HIV初筛实验室工作制度及操作规范.docx

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1、HIV 快速检测试验室操作标准及工作制度一、抽血标准操作规程1、适 用 范 围需做血液检测的对象。2 、试 剂 与 材 料碘酒 、酒精棉 、棉签 、橡皮止血带 、注射器 一次性采血器、试管 、止血棉。3 、操 作 步 骤3.1 核对被检者姓名并标价试管；3.2 请被检者入座，伸出手臂放在采血垫上；3.3 用橡皮止血带扎紧并请被检者握紧拳头；3.4 选择静脉，用碘酒棉在采血部位由里向外擦拭直径约6cm 左右消毒；3.5 用酒精棉脱碘；3.6 把一次性注射器一次性采血器翻开，在采血部位穿刺静脉， 抽取血液；3.7 放松橡皮止血带，拔出针头，同时请被检者用止血棉压迫止血。二、酒精棉球的制备1. 试剂

2、与材料无水乙醇分析纯 、 消毒蒸馏水假设干 、消毒量筒1000ml 、消毒盛器2. 操作步骤2.1 把消毒棉放入消毒盛器中待用。2.2 取 165ml 消毒蒸馏水到入消毒好的量筒中，再参与一瓶 500ml无水乙醇充分 混匀。2.3 把配好的 75酒精到入放有消毒棉的盛器中10三、样品的采集和处理1 . 范围本章规定了用于艾滋病病毒HIV检测的血清、浆和全血样品的采集和处理方法，适用于 HIV 抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T 淋巴细胞测定和HIV 分别培育。2 . 操作步骤2 .1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试

3、样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下：2.1.1 血清样品采集和处理2.1.1.1 用一次性注射器或真空采血管抽取确定量静脉血，室温下自然放置 12 小时，待血液凝固、血块收缩后再用 3、000r/min 离心 15min，吸出血请备用。2.1.1.2 如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进展消毒，在刺破皮肤，快速把滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体外表造成污染。采血后要待血样枯燥后再包装送检。2.1.2 抗凝血样品采集和处理2.1.2.1 用加有抗凝剂的真空采血管或一次性注射器抽去静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分别血浆和血细胞备用。2.1.2.2 应依据试验要求选用适

4、当的抗凝剂，如 CD4+/CD8+T 淋巴细胞测定可选用K3EDTA 或肝素或柠檬酸钠，HIV 病毒分别、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA 或枸橼酸钠。2.1.2.3 用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在 48h 内分别 PBMC 和血浆，否则应在 2448h 内分别血浆和血细胞。(病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章 4.1 中表 2；CD4+/CD8+T 淋巴细胞测定样品采集要求见第五章 4.1。)2.1.3 采集样品留意事项2.1.3.1 采集样品原则上应按临床采血技术标准操作试剂盒有特别要求。2.1.3.2 采集样品时应留意安全，建议承受真空采血管及蝶形针具，以避开直接接触血

5、液；直接接触 HIV 感染者/艾滋病AIDS病人血液/ 体液的操作，应带双层手套。2.2 样品的保存2.2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20 度以下，短期1 周内进展检测的样品可存放于 2-8 度。2.2.2 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20 以下，进展病毒RNA 检测的样品如需保存 3 个月以上应置于-80 度。2.2.3 用于CD4+/CD8+T 淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过 48h 则不行检测。2.3 样品的运送2.3.1 试验室间传递的样品应为血清或血浆，除特别状况外一般不运送全血。2.3.2 应承受WHO 提出的三级包装系统2.3

6、.2.1 第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的四周应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。2.3.2.2 其次层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装假设干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。2.3.2.3 第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签数量，收、发件人。2.3.3 血清和血浆样品应在 28 度条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+T 淋巴细胞测定的样品应在室温下 1823

7、 度运送。每一包装的体积以不超过 50ml 为宜。2.3.4 运送感染性材料必需有记录。2.3.5 如分别血浆仍有困难，可直接将抗凝血-20 度以下冻存，承受冰壶冷藏运输，避开冻融。2.3.6 特别状况下如需对个别样品进展复测，可以用特快专递形式投寄，但必需按三级包装系统将盛样品的试管包扎好，避开使用玻璃容器，以保证不会裂开和溢漏。2.4 样品的接收2.4.1 含有感染性样品的包裹必需在具有处理感染源设备的试验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员翻开，用后的包裹应进展消毒。2.4.2 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如觉察溢漏应马上将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告

8、有关领导和专家。2.4.3 检查样品的状况，记录有无严峻溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等状况。假设污染过重或者认为样品不能被承受，则应将样品安全废弃。并要将样品状况马上通知送样人。2.4.4 翻开标本容器时要留神，以防内容物泼溅。样品处理时假设内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进展。同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。2.4.5 因特别临床治疗导致自发荧光的样品不行用于荧光方法测试。2.4.6 承受样品时应填写样品承受单。四、 电 热 恒 温 水 浴 箱 操 作 规 程1. 概 述：本电热恒温水浴箱主要用于科研单位、医疗单位及化验所检查化验病理血清等用。2. 技术性能：工作

9、环境：常温常压条件下正常工作。技术指标：温度调整范围：3765 温度波动：1温度均匀性：13. 使用方法：3.1 使用是必需参与温水，可缩短加热时间和节约用电。3.2 翻开电源开关，电源指示灯亮表示电源接通。3.3 旋转恒温把握器旋钮，加热指示灯亮表示电源接通，当温度表上的温度到达所需使用的温度时，将恒温把握器的旋钮调整在恒温指示灯忽亮忽熄点，待数分钟后即能自动恒温把握。3.4 恒温把握器的刻度，仅可作温度比照指示，并非温度指示刻度。4. 点检程序：4.1 为保证水浴箱温度的 准确性必需每日使用温度计测量水浴箱内水温，并做好日温度记录。4.2 每半年由设备科检测校正一次，且附有原始记录。5.

10、留意事项：5.1 箱外壳必需有效接地。5.2 在未加水前，切勿开电源，以防止电热管内的电热丝烧坏。5.3 非必要时，请勿拆开右册盖板，以利安全。五、生物安全防护试验室操作规程(一)、 适用范围：生物安全防护试验室分为 四个等级本文涉及一、二级，上一级试验室操作规程除了必需遵守 一级试验室的全部操作规程外还必需遵守本级所特有的操作规程。(二)、 操作步骤： 一级生物安全防护要点1、 常规微生物安全操作要点1） 制止非工作人员进入试验室，参观试验室等特别状况须经试验室负责人批准前方可进入。2） 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套离开试验室前要洗手。3） 制止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼睛、

11、扮装及储存食物。4） 用移液器吸取液体，制止口吸。5） 应制定锐利器具的安全操作规程。6） 依据试验室安全操作规程操作，以降低溅出和汽溶胶的产生。7） 每天工作前后至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要准时消毒。8） 全部培育物、储存物及规定的废弃物在运出试验室之前必需进展消毒，如高压消毒。需运出试验室灭活的物品必需放在 专用密闭容器内。9） 制定有效的防鼠防虫措施。2、特别的安全操作规程无特别的安全操作规程二级生物安全防护试验室1、常规微生物安全操作要点与一级生物安全防护试验室一一样。2、特别的安全操作规程1 进展感染性试验时，制止他人进入试验室，或必需经试验室负责人同意前方可进入。2） 试

12、验室主任有权打算进入试验室工作人员的名单，并负有最终责任。进入试验室的工作人员应了解潜在风险并符合进入试验室的特别要求如，经过免疫接种。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必需经试验室负责人同意方可在试验室内工作。3） 试验室入口必需贴上国际通用的生物危急标志，注明危急因子、生物安全级别、需要的免疫、负责姓名和 、进入试验室的特别要求及离开试验室的程序。4） 工作人员应承受必需的免疫接种和相应的抗体检测如乙型肝炎疫苗、卡介苗等。5） 收集保存从事危急性工作人员的根底血清并定期检测，如有问题准时处理。六、移液器的使用与校准的标准操作程序一、移液器是生物试验室常用工具，它以使用便利、安全性好的性

13、能适宜于各种试验，保养好移液器是 保证明验准确、牢靠的重要条件。因此特制定此标准操作程序：(一)、移液器的体积类别：可分为 5 种0.510.0 l分刻度为 0.1 l540 l分刻度为 0.5 l40200 l分刻度为 1.0 l2001000 l分刻度为 5.0l15 m l 分刻度为 50l (二)、移液器的使用方法首先应选择或按说明书要求调整好所需要的体积，装上配套的加样头，以下全部操作都必需将移液器保持垂直状态。1、 前进法！将移液器按钮压到第确定点位置。（2） 将移液器加样头插到所需要移液样品液面下 23mm，渐渐松开。（3） 将加样头伸入需要样品的容器，尽量将按钮推至最终档。（4

14、） 松开按钮，回到起点，退掉加样头。2、倒退法本方法适用于高黏度或易起泡沫的样品加样，也推举用于微小量液体的加样。（1） 将按钮下压至其次定点位置。（2） 将移液器的加样头插入所需要移液样品液面下 23mm，渐渐松开吸入液体。（3） 将加样头伸入需要样品的容器，贴在容器内壁，轻轻压下操作按钮至第确定点位置，待加样头中液体流净后，撤出移液器。（4） 遗留在加样头内的液体可随头子弃去。3、 重复操作法可快速、简洁地重复进展一样样品，一样体积的加样动作：（1） 前面的 3 个步骤和倒退法的前 3 个步骤完全一样，完成第一次加样动作。（2） 此时，移液器的按钮保持在第确定点位置，重复第 2、3 步骤。

15、4、全血加样：由于全血很粘稠（1） 按前进法的第 1 和第 2 步操作，取出所需血样。（2） 将移液器加样头伸入含有稀释液的试管内。（3） 用稀释液反复数次，直到加样头内液体清楚。七、酶标仪洗板机的使用维护和校准设立常用仪器的维护及校准制度，以保证仪器正常运行。1、每天核对滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏夜现象。2、每周清洁仪器外表，保护光学零件不沾灰尘。3、每月检查洗涤时各孔是否有相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求。4、每年检查清洗滤光片，假设消灭裂开或霉点则要更换，依据仪器内具有的校准程序或使用校准板，对滤光片的周密度进展校准并保存记录。试验过程中觉察特别状况，应随时进

16、展处理，可依据使用状况更换必要部件。每天试验后，做好使用记录。八、废弃物处理标准程序为了避开试验室污染，HIV 抗体试验室所废弃物品必需按特定程序进展清洁和消毒。(一)、HIV 抗体试验室所废弃的物品1、使用过的一次性注射器；2、使用过的一次性试管；3、使用过的一次性隔离服、口罩、帽子、乳胶手套、塑料手套；4、使用过的一次性加样头；5、试验过程所用过的滤纸、棉球及试验用的塑料制品如加样反响板等固体物质；6、试验过程所废弃的液体血清、全血及尿液等。(二)、废弃物的处理原则：1、全部液体血清、尿液、反响液等必需消毒。2、全部废弃的固体物质，必需消毒后燃烧。对上述污染或可能造成污染的材料，在带出 H

17、IV 抗体试验室前应进展消毒后弃掉或燃烧。(三)、废弃物的消毒：1、弃物缸内要装有10%V/V次氯酸钠，含 10.000ppm 有效氯对废弃的固体物进展浸泡消毒。2、生物安全柜、超净台、试验台等台面和仪器外表要用 70%乙醇、4%甲醛水溶液或过氧乙酸等擦拭消毒。3、溢出物用 10%次氯酸钠浸泡、擦拭。4、HIV 抗体试验室每次做完试验后，紫外线灯消毒 1520 分钟。5、试验废弃的固体物质，经消毒后装于塑料袋或防漏器中。6、试验室废弃液体样品尿液、唾液、血清、血浆100ml 加漂白粉 5g 或二氯异氰尿酸钠 2g，1%次氯酸钠溶液，作用 6h-24h 或煮沸100C20 分钟后弃入下水。( 四

18、)、HIV 抗体检测试验室必备药品与试剂：1、次氯酸钠2、过氧乙酸3、医用酒精4、碘氟5、其它氯制剂6、紫外线7、废弃物储存、运输及消毒灭菌防漏的容器。九、 HIV 抗体检测操作及报告撰写留意事项1 、收到样品时应当对样品标记送检单中的内容是否全都，尤其是编号并准时冷藏，登记科内的标本登记薄；2 、试验前将全部试剂从冰箱中取出，登记室内温度、湿度，恒温培育箱及冰箱温度，清空洗板机废液瓶，预备需要的移液器与移液头， 排列所需要检测的样品；3 、试验过程中严格依据试剂说明书操作；4 、试验完毕后准时处理废弃物；5 、做好试验原始记录包括日期，样品编号，试验结果，试剂名称、批号、有效期、温湿度，冰箱

19、、培育箱温度，仪器设备型号、仪器使 用记录等；6 、核对试验结果，撰写报告，测试人，复核人，编制主检人， 校核人栏里签名，检品卡上部门负责人栏里签名，送收样室打印；7 、取回报告，校对，在检品卡校对栏中签字1 人；8 、再送收样事打印三份正式报告，取回三级签发编制主检审核 ，批准栏签名，日期全都，复印送检化验单；9 、装订：9.1 一份质管科存档：托付单，检品卡，原始的样品检测原始记录，原始的检验报告底稿，检验报告；9.2 一份发送送检单位：化验单复印件和检验报告；9.3 一份科室存档：化验单复印件和检验报告； 三份报告送收样室盖章；10 、登记报告编号存档；11 、客户取报告并签收。十、艾滋

20、病筛查试验室常规消毒清理工作制度试验室为防止阳性材料造成的可能性污染，制定以下消毒制度， 请以认真执行。1、检测可疑样品时，充分预备好废弃物消毒具及消毒药、液如： 次氯酸钠含有效氯 20235000mg/L，75%乙醇和 2%戊二醛。2、试验室用的吸头准时打入消毒器皿中。3、一次性手套，隔离服更换后，应丢弃在一次性垃圾袋内。4、常用消毒方法4、1 物理消毒方法4、1、1 高压蒸汽消毒，121C，保持 1520min；4、1、2 枯燥空气烘箱消毒干烤法，140C，保持 23h。4、2 化学消毒方法4、2、1 废弃物缸：5000mg/L 次氯酸钠4、2、2 工作台面及仪器外表：75%乙醇4、2、3

21、 溢出物：5000mg/L 次氯酸钠4、2、4 污染的台面和器具：2023mg/L 次氯酸钠也可用过氧化氢或过氧化乙酸，器械可用 2%戊二醛消毒5、试验室中发生可疑样品溢出时，应准时用消毒剂浸泡的吸水物质掩盖，10-15 分钟，用消毒剂清洗该地方。6、全部试验工作完毕后，应对试验台、仪器、设备接触部位 地面进展彻底消毒处理。7、废弃物处理从 HIV 试验室出来的全部废弃物，包括不再需要的样品，培育物和其他物品，均应视为感染性废弃物，处理应符合试验室生物安全通用要求GB194892023和消毒技术标准2023 年版十一、艾滋病筛查试验室资料保密制度为确保试验室全部资料严格保密，应遵守以下制度：1

22、、与 HIV/AIDS 相关检测工程的全部资料均应严格保密，包括送检单与检测记录的保管，报告单的发放和工作人员年度采血检测等。2、 HIV 初筛试验室全部人员应具有高度的保密意识，严格遵守国家规定的保密制度的各项要求。3、工作人员不得向无关人员供给检验结果，要妥当保存各种试验记录。4、对初筛疑似阳性感染者不能告知受检者本人，更不能处处乱讲。5、 对初筛证明的阳性结果要以机密程序上报主管领导机构，并对本人做好。6、初筛试验室的有关检验资料，档案、结果记录其他人不得翻录查阅，修改和销毁。7、试验室工作人员，不能在非正式场合对外供给任何结果、数据。8、保密制度纳入年度考核，觉察问题准时处理，并依据状

23、况修订保密制度。十二、艾滋病筛查试验室安全防护制度为确保试验室人员的工作安全，防止穿插感染，请严格遵守安全防护制度1、工作人员要完成与工作有关的充分有效的技术培训，要了解HIV危害，提高全员安全意识，试验室安全负责人要对工作和环境的安全负责，全部工作人员都有责任保护自己和他人的安全。2、试验室工作人员年度采血检测 HIV 抗体和备案制度。3、对有放试剂、样品血清的冰箱应上锁，专人治理。4、试验人员应娴熟把握操作学问和消毒技术。5、进入试验室应穿隔离衣，戴手套，传染性危急大时应戴双层手套，戴防护镜，口罩，如防护用具破损应准时更换，不用戴手套的手触摸暴露的皮肤等部位。6、试验期间尽量避开使用利器，

24、易碎器皿，制止承受口腔吸液管。7、送检样品应视为有潜在传染性，由专人接收，登记，存放，提取。8、对带入和带出试验室的物品都应进展检查，包裹必需在以下状况下翻开；人员在处理感染源方面受过训练；具有处理感染源设备的试验室；穿防护服的工作人员；用后置可消毒的容器。9、试验用吸头、手套、隔离服、污染物、废弃物均放在指定垃圾袋中统一进展消毒，燃烧到无害化处理。10、不得在试验室中吃食物，扮装装扮等，不得在试验室会客。11、试验室用品包括工作服不得用于其他用途，不行将私人和无关的物品带入试验室。12、工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作服，用肥皂和流淌水洗手，洗手后离开试验室。13、试验完毕后，要对工作平

25、台、仪器、地面进展消毒处理。14、遇有意外事故，应马上口头和书面报告上级部门，并进展局部处理，如含氯消毒剂浸泡伤口，洗眼，漱口等，如遇高危意外事故，除进展局部处理外，同时应马上实行预防措施，包括对其随访， HIV检测，休息并暂离岗位二个月，按医嘱服用 HIV 药物等。十三、HIV 试验室进入状况登记表姓 名事由进入时间离HIV 试验室进入状况登记表152023 年大番坡镇卫生院检验科艾滋病/HIV 初筛试验室年度工作总结为促进艾滋病筛查试验室标准化治理，提高试验室检测技术水平， 依据 HIV 筛查试验室的各项要求，我们组织全体职工认真学习了相关文件和科室的各种规章制度，对一年来的工作进展了认真

26、的分析总结， 从中吸取阅历教训，改进今后的工作。一、认真学习 HIV 筛查试验室各种制度,严格执行各种规章制度. 二、开展 HIV 筛查状况全年接收 HIV 筛查标本 份,无一阳性.术前检测占 %，受血前检测占 %，性病门诊占 %，婚前检查(含涉外婚姻)占 %，孕产期检查占 %，其他就诊者检测占 %。三、开展试验室标准化治理努力改进工作通过学习并结合科室在医疗安全、医疗质量和效劳态度方面存在的问题进展了深入的争论，对我室一年来的问题和医患纠纷进展了总结和争论，完善了局部制度和治理方法。1、比照HIV 筛查试验室治理方法，加强规章制度的健全和落实， 健全了各种工作记录，使 HIV 筛查试验室工作

27、走向标准化、法制化、程序化。2、对工作人员加强医疗安全教育，特别是工作时的防护，结果的解释，质量把握、待复检标本上报的程序等。3、对有放试剂、样品血清的冰箱应上锁，专人治理。4、制作了标本转运盒，确保标本转运的安全。5、开展试验室全面质量把握确保检验质量：进展了仪器校准，加样器校准，制作了 HIV 临界质控血清，通过室内质量把握活动检验工作质量，并从中觉察问题、解决问题。6、废弃物处理从 HIV 试验室出来的全部废弃物，包括不再需要的样品，培育物和其他物品，均应视为感染性废弃物，处理应符合试验室生物安全通用要求.我科承受高压蒸汽消毒，121C，保持 1520 min。167、试验室工作人员年度体检,采血检测 HIV 抗体,乙肝,甲肝,梅毒抗体,丙肝抗体等,并备案.8、11 月 3 日我科派出二人参与市级HIV 初筛试验室培训班。我们科决心连续在上级领导和相关部门的指导下，加强 HIV 筛查试验室的标准化建设，努力工作，开拓创，为保障人民安康连续做出应有奉献。密市刘寨镇卫生院2023 年 3 月 22 日