2023年挥发性脂肪酸的测定——5种方法.docx

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1、挥发性脂肪酸的测定一般来说，碳原子数在 10 以下的脂肪酸大局部具有挥发性，并且易溶于水。在它们中间，随着碳原子数的增加，挥发性渐渐下降。典型的挥发酸见附表 5。795附表 5 低级脂肪酸的分子式及沸点名称分子式沸点/名称分子式沸点/甲酸HCOOH100.8丁酸C H COOH3162.3乙酸CH COOH3117.5戊酸C H COOH4185.5丙酸C H COOH2140.0已酸C HCOOH511205.0挥发性脂肪酸易被微生物利用。在有机物的厌氧分解中，挥发性脂肪酸是作为生物代谢的中间或最终产物而存在。在厌氧发酵的液化产酸阶段，这一类低级脂肪酸是这一阶段的主要产物，其中以乙酸为主。在

2、某种条件下， 乙酸可以到达该类酸总量的 80%。在CH4 形成过程中，甲酸和乙酸是形成甲烷的重要前体物。据争论，自然界有机物产生的CH4 中大约有 70%上由乙酸中的甲基原子团形成的。丙酸、丁酸可以转化成甲酸。有机酸过多往往反映动身酵池的病态。因此可以认为，在微生物厌氧发酵过程中，挥发性脂肪酸不仅是一种不行缺少的养分成分，更重要的意义在于这类有机酸已是沼气发酵争论有机物降解工艺条件优劣的重要参数，在甲烷形成的争论和生产中， 它们的含量也是重要的参数。在挥发性脂肪酸的总量测定中，是以乙酸作为基数进展计算，除了要求测定总量外，对甲酸、乙酸等各种低级脂肪酸的分别定量分析也是格外重要的。1C2C5 挥

3、发性脂肪酸的气相色谱测定法2.5.1.1 测定原理使用色谱仪上的氢火焰检测器测定挥发性脂肪酸含量，其根本原理是： 色谱柱分别后馏出的物质被载气载入检测器离子室的喷嘴口，与燃烧气 氢气相混合，并以空气助燃气进展燃烧，以此为能源，将组分电离成离子数目相等的正离子和负离子电子。在离子室内装有收集极和底电极，因此离子在电场内作定向流淌，形成离子流。该离子流被收集极收集后，经过微电流放大器放大输送给记录仪得到信号，此信号的大小代表单位时间内进入检测器火焰的组分含量。2.5.1.2 测定条件试剂设备 乙酸、丙酸、丁酸、戊酸混合标准液的配制。分别吸取乙酸A.R.， 相对密度 1.045，含量 99%、丙酸A

4、.R.，相对密度 0.9987，含量 99.5%、丁酸A.R.，相对密度 0.8097，含量 99%、戊酸A.R.，相对密度 0.934，含量 100%各 25L 于 50mL 容量瓶中，再参加 2.5mL 甲酸A.R.，相对密度 1.22，含量 88%，最终用蒸馏水定容。其中乙酸、丁酸、戊酸的浓度分别为 517L/L、497L/L、401L/L、467L/L。 6mol/ L 硫酸的配制：将 167mL 浓硫酸相对密度 1.84缓慢倒入 833mL蒸馏水中。 甲酸：相对密度 1.22，含量 88%。 离心机 400016000r/min。 气相色谱仪，FID 检测器。 样品预处理 用沼气发酵

5、液 7mL 参加 2 滴 6mol/ L H2SO4 使 pH 值降至 3.5 左右用pH 试纸粗测，离心2030 min，取上层透亮清液 3mL，参加 0.15 mL 浓甲酸，最终 pH 值为 2.0 左右掌握在 3.0 以下。 主要试验参数4 条件一。固定相：GDX103+H3PO ，2%(6080 目)；色谱柱：2m6mm；柱温：180200；气化室温度：240；检测温度：210；进样量：2L； 载气流量：N2，50mL/ min；氢气流量：50 mL/ min；空气流量：600700 mL/min；衰减：1/8。 条件二。色谱柱：2m3mm，不锈钢柱，内填国产 GDX-401 担体，

6、6080 目；柱温：210；载气：N2，流率为90mL/ min；空气流率：500 mL/ min；氢气流率：50 mL/ min；气化室温度：240；检测温度：210。 条件三。色谱柱：2m6mm，装有以2%磷酸饱和的6080 目GDX-103担体；柱温：180200；气化室温度：240；检测温度：210；进样量：2L；载气流量：N2，50mL/ min；氢气流量：50 mL/ min；空气流量：600700 mL/ min； 条件四。色谱柱： 2m2mm，玻璃柱，内装有 10%的商品固定液FluoradFC431 涂布的 Supelcoport 担体，100200 目；柱温：130；气化室

7、温度：220；检测温度：210；载气流量：N2，40mL/ min。 定性与定量 定性。配制模拟标准样品，用物质的保存时间比照被测物质的保存时间进展定性。 定量。用样校正法进展定量，其方法是配制浓度的标准样与样品组分全都，进展色谱试验，测量标准样各组分的峰高或峰面积， 求出组分 i 的单位峰高或峰面积的组分含量或作出峰高和浓度的标准曲线。当样品组分浓度变化不大时，可承受单位校正法。当样品组分浓度变化很大时，则需预先用校准样作出浓度和峰高或峰面积的标准曲线，观看其标准曲线是不是通过原点的直线，即是否呈线性。假设呈线性，就可用单点校正法， 按下面的公式计算：总C = C H VsiHiVs样Ci

8、待测样品浓度，L/L；H 待测样品峰高，mm；iC 标准样品浓度，L/L；sH 标准样品峰高，mm；sV 待测样品体积+甲酸体积，mL；总V待测样品体积，mL。样2.5.1.3 方法的精度和留意事项 以 GDX103+H3PO42%为固定相，比用 GDX101 、PEGS、Porapak.N 等作为固定相其保存时间短，且峰形对称。 本法最小检测量为 4L/L，相对误差为 1.8%，相对标准偏差2.7%以乙酸计。 有机酸是一种强极性物质，沸点较高，由于担体对酸的吸附，常常引起酸峰拖尾和鬼峰的消灭。因此，取有机酸直接进样测定时，为了抑制酸的吸附，可实行以下措施。 在样品中参加肯定量的浓甲酸相对密度

9、 1.22，含量 88%，使其甲酸参加量体积与样品的体积比为 5：100。甲酸是一种一元羧酸，离解常数2.1110-4大于其他任何一元羧酸，当含有甲酸的样品进入固定相时，担体外表的吸附中心位置被甲酸临时占据，这样便抑制了 C2C5 酸被担体的吸附。此外，甲酸在 FID 上响应很低，故对其他组分的应答影响不大。 酸的吸附还发生在接近进样口的地方，由于进样口常积存有碳质沉积物，通常承受蒸馏水清洗进样口，并用1.5%磷酸-丙酮液来浸泡进样口，然后在约 150的温度下将进样口烘烤 48h。 用 1.5%磷酸-丙酮液来浸泡柱口玻璃毛。 在分析高浓度时，肯定分析周期内注射水或 15%甲酸液来洗涤被柱子吸附

10、的酸。 操作条件恒定以后，在进标准酸样或样品之前，用15%的甲酸液来冲洗柱子 34 次。 柱子使用寿命大约 46 个月，一旦觉察色谱峰消灭拖尾或重复性差， 则必需更换柱。 尽管实行了一系列防止吸附的措施，但柱子的吸附问题还是不行能完全解决，特别是对于 4000L/L 以上高浓度的酸样，如何抑制吸附问题还值得更进一步争论。 当检测器的灵敏度显著降低或更换柱之后，重做校正曲线。2 挥发性脂肪酸总量的比色测定法2.5.2.1 测定原理含挥发性脂肪酸的样液，在加热的条件下，与酸性乙二醇作用生成酯， 此酯与羧胺反响，形成氧肟酸。在高铁试剂存在下，氧肟酸转化为高铁氧肟酸的棕红色络合物，其颜色的深浅在一个较

11、大的范围内与反响初始物 挥发性脂肪酸的含量成正比，故可用比色法测定。2.5.2.2 测定方法 试剂 1：1 硫酸：浓硫酸相对密度 1.84，C.P.加到同体积蒸馏水中稀释配制。 酸性乙二醇试剂：取 30.0mL 乙二醇(C.P.)与 4.0mL 配制的稀硫酸混合。 4.5mol/L 的氢氧化钠：称取 180g 氢氧化钠(C.P.)溶于水中，冷后以蒸馏水稀释至 1L。 10%硫酸羟胺溶液：称取硫酸羟胺(C.P.)10.0g，溶于 100mL 蒸馏水中。 羟胺试剂：量取 20.0 mL4.5mol/L 的氢氧化钠，与 5.0mL10%的硫酸羟胺相混合。 酸性氯化铁试剂：将 20.0g 分析纯 Fe

12、Cl3 6H2O 溶于 500mL 水中，准确参加 20.0 mL 浓硫酸，并以蒸馏水稀释至 1L。 测定程序 乙酸标准液的配制。准确称取乙酸分析纯，相对密度 1.045，含量99.0%1.010g，以蒸馏水稀释至 100mL，此溶液含乙酸 10mg/mL。准确吸取 10 mg/mL 乙酸标准溶液 1.0mL、5.0mL、10.0mL、15.0mL、20.0mL、25.0mL、30.0mL，分别置于 100.0mL 容量瓶内，以蒸馏水定容至刻度，摇匀，即得 100L/L、500L/L、1000L/L、1500L/L、2023L/L、2500L/L、3000L/L 的乙酸标准系列液。 标准曲线的

13、绘制。取相对密度 1.045 的乙酸分析纯试剂，制成50mL/L、100 mL/L、500 mL/L、1000 mL/L、1500 mL/L、2500 mL/L、3000 mL/L 的系列标准液，分别吸取 0.5 mL 分置于试管中12.5cm1.5cm，每瓶中准确参加，于沸水浴中加热 3min，然后马上以冷水冷却；再参加 2.5mL 羟胺试剂，充分摇匀，然后，充分振荡混匀，以蒸馏水定容，用 721 型分光光度计以 500nm 波长测定其光密度，绘制标准曲线，以横坐标表示浓度值，纵坐标表示光密度值。 样品的测定。以400010000r/min 的离心条件，制取沼气发酵样品澄清液，吸取 0.5m

14、L 样液置于试管中12.5cm1.5cm，准确参加 1.7 mL 酸性乙二醇试剂，充分混合，于沸水浴中加热 3min，应避开试管与加热器壁直接接触。然后马上将试管置于冷水中冷却。参加 2.5mL 羟胺试剂，并混匀，放置 1min，然后全部倒进盛有 10mL 酸性氯化铁试剂的 25mL 容量瓶中，用蒸馏水定容，并充分摇匀，静置 5min，用分光光度计以 500nm 波长测定光密度。同样操作做空白试验 1 份。计算C V挥发性脂肪酸 =1 10V3(mg/L)式中C样液光密度值相应于标准曲线上挥发酸的含量，mg； V测定样液体积，mL；V1测定时液样的稀释倍数。2.5.2.3 留意事项 此方法是挥

15、发性脂肪酸总量的阅历测定法，比蒸馏法测定更为简便、快速。除 150mg/L 以下的低浓度范围外，其测定值相对误差与气相色谱法测定总值的相对误差相近。 此法中的反响是在严格的 pH 值条件下进展的，最适 pH 值为 1.60.1。pH 值高于 2.0 时，色度加剧，pH 值低于 1.0 时，颜色难以稳定，易消逝。 酸性己二醇试剂和羟胺试剂宜使用时配，也可在测定中配入。例如， 以参加 1.5mL 己二醇和 0.2mL 稀硫酸来代替 1.7mL 酸性己二醇试剂，以 0.5mL 硫酸羟胺和 2.0mL4.5mol/L 的氢氧化钠来代替 2.5mL 羟胺试剂。 假设所做的空白测定含量酸量超过200mg/

16、L 时必需用氢氧化钠蒸馏提纯己二醇 。 酸性氯化铁配制好后，应静置过夜，弃去沉淀。 必需严格遵守操作规程，显色反响必需充分摇动。 比色法没挥发性脂肪酸总量，便利快速，对于特定样品特别是污水污泥体系的准确度较高，适合于沼气发酵的常规分析。3 挥发性脂肪酸VFA的测定-碳酸氢盐碱度和 VFA分析的联合滴定法挥发性脂肪酸VFA是厌氧消化过程的重要中间产物，甲烷菌主要利用 VFA 形成甲烷，只有少局部甲烷由CO2 和 H2 生成。但CO2 和 H2 的生成也经过高分子有机物形成 VFA 的中间过程。由此看来，形成甲烷的过程离不开 VFA 的形成，但是 VFA 在厌氧反响器中的积存能反映出甲烷菌的不活泼

17、状态或反响器操作条件的恶化，较高的 VFA例如乙酸浓度对甲烷菌有抑制作用。因此在反响器运行中，出水 VFA 用作重要的掌握指标。在 VFA 测定中，常进展VFA 总量测定，其单位以mmol/L 或换算为按乙酸计，以单位 mg/L 表示。对 VFA 中各种低级脂肪酸乙酸、丙酸的分别定量分析也是重要的，有时常需要知道以COD 表示的 VFA 的量即VFA 以单位 mgCOD/L表示，此时也需要知道 VFA 中各种有机酸的含量，因此它们换算为 COD 的换算系数是不同的。VFA 包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸以及它们的异构体。在运转良好的高速厌氧反响器中，VFA 中乙酸可占有很高的比例，但当

18、反响器运行状态不好时，丙、丁酸浓度会上升。1分析原理厌氧处理中会产生大量的 CO2，在反响器条件下pH68 之间，这些CO2 主要以 HCO3-形成存在。这是厌氧处理中最重要的 pH 缓冲物，由 HCO3- 或主要由 HCO3-引起的碱度称为碳酸氢盐碱度。HCO3-产生最大缓冲力量的范围约在 pH67。如前所述，HCO3-可以通过滴定测定，但测定过程受到其它一些阴离子的干扰，其中发酵液中常含有的VFA 的阴离子是影响碳酸氢盐碱度的主要因素。为此，在荷兰进展了碳酸氢盐碱度和VFA 同时进展测量的方法。其原理如下：水样先以 0.1000mol/L 的 HCl 标准溶液滴定至 PH=3，在这一 pH

19、 值下， 全部 HCO3-被完全转化为 H2CO3，VFA 也几乎完全地转化为其非离子形式。此后，已被滴定至 pH3 的水样在如下图的带回流冷凝器的烧瓶中煮沸，全部转化为H2CO3 的HCO3-将分解为CO2 和H2O，其中 CO2 完全由其中溢出， 而 VFA 则由于有回流冷凝器而保存在水样中。然后水样以 0.1000 mol/L 的NaOH 标准溶液滴定至 pH6.5，在此pH 下，全部的VFA 和其他弱酸将被转化为其离子形式。由使用的 HCl 和 NaOH 标准溶液的量，即可计算出碳酸盐碱度和VFA 的浓度。由此得到的结果更易于推断水样在厌氧条件下的缓冲力量。（2） 仪器1250ml 带

20、磨口烧瓶，250ml 烧杯；210ml 半微量酸式滴定管；310ml 半微量碱式滴定管；4. 回流冷凝器；5. 自动电位滴定计；（3） 试剂1. 无二氧化碳水用于制备标准溶液及稀释用的蒸馏水或去离子水，临用前煮沸15min， 冷却至室温。PH 值应大于 6.0，电导率小于 2s/cm。2. 酚酞指示液称取 1g 酚酞溶于 100ml 95%乙醇中，用 0.1mol 氢氧化钠标准溶液滴定至消灭淡红色为止。3. 甲基橙指示剂称取 0.1g 甲基橙溶于 100ml 蒸馏水中。4. 碳酸钠标准溶液1/2 Na2CO3=0.0250 mol/L称取 1.392g(于 250烘干 4h)的无水碳酸钠(Na

21、2CO3)，溶于少量无二氧化碳水中，移入1000ml 容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。贮于聚乙烯瓶中， 保存时间不要超过一周。5. 盐酸标准溶液0.0250 mol/L用分度吸管吸取 2.1 ml 浓盐酸(=1.19g/ml)，并用蒸馏水稀释至 1000ml,此溶液浓度0.0250 mol/L。其准确浓度按下法标定：用无分度吸管吸取 25.00 ml 碳酸钠标准溶液于 250 ml 锥形瓶中，加无二氧化碳水稀释至约 100ml，参加3 滴甲基橙指示液，用盐酸标准溶液滴定至由桔黄色刚变成桔红色，记录盐酸标准液用量。按下式计算其准确度：C=0.025025.00/V式中，c-盐酸标准溶液浓度mol

22、/L； V-盐酸标准溶液用量ml。6. 氢氧化钠标准溶液0.0250 mol/L称取 60g 氢氧化钠，溶于 50ml 水中，冷却后移入聚乙烯细口瓶中，盖紧瓶盖静置 4d 以上。然后吸取上层澄清溶液 1.4ml，用水稀释至 1000ml，此溶液约为 001mol/L。其准确浓度可用邻苯二甲酸氢钾标定，标定方法如下：取基准试剂级邻苯二甲酸氢钾在 105-110烘干至恒重。准确称取三份，每份约 0.1g称准至 0.0001g，分别置于 250ml 锥形瓶中，参加 100ml 水，稍加热使之溶解。然后参加 4 滴酚酞指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定至淡红色不褪为止。记录下氢氧化钠标准溶液的用量ml，并

23、按下式计算其浓度：C= =G103/(204.22V)式中，C-氢氧化钠标准溶浓度mol/L； V-氢氧化钠标准溶用量ml；G-邻苯二甲酸氢钾重量g；204.22-苯二甲酸氢钾(KH4C8H4O4)摩尔质量(g/mol)。（4） 操作步骤按自动电位计说明书安装、校正好电位计，以蒸馏水清洗电极。用移液管吸取过滤后的水样 Vml参加 250ml 烧杯中。其中含有 VFA 的量不超过 3mmol，将样品水温调制252，将盛有此样品的 250ml 烧杯置于滴定台上，投入长约 1.5cm 的磁力搅拌棒，翻开搅拌开关并调置肯定搅拌强度，留神将电极放入烧杯的液面下。假设此样品水样的 pH 高于 6.5，则准

24、确调整至 6.5。然后在自动电位滴定计上滴定此水样至 pH3.0，消耗的 0.1000mol/LHCl记作 Zml。将此水样转移至磨口锥形瓶中，参加沸石或玻璃珠少许，安装好回流冷 凝器。翻开冷却水，加热至沸腾并维持 3min 以上，撤离酒精灯并等待2min，将溶液移回 250ml 烧杯。以 NaOH 标准溶液滴定至 pH=6.5，消耗的 NaOH 标准溶液记作 Bml。（5） 结果计算挥发酸VFAmol/l=(ZCa-BCb)103/V 式中，Ca-标准 HCl 溶液的浓度mol/L；Cb-标准 NaOH 溶液的浓度mol/L。4 挥发性脂肪酸VFA的测定Q/YZJ10-03-02-20231

25、、范围本标准适用于工业废水厌氧消化过程中消化液中的挥发酸含量的测定。2、引用标准以下标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均有效。全部标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用以下标准最版本的可能性。GB/T 6682-1992 分析试验室用水规格和试验方法ISO3696-1978 GB12999-1992 水质采样样品保存规定。3、方法提要样品中的乙酸、丙酸、丁酸等挥发性有机物在酸性条件下被蒸馏出来， 馏出液经回流以除去 CO2、H2S、SO2 等气体，趁热以酚酞为指示剂用 0.1mol/L 的氢氧化钠溶液滴定，结果以乙酸计算。4、试剂和材料除另有说

26、明，本标准使用的试剂和水，均指分析纯试剂和GB/T6682 规定的三级水。4.1 25%硫酸溶液取 250 毫升分析纯浓硫酸参加约 700 毫升蒸馏水中，然后加水至 1 升。4.2 酚酞指示剂称取 0.5 克酚酞，溶于 50ml 95%乙醇中，用水稀释至 100ml。4.3 0.1N 氢氧化钠溶液配制及标定称取 60 克氢氧化钠溶于 50ml 水中，转入150ml 的聚乙烯瓶中，冷却后， 用装有碱石灰管的橡皮塞塞紧，静置 24 小时以上。吸取上层清液约 7.5ml 置于 1000ml 容量瓶中，用无二氧化碳水稀释至标线，摇匀。称取在 105-110 度枯燥过的基准试剂级苯二甲酸氢钾约 0.5

27、克称至0.0001g，置于 250ml 锥形瓶中，加无二氧化碳水 100ml 使之溶解，参加 4 滴酚酞指示剂，用待标定的氢氧化钠标准溶液滴定至浅红色为终点。同时用无二氧化碳水做空白滴定，按下式计算。氢氧化钠标准溶液浓度mol/L=M1000/(V1-V0) 204.23式中：m称取苯二甲酸氢钾的质量g；V0滴定空白时所耗氧氧化钠标准溶液体积ml；V1滴定苯二甲酸氢钾时所耗氢氧化钠标准溶液的体积ml； 204.23苯二甲酸氢钾的摩尔质量g/mol。5、仪器和设备5.1 500 毫升蒸馏装置；5.2 500 亳升磨口三角瓶；5.3 球形冷凝管；5.4 25 毫升碱式滴定管。6、取样按国家环保局公

28、布的环境监测技术标准地表水和“废水”局部规定实行有代表性的样品采集后应尽快测定或加少量氢氧化钠固定，置于 4下保存。7、分析步骤7.1 蒸馏。取 300 毫升/V5或适量水样加蒸馏水稀释至 300 毫升水样于 500 毫升的平底蒸馏瓶中，然后参加 25 毫升 25%的硫酸溶液，再参加数粒玻璃珠，进展蒸馏，接取 200 毫升蒸馏液。7.2 滴定。在另一电炉上加热煮沸回流 30 分钟，取下三角烧瓶，加 3 滴酚酞指示剂，趁热用 0.1N 的氢氧化钠标准溶液滴定至微红色 30 秒不褪色为终点。7.3 同时按上述步骤用蒸馏水代替水样作空白。8、分析结果计算挥发酸VFAmg/l= (V3-V4)N601

29、03/V5式中：V3滴定样品时所消耗的 NaOH 毫升数； V4滴定空白时所耗的 NaOH 毫升数； V5取样量ml；NNaOH 溶液的浓度mol/L； 60乙酸的分子量。9、留意事项9.1 在蒸馏过程中不能使水样直接冲入蒸出液中，假设蒸出则需重取样蒸馏。9.2 当丁、戊酸含量高时，代表性不强，最好用气相色谱法。VAF 不能代表乙、丙、丁、戊的各种含量。10、报告10.1 当两次重复测定结果之差不大于算术平均值的 10%时，取算术平均值报告、分析结果报告至 0.1mg/L。10.2 报告应包括以下内容：a) 有关样品的全部资料，例如样品的名称、采样地点、采样日期、采样时间等；b) 本标准的代号

30、； c)分析结果；d)测定中观看到的任何特别现象的细节及说明； e)分析人员的姓名及分析日期等。5 VFA 的滴定法分析（1） 原理本法原理是将废水以磷酸酸化后，从中蒸发出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用 NaOH 溶液滴定馏出液。废水中的氨态氮可能对测定形成干扰， 因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮，假设要同时测定氨态氮，以硼酸溶液吸取后滴定之。因此此法可用于氨态氮和 VFA 的联合测定。（2） 药品10%NaOH 溶液NaOH 标准溶液，0.1000mol/l10%磷酸溶液，取 70ml 密度 1.7mg/cm3 的磷酸用水稀释至 1L。酚酞指示剂，1%的乙酸溶液。（3） 测定步骤于蒸馏

31、瓶中放入 50200ml 待测废水，其 VFA 含量不超过 30mmol。如水样体积缺乏 100ml，可以蒸馏水稀释至 100ml。放入几滴酚酞指示剂。参加 10%NaOH 溶液，使溶解呈碱性，并使 NaOH 略过量。开头蒸馏 ，至蒸馏瓶中剩余的液体为 5060ml 为止。用蒸馏水将蒸馏瓶剩余液体稀释至原来的体积，用 10ml10%的磷酸酸化， 在承受瓶中放入 10ml 蒸馏水并使承受瓶与蒸馏瓶上的冷凝管连接，导入管应浸入承受瓶的液面以下。蒸馏至瓶中液体为 1520ml 为止。待蒸馏瓶冷却后， 参加 50ml 蒸馏水再次蒸馏，至剩余 1020ml 液体为止。为了除去二氧化碳、硫化氢、二氧化硫等

32、干扰物，可向馏出液中通入高纯氮气 1015min，然后参加 10 滴酚酞，用 NaOH 标准溶液滴定至淡粉色不消逝为止。（4） 计算挥发性脂肪酸含量计算如下：VFA=V (NaOH)*C*1000/Vs(mmol/L)式中：V(NaOH)-滴定消耗的 NaOH 标准溶液的体积，ml;c- 滴定消耗的 NaOH 标准溶液的准确浓度，mol/L;挥发性脂肪酸(VFA)的测定挥发性脂肪酸是厌氧硝化过程的中间产物，甲烷菌主要利用 VFA 形成甲烷，只有少局部甲烷由CO2和 H 生成。VFA 在厌氧反响器中的积存能反映出甲2烷菌的不活泼状态或反响器操作条件的恶化，较高的 VFA 浓度对甲烷菌有抑制作用。

33、VFA 包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸及它们的异构体，在运转良好的反响器中，乙酸比例较高，反响器不好时，甲酸、丙酸浓度上升。在 VFA 测定中，其单位常换算为按乙酸计，以 mg/L 表示。常用的测定方法有：滴定法和气相色谱分析法一、滴定法测 VFA： 1、原理将废水酸化后，从中蒸馏出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用氢氧化钠滴定馏出液。废水中的氨态氮先在碱性条件下蒸馏出。2、仪器：50ml 碱式滴定管、锥形瓶、带磨口的具支蒸馏烧瓶500ml、与烧瓶配套的蛇形冷凝管、橡胶导管、电炉试剂：(1) 10%氢氧化钠：10g 氢氧化钠溶于水,稀至 100ml。(2)10%磷酸溶液：取 70ml 浓

34、磷酸稀释至 1L。(3) 酚酞指示剂：称取 0.5g 酚酞溶于 50ml 95%的乙醇中,用水稀释至100ml。(4) 氢氧化钠标准溶液(0.1000mol/L)：称取 60g 氢氧化钠溶于 50ml 水中，转入聚乙烯瓶中静置 24h，吸取上层清夜约 7.5ml 置于 1000ml 容量瓶中,稀释至标线。称取在 105-110枯燥过的基准试剂(邻)苯二甲酸氢钾约 0.5g称准至0.0001g,置于 250ml 锥形瓶中，加无二氧化碳水 100ml 使之溶解，参加 4 滴酚酞指示剂，用待标定的氢氧化钠标液滴定至浅红色为终点，同时，用无二氧化碳水做空白滴定。氢氧化钠标准溶液浓度mol/L=M100

35、0/(V1-V0) 204.23 式中：m称取苯二甲酸氢钾的质量g； V0滴定空白时所耗氧氧化钠标准溶液体积ml； V1滴定苯二甲酸氢钾时所耗氢氧化钠标准溶液的体积ml； 204.23苯二甲酸氢钾的摩尔质量g/mol。3、测定步骤：(1) 于蒸馏烧瓶中参加 100ml 待测水样，几粒玻璃珠，参加几滴酚酞指示剂，然后参加10%氢氧化钠溶液使使水样呈碱性溶液消灭红色，并使氢氧化钠略过量。(2) 翻开冷凝水，开头蒸馏，蒸馏至瓶中液体为 5060ml，(假设测定氨氮，则可用 50ml 硼酸吸取馏出液。假设不，可倒掉。)(3) 参加约 4050ml 蒸馏水，参加 10ml10%磷酸酸化，在承受瓶中参加10ml 蒸馏水，将冷凝管插入液面下，蒸馏至瓶中液体为 1520ml。待冷却后， 参加 50ml 蒸馏水连续蒸馏，至瓶中剩余液体 1020ml 止。(4) 向馏出液中参加 10 滴酚酞指示剂，用氢氧化钠标液滴定至氮淡粉红色不消逝止，记录用量。计算： 挥发酸VFAmg/l= (V3-V4)N60103/V5式中：V3滴定样品时所消耗的 NaOH 毫升数； V4滴定空白时所耗的 NaOH 毫升数； V5取样量ml；NNaOH 溶液的浓度mol/L； 60乙酸的分子量。留意事项：(1) 蒸馏前翻开冷凝水；(2) 冷却时，把承受瓶移开，以免倒吸；及分析日期等。