化妆品中美白成分鉴别及含量测定方法医学心理学检验医学高等教育大学课件.pdf

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1、 化粧品中美白成分鑑別及含量測定方法 and Assay for Whitening Ingredients in Cosmetics 1.適用範圍：本方法適用於化粧品中含維他命 C 磷酸鎂(magnesium ascorbyl phosphate、維 他 命 C 葡 萄 糖 苷(ascorbyl glucoside、麴 酸(kojic acid、熊 果 素(arbutin、對苯二酚(hydroquinone 之鑑別及含量測定。2.檢驗方 高效 液 相層 析法(high performance chromatography,HPLC 2.1.裝置：高效液相層析儀 2.1.1.檢 出 器：光 二

2、 極 體 列 陣 檢 出 器(photodiode array detector。2.1.2.級品。層析管：COSMOSIL 5C18-AR-I，I 內徑 4.6 mm 250 mm 或同 2.2.試藥：甲醇採 HPLC 級，磷酸及磷酸二氫鉀(potassium dihydrogen phosphate 採用試藥特級，維他命 C 磷酸鎂、維他 命 C 葡萄糖苷、麴酸、熊果素、對苯二酚對照用標準品。2.3.器具及材料：2.3.1.容量瓶：20 mL,100 mL,1000 mL,Pyrex 材質。2.3.2.濾膜：孔徑 0.45 m，Nylon 材質。2.4.0.05 M 磷酸二氫鉀溶液之配製：

3、取磷酸二氫鉀 6.8 g，加水至 1000 mL，並以磷酸調整 pH 值至 2.5。Identification 2.5.移動相溶液之配製：0.05M 磷酸二氫鉀溶液：甲醇(99：1,v/v 混液，以濾膜 過濾，取濾液，供作移動相溶液。2.6.標準溶液之 配製：2.6.1.分別取適量維他命 C 磷酸鎂、維他命 C 葡萄糖苷、麴 酸、熊果素、對苯二酚對照用標準品，精確稱定，以去離子水溶解並 定容，供作標準原液，使用時再以去離子水稀釋至 2.6.2 節各美白成 分線性範圍內。2.6.2.標準溶液之線性範圍：2.6.2.1.維他命 C磷酸鎂：4400 g/mL。2.6.2.2.維他命 C葡萄糖苷：2

4、200 g/mL。2.6.2.3.麴酸：0.440 g/mL。2.6.2.4.熊果素：2200 g/mL。2.6.2.5.對苯二酚：1100 g/mL。2.7.檢液之調製：取檢體約 1 g，精確稱定，以 0.05M 磷酸二氫鉀溶液溶解並定容 至 20 mL，於超音波中震盪約 30 分鐘，置室溫冷卻，以濾膜過 濾，濾液供作檢液。2.8.鑑別試驗及含量測定：取檢液及標準溶液各 20 L，分別注入高效液相層析儀，參照下 列條件進行液相層析，就檢液與標準溶液所得波峰之滯留時間 比較鑑別之。並依下列計算式，求出檢體中各美白成分之含量(mg/g：CV 素對苯二酚之鑑別及含量測定檢驗方高效液相層析法裝置高效

5、液相層析儀檢出器光二極體列陣檢出器層析管內徑級品或同試藥甲醇採級磷酸及磷酸二氫鉀採用試藥特級維他命磷酸鎂維他命葡萄糖苷麴酸熊果素對苯二酚對照用標準品配製磷酸二氫鉀溶液甲醇混液以濾膜過濾取濾液供作移動相溶液標準溶液之配製分別取適量維他命磷酸鎂維他命葡萄糖苷麴酸熊果素對苯二酚對照用標準品精確稱定以去離子水溶解並定容供作標準原液使用時再以去離子水稀釋至節約精確稱定以磷酸二氫鉀溶液溶解並定容至於超音波中震盪約分鐘置室溫冷卻以濾膜過濾濾液供作檢液鑑別試驗及含量測定取檢液及標準溶液各分別注入高效液相層析儀參照下列條件進行液相層析就檢液與標準溶液所得波峰之滯留檢體中各美白成分之含量(mg/g=M 103 C

6、：由標準曲線求得檢液中各美白成分之濃度(g/mL M：取樣分析檢體之重量(g V：檢體定容之體積(mL 高效液相層析測定條件：光二極體列陣檢出器：波長 280 nm。層析管：COSMOSIL 5C18-AR-II，內徑 4.6 mm 250 mm。移動相溶液：依 2.5 節配製之溶液。移動相流速：0.9 mL/min.。附註：1.本檢驗方法之檢出限量分別為維他命 C 磷酸鎂鹽 0.08 mg/g，維他命 C 葡萄糖苷 0.04 mg/g，麴酸 0.008 mg/g，熊果 素 0.04 mg/g，對苯二酚 0.02 mg/g。2.化粧品中若有影響檢驗結果之物質，應自行檢討。參考文獻：1.Huan

7、g S.C.,Lin C.C.,Huang M,C.and Wen K.C.2004.Simultaneous Determination of Magnesium Ascorbyl Phosphate,Ascorbyl Glucoside,Kojic Acid,Arbutin and Hydroquinone in Skin Whitening Cosmetics by HPLC.Journal of Food and Drug Analysis,Vol.12,No.1:13-18.2.Shih,Y.2001.Simultaneous determination of magnesium L

8、-ascorbyl-2-phosphate and kojic acid in cosmetic bleaching products by using a microbore column and ionpair liquid chromatography.J.素對苯二酚之鑑別及含量測定檢驗方高效液相層析法裝置高效液相層析儀檢出器光二極體列陣檢出器層析管內徑級品或同試藥甲醇採級磷酸及磷酸二氫鉀採用試藥特級維他命磷酸鎂維他命葡萄糖苷麴酸熊果素對苯二酚對照用標準品配製磷酸二氫鉀溶液甲醇混液以濾膜過濾取濾液供作移動相溶液標準溶液之配製分別取適量維他命磷酸鎂維他命葡萄糖苷麴酸熊果素對苯二酚對照用標準

9、品精確稱定以去離子水溶解並定容供作標準原液使用時再以去離子水稀釋至節約精確稱定以磷酸二氫鉀溶液溶解並定容至於超音波中震盪約分鐘置室溫冷卻以濾膜過濾濾液供作檢液鑑別試驗及含量測定取檢液及標準溶液各分別注入高效液相層析儀參照下列條件進行液相層析就檢液與標準溶液所得波峰之滯留AOAC Int.84:1045-1049.素對苯二酚之鑑別及含量測定檢驗方高效液相層析法裝置高效液相層析儀檢出器光二極體列陣檢出器層析管內徑級品或同試藥甲醇採級磷酸及磷酸二氫鉀採用試藥特級維他命磷酸鎂維他命葡萄糖苷麴酸熊果素對苯二酚對照用標準品配製磷酸二氫鉀溶液甲醇混液以濾膜過濾取濾液供作移動相溶液標準溶液之配製分別取適量維他命磷酸鎂維他命葡萄糖苷麴酸熊果素對苯二酚對照用標準品精確稱定以去離子水溶解並定容供作標準原液使用時再以去離子水稀釋至節約精確稱定以磷酸二氫鉀溶液溶解並定容至於超音波中震盪約分鐘置室溫冷卻以濾膜過濾濾液供作檢液鑑別試驗及含量測定取檢液及標準溶液各分別注入高效液相層析儀參照下列條件進行液相層析就檢液與標準溶液所得波峰之滯留