(10.12)--酒精对大鼠学习记忆能力的影响.pdf

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1、酒精对大鼠学习记忆能力的影响摘要:目的观察酒精对大鼠学习记忆能力的影响，并探讨其初步机制。方法32 只清洁级雄性 SD 大鼠随机分成对照组及酒精 6%、8%、12%浓度组，每组8 只，每天24 h 自由饮，连续30 d。旷场实验观察大鼠的异动行为，Morris 水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力的变化，检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，高效液相色谱法检测海马多巴胺(DA)含量变化。结果旷场实验中，与对照组相比，8%、12%酒精浓度组大鼠水平运动的时间和距离均显著延长(P 0 05)，垂直运动的时间和距离均显著减少(P 0 05)。Morris 水迷宫结果显示，与对照组相比

2、，8%、12%酒精浓度组大鼠逃避潜伏期显著延长(P 0 05)，穿越原站台的次数显著较少(P 0 05);8%、12%酒精浓度组大鼠血清中 SOD 活性显著下降(P 0 05)，MDA含量显著增加(P 0 05)，海马组织中 DA 含量显著较少(P 0 05)。结论酒精可能通过增加体内的自由基毒性和减少海马组织内 DA 含量导致大鼠学习记忆能力减退和出现异动行为。关键词:酒精;学习记忆;多巴胺;Morris 水迷宫中图分类号:363文献标志码:AEffect of alcohol on learning and memory ability of ratsTONG Xiqi，YU Ming，W

3、ANG Hong，ZHANG Xinyuan，LOU Xiying，WAN Peng*(School of Basic Medicine，JilinMedical University，Jilin City，Jilin Province，132013，China)Abstract:ObjectiveTo observe the effect of alcohol on the learning and memory ability of rats and explore its pre-liminary mechanism MethodsThirty-two male SD rats of c

4、lean grade were randomly divided into control group andalcohol 6%，8%，12%groups，8 rats in each group They drank freely 24 hours a day for 30 days Open field test wasused to observe the abnormal behavior of rats，Morris water maze test was used to observe the changes of learning andmemory ability of ra

5、ts The activity of superoxide dismutase(SOD)and the content of malondialdehyde(MDA)in se-rum were measured The content of dopamine(DA)in hippocampus was detected by HPLC esultsIn the openfield experiment，compared with the control group，the time and distance of horizontal movement of rats in 8%and12%

6、alcohol concentration groups were significantly longer(P 0 05)，and the time and distance of vertical move-ment were significantly reduced(P 0 05)In Morris water maze test，compared with the control group，the escapelatency of rats in 8%and 12%alcohol concentration groups was significantly prolonged(P

7、0 05)and crossed theoriginal platform The activity of SOD in serum decreased significantly(P 0 05)The content of MDA increased sig-nificantly(P 0 05)And the content of DA in hippocampus decreased significantly(P 0 05)ConclusionAl-cohol may increase the toxicity of free radicals and decrease the cont

8、ent of DA in hippocampus，which may lead to thedecline of learning and memory ability and abnormal behavior in ratsKey words:alcohol;learning and memory;dopamine;Morris water maze近年来，因过度饮酒造成的事故、损伤、疾病和死亡等问题显著增加。酒精依赖是一种以酒精耐受、依赖、饮酒、自控力进行性丧失和以戒断综合征为特点的慢性功能紊乱性疾病1。中枢神经系统是酒精最敏感的靶点。酒精可以自由通过血脑屏障，影响神经系统结构和功能。酒

9、精主要影响中脑黑质-纹状体多巴胺系统功能异常，从而导致记忆能力障碍、失眠、DOI:10.13845/ki.issn1673-2995.2021.03.004抑郁、异动症、成瘾、焦虑，甚至产生幻想等行为2。有研究证实，酒精可以损伤大鼠的学习记忆功能3。目前关于酒精对机体损伤的研究较多，主要包括对大脑的结构、神经递质及受体等4，但酒精自由饮对大鼠的异动行为研究较少。因此，本实验采用酒精自由饮模型，观察酒精对大鼠异动行为和学习记忆能力的影响，同时检测血清中自由基的损伤情况，探讨酒精损伤中枢神经系统的可能机制。1材料与方法1 1实验动物及分组雄性清洁级 SD 大鼠 32 只，适应性饲养 1 周，室温(

10、20 2)，相对湿度 40%60%，体重(200 20)g，吉林大学动物实验中心提供(动物许可证号:SCXK-吉 20160003)。实验动物随机分为 4 个组，对照组及酒精自由饮 6%、8%、12%的浓度梯度组。1 2旷场实验检测大鼠在新异环境中的自主行为。检测前1 d大鼠在旷场实验箱内适应 30 min 以熟悉环境。观察指标有大鼠排尿、排便次数，运动速度，运动距离(水平运动和垂直运动)，休息时间，沿边运动距离和中央运动距离及停留的时间等。本实验主要观察大鼠水平运动的时间和距离以及垂直运动的时间和距离，每次测试时间 30 min。每测试一次动物都要对旷箱地板进行 75%酒精擦拭，以免上次动物

11、余留的信息(如动物的大、小便，气味)影响下次测试结果。1 3Morris 水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力。检测前 1 d 大鼠在无站台的水池中自由游泳 2 min 以熟悉环境。定位航行实验观察指标有大鼠寻找并跳上平台的时间、路径、总路程以及搜索策略方式等。本实验用逃避潜伏期以 120 s 记录。空间探索实验用来衡量实验动物对平台所处空间位置的记忆保持能力，测量实验动物在固定的时间内(本实验采用 60 s)穿越原站台区的次数。1 4海马组织多巴胺含量及血清中抗氧化指标测定Morris 水迷宫实验结束后，大鼠行腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，3000 r/min(离心半径 13 5 cm)，离心 1

12、0 min，制备血清，样本用于测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量(严格按照相应试剂盒说明书进行操作)。之后快速在冰上取脑，并迅速剥离一侧大脑海马组织，滤纸滤干准确称取海马组织的重量，并放入盛有脑组织质量9 倍4 生理盐水的组织匀浆管中，用匀浆器制备 10%的组织匀浆，3000 r/min(离心半径13 5 cm)，离心10 min，取上清液备用。将收集的样品注入高效液相色谱系统，测定多巴胺(dopamine，DA)的含量。1 5统计学方法数据用 SPSS 17 0 统计软件对数据进行统计分析。所有数据均用 珋x s 表示。采用完全随机设计的单因素方差分析(one-way A

13、NOVA)，各样本均数之间的多重比较采用独立样本 LSD-t 检验。P 0 05 为有统计学意义。2结果2 1旷场实验结果旷场实验测试结果显示，与对照组相比，8%、12%酒精组大鼠水平运动的时间显著延长(P 0 05);12%酒精组与 6%酒精组相比，大鼠水平运动的时间显著延长(P 0 05);12%酒精组与对照组和6%酒精组相比，大鼠水平运动的距离显著增加(P 005)。与对照组相比，8%、12%酒精组大鼠垂直运动的时间和垂直运动的距离均显著减少(P 0 05);12%酒精组与 6%酒精组相比大鼠垂直运动的时间和垂直运动的距离均显著减少(P 0 05)。见表 1。2 2Morris 水迷宫实

14、验结果在 5 d 的定位航行实验中，大鼠找到站台所需要的时间，即逃避潜伏期随着训练天数的增加逐渐缩短。与对照组相比，8%、12%酒精组大鼠的逃避潜伏期显著延长(P 0 05)，12%酒精组与 6%酒精组相表 1酒精自由饮对大鼠自主行为的影响(n=8，珔x s)组别水平运动时间/s水平运动距离/cm垂直运动时间/s垂直运动距离/cm对照组628 34 3 4690 74 2 14967 34 4 15567 32 2 436%酒精组758 45 4 37118 36 3 06876 43 3 26543 48 3 028%酒精组986 32 3 26*126 24 2 68703 42 4 01

15、*412 36 2 46*12%酒精组1256 45 4 34*#193 86 3 46*#589 38 3 83*#368 16 3 43*#与对照组相比，*P 0 05;与 6%酒精组相比，#P 0 05371第 3 期佟昕琪，等 酒精对大鼠学习记忆能力的影响比大鼠的逃避潜伏期显著延长(P 0 05)。第 5 天撤去站台后的空间探索实验中，大鼠在 60 s 内穿过原站台区的次数与对照组相比，8%、12%酒精组大鼠穿越原站台的次数显著减少(P 0 05);12%酒精组与 6%酒精组相比大鼠穿越原站台的次数显著减少(P 0 05)。见表 2。表 2酒精自由饮对大鼠学习记忆能力的影响(n=8，珔

16、x s)组别逃避潜伏期/s穿越原站台/(次min1)对照组25 12 2 139 67 0 386%酒精组26 24 2 178 23 0 468%酒精组42 36 2 31*6 24 0 57*12%酒精组57 01 3 13*#3 86 0 28*#与对照组相比，*P 0 05;与 6%酒精组相比，#P 0 052 3酒精对海马组织 DA 含量及血清中 SOD 和MDA 的影响与对照组相比，8%、12%酒精组大鼠海马组织内DA 含量显著减少(P 0 05);12%酒精组与 6%酒精组相比大鼠海马组织内 DA 含量显著减少(P 0 05)。与对照组相比，8%、12%酒精组大鼠血清中SOD 的

17、活性显著降低(P 0 05);12%酒精组与 6%酒精组相比大鼠血清中 SOD 的活性显著降低(P 0 05)。与对照组相比，8%、12%酒精组大鼠血清中MDA 含量显著增加(P 0 05);12%酒精组与 6%酒精组相比大鼠血清中 MDA 含量显著增加(P 0 05)。见表 3。表 3酒精对海马组织 DA 含量及血清中 SOD 活性和 MDA 含量影响(n=8，珔x s)组别DA/(gg1)SOD/(UmL1)MDA/(molL1)对照组6 14 0 31274 4 10 512 4 1 36%酒精组5 68 0 12259 7 13 614 6 1 78%酒精组5 05 0 25*207

18、6 15 8*17 5 2 0*12%酒精组 3 94 0 41*#197 5 9 4*#18 4 1 3*#与对照组相比，*P 0 05;与 6%酒精组相比，#P 0 053讨论众所周知，中枢神经系统是酒精损伤的重要靶点之一，摄入酒精后可损伤大脑神经元的形态及其功能发生改变。有研究证实，长期过量饮酒可以引起明显的酒精依赖，最终引起严重的迟发性运动障碍，其运动障碍发生在戒断期与短暂性帕金森病相类似5。本研究证实，8%、12%的酒精浓度组大鼠海马组织内DA 含量显著减少，并且在旷场实验中出现了垂直运动的时间和垂直运动的距离均显著减少的异动症状。研究证实，多巴胺能神经元及其受体在药物成瘾中发挥重要

19、作用，中脑黑质及纹状体内多巴胺能神经元减少引起显著的帕金森病特征6。虽然海马不是多巴胺神经系统的经典部位，但是海马接受腹侧背盖区等处的多巴胺能神经元的投射7-8，而且海马内有 D1和 D2 受体的高表达9。长期过量饮酒最常表现为Korsakoff 综合征和酒精相关性痴呆，长期过量饮酒可以引起大脑结构和功能的永久性损害10，造成认知功能紊乱和神经退行性疾病，这与本研究的 8%、12%的酒精浓度组大鼠在 Morris 水迷宫实验中逃避潜伏期显著延长和穿越原站台的次数显著减少相一致。不同剂量酒精对中枢神经系统有一系列影响，但酒精摄入与认知功能障碍之间的剂量-反应关系尚不清楚11。有研究证实，长期大量

20、饮酒后能显著抑制体内抗氧化酶的活性，导致机体内过多的氧自由基无法被清除12，这与本研究的 8%、12%的酒精浓度组大鼠血清中 SOD 活性显著下降和 MDA 含量显著增加相一致。长期过量摄入酒精能够显著减少脑内 DA 的含量，从而引起大鼠的异动行为，进一步引起学习记忆功能障碍。酒精对大脑的损伤一定程度上与增强体内自由基的毒性及氧化作用相关，但酒精是否通过影响神经递质的下游受体和相关蛋白导致突触可塑性降低而影响学习记忆能力，有待于更深一步研究。参考文献:1 KHOM S，STEINKELLNE T，HNASKO T S，et al Alcoholdependence potentiates su

21、bstance P/neurokinin-1 receptorsignaling in the rat central nucleus of amygdalaJ SciAdv，2020，6(12):1-11 2 E爦EL E，DIN K Neurobiology of alcohol dependence andimplications on treatmentJ Turk Psikiyatri Derg，2017，28(1):51-60 3GIBULA-TALOWSKA E，KOTLINSKA J H Kissorphinimproves spatial memory and cogniti

22、ve flexibility impair-ment induced by ethanol treatment in the Barnes maze taskin rats J Behav Pharmacol，2020，31(2/3):272-282 4 NASHED M G，CHATTEJEE D，NGUYEN D，et al Etha-nol-induced changes in synaptic amino acid neurotransmit-ter levels in the nucleus accumbens of differentially sensi-tized miceJ

23、Psychopharmacology(Berl)，2019，236471吉林医药学院学报2021 年 06 月第 42 卷(12):3541-3556 5PAKASH S，BALHAA Y P are form of dyskineticmovements associated with alcohol withdrawalJ IndianJ Psychol Med，2016，38(2):163-164 6 BIJJAL S，SUBODH B N，NAAYANASWAMY J C，et alDystonia as a presenting feature of alcohol withdraw

24、al J JNeuropsychiatry Clin Neurosci，2012，24(1):15-16 7 LISMAN J，GACE A A，DUZEL E neoHebbian frameworkfor episodic memory;role of dopamine-dependent late LTP J Trends Neurosci，2011，34(10):536-547 8NAZAI-SEENJEH F，EZAYOF A，ZAINDAST M Functional correlation between GABAergic and dopam-inergic systems o

25、f dorsal hippocampus and ventral tegmen-tal area in passive avoidance learning in ratsJ Neuro-science，2011，24(196):104-114 9GANGAOSSA G，LONGUEVILLE S，DE BUNDEL D，etal Characterization of dopamine D1 and D2 receptor-ex-pressing neurons in the mouse hippocampusJ Hippo-campus，2012，22(12):2199-2207 10 K

26、ANZAKI A，TADA H，OTSUKA A，et al Severe tardivedyskinesia induced by domperidone in presenile and non-dementia type 2 diabetes man with alcohol misuse showingalbuminocytological dissociation and white matter hyperin-tensity J BMJ Case ep，2019，12(5):1-10 11 刘国良，林玲 慢性饮酒及戒断对老年大鼠学习记忆的影响 J 中国老年学杂志，2019，39(

27、11):2745-2748 12 刘青青，谢惠波，李永儒，等 野生猕猴桃对大鼠酒精性脑损伤的抗氧化作用研究J 当代医学，2019，25(23):6-8(收稿日期:2020-11-17)檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽文章编号:1673-2995(2021)03-0175-03论著替硝唑联合克林霉素磷酸酯治疗细菌性阴道炎的效果观察姚晓荣(太康县康复医院妇产科，河南 周口461400)摘要:目的探索替硝唑口服联合克林霉素磷酸酯阴道凝胶局部外用治疗细菌性阴道炎的临床疗效，并观察治疗后对复发率和致病菌检出率的

28、影响。方法将 98 例细菌性阴道炎患者随机分为观察组(48 例)和对照组(50 例)。对照组给予替硝唑口服治疗，观察组再增加克林霉素磷酸酯阴道凝胶局部涂抹治疗。比较两组患者临床总有效率、临床症状消失时间、不良反应发生率、治疗前后病原菌和乳杆菌属检出率及复发率。结果对照组临床总有效率和复发率分别为 74 和 14%，观察组分别为 93 75%和 4 17%，差异均有统计学意义(P 005)。治疗后两组不良反应发生率差异无统计学意义(P 0 05)。治疗后观察组黏膜充血、外阴阴道疼痛、外阴瘙痒及白带消失时间均比对照组短(P 0 05)，病原菌检出率明显低于对照组(P 0 05)。结论替硝唑口服联合

29、克林霉素磷酸酯阴道凝胶局部外用治疗细菌性阴道炎临床疗效显著，值得推广应用。关键词:阴道炎;克林霉素;替硝唑;细菌中图分类号:711 31文献标志码:AEffect of tinidazole combined with clindamycin phosphate in the treatmentof bacterial vaginitisYAO Xiaorong(Department of Obstetrics and Gynecology，Taikang ehabilitation Hospital，Zhoukou，Henan Prov-ince，461400，China)Abstract:

30、ObjectiveTo explore the clinical efficacy of tinidazole combined with Clindamycin Phosphate VaginalGel topical application in the treatment of bacterial vaginitis，and observe the recurrence rate and the detection rate ofpathogenic bacteria after treatment MethodsNinety-eight cases of bacterial vaginitis were randomly divided intoobservation group(48 cases)and control group(50 cases)The control group was given tinidazole orally，while the作者简介:姚晓荣(1974)，女(汉族)，主治医师，本科571第 42 卷第 3 期2021 年 06 月吉林医药学院学报JournalofJilinMedicalUniversityVol 42No 3Jun 2021DOI:10.13845/ki.issn1673-2995.2021.03.005