OLYMPUS钠钾氯离子选择性电极ISE间接电位法测定作业指导书.docx

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1、OLYMPUS 钠钾氯离子选择性电极 ISE 间接电位法测定作业指导书1. 试验原理 1 传统的血液样品的离子检测方法是用火焰光度学方法， 样品被离子通常为锂离子或铯离子浓度的溶液稀释， 雾化并通过火焰成为离子态。这些离子象不同频率的光子一样稀放能量，光的强度与样品中的离子浓度有关。觉察的钠离子选择性玻璃、和选择性吸取钾和氯的有机化合物使得探测器可以直接接触生物体液进展测量，这些感受器即所谓离子选择性电极。OLYMPUS 电解质使用离子选择性电极技术检测生物体液中的钠、钾、氯离子浓度。钠、钾电极 承受对钠、钾离子敏感的膜电极； 氯电极承受分子机制的 PVC 膜， 仅对氯离子敏感。电极电位可与内

2、参比电极产生的稳定电位比较而测得。离子选择性电极使 得电位随样品的离子浓度的转变而转变， 变化的电位与离子浓度呈对数关系， 以能斯特方程表示：RT CEE0 NF其中： E 在样品溶液中的电极电位E 在标准状态下的电极电位RT/nF 一个与电极反响值有关的常量 取自然对数r 溶液中的离子活度c 溶液中的离子浓度检测时利用了比较法。首先， 参加样品， 再参加稀释液， 混匀后吸进装载电极的分析单元中， 测量电位， 然后参加标准液测量电位， 测量电位， 二者的差与样品中钠、钾、氯离子浓度和它们在标准液中的浓度之比存在对数关系，因电位与标准液中钠、钾、 氯离子浓度的关系， 计算机可据能斯特方程计算出样

3、 品中钠、钾、氯离子浓度。2. 标本采集 2 ， 3 2.1 病人预备： 无特别要求。最好用禁食的标本以削减乳糜血的干扰。2.2 类型： 血清、肝素锂抗凝血浆或尿液。3. 标本采集、处理与贮存： 应尽量避开标本溶血或严峻脂血。溶血标本， 红细胞中的钾会释放到血清或血浆中， 造成假性钾便高。因此血清、肝素锂抗凝血浆标本应准时离心分别血清或血浆并避开残留红细胞。严峻脂血的标本， 会造成假性低、钠钾血症， 应通过超速离心消退脂血的影响。血清或血浆标本的稳定性： 在 2 25 贮存， 氯稳定 7 天，钾 6 周， 钠 2 周。24 小时尿液标本不添加防腐剂，混浊尿应离心后吸取上清液，严禁酸化尿液。尿标

4、本的稳定性：在 2 25 贮存，氯稳定 7 天 6 ，钾在 2 8 贮存稳定 2 个月，在 15 25 贮存稳定 45 天 4 ，钠在 2 25 贮存稳定 45 天 4 。4. 标本运输： 室温条件下运输5. 标本拒收标准： 细菌污染、溶血、严峻脂血的不能做测定。6. 试验材料：6.1日本 OLYMPUSISE 试剂与标准液货号试剂名称规格成分浓度单位：mol/L试剂稳定性6632ISE 缓冲4Triethanola0.10液2023mlmine适量2 个月防腐剂Na4.366319ISE 中值标准液42023mlKCl0.133.11 个月防腐剂适量66318ISE 参比液41000ml氯化

5、钾防腐剂1.0适量2 个月6631ISE 低值4NaK1303.57血清标准100mlCl8590 天液防腐剂适量6631ISE 高值4NaK16066血清标准100mlCl12090 天液防腐剂适量低50高6631ISE 低/高4Na K200低10高5值尿标准液100mlCl防腐剂100低50高90 天180适量6631 ISE 内参225ml氯化钾3.390 天4比液氯化银饱和防腐剂适量ISE Na/K6631Na150选择性监 225ml90 天7防腐剂适量测液6.1.1 试剂组成： 见上表。6.1.2 试剂预备： 试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存货号为 66314 的试剂应

6、保存于 15 25 ，假设开启使用， 在 15 25 保存可稳定 90 天。其它试剂未开启前在 2 25 保存可稳定至失效期；一旦开启在 2 25 保存其有效期见上表。6.1.4 变质指示： 当试剂有浊度时， 说明有细菌污染或过失效期不能连续使用。6.1.5 留意事项：货号为 66317 、66316 、66315 、66314和 66313 的试剂在每次使用后均应马上盖好盖子。ISE 内参比液在保存期间可有局部沉淀释出， 这不会影响试剂性能， 但在使用前应充分混匀试剂。试剂中含防腐剂。不行入口！ 避开接触皮肤及粘膜。应实行必要的预防措施使用试剂。6.2 校准品：使用 OLYMPUS 公司供给

7、的 ISE 低/高值血清标准液或 ISE 低/高值尿标准液对自动进展校准， 每天开机前校准或在以下状况下校准： 试剂批号更换、质控数值明显漂移或失控、更换电极、主要 的预防性保养后或关键部件更换后。6.3 质控品： 具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件7. 仪器： 奥林巴斯 AU1000 ISE 8. 操作步骤： 参见 AU1000 ISE 操作规程.SOP 文件9. 检验结果的推断与分析10. 质量掌握： 在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进展分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限， 绘制质控图， 推断是否在控。质控规章参见室内质控操作规程.

8、SOP 文件。11. 计算方法： 使用 OLYMPUS 公司供给的 ISE 低/高值血清标准液或 ISE 低/高值尿标准液校准仪器后，在病人结果可报告范围内， 仪器直接报告牢靠的检测结果， 以 mmol/L 报告。12. 参考值范围 成人 见下表：钠钾氯血清136-146mmol/L3.5-5.1mmol/L98-106mmol/L血浆136-146mmol/L3.4-4.5mmol/L98-106mmol/L尿液 24时小40-220mmol/ 天25-125mmol/ 天110-250mmol/ 天参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差异。依据好的试验室阅历， 每个试验室应建立自己的

9、参考值。 由于分析方法局限性，应留意对高脂血症和高蛋白血症的病人标本检测结果的解释。13. 临床意义13.1 钾离子是细胞内液中的主要阳离子。钾离子测定可用于诊断电解质失衡， 心律不齐， 肌无力， 肝脑病变和肾衰竭， 并在糖尿病和静脉输液治疗中检测酮酸中毒。并发醛固酮过多症的高血压患者， 超过 90% 的人 K+ 浓度很低。呕吐，腹 泻，嗜酒和叶酸缺乏症都可引起 K+浓度降低。快速输入 K+，晚期肾衰，溶血性病变， 外伤， Addison 氏综合症， 代谢性酸中毒， 急性饥饿症， 脱水和急救等均可引起 K+ 浓度上升。通常状况下， K+经肾小球过滤掉， 但在 K+ 浓度较低时，K+ 会保存下来

10、。在饮食增加， 高醛固酮症， 肾小管性酸中毒和碱中毒发病时， 尿液中 K+ 的含量上升。13.2 钠离子是细胞外液中的主要阳离子，人体内的钠平衡由肾脏维持。尿液排泄过多， 腹泻， Addison 氏综合症， 肾小管肾炎等都可引起钠浓度降低。严峻脱水， 某些类型的脑外伤， 糖尿病昏迷和盐摄入过量可导致钠浓度上升。13.3 氯离子是细胞外液中的主要阴离子，它的生理重要性在于能保持人体正常的水代谢， 渗透压和细胞外液中正常的离子平衡。在脱水， 肾小管酸中毒 高氯代谢酸中毒，食盐摄入过多等状况下，氯的浓度会上升。在水含量过多，慢性呼吸性酸中毒，失盐性肾炎， 代谢性碱中毒和充血性心脏衰竭等状况下， 氯的

11、浓度会降低。14. 操作性能14.1 线性范围血清50-200mmo1.0-10.0m50-200mmol/Lmol/Ll/L血浆50-200mmol/L1.0-10.0mmol/L50-200mmol/L尿液10-400mmo2.0-200mm15-400mmol/Lol/Ll/L钠钾氯14.2 周密度：重复性的评估是依据 NCCLS 推举的标准批内精总精密N=80血密度度方法， AU1000 批内重复性小于 3% ， 总不周密度小于3% 。 用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规章。清：平均值mmol/LSDCV%SDCV%钠1380.660.490.890.64钾4.80

12、.030.650.040.76氯900.580.640.630.71尿N=80批密内精度总精度密液：平均值SDCV%SDCV%mmol/L钠1660.730.441.290.78钾1000.480.481.301.29氯2451.060.432.220.9014.3 方法学比较： 奥林巴斯 AU1000 ISE 方法 1 与其它商品化的 ISE 方法 2， 共同做同一批病人标本。相关系数及回归方程如下：钠 方 法 1= 钠 方 法 2 1.016-2.428 ，r=0.981(N=239， 病 人 结 果 数 值 分 布 ：118.0-157.0mmol/L) 。钾方 法1= 钾方法2 0.9

13、77+0.107，r=0.991(N=238，病人结果数值分布：1.5-7.0mmol/L)。氯方 法1= 氯方法2 1.024-2.302，r=0.977(N=23380-125.0mmol/L)，。病人结果数值分布：14.4 灵 敏 度 ： 本 法 线 性 下 限 为 血 清 / 血 浆 钠 为50mmol/L ， 钾为 1.0mmol/L ， 氯为 50mmol/L ； 尿钠为10mmol/L ， 钾为 2.0mmol/L ， 氯为 15mmol/L 。14.5 病 人 结 果 可 报 告 范 围 ： 血 清 / 血 浆 钠 为50-200mmol/L， 钾 为1.0-10.0mmol/

14、L， 氯 为50-200mmol/L； 尿 钠 为 10-400mmol/L， 钾 为2.0-200mmol/L ， 氯为 15-400mmol/L 。15. 超出范围结果处理： 本法线性上限为血清/ 血浆钠为 200mmol/L ， 钾为 10mmol/L ， 氯为 200mmol/L ； 尿钠为 400mmol/L ，钾为 200mmol/L ，氯为 400mmol/L 。如样品测定值超过上限时，应将样品用去离子水作 1： 1 稀释， 重测定， 结果乘以 2。16. 病 危 报 警 值 的 处 理 ： 当 血 清 / 血 浆 ： 钠 160mmol/L 或 120mmol/L ； 钾 6.

15、5mmol/L 或 2.5mmol/L ，氯 115mmol/L 或 80mmol/L 时，应在复查该标本检测结果后， 准时报告临床医生， 必要时可以再抽血复查。17. 方法局限性17.1 本法线性上限为血清/血浆钠为 200mmol/L ， 钾为 10mmol/L ， 氯为 200mmol/L ； 尿钠为 400mmol/L ， 钾为 200mmol/L ，氯为 400mmol/L 。如样品测定值超过上限时，应将样品用去离子水作 1：1 稀释，重测定， 结果乘以 2。17.2 干扰物质：某些抗凝剂、防腐剂、药物、有机化合物会干扰测定， 具体参考文献 8。18. 补救措施： 当仪器发生故障无法

16、自行解决时，迅速联系仪器厂家进展修理， 同时可用 VITROS250 干化学或者 EASYLYTE Na/K/Cl 测定病人标本。19. 参考文献： OLYMPUS ISE 试剂说明书和操作手册1. TietzNW,PrudenEL,Siggaard-AndersonO. Electrolytes. In Teitz NW, ed. Fundamentals of clinical chemistry. Philadelphia： WB Saunders Company, 1987 ： 614-624.2. Tietz NW, ed. Clinical guide to laboratoryt

17、ests, 3r d ed. Philadelphia ： WB Saunders company,1995 ： 124pp,502-504,562-564.3. ScoltMG,HeuselJW,LeGryVA,Siggaard-Anderson O. Electrolytes and bloog gases. In ： Burtis CA,Ashwood ER,eds. Tietz textbook of clinical chemistry. Philadephia ： WB Saunders Company, 1999;1061.4. Ehret W, Heil W, Scgmitt

18、Y, Topfer G, et al.Use of anticoagulants in diagnostic laboratory investigation and stability of blood ,plasma and serumsamples.WHO/DIL/LAB/99.1Rev.2：26,39,41,48pp.5. NCCLS.Urinalysisandcollection,transportation,andpreservationofurineapecimens,approved guideline.NCCLS DocumentGP16-A2, 2 n d ed. Penn

19、sylvania ： NCCLS, 2023.6. Young DS. Effects of preanalytical variableson clinical laboratory tests. 2 n d ed. Washington.AACC Press, 1997.7. Tietz NW, Logan NW. Appendix In： Teitz NW,ed.Fundamentalsofclinicalchemistry. Philadelphia ：WB SaundersCompany,1987 ： 948,962,965pp.8. YoungDS.Effectsof drugson clinicallaboratory tests, AACC, 5 t h ed. AACC Press, 2023.20. 其他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置治理规定执行。