重组人干细胞因子.docx

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1、从专业角度认识 重组人干细胞因子 rHuSCF, 一种造血生长因子重组人干细胞因子是一种造血生长因子，通过c-Kit受体发出信号来发挥其活性。 SCF和c-Kit对于黑素细胞和生殖细胞谱系的造血细胞的生存、增殖和分化至关重 要。人SCF在小鼠细胞上表现出低活性，而小鼠和大鼠SCF在人细胞上完全活性。 人SCF基因编码273个氨基酸的跨膜蛋白，其中包含25个氨基酸的N端信号序 列、189个氨基酸的胞外结构域、23个氨基酸的膜外结构域和36个氨基酸的细 胞质结构域。分泌可溶性SCF是通过膜锚定前体的蛋白水解加工产生的。重组人 SCF是含有165个氨基酸残基的18.4kDa多肽，其对应于分泌可溶性S

2、CF形式的 序列。AA Sequence:MEGICRNRVT NNVKDVTKLV ANLPKDYMIT LKYVPGMDVL PSHCWISEMV VQLSDSLTDL LDKFSNISEG LSNYSIIDKL VNIVDDLVEC VKENSSKDLK KSFKSPEPRL FTPEEFFRIF NRSIDAFKDF VVASETSDCV VSSTLSPEKD SRVSVTKPFM LPPVA在大肠杆菌中产生的干细胞因子人类重组蛋白是一条含有165个氨基酸的非糖 基化单链，分子量为18409道尔顿。氨基酸序列测定了前五个N端氨基酸的序列，发现其为Met-Glu-Gly-lle-CySo生物活性 通过对人TF-1细胞的剂量依赖性刺激测定的ED50小于2 ng/ml,对应于500000 IU/mg的比活性。蛋白质含量通过两种独立的方法进行蛋白质定量1 ,在280nm的紫外光谱，使用0.52的吸收值作为0.1% (lmg/ml)溶液的消光系 数。该值由蛋白质序列的PC基因计算机分析程序(IntelliGenetics)计算。2,使用干细胞因子的标准溶液作为参考标准，通过RP-HPLC进行分析。