【微生物学检验】知识点整理(第二部分)_医学心理学-检验医学.pdf
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1、学习必备 欢迎下载【微生物学检验】知识点整理(第二部分)室内质量控制的内容包括哪些?答:室内质量控制的内容包括:人员与组织管理 操作手册 培养基的质量控制 试剂、抗血清和染色液的质量控制 抗生素与抗生素纸片 仪器 标本检验过程的质量控制 室内全面质量控制 标准菌株的来源和保存。对于不同种类的培养基,应如何进行无菌试验?对分装后灭菌的培养基:随机 5%10%的量,35,培养 24h;无菌操作分装的培养基对全部培养基 35,培养 24h;选择培养基部分加入 10 20 倍无抑制性肉汤 35,培养 24h;以上情况证明无菌生长为合格。K-B 法质控结果出现错误,试分析其原因?质控结果记录错误 量取抑
2、菌环直径时读数错误 标准菌株被污染或其他改变 接种的菌悬液太浓或过淡 0.5 管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效 孵育温度或气体环境不正确 MH培养基质量有无问题 含药纸片失效。细菌耐药机制?主要有四种 产生一种或多种水解酶钝化酶和修饰酶。抗生素作用的靶位改变,包括青霉素结合蛋白位点和 DNA 解旋酶的改变。细菌膜的通透性下降,包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失。细菌主动外排系统的过度表达。超广谱 内酰胺酶检测 分为纸片检测和液体稀释法检测,检测对象为肺炎克雷伯菌,产酸克雷伯菌,大肠埃希菌和奇异变形杆菌。结果判读:肺炎克雷伯菌,头孢泊肟抑菌环直径 17mm;学习必备 欢迎下载 头孢他啶抑菌环
3、直径 22mm;氨曲南抑菌环直径 27mm;头孢噻肟抑菌环直径 27mm;头孢曲松抑菌环直径 25mm.K-B 法(纸片扩散法)检测原理及影响因素?原理:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系,即抑菌圈愈大,MIC 愈小。影响纸片法药敏试验结果的因素有:1 培养基的质量,如 pH、深度、硬度和表面湿度等。对每批商品化或自配 MH琼脂必须用
4、标准质控菌株进行检测,合格后方能使用;2 药敏纸片的质量,含药量和保存方式;3 接种菌量正确与否是影响结果的重要因素之一,取决于麦氏比浊标准的配制,正确使用和保存;4 试验操作质量;5 孵育条件,温度和时间;6 抑菌圈测量工具的精度;7 质控标准菌株本身的药敏特性是否合格,有无变异。伤寒患者标本采集。根据疾病的类型,病情和病程的不同分别采集不同的标本。伤寒沙门菌分离培养原则上于发病第一周取血,第二三周取粪便做培养的分离率高,第三周也可取尿液培养,全病程均可做骨髓培养。细菌生长繁殖的方式和条件?.答:方式:无性二分裂法条件:营养物质 温度 酸碱度 气体 简述金黄色葡萄球菌的鉴定依据。员与组织管理
5、操作手册培养基的质量控制试剂抗血清和染色液的质量控制抗生素与抗生素纸片仪器标本检验过程的质量控制室内全面质量控制标准菌株的来源和保存对于不同种类的培养基应如何进行无菌试验对分装后灭菌的培养基 生长为合格法质控结果出现错误试分析其原因质控结果记录错误量取抑菌环直径时读数错误标准菌株被污染或其他改变接种的菌悬液太浓或过淡管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效孵育温度或气体环境不正确培养基质量有无问题 结合蛋白位点和解旋酶的改变细菌膜的通透性下降包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失细菌主动外排系统的过度表达超广谱内酰胺酶检测分为纸片检测和液体稀释法检测检测对象为肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌大肠埃希菌和奇异学
6、习必备 欢迎下载 答:1 形态染色:革兰阳性球菌,葡萄串状排列 2 菌落特征:在血平板上菌落中等大小、光滑湿润、菌落呈金黄色、菌落周围有透明溶血环 3 鉴定试验:凝固酶阳性、发酵甘露醇、耐热核酸酶阳 简述革兰染色的意义 答.用于鉴定细菌 有利于临床药物的选择 与致病性有关 写出革兰染色所用染液及染色操作方法。答:革兰染色染液:结晶紫染液、卢戈碘液、95 乙醇、稀释石炭酸复红 染色步骤:初染 1 分钟,水洗 媒染 1 分钟,水洗 脱色 30 秒至 1 分钟 复染 1 分钟 简述影响革兰染色的因素有哪些 答:操作因素 涂片的厚薄、脱色时间的长短;染液因素染液的蒸发、结晶紫染液防止过久出现沉淀;细菌
7、因素 菌龄 简述大肠埃希菌的主要鉴定依据.答.分解葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘露醇 产酸产气 IMViC:+-KIA:+-触媒试验阳性 硝酸盐还原试验阳性 氧化酶试验阴性 乙肝病毒“二对半”检测的内容是什么和意义?答:HbsAg(1 分)抗 HBs(1 分)HBeAg(1 分)抗 HBe(1 分)抗 HBc(1 分)3 答:(1)乙肝病毒“二对半”检(2)其临床意义是:HBsAg:是 HBV 感染的标志 抗 HBs:是机体对 HBV 产生免疫力的标志 抗 HBc:抗 HBcIgM 是 HBV 在体内复制的指标 HBeAg:表明 HBV 复制,血清具有高度传染性 抗 HBe:表明 HBV 复制减少,
8、传染性减弱,病情趋于好转 员与组织管理操作手册培养基的质量控制试剂抗血清和染色液的质量控制抗生素与抗生素纸片仪器标本检验过程的质量控制室内全面质量控制标准菌株的来源和保存对于不同种类的培养基应如何进行无菌试验对分装后灭菌的培养基 生长为合格法质控结果出现错误试分析其原因质控结果记录错误量取抑菌环直径时读数错误标准菌株被污染或其他改变接种的菌悬液太浓或过淡管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效孵育温度或气体环境不正确培养基质量有无问题 结合蛋白位点和解旋酶的改变细菌膜的通透性下降包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失细菌主动外排系统的过度表达超广谱内酰胺酶检测分为纸片检测和液体稀释法检测检测对象为肺炎
9、克雷伯菌产酸克雷伯菌大肠埃希菌和奇异学习必备 欢迎下载 简述病毒的基本特征?答:1 形体极其微小,一般都能通过细菌滤器,故必须在电子显微镜下才能观察:2 没有细胞构造,3 每一种病毒只含一种核酸,不是 DNA就是 RNA;肠杆菌科有哪些共同特点 答:革兰阴性杆菌 2.营养要求条件不高在普通培养基上生长良好,37 度生长3.生化反应活泼,4.抗原性,有菌体抗原、表面抗原、鞭毛抗原,5.变异性,易发上 H-O 变异 R-S 变异等。6.致病性 均以菌毛粘附肠粘膜上皮,内毒素、肠毒素为主要致病物质。列举哪些病原体可以引起性传播疾病(6 种以上)答:沙眼衣原体 溶脲脲原体 淋病奈瑟菌 HIV 人型支原
10、体 生殖支原体 简述外斐反应的原理及意义。答:此项试验是一项非特异性凝集反应。因某些立克次体与变形杆菌某些 OX 菌株有共同抗原成分,故用变形杆菌 OX19、2、K 株抗原代替立克次体抗原,检查患者血清中立克次体抗体的水平和变化。如抗体效价 1:160 或双份血清效价增长 4 倍,为阳性反应。流行性和地方性斑疹伤寒、恙虫病患者可出现阳性反应。由于该试验为非特异性,故必须结合流行病学和临床症状才能作出确诊。内毒素和外毒素的特点有何不同?答:区别要点 外毒素 内毒素 1.来源 革兰阳性菌和部分革兰阴性菌 革兰阴性菌 2 存在部位 由细菌合成并分泌到菌体外,细胞壁成分,菌体裂解后释出少 数菌裂解后释
11、出 3 化学成分 蛋白质 脂多糖 4.稳定性 不稳定,不耐热 稳定,耐热 员与组织管理操作手册培养基的质量控制试剂抗血清和染色液的质量控制抗生素与抗生素纸片仪器标本检验过程的质量控制室内全面质量控制标准菌株的来源和保存对于不同种类的培养基应如何进行无菌试验对分装后灭菌的培养基 生长为合格法质控结果出现错误试分析其原因质控结果记录错误量取抑菌环直径时读数错误标准菌株被污染或其他改变接种的菌悬液太浓或过淡管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效孵育温度或气体环境不正确培养基质量有无问题 结合蛋白位点和解旋酶的改变细菌膜的通透性下降包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失细菌主动外排系统的过度表达超广谱内酰胺
12、酶检测分为纸片检测和液体稀释法检测检测对象为肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌大肠埃希菌和奇异学习必备 欢迎下载 5.毒性作用:外毒素极强,对组织器官有选择性的毒害作用,引起特殊临床 表现。内毒素较弱,各菌的毒性作用大致相同。6.抗原性:外毒素强,刺激机体产生抗毒素,中和游离外毒素的毒性作用,0.4甲醛处理,可脱毒成失去毒性而保持抗原性的类毒素。内毒素弱,刺激机体产 生的抗菌抗体无明显中和作用,甲醛处理不形成类毒素。写出脓汁标本金黄色葡萄球菌的检验程序和鉴定依据 脓标本-【1、直接涂片染色 2、分离培养(血平板)-鉴定试验和药敏试验-(涂片染色、耐热核酸酶、血浆凝固酶、其它试验、药敏试验)-报告】金黄色
13、葡萄球菌鉴定依据:(1)形态染色:革兰阳性球菌,葡萄串状排列(1分)2)菌落特征:在血平板上菌落中等大小、光滑湿润、菌落呈金黄色、菌落周围有透明溶血环(2 分)3)鉴定试验:凝固酶阳性、发酵甘露醇、耐热核酸酶阳(2 分)革兰阳性菌和阴性菌的细胞壁有何区别 答:(1)革蓝阳性菌细胞壁的肽聚糖由聚糖骨架、五肽桥、四肽侧链组成而革蓝阴性菌细胞壁的肽聚糖由聚糖骨架、四肽侧链组成。2)革蓝阳性菌细胞壁的肽聚糖较厚而革蓝阴性菌细胞壁的肽聚糖较薄。3)革蓝阳性菌细胞壁有磷壁酸而革蓝阴性菌细胞壁没有。4)革蓝阳性菌细胞壁坚韧度强而革蓝阴性菌细胞壁坚韧度弱。5)革蓝阳性菌细胞壁无外膜而革蓝阴性菌细胞壁有外膜 怎
14、样报告结核菌检查时抗酸染色镜检和斜面接种的结果?答:抗酸:-仔细检查 300 个视野未发现抗酸杆菌 300 个视野内发现 12条抗酸菌 100 个视野内发现 19 条抗酸菌 2 10 个视野内发现 19 条抗酸菌 3 每个视野内发现 19 条抗酸菌 4 每个视野内发现 9 条以上抗酸菌 员与组织管理操作手册培养基的质量控制试剂抗血清和染色液的质量控制抗生素与抗生素纸片仪器标本检验过程的质量控制室内全面质量控制标准菌株的来源和保存对于不同种类的培养基应如何进行无菌试验对分装后灭菌的培养基 生长为合格法质控结果出现错误试分析其原因质控结果记录错误量取抑菌环直径时读数错误标准菌株被污染或其他改变接种
15、的菌悬液太浓或过淡管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效孵育温度或气体环境不正确培养基质量有无问题 结合蛋白位点和解旋酶的改变细菌膜的通透性下降包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失细菌主动外排系统的过度表达超广谱内酰胺酶检测分为纸片检测和液体稀释法检测检测对象为肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌大肠埃希菌和奇异学习必备 欢迎下载 斜面:斜面 20 个菌落以上,占斜面 1/4 以下、2 斜面上菌落生长面积占1/4 以上,1/2 以下、3 斜面上菌落面积占斜面 1/2 以上,3/4 以下、4 斜面上菌落生长密集,成菌苔 怎样鉴定粪便标本中的福氏志贺菌?(写出检验程序,鉴定依据 答:程序:标本-增菌、分离培养-初
16、步鉴定-最终鉴定-血清学诊断 白色念珠菌鉴定的依据有哪些 答:直接镜检观察到圆形或卵圆形的芽生孢子、假菌丝,假菌丝中隔部伴有芽生孢子,顶端有厚壁的厚膜孢子,革兰染色阳性,着色不均匀。玉米琼脂室温及 35 均生长并形成顶端厚膜孢子,42 也能生长。芽管形成试验阳性。葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、蕈糖发酵试验阳性,蔗糖、乳糖发酵试验阴性。葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、蕈糖同化试验阳性,乳糖同化试验阴性。三氮唑氯试验,培养基不变色或淡红色。S-R 变异:自临床标本初次分离的菌株一般都是光滑型,经人工培养,传代后逐渐变成粗糙型菌落,此时菌体表面的特异多糖抗原丧失,在生理盐水中出现自凝。H-O 变异:是指有鞭毛的沙
17、门菌失去鞭毛的变异。位相变异:具有双相 H 抗原的沙门菌变成只有其中某一相 H 抗原的单相菌,称位相变异。V-W变异:是指沙门菌失去 Vi 抗原的变异。员与组织管理操作手册培养基的质量控制试剂抗血清和染色液的质量控制抗生素与抗生素纸片仪器标本检验过程的质量控制室内全面质量控制标准菌株的来源和保存对于不同种类的培养基应如何进行无菌试验对分装后灭菌的培养基 生长为合格法质控结果出现错误试分析其原因质控结果记录错误量取抑菌环直径时读数错误标准菌株被污染或其他改变接种的菌悬液太浓或过淡管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效孵育温度或气体环境不正确培养基质量有无问题 结合蛋白位点和解旋酶的改变细菌膜的通透性
18、下降包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失细菌主动外排系统的过度表达超广谱内酰胺酶检测分为纸片检测和液体稀释法检测检测对象为肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌大肠埃希菌和奇异学习必备 欢迎下载 微生物:是存在于自然界中的一群形体微小结构简单肉眼直接看不见,必须借助光学显微镜或电子显微镜方达数百至数万倍才能观察到的微小生物 微生物学:是生物学的一个分支,是研究微生物的类型分布、形态结构、生命活动及其规律、遗传进化,以及与人类、动物植物等相互关系的一门学科。医学微生物学:主要是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性,以及特异性诊断和防治措施的学科,目的是控制和消灭微生物引起的感染性疾病,
19、以保证和提高人类的健康水平。临床微生物学又称诊断微生物学是研究病原微生物检查以及微生物与宿主相互作用的一门医学专业和应用学科。细菌属于原核生物界,是一种单细胞微生物,形体微小,结构简单,有细胞壁和原始核质,无核膜和核仁,除核糖体外无其他细胞器。肽聚糖:又称胞壁质,为细菌细胞壁所特有,主要是由包含两种糖衍生物的聚糖骨架和几种不同的氨基酸组成,几种不同的氨基酸可以组成四肽侧链和五肽交联桥。7 脂多糖(LPS):为细菌所特有,主要是由包含两种衍生物的聚糖骨架和几种不同的氨基酸组成,几种不同的氨基酸可以组成四肽侧链和五胎交联桥。8 质粒:使细菌染色体外的遗传物质,存在于细胞质中,是小的闭合环状 dna
20、分子,可独立于染色体存在并复制,也可整合到染色体上。9 异染颗粒:有些细菌的内含体主要成分是多聚磷酸盐,主要用于磷的贮存,在细菌合成细胞组分时提供磷酸盐,同时在细菌代谢时作为能量来源。这些颗粒用蓝色染料甲基兰或甲苯胺蓝染色时可被染成不同深浅的蓝色,与菌体其他部分不同,显示异染效应,称为异染颗粒。10 革兰染色:是细菌学最经典最常用的染色方法,11 芽胞:很多革兰阳性细菌在一定条件下可在菌体内部形成具有多层膜包裹的圆形或卵圆形的小体,称为内生孢子,简称芽孢。12 荚膜:有些细菌的细胞壁外包裹着一层排列有序且不易被洗脱的物质,称为荚膜。员与组织管理操作手册培养基的质量控制试剂抗血清和染色液的质量控
21、制抗生素与抗生素纸片仪器标本检验过程的质量控制室内全面质量控制标准菌株的来源和保存对于不同种类的培养基应如何进行无菌试验对分装后灭菌的培养基 生长为合格法质控结果出现错误试分析其原因质控结果记录错误量取抑菌环直径时读数错误标准菌株被污染或其他改变接种的菌悬液太浓或过淡管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效孵育温度或气体环境不正确培养基质量有无问题 结合蛋白位点和解旋酶的改变细菌膜的通透性下降包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失细菌主动外排系统的过度表达超广谱内酰胺酶检测分为纸片检测和液体稀释法检测检测对象为肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌大肠埃希菌和奇异学习必备 欢迎下载 13 芽孢:很多革兰阳性细菌在一
22、定条件下可在菌体内部形成具有多层荚膜包裹的的圆形的或卵圆形的小体称为内生孢子简称芽孢。14 热原质:或称致热源,是细菌合成的注入人体活动物体内能引起发热反应的物质。7氧化酶试验:氧化酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素 C 氧化,再由氧化型细胞色素 C 使对苯二铵氧化,生成有色的醌类化合物。15 触酶试验:具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢生成水和新生态氧,继而形成分子氧出现气泡。16 细菌的 L 型:细菌在体内或体外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚糖直接或间接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。17 消毒:是去除或杀灭大
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