《临床微生物检验问与答》系列之一.docx

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1、临床微生物检验问与答系列第一篇 临床微生物学试验室的治理第一章 临床微生物 试验室的一般治理第一节 临床微生物学试验室的根本建设一临床微生物学试验室的功能和设计(一) 当代临床微生物学试验室的功能是什么？答：当代临床微生物学试验室的功能不应当仅仅是检验的场所而是应与临床感染性疾病的流行病史亲热结合，建立分别、鉴定样品中病原微生物的方法学，并进展药物敏感试验。开展本单位的耐药监测，为临床医生阅历用药和目标用药供给参考依据。结合临床需要开展科学争论，不断建立满足临床工作所需的现行有效的检验工程，淘汰陈旧的、无用或错误的微生物检验工程。追溯传染源，降低医院感染率。( 二)、 是否每个医院必需建立临床

2、微生物学实 验室？微生物学试验室 应归属哪一局部更合理？答：依据卫生部 2023 年 285 号文件提示，“对二级或二级以下的医院也应建立临床微生物学试验室，进展病原微生物的分别、药敏试验和质量把握。”所以建立微生 物 学 实 验 室 是 医 院 的 必 须 ， 根 据 所 在 医 疗 机构级别建立相应生物安全防护级别的微生物学试验室，开展满足临床需要的检验工程；无明确的官方文件，依据目前中国已有的试验室格局，微生物室归属于检验科。在美国、日本等国家临床微生物学试验室归属于病理科，从有利于生物安全治理角度考虑，临床微生物学试验室与病理试验室、寄生虫试验室可同属一个部门或独立成立一部门较合理。(

3、三)、? 临床微生物学试验室的建筑材料有什么特别要求？答：微生物学试验室的桌面应由无化学、无生物毒性，易消毒、易清洗，抗腐蚀、抗吸 污、防水的光滑材料制成。放置承重设备的桌子强调其足够的结实性。试验室内不能铺设地毯，地面材料应具有耐清洗、耐消毒，防滑的性能；墙面也应符合便于清洗、消毒、不易吸附、光滑的原则。(四)、? 微生物学试验室的根本设施有什么特别要求？答：微生物学试验室应有足够的空间，依据菌毒种划分不同区域，结核菌检测、丝状真菌检测应与一般细菌检测分开；微生物学试验室至少应有两个洗手水池，其中一个作为染色或工作之用。另一个作为操作人员离开试验室前洗手之用。该洗手池应设在近门口，承受感应式

4、或脚踏把握的龙头；用洗手液而不是肥皂作手的清洁。试验室内的无菌室，用于倾倒培育基或其他无菌操作。无菌室内要有两道缓冲区，并设门。无条件设置无菌室的，可用超净工作台代替；微生物学试验室的每一个工作区都应安装紫外灯，合理的高度应距离桌面1m；微生物学试验室必需配备相应级别的生物安全柜，用于接种样品，分别细菌、药敏试验等产生气溶胶的试验活动；微生物学试验室的工作台应装台灯，用于显微镜使用，肉眼观看细菌溶血现象，玻片凝集反响，纸片法药敏试验的抑菌环等。(五)、? 微生物学试验室的耐火材料应用哪一级？ 答：应用二级耐火材料。二微生物学试验室的布局要求(一)、? 微生物学试验室的布局有什么特别要求？答：微

5、生物学试验室的布局应符合保护工作人员的安康，防止穿插感染，有利于样品送检 和保证工作质量的要求。微生物学试验室应划分为三大区域，包括清洁区，操作区和无菌区。 清洁区包括办公室、休息室、培育基制备室和试剂贮存。操作区也是微生物室的污染区，用于样品接种、分别、鉴定、药敏试验。无菌区是指无菌室，主要用于灭菌后物品的分装、培育基的倾注等活动，试验室空间缺乏的可用超净台代替无菌室。(二)、? 如何合理安排微生物学试验室操作区的布局？答：操作区布局应依据操作流程次序按单一方向布局，如样本接收、样品接种、培育、分别鉴定、药物敏感试验、结果报告等；依据上述的程序，可合理设置生物安全柜或洗手池的 所在位置。(三

6、)、? 如何安排结核菌检测试验室的布局？答：结核菌检测试验室应与一般细菌检测试验室分开，试验室的面积不应小于 10 平方米， 按功能分为操作区和相对干净区。操作区用于痰涂片制备、染色，相对干净区用于显微镜检查和登记。结核菌试验室必需有放置生物安全柜和保存必要涂片、病人资料的空间便于感染源的调查和资料的保存。其次节 临床微生物学试验室的生物安全治理一临床微生物学试验室的消毒灭菌(一)、? 消毒和灭菌有什么不同？答：消毒是指杀死物体上的致病性微生物。灭菌是指将物体上全部微生物全部杀死。(二)、? 微生物学试验室用紫外线作为空气消毒有何要求？答：应选择紫外线波长在 250-265nm 的灯管；由于紫

7、外线的消毒仅限于物体直射外表， 所以紫外灯应安装在距桌面 1-2.5m 处比较合理;为了保持紫外线的消毒效果在进展紫外线消毒的工作室应少灰尘,保持相对湿度不超过 50%;定期测试紫外线灯辐照效果和空气消毒效果,检测结果超标的应定期更换紫外灯管。(三)、? 如何选择微生物学试验室使用的化学消毒剂?答：应依据使用目的不同选择消毒剂，如，对试验室的地面和桌面消毒可用含氯消毒剂； 用于结核菌检验操作的桌面和地面的消毒可用醇类剂；用于操作人员皮肤消毒可使用 70%酒精；不能高压的器械可用戊二醛消毒等。(四)、? 微生物学试验室的生物废弃物品应如何处置？答：凡被微生物污染的一切物品包括接种后的样本、培育物

8、等均应用高压蒸汽灭菌；凡被微生物污染的动物或动物尸体应用燃烧炉燃烧；污染的移液器材、玻片等应先用消毒液浸泡确定时间然后高压灭菌处置。(五)、? 如何保证消毒剂的有效性？答：为了保证消毒剂的有效性，首先应知道所使用的消毒剂原液浓度，有效消毒浓度和有效使用时间；如含氯消毒剂，其有效成分是次氯酸钙，常用的漂白粉含有效氯25-32%。优氯净二氯异氰尿酸钠，含有效氯 60%。在知道原液浓度的根底上依据使用的目的不同，配制不同的应用浓度；又如过氧乙酸一般原浓度在 20%，应用浓度是 0.2-0.4%,但在细菌芽孢消毒时应用 1%的浓度。并应和医院感染部门合作定期对消毒剂效果进展监测。(六)、? 结核菌试验

9、室消毒的要求是什么？答 检测后的痰样品、被污染的一次性用品和试验室垃圾均应经高压灭菌后丢弃，或使用专用的燃烧炉或固定的垃圾坑进展燃烧；每次完成检查后，操作台和试验区域内要用紫外线近距离照耀消毒 2h 以上；试验过程中，如样品泄漏污染操作台和地面，应用大于污染面积的纱布、或卫生纸吸满5%的苯酚溶液或 70%酒精，掩盖污染区，30 分钟后移去，再用紫外线近距离照耀。二生物安全治理根本准则(一)、临床微生物学试验室生物安全治理官方有哪些文件？答：临床微生物学试验室生物安全治理的文件主要有2023 年12 月卫生部公布的WS233 行业标准“微生物和生物医学试验室生物安全通用准则”，2023 年 4

10、月中华人民共和国质量监视检验检疫总局公布的 GB19489-2023国家标准“试验室生物安全通用要求”，2023年 11 月 12 日国务院公布 424 号文件病原微生物试验室生物安全治理条例。2023 年 12 月28 日卫生部公布的第 45 号令“可感染人类的高致病性病原微生物菌毒种或样品运输治理规定”，2023 年 1 月 11 日卫生部印发的“人间传染的病原微生物名录”，2023 年中国合格评定国家认可委员会制定的CNAS-CL05试验室生物安全认可原则等。(二)、一般临床微生物学试验室应属于哪一级别的生物安全防护试验室？答：依据治理条例，依据病原微生物的传播方式，可能发生的感染类型和

11、严峻程度及试验室应具备的防范措施可将试验室分为4 个生物安全防护级别，分别为 BLS-1BLS-4。一般临床微生物学试验室应到达BLS-2 标准。(三)临床微生物学试验室应具备哪些必要的规章制度保证工作人员的生物安全？答：任何微生物学试验室都必需建立试验室生物安全治理制度；制度中应规定工作人员进入试验室应穿工作服、戴工作帽、乳胶手套、必要时还应戴防护眼镜；必需在二级生物安全柜中进展感染样品的操作；操作区应配备洗眼器，必要时配备紧急喷淋装置；在生物安全试验室的入口都应贴生物安全防护级别的标志；在盛有传染性物质的容器明显部位贴生物危急标志；用特别的耐扎容器装锐利器具并放在固定处，防止意外刺伤造成试

12、验室感染。(四临床微生物学试验室应承受什么措施预防微生物学试验室对外界环境的污染？答：严禁试验室工作人员任凭将生物样品、菌株或生物废弃物带出试验室；试验室工作人员离开试验室前必需按规定在流水下洗手，用烘干或自然枯燥或使用一次性擦手纸的方式吸干水分。试验室的废弃物要进展分类，污染的废弃物必需放置在专用的并有生物危害标志的垃圾袋盛放；使用后的锐器直接放于利器盒中，严禁把用过的针头重放入套管内；接种后的样本、培育物或其他生物废物必需经高压灭菌后废弃；试验动物必需经燃烧后废弃；负责废弃物的工作人员必需恳切、认真、并具有高度的责任感应经过有关部门正规培训第三节 临床微生物学试验室的人力资源治理一人力资源

13、档案和对试验室负责人的要求(一)、临床微生物学试验室人力资源信息中应包括哪些必需的内容？答：人力资源信息应包括：相关人员最终学历、力气指标如英语水平、计算机应用或设计力气、当前所具备的证书和执照，如对使用高压消毒蒸锅的人员必需有上岗证等；该人员以前的工作资料；职务说明；连续教育和业绩记录；年度力气的评估；对不利大事或事故报告的特别规定；人员的安康、免疫及职业暴露状况的记录。?(二)、?临床微生物学试验室的负责人的人力资源治理职责是什么？答：试验室负责人应有打算地安排对试验室在职人员进展根底教育、争论生教育、连续教 育和试验室特别的培训工程，不断提高工作人员的业务水平；对国家必需有上岗证书才能上

14、岗的岗位，负责人必需安排好相应人员，承受培训并通过考核方能上岗；每年度要对工作人员的业绩和缺乏进展评估，并作出相应处理；负责人应量才用人，对每一员工的业务进展作出安排并制造条件努力实现。(三)、临床微生物学试验室治理人员应具备哪些力气？答：能组织试验室人员合理的选择对临床效劳的试验，对特别试验数据的解释；有力气参 与临床感染性疾病的会诊，为临床医生供给感染性疾病诊断和治疗的建议；应具备良好的沟通力气，开展对患者或相关部门的联络；建立完整的质量治理体系，开展室内和室间质量把握活动，保证明验室数据的牢靠性；依据国家或卫生部要求建立严格的生物安全制度；制定并指导试验室的进展规划； 对在职员工供给连续

15、教育的打算；建立严密规章制度，确保在职员工保持良好的职业道德。二连续教育和考核(一)、本科检验系毕业生或争论生进入微生物学试验室是否需要岗前培训？答：无论本科检验系毕业生或争论生进入微生物学试验室同样需要进展岗前培训，他们与 中专或大专生的区分是根底学问和理论把握的程度不同。对于他们，可能把握的时间会比大中专的员工快、理解好，但岗前培训的目的是包括书本理论与实践的结合、的试验室诊断技术的学习、的生物安全的法规、试验室数据如何用于临床诊断和治疗等，所以本科大学生和争论生同样需要岗前培训；在职人员的岗前培训是保证人力资源质量的重要环节。(二)、对不同根底的员工如何进展连续教育？答：鼓舞员工利用业余

16、时间进展连续教育，完成学历，不断提高自身素养。由于工作需要行政应安排进展连续教育如电脑技术，专业学习、某些特别工种的上岗证获得等。试验室主任依据其本人的表现制定对每个员工的培训规划，进展目标，对已承受中等教育的人员，要求他们通过连续教育获得高一级的学历业务技术，并不断培育科研班子；有目标地培育人才， 觉察有力气的有事业性的员工提拔到治理岗位或学术带头人的岗位充分发挥每个人的学习和工作热忱。?(三)、微生物学试验室负责人对受雇或签约的工作人员如何建立其工作档案？答：试验室负责人对与检测相关的技术和关键技术人员都应建立技术档案，在档案中不仅 需包括该人员持有何种证书和执照，如对使用高压消毒蒸锅的人

17、员必需有上岗证等；该人员以前的工作资料；职务说明；连续教育和业绩记录；力气的评估；对不利大事或事故报告的特别规定；人员的安康状况、免疫及职业暴露状况的记录，同时应保存对当前工作的描述， 如从事检测和校正方面工作的责任、对检测结果的评价力气、在工作中受过的嘉奖或惩罚和治理力气等。(四)、试验室负责人如何从组织上保证微生物学试验室的工作质量？答：保证明验室开展室内质量把握和室间质量评价所需的经费；保证微生物学试验室完成各项工作应具备的必要设备、试剂、材料等；保证担当相应工作的技术人员参与必要的学术活动获得进展信息的时机；跟踪卫生部和相关机构对微生物学试验室的有关要求并争取上级领导的支持和理解，准时

18、完成硬件和人员培训方面的预备工作。其次章 临床微生物学试验室的专业治理第一节 微生物学试验室的作业指导书编写一标准操作程序的编写(一)、SOP 的含义是什么？答：SOP 是标准操作程序的英文缩写Standard Operation Program。 (二)、SOP 文件应包括哪些主要内容？答：SOP 文件分为不同的类型，在内容上也有所不同，对某一个检测工程的SOP 应包括以下内容：试验原理或检验目的；样品的种类及采集的要求；使用的试剂；使用的仪器；操作步骤；质量把握程序；结果解释及临床价值；方法的局限性；参考文献；如是使用设备的 SOP 应包括：操作的原理和组成；使用的目的和范围；仪器的校正程

19、序；检测标准的操作步骤； 质量把握程序；设备的功能；软件设置；操作过程；留意事项；设备的保养和维护；故障及排解等。二作业指导书(一)、何谓作业指导书？答：作业指导书是工作时的规程或标准类的文件，如对某一检验方法、校正程序、仪器设备维护过程，可用于直接指导操作人员进展各种质量把握活动时的执行性文件。?(二)、微生物学试验室的作业指导书主要有哪些内容?答：主要有不同类细菌鉴定操作规程;细菌纸片法药敏试验操作规程;细菌对抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)测定的操作规程;细菌鉴定和药敏试验室内质量把握的程序;染色方法的操作规程;培育基制作的操作规程;所用每一种设备的操作规程等(三)、如何设计作业指导书的格

20、式?答：临床微生物作业指导书中的一项试验应成为一个独立的程序，至少应有页眉，页眉应标明指导书的编写者，负责人、编写日期、仪器或试验的名称;正文内容应包括试验或仪器的工作目的;操作的内容、步骤、方法、结果推断、结果解释；质量把握的要求；操作留意事项； 流程；参考文献应用标准的来源、版本。(四)、作业指导书多长时间更较为合理?更的程序?答：作业指导书应随时更对临床有误导的试验,建议 3-5 年作一次大的调整编制。作业指导书的更改不能由某一操作者任意改动,首先应由临床医生或操作者提出更改或取消该试 验的理由，或由于目前的方法引起结果误差的实例，试验室主任与相关人员定期对存在的问题进展争论，打算某一试

21、验或方法是否连续承受或用的替代方法。(五)、作业指导书和SOP 文件有什么区分?答：作业指导书是一种标准类的执行性的文件,指导操作人员进展各种业务活动。从功能上讲 SOP 文件与作业指导书有格外多的相像性，但 SOP 文件需要按确定的要求、内容、格式、标准进展编写， SOP 文件的编写的内容更具操作性和有用性。如关于检验工程操作程序ISO15189：或 ISO17025 文件的相关局部对检验规程的编写均有确定的要求，而且要求其内容必需与当前的检验方法和操作步骤完全相全都。(六)、如何编写细菌鉴定的SOP 文件?答：细菌鉴定的 SOP 可以按细菌类别为根底，写出每一类细菌鉴定的程序和主要鉴定试验

22、的 SOP 文件，包括细菌鉴定的染色反响、初步鉴定试验如触酶试验、氧化酶试验等，鉴定细菌的主要生化反响、血清学反响、动物试验直到鉴定完成。如按不同的样品类型作为主干线编写，在编写上述内容前应包括细菌分别程序的SOP 文件。(七)、如何编写痰及下呼吸道样品分别鉴定的SOP 文件？答：应包括以下内容：?概况：正常人体的下呼吸道是无菌的,上呼吸道有正常菌群栖居。下呼吸道的分泌物在经上呼吸道排出时,常受口腔正常菌群污染。当病人消灭咳嗽、咳痰、呼 吸困难、咯血等病症时应采样检查，采集抗生素使用前样品。检样首先作显微镜检查，细菌 培育。对分别的病原体应尽力鉴定到种并按CLSI 抗微生物药敏试验标准操作，为

23、医生选择抗生素供给参考。?检验材料与设备:要标明该材料来源如抗酸染色液：购自生物梅里埃诊断产 品上海。要列出材料、设备的名称和来源。?样品检验步骤：从样品的采集、前 处理、接种分别、初步鉴定、种的鉴定、药敏试验以及检验结果报告方式均应按标准编写， 供给应操作者遵循。?临床意义：推断痰培育分别的细菌是致病菌或条件致病菌格外重要，某 些国家的指南提示：在涂片和培育见到同样的细菌并有细胞吞嗜现象或细菌涂片中每一油镜 视野菌数大于 20 个或占全部细菌的 50%以上的优势菌有最大可能是致病菌。类似的提示应在SOP 文件中表达。?操作留意事项：采集样品以早晨为佳，为削减口腔正常菌群污染样品，采集前应先用

24、漱口液充分漱口，并漱口后马上留痰；样品采集后应马上送检，以防某些细菌在 外环境中死亡。做结核分枝杆菌和真菌培育的样品不能准时送检时，放 4C 保存，以免杂菌生 长等。?痰液及下呼吸道分泌物样品细菌检验操作流程图：略。?参考文献(八、如何编写细菌对药物的敏感试验的SOP 文件？答：对于细菌药敏试验的SOP 文件的编写应包括纸片集中方法和最低抑菌浓度MIC测定；每一种方法都应包括常规药敏试验药物种类的选择;试验原理;药敏试验的指征;该方法适用的范围;所需要的材料和设备;不同类细菌的药敏方法和步骤和用培育基的差异;质量把握的方法;培育基的配制及用途;标准比浊管的配制;目前使用标准的版本及参考文献等。

25、(九)、常用培育基或染色液质量鉴定文件应包括哪些内容？答；无论是商品购置或自制的试验材料，都应有质量鉴定的过程。质量鉴定的文件内容应包括该工程的概述、适用范围、所需的材料、操作步骤、结果解释、报告方式和参考文献等。 几乎包括全部日常所用的材料，如革兰染色液或抗酸染色液质量把握程序，染色液质控品使用程序；各种培育基质量鉴定操作程序等。(十)、培育基的质量鉴定操作规程应包含哪些内容？答： 以血琼脂为例， 1.概述：说明血琼脂的运用目的、质控方法、结果推断。2.适用范围，3.材料，4.检测方法，5.结果解释，6.报告方式，7.参考文献。通过对其一般性状厚 度、硬度、PH 值、外表平坦度、湿度的判别和

26、无菌试验；通过金葡菌、肺炎链球菌、溶血链球菌标准株在血平板上生长状况的观看，推断血琼脂培育基质量是否合格。(十一)、临床微生物室应用设备的SOP 文件应包括哪些工程？工程书写应包含的内容? 答：临床微生物室的设备的 SOP 文件应包括全部的设备，如分析天平、显微镜、麦氏标准管、冰箱、一般培育箱、高压蒸汽灭菌锅、二氧化碳培育箱、生物安全柜、自动、半自动或全自动细菌鉴定系统等。由于不同的设备功能和使用范围不同书写的工程会稍有不同，但总的内容根本一样。每一个文件中应包括该设备的产品名称、型号；原理及检测范围；参数的设置及标准；开机与关机程序；操作程序；设备的保养和维护；常见故障的处理；根本技术性能；

27、 运行环境要求电源、温度、湿度、场地大小等；操作流程图等。其次节 临床微生物学试验室的质量保证治理一室内质量把握一、质控菌株1. 在标准菌株的来源中，英文缩写ATCC 和 NCTC 代表什么？答：ATCC 代表美国典型菌株保藏中心；NCTC 代表英国国家典型菌株保藏中心。2. 作为质控菌株应具备什么特征？答： 作为质控菌株首要的条件是能敏感的反响质量差异的，如反映养分培育基质量的质控菌株，确定是对养分要求高，不简洁生长的苛养菌株；如作为药敏试验的质控菌株，对抗生素最具敏感；如测定最低抑菌浓度，那么结果应最处于折点四周的；对于测试生化试验培育基的质控菌株，应具备稳定的生物特征，反响终点明显的特征

28、。3. 常规微生物学试验室药物敏感试验质量把握应使用哪些标准菌株？答：常规纸片法药敏试验的质量把握菌株：ATCC 25922 大肠埃希菌、ATCC25923 金黄色葡萄球菌、ATCC 27853 铜绿假单孢菌、ATCC 29212 粪肠球菌、ATCC 35218 大肠埃希菌、ATCC 49247 流感嗜血杆菌、ATCC 49766 流感嗜血杆菌、ATCC 49226 淋病奈瑟菌、ATCC 49619 肺炎链球菌。最低抑菌浓度MIC测定的标准菌株：ATCC 29213 金黄色葡萄球菌、ATCC 29212 粪肠球菌、ATCC 27853 铜绿假单孢菌、ATCC 25922 大肠埃希菌、ATCC

29、49247 流感嗜血杆菌、ATCC 49766 流感嗜血杆菌、ATCC 49226 淋病奈瑟菌、ATCC 49619 肺炎链球菌。4. ? 测试 5%羊血琼脂和巧克力琼脂平板质量应选择什么标准菌株？答：评估培育基质量应执行我国卫生部行业标准WS232/T2023测试5%羊血琼脂质量 应选择金黄色葡萄球菌ATCC 25923、化脓性链球菌ATCC 19615，肺炎链球菌ATCC 6305、奇异变形杆菌ATCC 12453，经 24h 培育可见到有的菌生长，有的局部抑制以及溶血现象。如化脓性链球菌呈小的、溶血的菌落。巧克力琼脂可选择流感嗜血杆菌，经35C 24h 培育生长良好。5. ? 对伊红美兰

30、、麦康凯和沙门志贺氏琼脂SS如何选择标准菌株？合格的指标是什么？答：伊红美兰培育基要选择大肠埃希菌ATCC 25922、鼠伤寒沙门菌ATCC 14028和粪肠球菌ATCC 29212，经 24h 培育，大肠埃希菌呈兰黑色菌落；鼠伤寒沙门菌呈无色菌落；粪肠球菌局部抑制。麦康凯琼脂可选择大肠埃希菌ATCC 25922、鼠伤寒沙门菌ATCC 14028、粪肠球菌ATCC 29212和奇异变形杆菌ATCC 12453。经 24h 培育，大肠埃希菌呈粉红色菌落；奇异变形杆菌和鼠伤寒沙门菌呈无色菌落；粪肠球菌局部被抑制。测试 SS 琼脂可承受鼠伤寒沙门菌ATCC 14028、粪肠球菌ATCC 29212、

31、大肠埃希菌ATCC 25922、福氏志贺菌ATCC 12023。 经 24h 培育，鼠伤寒沙门菌呈无色菌落，有或无黑心；福氏志贺菌生长，呈无色菌落；大肠埃希菌被局部抑制，呈粉红色菌落；粪肠球菌被完全抑制。6. 怎样选择生化反响质控菌株？答：作为生化反响的质控菌株，每一个生化反响都应选择 2 株菌株，其中一株是阴性反响， 一株阳性反响。菌株应对生化反响格外稳定，最好用标准菌株。7. 微生物学试验室应预备哪些标准菌株用于生化反响培育基的质控？答：大肠埃希菌、缓慢爱德华菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌、雷极普鲁威登斯菌。上述菌株可对靛基质、甲基红、伏谱、枸缘酸盐利用、氨基酸分解、硫化氢产生、

32、 苯丙氨酸脱氨酶、尿素酶、葡萄糖产气等诸多生化反响给出明确的测试结果。二、室内质控监测工程1. 如何做染色液的质量把握？答：微生物学试验室主要的染色液有革兰染色和抗酸染色。在每次配制或购入时必需做质控，并记录日期；革兰染色液应在每天染色前用金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌同步染色。抗酸染色每周用非典型分支杆菌同步测试1 次。为了生物安全也可将细菌制备成浓菌悬液高压灭菌后冰箱保存作为染色的质控菌株。金黄色葡萄球菌染成革兰阳性紫色，大肠埃希菌染成阴性红色，背景无沉渣和其他细菌或真菌污染。非典型分支杆菌应染成抗酸阳性红色?2. 如何保证高压灭菌器的灭菌效果？答：高压灭菌器的灭菌效果应随物品作每次测试。可承

33、受3M 公司的变色胶条，另外每月至少有一次，用嗜热脂肪芽孢杆菌测试其灭菌的效果，并作好记录。3. 如何保证培育箱、冰箱和CO2 培育箱的正常运转？答：试验室要制定严格的质量把握制度，分工包干，专项专人负责，每天工作开头第一个开培育箱、冰箱和CO2 培育箱的工作人员和下班前最终离开的工作人员要负责记录培育箱、冰箱和CO2 培育箱的温度和CO2 的含量,准时觉察问题和故障,准时处理,使对工作质量的影响减低到最小。4. 分别培育基如何进展质量把握？答：干粉培育基要依据有效期的长短酌量购入，购入时必需用相应标准菌株测试并记录。枯燥培育基应在质控记录中提示开头使用的日期，以便在发生质量差异时查找缘由。倾

34、注 的平皿或购入商品平皿应进展无菌试验，用相应的标准菌株验证培育基的分别力气。如验 证血琼脂应选择肺炎链球菌、b-溶血链球菌，如验证巧克力琼脂应选择流感嗜血杆菌。相应 功能的测试后必需作具体记录。5. 氧化酶、触酶试剂如何进展质量把握？答：氧化酶和触酶是日常工作中使用频率最高的试剂，规定每天使用前必需用用大肠埃希 菌和铜绿假单胞菌，金黄色葡萄球菌和链球菌的标准菌株分别对氧化酶和触酶试剂进展测试。6. 诊断血清如何进展质量把握？答：诊断血清是微生物学试验室必需常备但使用频率不高的诊断用品。买来时应与老的血清比较。使用后每季度应用菌株作质控。寻常应留意观看血清是否被污染。为生物安全， 可将质量把握

35、用的菌株配制为浓菌悬液经高压后冰箱保存备用。7. 如何进展纸片药物敏感试验的质量把握？答：药物敏感试验的质量把握活动可分为初始30 天的每天测试的质控、每周 1-2 次的常规质控和连续 5 天的纠控程序。初始 30 天质控目的是测试试验室条件的稳定性，当在30 天质控中有连续 3 次失控，说明试验室的条件不够稳定，还需每天连续做质控，直到质控过程全部合格或失控小于 3 次方可改为每周 1 次的常规质量把握程序。假设常规质控活动中，一旦失控 1 次，应查找缘由并进入 5 天纠控测试。5 天纠控中无失控时可改为每周 1 次否则应每日测试。8. 如何能使室内质量把握不连续地认真的进展？答：首先应提高

36、试验室每个工作人员的质量把握的意识，同时要有组织保证措施，把质量 把握作为岗位工作的一局部，每一岗位都有相应的质量把握的任务，而不是把质量把握工作积存给某一个人。试验室负责人定期监视检查质控活动中觉察存在的问题和解决的措施，并实行奖惩制度。?9. 是否每个微生物学试验室必需参与室间质量评价活动？答：有条件建立微生物学试验室的医院均应乐观参与地区、省市级或全国有关机构组织的 室间质量评价活动，由于它是对你试验室质量的客观评价，可以帮助你觉察试验室的系统误差。当你觉察室内质控结果好但参与室间质量评价活动时与质控中心预想结果有规律地消灭偏差，这是试验室系统误差的表现，你应尽力找出缘由并设法解决，使你的试验室前进一大步，而这种系统误差在室内质量把握中是觉察不了的。10. 每一个微生物学试验室参与多少个系统的室间质量评价活动比较合理？答：目前对于这个问题没有文件规定，各试验室可依据自己的潜力打算。但对二级或二级 以下的试验室，建议至少应参与本地区的室间质评活动，有条件的单位应参与省或全国的质评活动。就三级甲等医院而言，除了参与本省市和全国的质评活动外，有条件的试验室还可争取参与国际性的室间质评活动，以持续提高试验室的检测力气、扩大视野，拓宽思路。