试验原理用80%乙醇溶液提取以除去单糖、低聚糖、甘类及生物碱等干扰性成分，然后用水提取其 中所含的多糖类成分。多糖类成分在硫酸作用下，先水解成单糖，并快速 脱水生成糖醛衍 生物，然后和苯酚缩合成有色化合物，用分光光度法于适当波特长测定其多糖含量。四、试剂80%乙醇溶液：用95%乙醇或无水乙醇加适量蒸馈水配制。硫酸。苯酚液：取苯酚100g,加铝片0.1g与碳酸氢钠0. 05g,蒸储收集1721储分,称取此储分 10

2、g,加水150mL,置于棕色瓶中即得。葡萄糖标准溶液：精密称取105T：干燥至恒重的标准葡萄糖0.1000g,加水 溶解并定容至 1000mL 即得。五、仪器）试验室用样品粉碎机、分光光度计、电热恒温水浴。六、操作步骤厂样品处理精密称取样品粉末0. 4g （精确到0.0001g）置于圆底烧瓶中，加80%乙醇溶液200ml回流提 取lh,趁热过滤，残渣用80%热乙醇溶液洗涤（约10mL x 10次），残渣连同滤纸置于烧 瓶中，加蒸储水100ml,加热提取lh,趁热过滤，残渣用热蒸储水充分洗涤（约lOmLxlO 次），洗液并入滤液，冷却后移入250mL容量瓶中，用水定容，待Ho2标准曲线的绘制%精

3、密吸取葡萄糖标准溶液0.1、0.2. 0.4、0.6、0.8. 1-OmL中，各加 蒸储水使体积为2. 0mL,再各加苯酚液1. 0mL,摇匀，快速滴加硫酸5. 0mL,摇匀后放置5min, 置沸水浴中加热15min,取出冷却至室温；另以蒸储水2mL,加苯酚和硫酸，同上操作为空 白对比。于490nm处测定吸光度，绘制标淮 曲线。3 .试样的测定精确吸取待测液肯定量（视待测液含量而定），加蒸偏水至2niL,以下操作按标准曲线绘制下的方法测定吸光度，依据标准曲线查出显色液中葡萄糖含量。七、结果处理.结果纪录比色管号葡萄糖标准 溶液量/niL吸光度12平均00. 0010. 1020. 2030. 4040. 6050. 8061. 0绘制标准曲线。1 .结果计算m2 x 250 x f/二. 1 1 X 100(% )血1 x P x 106式中W一多糖含量，% ;m2显色液中葡萄糖的含量f-3.19,葡萄糖换算为多糖的换算系数；M2一试样质量，g;V吸取待测液的体积，mLo说明此方法可很好地用于食品中粗多糖含量的测定，由于不需要对多糖进行纯 化和脱色处理。洗涤粗多糖沉淀时，肯定要将离心管壁上粘的其他糖分和碳水化合物用80%乙醇洗净， 否则结果会受影响。试验十二饮料中糖精钠、苯甲酸、山梨酸含量的测定一、试验内容用高效液相色谱法测定饮料中糖精钠、苯甲酸、山梨酸的含量。