紫外可见吸收光谱鉴别技术知识点医学心理学基础医学_高等教育-大学课件.pdf
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1、于该溶液对光具有选择性吸收。当一束白光通过某一有色溶液时,部分光被溶 紫外-可见吸收光谱鉴别技术 紫外-可见分光光度法也称为紫外-可见吸收光谱法(UV-vis),它是依据物 质对紫外和可见光区不同波长光的吸收程度进行定性、定量的分析方法。1 物质对光的选择性吸收 光是一种电磁波,按波长顺序可以划分为不同的光区。不同波长的光具有不 同的能量,波长越长,能量越低;波长越短,能量越高。当一束白光通过棱镜后色散为红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色的光,每种颜色的光又有一定的波长范围。如果把两种光按一定强度比例混合,也可成 为白光,这两种颜色的光称为互补色光。图 1 是互补色光示意图,处于直线关系 的
2、两种颜色即为互补色光。溶液所以呈现不同的颜色是由 液选择吸收,另一部分光则通过溶液。例如当白光入射通过 KMnO 溶液时,溶液 选择性吸收绿光,溶液本身呈现绿光的互补色光,即紫红色 2.光吸收的基本定律一一朗伯-比尔定律 当一束平行单色光垂直照射到一定浓度 c、液层厚度为 b 的均匀透明溶液时(如图 2),由于溶液吸收了一部分光能,光的强度减弱。透射光强度 It与入射 光强度Io之比称为透射比,用 T表示;单色光通过溶液时被吸收的程度,称为吸 光度,用 A表示。图 2 光通过溶液示意图 I 0-为入射光强度 I t-为透射光 强度 绿 朗伯和比尔总结了光的吸收与液层厚度、溶液浓度的定量关系。其
3、数学表达 式为:A=k b c。其物理意义是:当一束平行单色光垂直通过均匀、透明的吸光物质的稀溶液 时,溶液的吸光度 A与溶液浓度 c 和液层厚度 b的乘积呈正比。朗伯-比尔定律是紫外-可见分光光度法进行定量分析的理论依据,适用于可 见光、紫外光、红外光和均匀非散射的液体、气体及透光固体。比例常数 k 称为吸光系数,是吸光物质的特征常数,与入射光的波长、物质 的性质和溶液的温度等因素有关,与溶液的浓度大小和液层厚度无关。它表示物 质对某一特定波长光的吸收能力,其数值及单位与 b、c 所取单位有关。当入射光波长一定时,溶液浓度 c 为 1 g/100mL(或 1%、液层厚度 b 为 1 cm 时
4、的吸光度称为百分吸光系数。药典中所收载的吸光系数均为百分吸光系数。吸光系数越大,表明该物质对某波长光的吸光能力越强,测定的灵敏度也越 高,微量的物质也能准确测出。如果溶液中同时存在两种或两种以上吸光物质时,只要共存物质不互相影响 吸光性质,则总吸光度是各共存物吸光度的和,即 A总=Aa+Ab+Ac+,而 各组分的吸光度由各自的浓度与吸光系数所决定。3吸收曲线 将不同波长的光照射某一浓度和 液层厚度固定的溶液,并测量不同波 长下溶液的吸光度,以吸光度 A为纵 坐标,相应波长入为横坐标绘制的曲 线,称为吸收曲线或吸收光谱。图 3 为 KMnC 溶液的吸收曲线。由图 3 可见,KMn4溶液对不同波
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