(1.8.13)--PPT8环境工程微生物学.ppt

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1、讨论一：计算生长量讨论一：计算生长量 2(三三)计算生长量计算生长量计算生长量，关键要测得细胞质量。计算生长量，关键要测得细胞质量。即即在在细细菌菌生生长长过过程程中中，测测定定单单位位体体积积液液体体中中细细菌菌群群体体重量变化重量变化直接表示细菌生长直接表示细菌生长的的数量数量。测定细胞质量的方法有：测定细胞质量的方法有：1.测定细胞干重法 2.生理指标法 3.DNA含量法 4.细胞含N量法31.测定定细胞干重法胞干重法测定干重时，先将细菌测定干重时，先将细菌分离分离，再烘干再烘干称量。分离可称量。分离可采用采用离心法离心法或或过滤法过滤法。取已经培养一段时间的待测。取已经培养一段时间的待

2、测样品，用离心机收集生长后的细菌细胞，或用滤纸、样品，用离心机收集生长后的细菌细胞，或用滤纸、滤膜过滤截取生长后的细菌细胞，在滤膜过滤截取生长后的细菌细胞，在105105110110下下进行干燥，称取干燥后重量，以此代表细菌生长量。进行干燥，称取干燥后重量，以此代表细菌生长量。4细胞干重法应用：细胞干重法应用：水水处处理理工工程程设设施施中中的的细细菌菌生生长长量量通通常常采采用用这这种种细细胞胞干干重重测测定定法法。这这种种方方法法实实际际上上测测得得的的是是水水中中悬悬浮浮物物重重量量，如如果果水水中中非非细细菌菌类类的的悬悬浮浮物物很很多多的的话话，势必会严重干扰细菌计数的结果。势必会严

3、重干扰细菌计数的结果。优点：可以适用于优点：可以适用于一切一切微生物微生物缺点：无法区别死菌和活菌缺点：无法区别死菌和活菌 非细菌类悬浮物很多时非细菌类悬浮物很多时误差较大误差较大52.DNA含量法含量法n同种细菌的同种细菌的DNADNA含量一致含量一致，可通过测定，可通过测定DNADNA的含量来表的含量来表示细菌的生长量。示细菌的生长量。n应用：应用：少量少量 纯细菌纯细菌培养时细菌培养时细菌数量的测定。数量的测定。n优点：优点：精确性非常高精确性非常高n缺点：对样品纯度以及仪器和缺点：对样品纯度以及仪器和 人员的要求较高。人员的要求较高。63.生理指生理指标法法定定义义：通通过过微微生生物

4、物的的呼呼吸吸强强度度、耗耗氧氧量量、酶酶活活性性、生生物物热热等等生生理理指指标标的的测测定定，来来分分析析判判断断微微生生物物的的数数量量和和生生长长状状况况，微微生生物物数数量量多多或或生生长长旺旺盛盛，这这些些指指标标愈愈明明显。显。应应用用：可可以以借借助助特特定定的的仪仪器器（如如瓦瓦勃勃氏氏呼呼吸吸仪仪、微微量量量量热热计计）及及TTC-TTC-脱脱氢氢酶酶活活性性测测定定法法测测定定相相应应的的指指标标，从而了解活性污泥或生物膜的活性。从而了解活性污泥或生物膜的活性。优点：简单易行，可由环境特点感知生物生长状况优点：简单易行，可由环境特点感知生物生长状况缺点：但是定量描述比较困

5、难。缺点：但是定量描述比较困难。74.细胞含胞含N量法量法大大多多数数生生物物蛋蛋白白质质氮氮含含量量较较稳稳定定，一一般般为为蛋蛋白白质质干干重重15151616，平均为平均为1616。菌体蛋白质菌体蛋白质-N-N细菌数目细菌数目单个细胞的蛋白质含量单个细胞的蛋白质含量16%16%细菌的数目细菌的数目=菌体蛋白质菌体蛋白质-N N 16%16%单个细胞的蛋白质含量单个细胞的蛋白质含量8应用：应用：凯氏定氮法凯氏定氮法 Kjeldahl determination 即在有即在有催化剂催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将的条件下，用浓硫酸消化样品将有机有机氮氮都转变成都转变成无机铵盐无机铵盐，然后

6、在碱性条件下，然后在碱性条件下将铵盐转将铵盐转化为氨化为氨，随水蒸气馏出并被，随水蒸气馏出并被过量的酸液吸收过量的酸液吸收，再以再以标准碱滴定标准碱滴定，以计算出样品中的氮量。，以计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，故此法是由于蛋白质含氮量比较恒定，故此法是经典经典的蛋白的蛋白质定量方法。质定量方法。优点：优点：1.1.可用于所有食品的蛋白质分析可用于所有食品的蛋白质分析 2.2.操作简单操作简单结果准确结果准确 3.3.实验费用较低实验费用较低缺点：缺点：1.1.实验时间长，精度低实验时间长，精度低 2.2.所用试剂有腐蚀性所用试剂有腐蚀性 3.3.测定的是总有机氮，而不只是蛋白质

7、氮测定的是总有机氮，而不只是蛋白质氮 9蛋白质中的氮含量不超过30%，而三聚氰胺的含氮量达到66%。蛋白质中的氮含量不超过30%，而三聚氰胺的含氮量达到66%。11三鹿奶粉的厂家为了降低三鹿奶粉的厂家为了降低成本，追求利润最大化，成本，追求利润最大化，用了损害人体健康的原材用了损害人体健康的原材料料三聚氰胺三聚氰胺（MelamineMelamine），俗称蛋白），俗称蛋白精，几乎无味精，几乎无味对身体有害对身体有害，不可用于食品加工或食品不可用于食品加工或食品添加物。添加物。20172017年年1010月月2727日日，世界卫世界卫生组织生组织国际癌症研究机构国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整公布的致癌物清单初步整理参考，三聚氰胺在理参考，三聚氰胺在2B2B类类致癌物致癌物清单中。清单中。