华中农业大学生物化学本科试题库核酸化学.docx

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1、第 5 章 核酸化学单元自测题(一) 名词解释1核酸， 2核酸一级构造，3DNA 二级构造，4碱基互补规律，5稀有碱基、稀有核苷酸，6环化核苷酸，7多磷酸核苷酸，8增色效应，9减色效应，10发卡构造11分子杂交，12Tm 值，13. 回文序列，14. 同裂酶，15. 限制性物理图谱二填空题1. 核酸可分为和两大类，其中主要存在于中，而主要存在于。2. 核酸完全水解生成的产物有、和， 其中糖基有，碱基有和两大类。3. 生物体内的嘌呤碱主要有二种，和，嘧啶碱主要有、和，某些RNA 分子中还含有微量的其它碱基，称为。4. DNA 和RNA 分子在物质组成上有所不同，主要表现在和的不同，DNA 分子中

2、存在的是和，RNA 分子中存在的是和。5. RNA 的根本组成单位是、，DNA 的根本组成单位是、，它们通过键相互连接形成多核苷酸链。6. DNA 的二级构造是构造，其中碱基组成的共同特点是(假设按摩尔数计算)、。7. 测知某一 DNA 样品中，A0.53mol，C0.25mol、那么Tmol，Gmol。8. 嘌呤环上的第位氮原子与戊糖的第位碳原子相连形成键，通过这种键相连而成的化合物叫。9. 嘧啶环上的第位氮原子与戊糖的第位碳原子相连形成键，通过这种键相连而成的化合物叫。10. 有两个主要的环核苷酸是、，它们的主要生理功用是。11. 写出以下核苷酸符号的中文名称：ATP、dCDP。12. D

3、NA 的Tm 值的大小与其分子中所含的的种类、数量及比例有关，也与分子的、有关。假设含的 AT 配对较多其值则、含的 GC 配对较多其值则，分子越长其 Tm 值也越。13. 组成核酸的元素有、等，其中的含量比较稳定，约占核酸总量的， 可通过测定的含量来计算样品中核酸的含量。14. DNA 双螺旋构造的维系力主要有和。15. DNA 分子中 G，C 含量高分子较稳定，同时比重也较、解链温度也。16. RNA 主要有三类，既、和、它们的生物功能分别是、和。17. RNA 的二级构造大多数是以单股的形式存在，但也可局部盘曲形成构造，典型的 tRNA 二级构造是型构造。18. 在生物细胞中主要有三种R

4、NA，其中含量最多的是、种类最多的是、含有稀有碱基最多的是。19. tRNA 三叶草型构造中，氨基酸臂的功能是，反密码环的功能是。20. tRNA 氨基酸臂 3末端中最终三个碱基是，反密码环中有三个相连的单核苷酸组成。21. 成熟的mRNA 在 5末端加上了构成帽的构造，在 3末端加上了形成尾巴。22. 类限制性内切核酸酶分子量较小一般在 2040KDa，通常由 亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA，极少数类酶也可作用于单链 DNA，或DNARNA 杂合双链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，类酶既具有 专一性，也具有专一性，一般在识

5、别序列内切割。切割的方式有 ，产生 或的 DNA 片段。作用时需要 作关心因子，但不需要 和 。23. 完全的回文序列具有两个根本的特点，就是：(1)(2)。24. SDS 是分别 DNA 时常用的一种阴离子除垢剂，它有四个作用：(1)；(2)；(3)；(4)。25. 酚是蛋白变性剂，用酚抽提细胞DNA 时，具有两方面的作用：(1);(2)。26. 用酚氯仿抽提DNA 时，通常要在氯仿或酚氯仿中加少许异戊醇。这是由于异戊醇。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含 DNA 的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。27. 同其他水解蛋白酶相比，蛋白水解酶K 具有两个显著的优点：(1);

6、(2)。28. 在分别DNA 时要使用金属离子螯合剂，如EDTA 和柠檬酸钠等，其目的是。29. 用乙醇沉淀DNA 时，通常要在DNA 溶液中参加单价的阳离子，如NaCl 和 NaAc，其目的是。30浓缩DNA 的方法有：(1);(2);(3); (4)。31. 通常可在三种温度下保存DNA：45、-20、-70，其中以最好。32. 在用SDS 分别DNA 时，要留意SDS 的浓度，0.1和1的SDS 的作用效果是不同的，前者，后者。33. 在 DNA 分别过程中造成 DNA 分子断裂的因素很多，主要有(1)；(2)；(3)。34. 在分别DNA 时，常用法、法、法及法等方法去除蛋白质。235

7、. 在DNA 保存液中，常加一滴氯仿，主要是起作用。36. 在简并引物的设计中，常常要用到dI(次黄嘌呤)，缘由是。37. 在分别DNA 时，要戴手套操作，缘由是。38. 简并引物PCR 主要是依据蛋白质的氨基酸序列设计引物来合成相应的基因。39. SSC 是由NaCI 和柠檬酸钠组成的试剂，其中 NaCl 的作用是使，而柠檬酸钠的作用是。40. 在重蒸酚中参加 01的 8羟基喹啉及少量 巯基乙醇，不仅可以防止酚的氧化，还可以的活性及作用。三选择题1. 在核酸中一般不含有的元素是：A 碳B 氢C 氧D 硫2. 腺嘌呤(A)与鸟嘌呤(G)在构造上的差异是：AA 的C6上有羟基，G 的C6上有氨基

8、 B A 的 C6上有氨基，G 的 C2上有氨基C A 的C6上有甲基，G 的C6上有羰基 D A 的C6上有氨基，G 的 C2上有羰基3. 胸腺嘧啶(T)与尿密啶(U)在构造上的差异是：AT 的C2上有氨基，U 的C2上有氧 BT 的C5上有甲基，U 的 C5上无甲基C T 的C4上有氧，U 的 C 上有氧 D T 的C42上有氧，U 的C2上有氧4. 通常即不见于 DNA 又不见于RNA 的碱基是：A 腺嘌呤B 黄嘌呤C 鸟嘌呤D 胸腺嘧啶5. 以下哪种碱基只存在于 mRNA 而不存在于 DNA 中?A 腺嘌呤B 尿嘧啶C 鸟嘌呤D 胞嘧啶6. DNA 与RNA 完全水解后，其产物的特点是

9、：A 戊糖不同、碱基局部不同B 戊糖不同、碱基完全一样C 戊糖一样、碱基完全一样D 戊糖一样、碱基局部不同7. 在核酸分子中核苷酸之间的连接方式是：A3，3，-磷酸二酯键B 糖苷键C 3,5-磷酸二酯键D 肽键8. 核酸的紫外吸取是由哪一构造所产生的?A嘌呤和嘧啶之间的氢键B 碱基和戊糖之间的糖苷键C 戊糖和磷酸之间的酯键D 嘌呤和嘧啶环上的共轭双键9. 含有稀有碱基比例较多的核酸是：AmRNAB DNAC tRNAD rRNA10. 核酸分子中储存、传递遗传信息的关键局部是：A 核苷B 戊糖C 磷酸D 碱基序列11. 假尿苷的糖苷键是：ACCBCNC NND CH12. 在核苷酸分子中戊糖(

10、R)、碱基(N)和磷酸(P)的连接关系是：ANRP B NPRCPNRD RNP13. DNA 的二级构造是指：A 螺旋B 片层C 转角D 双螺旋构造14. 以下关于核苷酸生理功能的表达，错误的选项是：A 作为生物界最主要的直接供能物质B 作为辅酶的组成成分C 作为质膜的根本构造成分D 作为生理调整物质15. ATP 的生理功能不包括：A 为生物反响供能B 合成RNA C 贮存化学能D 合成DNA16. 关于DNA 双螺旋构造学说的表达，哪一项为哪一项错误的?A 由两条反向平行的DNA 链组成B 碱基具有严格的配对关系C 戊糖和磷酸组成的骨架在外侧D 生物细胞中全部DNA-级构造都是右手螺旋1

11、7以下哪种核酸的二级构造具有“三叶草”型?AmRNAB 质粒 DNACtRNAD 线粒体DNA18. 以下复合物中除哪个外，均是核酸与蛋白质组成的复合物A核糖体B病毒C端粒酶D核酶(ribozyme)19. 真核细胞染色质的根本构造单位是：A 组蛋白B 核心颗粒C 核小体D 超螺旋管20. 不参与核小体核心颗粒的蛋白质是：AH1B H2AC H2BD H321. 核酸的一级构造实质上就是：A多核苷酸链中的碱基排列挨次B 多核苷酸链中的碱基配对关系C 多核苷酸链中的碱基比例关系D 多核苷酸链的盘绕、折叠方式22. DNA 变性是指：A 多核苷酸链解聚B DNA 分子由超螺旋变为双螺旋C 分子中磷

12、酸二酯键断裂D 碱基间氢键断裂23. 双链 DNA 热变性后A黏度下降B沉降系数下降C浮力密度下降D紫外吸取下降24. DNA Tm 值较高是由于以下哪组核苷酸含量较高所致? AG+AB C+GC A+TDC+T25. 核酸变性后可发生以下哪种变化?A 减色效应B 增色效应C 紫外吸取力量丧失D 溶液粘度增加26. 在以下进展DNA 局部酶切的条件中，掌握那一项最好?A 反响时间B 酶量C 反响体积D酶反响的温度27. 对 DNA 片段作物理图谱分析，需要用A核酸外切酶B限制性内切酶CDNA 连接酶DDNA 聚合酶 I28. 从细胞或组织中分别DNA 时，常用蔗糖溶液，目的是： A 抑制核酸酶

13、的活性B 保护DNA，防止断裂C 加速蛋白质变性 D有利于细胞裂开29. 关于cDNA 的最正确的说法是：A 同 mRNA 互补的单链DNA B 同mRNA 互补的双链DNA C 以mRNA 为模板合成的双链DNA D 以上都正确30. RNA 经 NaOH 水解，其产物是A5”-核苷酸B2”-核苷酸C3”-核苷酸D2”-核苷酸和 3”-核苷酸的混合物31. 用碱法分别质粒DNA 时，染色体DNA 之所以可以被除去，是由于：A 染色体DNA 断成了碎片B 染色体DNA 分子量大，而不能释放C 染色体变性后来不及复性D 染色体未同蛋白质分开而沉淀32. Clark 做了一个好玩的试验，觉察Taq

14、 DNA 聚合酶可以不需要模板，在双链DNA 的末端加一个碱基，主要是加AdGTPB dATPC dCTPDdTTP33. 在简并引物的 3端尽量使用具有简并密码的氨基酸，这是由于ATaq 酶具有肯定的不准确性 B 便于排解错误碱基的掺人C 易于退火 D易于重组连接34. Southern 印迹的DNA 探针杂交。A 只与完全一样的片段 B 可与任何含有一样序列的 DNA 片段C 可与任何含有互补序列的DNA 片段 D可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA 片段35. 以下哪一个不是Southern 印迹法的步骤?A 用限制酶消化DNABDNA 与载体的连接C 用凝胶电泳分别DNA 片段DDN

15、A 片段转移至硝酸纤维素膜上(四)是非题1. 核苷中碱基和戊糖的连接一般为C-C 糖苷键。2. 在 DNA 变性过程中总是 G-C 对丰富区先熔解分开。3. RNA 的局部螺旋区中，两条链之间的方向也是反向平行的。4. 不同来源 DNA 单链，在肯定条件下能进展分子杂交是由于它们有共同的碱基组成。5. 核酸变性时紫外吸取值明显增加。6. Tm 值高的 DNA，(A+T)百分含量也高。7. 用二苯胺法测定 DNA，必需用同源的 DNA 作为标准样。8. 双链 DNA 中，嘌呤碱基含量总是等于嘧啶碱基含量。9. 真核细胞中 DNA 只存在于细胞核中。10. 在体内存在的 DNA 都是以 Watso

16、nCrick 提出的双螺旋构造形式存在的。11. 在一个生物个体不同组织中的DNA，其碱基组成不同。12. 原核细胞 DNA 是环状的，真核细胞中的 DNA 全是线状的。13. 某物质的水解产物对 260nm 的紫外光有强吸取，地衣酚及二苯胺试验阴性，可以断定此物质为非核酸物质。14. 真核 mRNA 分子 5”末端有一个 PolyA 构造。15. DNA 分子中含有大量的稀有碱基。16. tRNA 分子中含有较多的稀有碱基。17. mRNA 是人体细胞 RNA 中含量最高的一种，由于它与遗传有关。18. DNA 只存在于细胞(真核与原核)中，病毒体内无 DNA。19. 线粒体中也存在肯定量的

17、DNA。20. 自然界中只存在右旋的 DNA 双螺旋。21. 碱基配对发生在嘧啶碱与嘌呤碱之间。22. DNA 双螺旋构造中，由氢键连接的碱基对形成一种近似平面的构造。23. DNA 双螺旋的两条链方向肯定是相反的。24. RNA 的分子组成中，通常 A 不等于 U，G 不等于 C。25. tRNA 二级构造中，全部核苷酸只形成三个环、氨基酸臂、附加环和配对的碱基。26. DNA蛋白质在低盐溶液中溶解度较小，而 RNA蛋白质在低盐溶液中溶解度大。所以可利用此差异来分别这两种核蛋白。27. 在酸性条件下，DNA 分子上的嘌呤碱基不稳定，易被水解下来。28. 核酸的紫外吸取与溶液的pH 值无关。2

18、9. 生物体内存在的游离核苷酸多为 5”-核苷酸。30. Z 型 DNA 与 B 型 DNA 可以相互转变。31. mRNA 是细胞内种类最多、含量最丰富的 RNA。32. 在全部病毒中，迄今为止还没有觉察既含有RNA 又含有 DNA 的病毒。33基因表达的最终产物都是蛋白质。34. 两个核酸样品 A 和 B，假设 A 的 OD260/OD280 大于B 的 OD260/OD280，那么 A 的纯度大于 B 的纯度。35. 限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源DNA 的修饰和对自身 DNA 的限制实现的。 36能够产生防范病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌，其本身的基因组中没有被该

19、核酸酶识别的序列。 37限制性图谱与限制性片段长度多态性(RFLP)图谱的最显著的区分在于前者是一个物理图谱而后者是一个连锁图。38迄今所觉察的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA，又能作用于单链DNA。39. 甘油会使很多限制内切核酸的特异性发生转变，是导致一些酶的星活性的主要缘由之一，防止的方法是在酶切反响体系中，将甘油的浓度掌握在 5%以下。40. 同一内切核酸酶切割靶DNA，得到的片段端都是一样的。41. 所谓引物就是同DNA 互补的一小段RNA 分子。42. 假设 PCR 的每一次循环都把上一次循环中合成的 DNA 加了一倍，那么，10 个循环就扩增了 1000 倍，20 个循环就扩

20、增了100 万倍，30 个循环就扩增了 10 亿倍。43. 最有效的制备纯RNA 的方法是让其在细胞中超表达，然后提纯。44. 大量制备已被克隆基因编码蛋白产物的常用方法是体外转录和翻译。45. 简并引物是依据DNA 序列设计的引物群。46. 在DNA 贮存液中加一滴三氯甲烷，可防止真菌的污染。47. 密码的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率。48. 酚法和碱法分别质粒DNA 都要用溶菌酶破壁，但碱法用的溶菌酶的浓度要高。49. 在Northern 杂交中，为了防止RNA 形成局部环状发夹构造影响迁移率，所以要用变性缓冲液进展电泳。50. Northern 印迹和Southe

21、rn 印迹的根本原理是样的，都是用于检测构造基因的表达。五问答题1. (1)T7 噬菌体 DNA，其双螺旋链的相对分子质量为 2.5107。计算DNA 链的长度(设核苷酸对的平均相对分子质量为650)。(2)相对分子质量为 130106 的病毒 DNA 分子，每微米的质量是多少? (3)编码 88 个核苷酸的 tRNA 的基因有多长?(4) 编码细胞色素 C(104 个氨基酸)的基因有多长?(不考虑起始和终止序列)(5) 编码相对分子质量为 9.6 万的蛋白质的 mRNA，相对分子质量为多少?(设每个氨基酸的平均相对分子质量为 120) (6) 噬菌体 DNA 长 17 m，一突变体 DNA

22、长 15 m，问该突变体缺失了多少碱基对?2. 对一双链 DNA 而言，假设一条链中 (A+G)/(T+C)=0.7 ，则： (1) 互补链中 (A+G)/(T+C)=?(2) 在整个 DNA 分子中(A+G)/(T+C)=?(3)假设一条链中(A+T)=(G 十 C)=0.7，则互补链中(A+T)/(G+C)=?(4)在整个 DNA 分子中(A+T)/(G+C)=?3. 试述以下因素如何影响DNA 的复性过程。 (1)阳离子的存在，(2)低于 Tm 的温度，(3)高浓度的 DNA 链。4. 如何让一个超螺旋的环状病毒DNA 分子实行其松弛态? 线形双链DNA 能否形成超螺旋? 5用稀酸或高盐

23、溶液处理染色质，可以使组蛋白与DNA 解离，请解释。6. 在酶切反响缓冲液中参加BSA 的目的是什么?机理是什么?7. 有些噬菌体和质粒常常编码一些抗限制性酶的蛋白以中和宿主的限制系统。你认为噬菌体和质粒还有哪些可能的方式避开宿主的限制作用?8. 下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是类酶的识别序列：GAATCG， AAATIT， GATATC，ACCCCA ? 为什么?9. 当两种限制性内切核酸酶的作用条件不同时，假设要进展双酶切，应实行什么措施?为什么?10. 什么是限制性内切核酸酶的星号活性?受哪些因素影响?11. 用于克隆的 DNA 在质量上有什么要求?12. 为什么从细胞中分别

24、 DNA 时往往会断裂?13. 为什么苯酚要重蒸饱和后才能用于DNA 的分别?14. 为什么氧化变色的酚不能直接用于DNA 的分别?应如何处置?15. 在 DNA 分别过程中，酚通常与氯仿联合使用，即使不联合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次，为什么?16. 何谓简并引物(degenerate Primer)?17. 双脱氧法(dideoxynucleotide method)测序的根本原理是什么?18. 限制性内切核酸酶有哪些特点?19. 一个线形的 DNA 分子分别被两种限制性内切酶或同时被两种内切酶消化，消化的结果是：限制性内切酶BamH Bgl BamH I/Bgl 依据以上结果，画

25、出该 DNA 的物理图谱。片段大小Kb8.0,7.5,4.5,2.913,6,3.97.5,6,3.5,2.9,2,120. 什么是Western 印迹？它与Southern 印迹有什么不同？21. 简并引物设计的一般原则是什么？22. 大肠杆菌在其细胞内产生核酸(DNA)限制性内切酶的意义是什么?它本身的核酸限制性内切酶对其细胞内的 DNA 是否作用?23. 用 lmol/L 的 KOH 溶液水解核酸，两类核酸(DNA 及 RNA)的水解产物是否一样?24. 分别DNA 时，为什么要在缓冲液中参加肯定浓度的EDTA 和蔗糖?25. PCR 的根本原理是什么?用PCR 扩增某一基因，必需预先得

26、到什么样的信息?六、参考答案一名词解释1. 由单核苷酸通过磷酸二酯键相连而组成的高分子化合物，称为核酸。它可以分为 DNA 和 RNA 两类。2. 核苷酸残基在核酸分子中的排列挨次就称为核酸的一级构造。3. 两条 DNA 单链通过碱基互补配对的原则，所形成的双螺旋。4. 在形成双螺旋构造的过程中,由于各种碱基的大小与构造的不同，使得碱基之间的互补配对只能在 GC(或 CG)和 A T(或 TA)之间进展，这种碱基配对的规律就称为碱基配对规律(互补规律)。5. 核酸分子中除了常见的五种碱基外，还可能含有其它微量的碱基，这些碱基称为稀有碱基。由稀有碱基形成的核苷酸以及碱基与戊糖之间以非正常 NC

27、糖苷键所形成的核苷酸都称为稀有核苷酸。6. 单核苷酸分子中的磷酸基分别与戊糖的 3”-OH 及 5”-OH 形成酯键，这种磷酸内酯的构造称为环化核苷酸或环核苷酸。75”-核苷酸的磷酸基进一步磷酸化成二磷酸核苷、三磷酸核苷或更多的磷酸核苷，它们都被称为多磷酸核苷酸。8. 当核酸分子加热变性时，其在 260nm 处的紫外吸取会急剧增加的现象称为增色效应。9. 当加热变性了的核酸分子，在退火的条件下发生复性时，其在 260nm 处的紫外吸取会削减的现象称为减色效应。10. 单链RNA 分子也会在分子内部形成局部双螺旋的构造，由于这种局部双螺旋的构造有些象发卡，所以把这种局部双螺旋的构造称为发卡构造。

28、11. 当两条不同来源的DNA(或 RNA)链或 DNA 链与 RNA 链之间存在互补挨次时，在肯定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子，这种分子称为杂交分子。形成杂交分子的过程称为分子杂交。12. 当核酸分子加热变性时，其在 260nm 处的紫外吸取会急剧增加，当紫外吸取变化到达最大变化的半数值时，所对应的温度称为熔解温度、变性温度或用 Tm 值表示。13. 回文序列(palindromic sequence)是一段自我互补的序列，即同其互补链一样的序列 (两者的阅读方向都是从 53)。依据回文序列的构造可分为：完全的回文序列、不完全的回文序列和连续的回文序列。完全的回文序列(GAATTC)

29、，通常是限制性内切核酸酶的识别序列，不完全的回文序列(如 TACCTCGGCGTGATA)，常是其他蛋白质的结合位点(如阻遏蛋白)，在基因表达调控中有重要作用。连续的回文序列(如 GGTTXXXAACC，有一段是颠倒的重复)，它可使单链的核苷酸有可能在 tRNA 中见到的一样，形成发夹环的构造，连续的回文序列又称反向重复序列。14. 不同来源的限制性内切核酸酶具有一样的识别序列，产生完全一样的黏性末端，将这些酶称为同裂酶(isoschizomer)。15. 限制性物理图谱即限制性内切核酸酶作图(restrictionmapping)。简洁地说就是 DNA 分子中限制性内切核酸酶切割位点的定位，

30、即DNA 分子中各种不同限制性内切核酸酶的酶切位点的线性排列图。即标明限制酶在DNA 分子上的限制性位点的数目、限制性片段大小及其线性排列的挨次。二填空题l. RNADNARNA 胞液DNA 细胞核2. 磷酸戊糖 碱基 -D-核糖 -D-2-脱氧核糖 嘌呤嘧啶3. AGCUT 稀有碱基4. 戊糖 嘧啶 -D-2-脱氧核糖 T D-核糖 U5. AMPGMPCMPUMPdAMPdGMPdCMPdTMP3，5磷酸二酯6；双螺旋ATGCA+GC+T70.530.258911，9糖苷键嘌呤核苷9111，1糖苷键嘧啶核苷10CAMPcGMP 作为激素的其次信使11，三磷酸腺苷 脱氧二磷酸胞苷12碱基 长

31、度低高 高13CH0NP 磷910磷14氢键 碱基平面间疏水积存力(范德华力) 15大高16. mRNAtRNArRNA 合成蛋白质的模板 运输氨基酸的工具与蛋白质结合成核糖体是合成蛋白质的场所17. 多核苷酸链 双螺旋三叶草18. rRNAmRNAtRNA19. 结合氨基酸 识别密码子20. CCA 反密码子217甲基鸟苷酸 多聚腺苷酸2224 个一样的；切割位点；识别位点的；平切和穿插切；平 黏性末端；Mg2+；ATPSAM23. (1)能够在中间划一个对称轴，两侧的序列两两对称互补配对；(2)两条互补链的 53的序列组成一样，马上一条链旋转 180o，则两条链重叠 24(1)溶解膜蛋白及

32、脂肪，从而使细胞膜裂开；(2)溶解核膜和核小体，使其解聚，将核酸释放出来； (3)对 RNase、DNase 有肯定的抑制作用；(4)SDS 能够与蛋白质结合形成复合物，使蛋白质变性沉淀25(1)使蛋白质变性； (2)使核小体和核糖体解聚，提高 DNA 的得率26可以降低外表张力，从而削减气泡产生27(1)水解力量很强，作用范围广；(2)在 SDS 和 EDTA 中仍保持高活性，可以同SDS 和EDTA 同时使用28. 螯合Mg2+离子，抑制核酸酶的活性29. 中和DNA 分子的负电荷，增加DNA 分子间的分散力30(1)包埋吸水法；(2)蒸发； (3)膜过滤法；(4)有机溶剂抽提法31-70

33、32只将RNA 分别出来；可将DNA 与 RNA 一起分别出来33(1)核酸酶降解；(2)化学降解；(3)物理剪切34. 酸变性；碱变性；热变性； 酶水解35. 抑制真菌污染的36. dI 可以同任何碱基相匹配37. 手上常有核酸酶38. 一组混合39. DNA 溶解；作为螯合剂，抑制核酸酶的活性40抑制RNase；三选择题金属离子的螯合1. D2. B3. B4.B5.B6. A7. C8. D9. C10.D11.A12.A13.D14.C15.D16.D17.C18D19.C20.A21.A22.D23.A24.B25. B26. B27B28B29C30D 31C32. B33A34C

34、35. B四是非题1错2错3对4错5对6. 错7错8对9错10错11错12错13对14对15错16对17错18错19. 对20错21对22对23对24对25错26对27对28 错29对30对 31错32对33错 34错 35错 36. 错37. 对38. 错 39.对40. 错 41错 42对 43错44. 错 45错 46对 47对 48对 49对 50错五问答题1. (1)(2.5107/650)0.34=1.3104nm=13 m (2)650/0.34=1.9103/nm=1.9106/ m (3)880.34nm=30nm=0.03 m (4)10430.34=106nm0.11 m

35、 (5)(96000/120)3320=76800 (6)(1715)X103/0.34=5.88103bp2(1)设 DNA 的两条链分别为 和 ，那么 A =T ，T =A ，G =C ，C =G ， 由于，(A +G )/(T +C )=(T +C )/(A +G )=0.7所以，互补链中(A +G )/(T +C )=I/0.7=1.43(2)在整个分子中由于，A=T，G=C，所以，A+G=T+C，(A+G)/(T+C)=1 (3)假设同 1，则A +T =T +A ,G 十 C =C +G ，所以(A +T )/(G +C )=(A +T )/(G C )=0.7(4)(A +T +

36、A +T )/(G +C +G +C )=2(A +T )/2(G +C )=0.73. (1)阳离子可以中和 DNA 中带负电荷的磷酸基团，减弱 DNA 链间的静电作用，促进两条互补的多核苷酸链的相互靠近， 从而促进 DNA 的复性。(2) 温度上升可使 DNA 变性，因此温度降低到熔点以下可以促进 DNA 的复性。(3)DNA 链的浓度增加可以加快互补链随机碰撞的速度，从而促进 DNA 的复性。4. 核酸内切酶作用于超螺旋的环状病毒 DNA 分子，在其中的一条链上产生“缺刻”(nick)，释放张力，则超螺旋转变为松弛态。线形 DNA 分子只有当两端都被固定时，才能产生超螺旋。5. 组蛋白与

37、 DNA 之间的结合依靠的是组蛋正电的碱性基团与 DNA 带负电荷的磷酸基团之间的静电引力，假设用稀酸处理复合物，则磷酸基团质子化而失去所带的负电荷，复合物解离。假设用高盐溶液处理复合物，则阳离子与磷酸基团结合而取代了组蛋白，导致组蛋白与 DNA 解离。6. 目的是保护酶活性，机理是通过提高溶液中蛋白质的浓度，防止酶失活。7. 某些噬菌体的基因组中有修饰的碱基，因此对限制性内切核酸酶具有免疫作用。另一种避开限制酶切割的途径是抑制SAMase 的活性，该酶制造 S腺苷甲硫氨酸，某些限制酶作用时需要 S腺苷甲硫氨酸。然而，噬菌体在发育过程中不能同某些单碳的供体反响。8. GATATC；AAATTT

38、，由于它们是回文序列。9. 留意星号活性，先低盐，后高盐；先低温酶，后高温酶；并且可以直接在换酶前将第一种酶失活，再加其次种酶，否则， 易产生星号活性。或使用通用缓冲液。10. 类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在肯定环境条件下表现出来的特异性。条件的转变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些转变，转变后的活性通常称其次活性，而将这种因条件的转变会消灭其次活性的酶的右上角加一个星号表示，因此其次活性又称为星号活性。概括起来，诱发星号活性的因素有如下几种：(1)高甘油含量(5，vv)；(2)限制性内切核酸酶用量过高100U/ g DNA；(3

39、)低离子强度(25： mmolL)；(4)高 pH(8.0 以上)；(5)含有有机溶剂，如 DMSO，乙醇等；(6)有非 Mg2+的二价阳离子存在(如 Mn2+，Cu2+， CO2+，Zn2+等)。11. (1)首先是稳定性：保持 DNA 的高分子量和原有的构型。(2)低蛋白质含量。(3) DNA 样品中应不含 RNA (4)不含可透析的小分子12. (1)细胞内存在很高的核酸酶活性,DNA 暴露后，很简洁遭到核酸酶的降解； (2)在分别 DNA 的过程中，要用到一些酸碱等化学试剂，也会使 DNA 断裂；(3)在 DNA 的分别过程中要经过屡次离心、吸取、转移等，产生的机械张力剪切会使 DNA

40、 断裂。13. 由于苯酚呈酸性，并且常常会氧化产生自由基，直接用于DNA 的分别，会使DNA 遭到破坏，所以，用前需要重蒸除去氧化物，然后用 Tris-HCl 饱和酚，并调整 pH 到中性。用缓冲液饱和酚还有其次个作用，就是防止酚吸取更多的 DNA 溶液，降低 DNA 的损失率。14. 由于苯酚与空气接触氧化成粉红色的醌。苯酚氧化生成的醌能够形成游离的自由基，这种自由基能够引起磷酸二酯键的断裂，造成 DNA 降解。氧化的苯酚须经高温重蒸以除去氧化物，并且在重蒸后的酚中添加抗氧化剂，巯基乙醇和 8羟基喹啉，浓度只需 01。重蒸酚能够用锡箔纸包起来避光保存在低温下。15. 缘由是酚和水有肯定程度的

41、互溶，所以单独使用酚抽提 DNA，最终不能除去酚，残留的酚会使起切割和连接作用的限制性内切核酸酶和连接酶变性。氯仿也是蛋白变性剂，它不与水互溶，但是能够同苯酚互溶，这样，酚和氯仿联合使用， 就可以带走残留的酚。16. 所谓简并引物是指依据肽链的氨基酸序列(或局部序列)，并充分考虑密码子的简并性而设计的、用于 PCR 扩增的混合引物群体，这种混合引物之间具有不同的碱基组成，但碱基的数量是一样的。由于充分考虑了密码的简并性，在这种混合引物中必定有一种引物是可以和该基因的 DNA 序列准确互补。17. 双脱氧的核苷酸是人造的分子，这种分子糖环的 2和 3碳上都没有了羟基基团，而在自然分子中糖环的 3

42、碳上有一个羟基。在DNA 复制中，掺人的碱基按配对原则是自然三磷酸核苷酸，用它的5”-P 同生长链的前一个核苷酸的 3羟基连接。但是，假设进入的核苷酸是双脱氧的，则由于 3没有羟基而影响下一个磷酸二酯键的形成，使DNA 的复制终止。18. 限制性内切核酸酶分为三类，重组 DNA 技术的限制性内切核酸酶为类。其特点为：识别 DNA 位点的核苷酸序列呈二元旋转对称即回文构造(palindrome)。一些酶切割后产生粘性末端(sticky end ), 另一些酶切割后产生平端或钝性末端(blunt end)。不同的限制性内切核酸酶识别DNA 中的核苷酸长短不一，为 4、6 或 8 个。19. 在双酶

43、切时，有三个片段(7.5，2.9 和 6Kb)没有被切成更小的片段，这说明它们内部没有其他酶的切点(如 7.5Kb BamH I 片段内无 Bgl 切点)。用 Bgl 消化产生 3 个片段说明整个 DNA 分子上具有 2 个 Bgl 切点，同样可以推断 DNA 上还有 3 个 BamH I 切点。13 和 3.9Kb Bgl 酶切片段在双酶切后消逝了，这说明这两个片段内部具有 BamH I 切点。而 2.9Kb 与 lKb 之和为 3.9Kb，这提示 3.9Kb 的 Bgl 酶切片段内有一个 BamH I 切点。2Kb，7.5Kb 与 3.5Kb 之和为 13Kb 则说明13Kb 的 Bgl

44、酶切片段内含有 2 个 BamH I 切点。此外，3.5Kb 与 lKb 之和为 4.5Kb 则说明 4.5Kb 的 BamH 酶切片段内含有一个 Bgl 切点。综合以上结果，原来的线形DNA 的物理图谱为：20. Western 印迹是将蛋白质经电泳分别后从凝胶中转移到固相支持物上，然后用特异性的抗体进展检测。它与 Southern 的不同在于探针的性质不同，在 Western 印迹中使用的探针是抗体(蛋白质)。21. (1)选择保守区设计简并引物；(2)选择简并性低的氨基酸密码区设计引物； (3)留意密码的偏爱性；(4) 使用完可能短的引物，以降低简并性，最短可用 1520 个碱基。(5) 由于 TaqDNA 聚合酶在 PCR 扩增时简洁掺人错误碱基，所以设计的引物，其 3”端尽量使用具有简并密码的氨基酸。22. 大肠杆菌产生核酸限制性内切酶是为了水解破坏外源的DNA，而大肠杆菌本身的 DNA 已经被甲基化修饰，所以不被其本身的核酸限制性内切酶所水解。23. 不同。RNA 可以被水解成单核苷酸，而 DNA 分子中的的脱氧核糖 2”碳原子上没有羟基，所以 DNA 不被碱水解。24. (1)EDTA是螯合剂，