2.2-土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(教案).docx

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1、般中学课程标准试验教科书一一生物选修1 人教版课题2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数课题目标（-）学问与技能利用选择培育基分别细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数（二）过程与方法分析探讨思路的形成过程，找出共性和差异性（三）情感、看法与价值观形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯课题重点对土样的选取和选择培育基的配制课题难点对分解尿素的细菌的计数教学方法启发式教学教学工具多媒体课件教学过程（一）引入新课上节课我们学习了培育基的配置以及接种技术。下面我们来学习如何进行细菌的分别， 获得所须要的目的微生物。（二）进行新课1 .基础学问1 . 1尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不

2、能）干脆汲取利用，而是首先通过 土壤中的细菌将尿素分解为氨和C02 ,这是因为细菌能合成胭酶。2 .2科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微 生物，这样也适用于试验室中微生物的筛选，原理是 人为供应有利于目的菌株生长的条件 （包括养分、温度、PH等），同时抑制或阻挡其他微生物生长。点评：生物适应肯定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培育基、限制 培育条件等选择目的微生物。K思索在该培育基配方中，为微生物的生长供应碳源的是葡萄糖，供应氮源的的 是一尿素，琼脂的作用是一凝固剂。K思索2D该培育基对微生物 具有（具有，不具有）选择作用。假如具有，其选择机

3、 制是只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培育基上生长。1. 3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。除 此之外，显微镜干脆计数 也是测定微生物数量的常用方法。【补充】显微镜干脆计数是测定微生物的方法。公式：视察到的红细胞平均数：视察到的细菌平均数=红细胞含量：细菌含量1. 4采纳稀释涂布平板法统计菌落数目时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品 稀释液中一个活菌。通过统计 平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌。 为了保证结果精确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。K思索33从平板上的菌落数推想出每克样品中的菌落数的计算方法是（平均菌落数 涂布

4、的稀释液体积）X稀释倍数。R思索43利用稀释涂布平板法胜利统计菌落数目的关键是恰当的稀释度。K思索5第二 位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的试验须要改进的操作 是第一位同学需设置重复试验组；其次位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误, 需重新试验。1. 5统计的菌落数比活菌的实际数目旦。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平 板上视察到的只是.一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数 来表示。1. 6设置比照的主要目的是解除试验组中非测试因素对试验结果的影响，提高试验结 果的可信度。1. 7比照试验是指除了被测试的条件外,其他条件都相同的试验。满意该条件的 称为比照组,未满意该条件的称

5、为试验组。K思索6请设计本试验的比照试验组:方案1：其他同学用A同学的土样进行试验。方案2：A同学以不接种的培育基作为空白比照。2.试验设计2. 1试验设计的内容包括试验方案、材料用具、实施步骤和时间支配等。2. 2依据图示2 7填写以下试验流程：配制土壤溶液系列稀藏卜H涂布平板与培育 T 菌落计数一2. 3 土壤微生物主要分布在距地表 Hem的近生性土壤中，约70%80%为细菌。2. 4分别不同的微生物采纳不同的稀释度，其缘由是不同微生物在土壤中含量不同, 其目的是保证获得菌落数在30300之间、适于计数的平板。细菌稀释度为IO4、1()5、1。6, 放线菌稀释度为103、1()4、105,

6、真菌稀释度为1()2、103、104。2. 5培育不同微生物往往须要不同培育温度。细菌一般在3037c培育12d,放线 菌一般在2528C培育57d,霉菌一般在2528c的温度下培育34d。2. 6在菌落计数时，每隔Mh统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结 果，以防止因培育时间不足而导致遗漏菌落的数目。点评：菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培育时间要足够，使得每个菌体 都能形成肉眼可视察到的菌落。2. 7菌落的特征包括 形态、大小、隆起程度、颜色 等方面。K思索8土壤微生物种类最多、数量最大的缘由是什么？ 土壤中养分物质含量丰富， 环境条件相宜等。2. 9试验过程1)取土

7、样用的小铁铲和盛土样的的信封在运用前都要灭菌。2)应在火焰旁称取土壤10 g。将称好的土样倒入盛有当mL无菌水的蜂瓶中，塞好 棉塞。3)在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。4)试验时要对培育皿作好标记。注明培育基类型、培育时间、稀释度、培育物等。5)为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。K思索9X在探讨未知微生物时务必规范操作，以防被致病微生物感染，试验后肯定要 洗手。3.结果分析与评价3. 1对分别的菌种作进一步的鉴定，还须要借助生物化学的方法。3. 2在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的胭酶将尿素分解成了氨。氨会使 培育基的碱性增加，PH上升。因此，我们可以通

8、过检测培育基- pH变更来推断该化学 反应是否发生。3. 3在以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂。培育某种细菌后，假如 PH上升，指示剂将变 红，说明该细菌能够 分解尿素。K思索102测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将肯定体积的水用细菌过滤器过滤后， 将滤膜放到 伊红美蓝 培育基上培育,大肠杆菌菌落呈现.黑 色,通过记述得出水样中大肠 杆菌的数量。你认为在该试验中至少应取三个水样。（三）课堂总结、点评（四）实例探究例1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是A.在液体培育基上进行B.至少接种一种细菌C.接种一个细菌D.刚好补充消耗的养分物质解析：细菌群体生长规律的测定是人们在肯定条件下进行的

9、。这些条件是：一种细菌、 恒定容积的培育基，液体培育基、定时测定细菌总数。在这些条件下，才能测定出细菌的生 长规律。测定时只能用一种细菌的子细胞群体的变更规律表达微生物的生长；恒定容积是给 微生物供应肯定的生存环境；液体培育基才能通过样品推想细菌总数。若接种多种细菌，则 会发生种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。在接种时，要保证肯定的接种量。答案：A例2.在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最激烈的时期是A.调整期 B.对数期 C.稳定期D.衰亡期解析：种内斗争是一种生态因素。种内斗争反应了种内生物对生存空间和生活资源的争 夺。在生活空间充裕，养分足够的时候，种内斗争的程度是比较低

10、的。随着微生物个体数目 的增加，每个个体的生存空间越来越少，养分物质也越来越少，每个个体对生存空间和资源 的争夺也越来越激烈，种内斗争就越来越激烈。由此可知，在稳定期的种内斗争最激烈。在 衰亡期，微生物的数目已经起先削减，pH已经极度不适于微生物的生存，次级代谢产物积 累到很高的程度，这时的微生物的生存斗争主要是与无机环境的斗争。答案：C综合应用例3.（2023年江苏）抗生素作为治疗细菌感染的药物，其高效性和巨大的经济价值使 抗生素工业经久不衰。其中青霉素的发觉和应用具有划时代的意义。青霉素发酵产生青霉素。青霉菌的新陈代谢类型是,青霉素是青霉菌的 代谢产物。在生产和科研中，常选用处于 期的青霉

11、菌作为菌种或探讨材料，因为此时的青霉菌代谢旺盛，和 比较稳定。对青霉菌菌体生长状况的测定：取肯定体积的发酵液，经离心分别、反复洗涤 后，,再计算发酵罐中菌体的总重量。解析：青霉菌属于真菌，其代谢类型应为异养需氧型，而青霉素作为它的代谢产物，并 不是它生长、繁殖所必需的，所以青霉素应属于次级代谢产物。在测定培育基上青霉菌菌体 的生长状况时，常用的方法有两种：一种是测量青霉菌的细胞数目，另一种是测重量，取肯 定体积的发酵液，经离心分别、反复洗涤后，称菌体的湿重，或烘干后称干重，再由此计算 出其中的细胞总重量。在细菌生长的四个主要时期中，因为处于对数期的细菌代谢旺盛，个 体的形态和生理特性比较稳定，

12、常作为生产用的菌种和科研的材料。答案：异养需氧型次级对数个体的形态生理特性称菌体的湿重（称烘干后的重量）（五）巩固练习1 .在一个“淀粉一琼脂”培育基的5个圆点位置，分别用不同方法处理，将此试验装 置放在37c恒温箱中，保温处理24h后，将碘液滴在培育基的5个圆点上，其试验结 果记录于下表：（C）淀粉圆点试验处理方法碘液处理后的颜色反应簇新唾液与盐酸混合蓝黑色经过煮沸的簇新唾液蓝黑色接种面包霉棕黄色只有簇新的唾液? *只有肯定浓度的蔗糖溶液请指出和所发生的颜色反应，以及接种的面包霉的分泌物分别是A.棕黄色、棕黄色、淀粉酶B.蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶C.棕黄色、蓝黑色、淀粉酶D.棕黄色、蓝黑色、

13、麦芽糖酶2 .试验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先打算好的琼脂块平板 上画3条等长的平行线(3条线均与下图中的链霉素带接触)，将平板置于37C条件下恒温 培育3天，结果如图所示。从试验结果分析以下叙述，不正确的是 ()霍乱菌伤寒菌结核菌A.链霉素能阻挡结核菌的生长B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D.链霉素可以用于治疗伤寒病人3 .利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是A.酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌8 .酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌C.酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌D.黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸

14、菌9 .下列操作不属于微生物的分别步骤的是A.稀释 B.划线或涂布 C.接斜面 D.培育10 影响微生物生长的主要环境因素是A.阳光、温度、水分 B.温度、水分、PH C.水分、PH、氧 D.温度、PH、氧11 下列微生物的产物中没有菌种特异性的一组是A.氨基酸、核昔酸、多糖、色素12 多糖、脂类、维生素、抗生素、氨基酸C.核甘酸、多糖、维生素、毒素、抗生素D.核甘酸、维生素、多糖、脂类、氨基酸7 .微生物代谢的人工限制是指B.限制发酵时的温度A.变更微生物的遗传特性c.调整发酵过程中的pH,氧气通入量D.包括A、B、C三项8 .在微生物群体生长规律的测定中，不行能发生的是A.繁殖B.生存斗争

15、C.种间斗争 D.种内斗争9 .与调整期长短有关的因素中，可缩短调整期的一组是用与菌种相同的培育基 养分丰富的培育基 稳定期获得的菌种 对数期 获得的菌种接种时间提前 接种量加大 接种量减小 接种种类加大A、B、C、 D、10 .微生物群体生长善的测定方法可以是测定样品的细胞数目测定次级代谢产物的总产量测定培育基中细菌的体积测定样品的细胞重量测定初级代谢产物的总产量A.B.C.D.答案：15 CDCCD61ODDCCB 课余作业某生物小组以空气中细菌含量为指标，调查校内内不同区域（教室、草场、校长室、卫 生间）的空气质量状况。请你写出完整的试验调查方案。 教学体会本节课可以从尿素在农业上的重要

16、应用切入，介绍能分解尿素的细菌，进而说明这种细 菌的作用是能够合成分解尿素的酶。在教学过程中，可以联系生产生活实际，使学生对尿素 以及分解尿素的细菌形成肯定的感性相识。同时通过课题背景的介绍，可以进行STS教化。 对于试验中的比照原则，可以指导学生分组探讨，在驾驭微生物分别技术的同时巩固试验设 计的基本原则。 资料袋选择培育基选择培育基的含义是：在培育基中加入某种化学物质，以抑制不须要的微生物的生长, 促进须要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分别所须要的微生物。在培育基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分别出酵母菌和霉 菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培育的培育成分的基础上加 入的。培育基中的养分成分的变更也可达到分别微生物的目的。如培育基中缺乏氮源时，可以 分别固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培育基上生存。当培育基的某种养分成分为特 定化学成分时，也具有分别效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的 生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分别能消退石油污染的微生物的目的。变更微生 物的培育条件，也可以达到分别微生物的目的，如将培育基放在高温环境中培育只能得到 耐高温的微生物。