高中教学：电泳复习提纲.docx

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电泳复习提纲一、电泳的原理1.在凝胶中分子的移动受到分子大小、空间结构、电荷量、电场强度、凝胶缝隙大小的影 响。(1)SDS的作用：去除空间结构，将电荷量与分子大小正相关 二、电泳异常结果的观察1. marker无条带2. maker跑不开 (1)胶浓度太大 (2)电泳时间太短3. marker存在，但样本无条带或条带微弱4. 出现非特异性扩增 合理。需重新设计引物 退火温度太低。提高退火温度 酶加入过多。5. 电泳孔亮：存在蛋白质或多糖污染，堵住了凝胶孔隙2.3常见问题口可访问网页浏览，较为详细。detaibioxom/topics/sds.下面罗列一些：Q：微笑（两边翘起中间凹下）形带原因？A：主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中。处理办法：待其充分凝固再作后续实验。Q：皱眉”（两边向下中间鼓起）形带原因？A：主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。处理办法：可在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。Q：为什么带出现拖尾现象？A：主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。处理办法：加样前离心;选择适当的样品缓冲液，加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长，重新配 制;降低凝胶浓度。