2023年沉淀反应实验报告.pdf
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1、实 验 蛋 白 质 的 沉 淀 反 映 与 颜 色 反 映 一、实 验 目 的 掌 握 鉴 定 蛋 白 质 的 原 理 和 方 法。熟 悉 蛋 白 质 的 沉 淀 反 映,进 一 步 熟 悉 蛋 白 质 的 有 关 反 映。二、实 验 原 理 蛋 白 质 分 子 中 某 种 或 某 些 集 团 可 与 显 色 剂 作 用,产 生 颜 色。不 同 的 蛋 白 质 由 于 所 含 的 氨 基 酸 不 完 全 相 同,颜 色 反 映 亦 不 完 全 相 同。颜 色 反 映 不 是 蛋 白 质 的 专 一 反 映,一 些 非 蛋 白 物 质 也 可 产 生 同 样 的 颜 色 反 映,因 此 不 能
2、根 据 颜 色 反 映 的 结 果 来 决 定 被 测 物 是 否 为 蛋 白 质。此 外,颜 色 反 映 也 可 作 为 一 些 常 用 蛋 白 质 定 量 测 定 的 依 据。蛋 白 质 是 亲 水 性 胶 体,在 溶 液 中 的 稳 定 性 与 质 点 大 小、电 荷、水 化 作 用 有 关,但 其 稳 定 性 是 有 条 件 的,相 对 的。假 如 条 件 发 生 了 变 化,破 坏 了 蛋 白 质 的 稳 定 性,蛋 白 质 就 会 从 溶 液 中 沉 淀 出 来。三、实 验 仪 器 1、吸 管 2、滴 管 3、试 管 4、电 炉 5、p h 试 纸 6、水 浴 锅 7、移 液 管
3、四、实 验 试 剂 1、卵 清 蛋 白 液:鸡 蛋 清 用 蒸 偏 水 稀 释 1 0-2 0倍,3 4 层 纱 布 过 滤,滤 液 放 在 冰 箱 里 冷 藏 备 用。2、0.53苯 酚:1 g苯 酚 加 蒸 镯 水 稀 释 至 2 0 0 m l。3、m i l l。n,s 试 剂:4 0 g 汞 溶 于 6 0 m l浓 硝 酸(水 浴 加 温 助 溶)溶 解 后,冷 却,力 口 二 倍 体 积 的 蒸 储 水,混 匀,取 上 清 夜 备 用。此 试 剂 可 长 期 保 存。4、尿 素 晶 体 5 l%c u s o:l g cu s o 晶 体 溶 于 蒸 t留 水,稀 释 至 100
4、ml 446、1 0%n a o h:10g na o h 溶 于 蒸 储 水,稀 释 至 10 0 m l7、浓 硝 酸 8、0.1%前 三 酮 溶 液:0.1 g 玮 三 酮 溶 于 95%的 乙 醇 并 稀 释 至 1 0 0ml.9、冰 醋 酸 1 0,浓 硫 酸 1 1、饱 和 硫 酸 镀 溶 液:1 0 0 m l蒸 镯 水 中 加 硫 酸 钱 至 饱 和。12、硫 酸 镂 晶 体:用 研 钵 研 成 碎 末。1 3、953乙 醇。14、醋 酸 铅 溶 液:1 g 醋 酸 铅 溶 于 蒸 储 水 并 稀 释 至 1 00ml15、氯 化 钠 晶 体 1 6、10%三 氯 乙 酸 溶
5、 液:1 0 g 三 氯 乙 酸 溶 于 蒸 储 水 中 并 稀 释 至 1 0 0 m l17、饱 和 苦 味 酸 溶 液:100 m l蒸 馀 水 中 加 苦 味 酸 至 饱 和。18、1%醋 酸 溶 液。五、实 验 环 节 蛋 白 质 的 颜 色 反 映(一)米 伦(m i 1 I o n s)反 映 1、苯 酚 实 验:取 0.5%苯 酚 溶 液 Im 1于 试 管 中,加 m il lo n,s 试 剂 0.5 n d,电 炉 小 心 加 热 观 测 颜 色 变 化。2、蛋 白 质 实 验:取 2 m l蛋 白 液,加 m i l l o n,s 试 剂 0.5nli,出 现 白 色
6、 的 蛋 白 质 沉 淀,小 心 加 热,观 测 现 象。(-)双 缩 胭 反 映 1、取 少 量 尿 素 晶 体 放 在 干 燥 的 试 管 中,微 火 加 热 熔 化,至 重 新 结 晶 时 冷 却。然 后 加 10%n a o h溶 液 1 m l,摇 匀,再 加 2-4 滴 13 c u s o 4 溶 液,混 匀,观 测 现 象。2、取 蛋 白 液 1 m l,加 10带 n a o h溶 液 lm 1,摇 匀,再 加 2-4 滴 1%c u s o 4 溶 液,混 匀,观 测 现 象。(三)黄 色 反 映 取 一 支 试 管,加 入 1 m l蛋 白 液 及 浓 硝 酸 5 滴。加
7、 热,冷 却 后 注 意 颜 色 变 化。然 后 再 加 入 10%naoh溶 液 Im 1,观 测 颜 色 有 什 么 变 化。(四)年 三 酮 反 映 取 蛋 白 液 1 m l于 试 管 中,加 4-8 滴 玮 三 酮 溶 液,加 热 至 沸,即 有 蓝 紫 色 出 现。蛋 白 质 的 沉 淀(一)蛋 白 质 的 盐 析 作 用 1、试 管 中 加 蒸 储 水 3m1,加 固 体 硫 酸 镀 至 饱 和。另 一 支 试 管 加 蛋 白 液 2 m l,再 加 入 饱 和 硫 酸 镀 溶 液 2 m l,摇 匀 静 置 观 测 现 象。2、将 上 述 混 合 液 过 滤。向 滤 液 中 逐
8、 渐 加 入 少 量 固 体 硫 酸 镀,直 至 饱 和 为 止,此 时 析 出 为 清 蛋 白。再 加 入 少 量 蒸 镯 水,观 测 沉 淀 是 否 溶 解。(-)有 机 溶 剂 沉 淀 蛋 白 质试 管 中 加 蛋 白 液 1 m l,加 晶 体 氯 化 钠 少 许,溶 解 后 加 95%乙 醇 3 m l,摇 匀,观 测 现 象。(三)重 金 属 盐 与 某 些 有 机 酸 沉 淀 蛋 白 质 工、取 试 管 2 支,各 加 蛋 白 液 2 m l,一 支 管 中 滴 加 醋 酸 铅 溶 液,另 一 支 管 中 滴 加 工 硫 酸 铜 溶 液,至 有 沉 淀 产 生。2、取 一 支 试
9、 管 加 蛋 白 液 2 m l,再 加 入 1 0 2三 氯 乙 酸 1 m l,充 足 混 匀,观 测 结 果。(四)生 物 碱 试 剂 沉 淀 蛋 白 质 取 一 支 试 管,加 入 蛋 白 液 2 m l及 醋 酸 4-5 滴,再 加 饱 和 苦 味 酸 数 滴,观 测 现 象。六、实 验 结 果 蛋 白 质 的 颜 色 反 映(一)米 伦(m i l l o n f s)反 映 1、苯 酚 实 验:溶 液 即 出 现 玫 瑰 红 色。2、蛋 白 质 实 验:出 现 白 色 的 蛋 白 质 沉 淀,小 心 加 热 后 凝 固 的 蛋 白 质 出 现 红 色。(二)双 缩 胭 反 映 1
10、、有 紫 色 出 现。2、溶 液 有 蓝 紫 色 出 现(三)黄 色 反 映 先 有 黄 色 沉 淀 生 成,加 入 10%na o h 溶 液 1 m l后 颜 色 变 为 橘 黄 色。(四)荀 三 酮 反 映 有 蓝 紫 色 出 现。蛋 白 质 的 沉 淀(一)蛋 白 质 的 盐 析 作 用 1、有 蛋 白 析 出。2、有 蛋 白 质 析 出,加 水 后 可 复 溶。(六)有 机 溶 剂 沉 淀 蛋 白 质 取 一 试 管 加 蛋 白 液 1 m l,加 入 晶 体 氯 化 钠 少 许,待 溶 解 后 再 加 9 5%乙 醇 3m1,摇 匀,观 测 现 象(七)重 金 属 盐 与 某 些
11、有 机 酸 沉 淀 蛋 白 质 取 试 管 2 支,各 加 蛋 白 液 2 m l,一 支 管 中 滴 加 12醋 酸 铅 溶 液,另 一 支 管 中 滴 加 1%硫 酸 铜 溶 液,至 有 沉 淀 产 生。(八)生 物 碱 试 剂 沉 淀 蛋 白 质 取 一 支 试 管,加 入 蛋 白 液 2 m l及 醋 酸 4-5 滴,再 加 饱 和 苦 味 酸 和 糅 酸 数 滴,观 测 现 象。七、实 验 分 析 蛋 白 质 分 子 中 某 种 或 某 些 集 团 可 与 显 色 剂 作 用,产 生 颜 色。不 同 的 蛋 白 质 由 于 所 含 的 氨 基 酸 不 完 全 相 同,颜 色 反 映
12、亦 不 完 全 相 同。篇 二:自 由 沉 淀 实 验 报 告 六、实 验 数 据 记 录 与 整 理 1、实 验 数 据 记 录 沉 降 柱 直 径 水 样 来 源 柱 高 静 置 沉 淀 时 间/m i n表 面 皿 表 面 皿 编 号 质 量/g表 面 皿 和 悬 浮 物 总 质 量/g水 样 中 悬 浮 物 质 量/g水 样 体 积/m l悬 浮 物 沉 降 柱 浓 度/工 作 水(g/m l)深/mm颗 粒 沉 沉 淀 效 速/率/=(m m/s)残 余 颗 粒 比 例/会 0 5 10 20 3 0 60 1 200 1 2 3 4 5 679.0 4 3 8 8 0.7 4 1
13、2 1.6 9 7 4 8 1.7 6 0 3 8 3.2 0 75 1.4 4 7 2 6 4.1 8 9 065.4 9 7 2 1.3 0 8 2 6 6.1162 6 7.3286 1.2124 73.7 895 7 4.9 3 85 1.1 4 9 08 3.4 7 8 2 8 4.6 290 1.1 50 8 7 5.0 3 3 2 7 6.1 5 7 3 1.1 2 4 13 1.0 3 0.0 3 0.0 3 0.0 30.0 3 1.0 3 1.00.0548 0.0 4 82 0.0 4 36 0.0404 0.038 3 0.0 3 7 1 0.0 3 6 38 4 6.
14、0 8 0 8.0 7 8 0.0 7 2 4.0 6 6 4.0 5 0 0.0 361.01.86 0 0.883 0.3 9 5 0.2 3 0 0.0 6 9 0.0 2 11 1.4 0 2 0.4 4 2 6.28 30.11 3 2.30 3 3.76100 8 7.9 6 7 9.56 7 3.7 2 6 9.8 9 6 7.7 0 6 6.2 42、实 验 数 据 整 理(2)绘 制 沉 淀 曲 线:e-t、e-u、u i p i 曲 线 如 下:2-1、绘 制 去 除 率 与 沉 淀 时 间 的 曲 线 如 下:图 2.2:沉 淀 时 间 t 与 沉 淀 效 率 e 的 关
15、 系 曲 线 2-2、绘 制 去 除 率 与 沉 淀 速 度 的 曲 线 如 下:图 2.2:颗 粒 沉 速 u 与 沉 淀 效 率 e 的 关 系 曲 线 2 3、绘 制 去 除 率 与 沉 淀 速 度 的 曲 线 如 下:(1)选 择 t=6 0 m i n 时 刻:(大 家 注 意 哦!这 部 分 手 写 的,不 要 直 接 打 印!)水 样 中 悬 浮 物 质 量=表 面 皿 和 悬 浮 物 总 质 量 一 表 面 皿 质 量,如 表 格 所 示。原 水 悬 浮 物 的 浓 度:c0?水 样 中 悬 浮 物 质 量 1.6974?0.0 5 4 8 g/m l水 样 体 积 3 1.0
16、悬 浮 物 的 浓 度:c 5?水 样 中 悬 浮 物 质 量 1.1 5 0 8?0.0 3 7 lg/m l水 样 体 积 3 1.0沉 淀 速 率:u?h?10(50 0-2 5 0)?0.0 6 9 m m/st i?6 060?60c 0-c 5 0.0 548-0.0 3 71?100%?100%?3 2.3 0 c 0 0.0 548C 50.0371?100%?100%?67.7 0 c 0 0.0 5 4 8沉 淀 效 率:e5?残 余 颗 粒 比 例 p 5?篇 三:混 凝 沉 淀 实 验 报 告 实 验 名 称:混 凝 沉 淀 实 验 一、实 验 目 的 1、通 过 实
17、验 观 测 混 凝 现 象、加 深 对 混 凝 沉 淀 理 论 的 理 解;2、掌 握 拟 定 最 佳 投 药 量 的 方 法,选 择 和 拟 定 最 佳 混 凝 工 艺 条 件;3、了 解 影 响 混 凝 条 件 的 相 关 因 数。二、实 验 原 理 1.混 凝 作 用 原 理 涉 及 三 部 分:1)压 缩 双 电 层 作 用;2)吸 附 架 桥 作 用;3)网 捕 作 用。这 三 种 混 凝 机 理 在 水 解 决 过 程 中 不 是 各 自 孤 立 的 现 象,而 往 往 是 同 时 存 在 的,只 但 是 随 不 同 的 药 剂 种 类、投 加 量 和 水 质 条 件 而 发 挥
18、作 用 限 度 不 同,以 某 一 种 作 用 机 理 为 主。对 高 分 子 混 凝 剂 来 说,重 要 以 吸 附 架 桥 机 理 为 主。而 无 机 的 金 属 盐 混 凝 剂 则 三 种 作 用 同 时 存 在。胶 体 表 面 的 电 荷 值 常 用 电 动 电 位;表 达,又 称 为 z e t a 电 位。一 般 天 然 水 中 的 胶 体 颗 粒 的 z e t a 电 位 约 在-3 0 m v 以 上,投 加 混 凝 剂 之 后,只 要 该 电 位 降 到-1 5 m v左 右 即 可 得 到 较 好 的 混 凝 效 果。相 反,当 电 位 降 到 零,往 往 不 是 最 佳
19、 混 凝 状 态。由 于 水 中 的 胶 体 颗 粒 重 要 是 带 负 电 的 粘 土 颗 粒。胶 体 间 存 在 着 静 电 斥 力,胶 粒 的 布 朗 运 动,胶 粒 表 面 的 水 化 作 用,使 胶 粒 具 有 分 散 稳 定 性,三 者 中 以 静 电 斥 力 影 响 最 大,若 向 水 中 投 加 混 凝 剂 能 提 供 大 量 的 正 离 子,能 加 速 胶 体 的 凝 结 和 沉 降。2.混 凝 剂 向 水 中 投 加 的 能 使 水 中 胶 体 颗 粒 脱 稳 的 高 价 电 解 质,称 之 为 混 凝 剂“。混 凝 剂 可 分 为 无 机 盐 混 凝 剂 和 高 分 子
20、混 凝 剂。水 解 决 中 常 用 的 混 凝 剂 有:三 氯 化 铁、硫 酸 铝、聚 合 氯 化 铝(简 称 p a c)、聚 丙 烯 酰 胺 等。本 实 验 使 用 P a c,它 是 介 于 a l c l 3 和 a l(o h)3 之 间 的 一 种 水 溶 性 无 机 高 分 子 聚 合 物,化 学 通 式 为 a l 2(o h)n c(6 n)m其 中 m代 表 聚 合 限 度,n 表 达 p a c 产 品 的 中 性 限 度。3.投 药 量 单 位 体 积 水 中 投 加 的 混 凝 剂 量 称 为 投 药 量,单 位 为 m g/1。混 凝 剂 的 投 加 量 除 与 混
21、 凝 剂 品 种 有 关 外,还 与 原 水 的 水 质 有 关。当 投 加 的 混 凝 剂 量 过 小 时,高 价 电 解 质 对 胶 体 颗 粒 的 电 荷 斥 力 改 变 不 大,胶 体 难 以 脱 稳,混 凝 效 果 不 明 显;当 投加 的 混 凝 剂 量 过 大 时,则 高 价 反 离 子 过 多,胶 体 颗 粒 会 吸 附 过 多 的 反 离 子 而 使 胶 体 改 变 电 性,从 而 使 胶 体 粒 子 重 新 稳 定。因 此 混 凝 剂 的 投 加 量 有 一 个 最 佳 值,其 大 小 需 要 通 过 实 验 拟 定。4.影 响 混 凝 作 用 的 因 素 投 药 量、水
22、中 胶 体 颗 粒 的 浓 度、水 温、水 的 p h 值 等。5.浊 度 仪 浊 度 是 表 现 水 中 悬 浮 物 对 光 线 透 过 时 所 发 生 的 阻 碍 限 度。水 中 具 有 泥 土、粉 尘、微 细 有 机 物、浮 游 动 物 和 其 他 微 生 物 等 悬 浮 物 和 胶 体 物 都 可 使 水 中 呈 现 浊 度。浊 度 仪 采 用 9 0 散 射 光 原 理。由 光 源 发 出 的 平 行 光 束 通 过 溶 液 时,一 部 分 被 吸 取 和 散 射,另 一 部 分 透 过 溶 液。与 入 射 光 成 9 0。方 向 的 散 射 光 强 度 符 合 雷 莱 公 式,在
23、入 射 光 恒 定 条 件 下,在 一 定 浊 度 范 围 内,散 射 光 强 度 与 溶 液 的 混 浊 度 成 正 比。因 此,我 们 可 以 通 过 测 量 水 样 中 微 粒 的 散 射 光 强 度 来 测 量 水 样 的 浊 度。三、实 验 仪 器 和 试 剂 1.仪 器(1)浊 度 仪 一 台(s g z-2 数 显 浊 度 仪,上 海 悦 丰 仪 器 仪 表 有 限 公 司)(2)混 凝 实 验 搅 拌 仪(m y 3000-6普 通 型 混 凝 实 验 搅 拌 仪,潜 江 梅 宁 仪 器 有 限 公 司)(3)电 子 天 平(赛 多 利 斯 科 学 仪 器,北 京 有 限 公
24、司)(4)沉 淀 桶(60 0 m l烧 杯)6 个;(5)1 0 0 m l取 样 瓶 6 个;(6)乳 胶 管 或 塑 料 软 管(直 径 5 8mm)1520cm;(7)1 0 0m 1 烧 杯 I 个;(8)100ml 量 筒 1 个;(9)5 00ml 量 筒 1 个;(10)1 0 m l 量 筒 1 个;2.实 验 试 剂 混 凝 剂:聚 合 氯 化 铝 P a c;原 水(制 备 工 作 已 由 实 验 员 完 毕);自 来 水 四、实 验 环 节 1)制 备 原 水:事 先 用 高 岭 土 配 制 浊 度 为 5 0 n t u 左 右 的 浑 水,静 沉 1天 以 上,取
25、上 清 液 备 用。(己 由 实 验 员 完 毕)2)用 电 子 天 平 称 取 混 凝 剂(p a c)3 g 溶 于 1 1 自 来 水 中,浓 度 为 3 g/1。3)取 6 0 0 m l原 水 倒 入 与 搅 拌 仪 配 套 的 沉 淀 桶 中。共 六 个 沉 淀 桶。4)根 据 原 水 体 积,按 照 投 加 量 8 0、1 20 16 0、2 0 0、3 0 0、4 0 0mg/I 计 算 力 口 药 量,并 换 算 成 混 凝 剂 溶 液 的 体 积 量。换 算 后,混 凝 剂 溶 液 的 体 积 分 别 为:16、2 4、3 2、4 0、60、8 0m1 O5)设 立 搅 拌
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