DB5134∕T 40-2023 美姑山羊人工授精技术规程(凉山彝族自治州).pdf

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1、ICS 65.02CCS B43DB5134四川省（凉山彝族自治州）地方标准DB 513 4/T 40 2023美姑山羊人工授精技术规程2023 T2-05 发布2023-12-30实施凉山彝族自治州市场监督管理局 发 布DB5134/T 40 202 3目次前 言.II1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14种公羊的选择与训练.25采精.26精液品质检查.37精液稀释.48母羊同期发情.49母羊发情鉴定.510输精.5附录A（资料性附录）美姑山羊人工授精站所需仪器、设备.7DB5134/T 40 2023-XX.-A 刖 B本标准按照GB/T1.1和GB/TL 2进行编写。本标准由凉

2、山彝族自治州农业农村局归口。本标准由美姑县养殖技术推广中心、四川农业大学、凉山彝族自治州农业科学研究院提出并起草。本标准由美姑县养殖技术推广中心、四川农业大学、凉山彝族自治州农业科学研究院负责解释。本标准主要起草人：沙马说布、王林杰、杨世忠、阿西伍牛、占思远、阿尔阿布、勒格阿作、付开 棉、陈益、安拉扎、孟群英、吉色曲伍、范景胜、阿则晓龙、彭航馨。DB513 4/T 40 2023美姑山羊人工授精技术规程1范围本标准规定了美姑山羊种公羊选择、采精、精液品质检查、精液稀释、母羊同期发情、母羊发情鉴 定和输精等主要技术环节。本标准适用于凉山州美姑山羊种羊场、种羊生产专业户和美姑山羊人工授精站。2规范

3、性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 1236 绵、山羊生产性能测定技术规范DB5134/T 2 美姑山羊3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1美姑山羊美姑山羊被毛黑色，以黑色为主。头大小中等，两耳短侧立，鼻梁微拱，角多为弓形，多有胡须，有肉髯者约占30%,蹄质坚实，蹄冠黑色，短瘦尾。3.2人工授精是指借助于专门器械，用人工方法采取公羊的精液，经体外检查与处理后，输入发情母羊的生殖道 内，使其受胎的一种繁殖技术。3.3同期发情用孕激素制剂处理，采

4、用CIDR（羊用孕激素阴道栓）+PMSG法，促使母羊在同一时间发情。3.4假阴道DB5134/T 40 202 3采精用具，由硬橡胶外壳、柔软橡胶内膜和带夹层玻璃集精杯组成,筒状结构，用前组装。3.5精子活力3 7c温度镜检，直线前进运动精子占总数的百分比。3：6精子密度每毫升精液中所含精子数，分密、中、稀三级。4种公羊的选择与训练4.1 种公羊的选择种公羊的选择应参照DB5134/T 2执行，具有种用体况，达到二级以上标准。4.2采精训练对于初次参加采精的种公羊，在配种前1个月驱除内、外寄生虫，同时应有计划地进行调教，每天 保持3 h5h运动时间。在配种开始前1个月，定人定时，每天采精一次，

5、两周以后每两天一次，每次 均应取样进行精液品质检查，精子活力不低于0.8。5采精5.1 采精场地要求采精室面积lOnTi51n2、精液品质检查室ion!?和输精室1(W,室温保持在182 5C。人工授 精站要求地面平坦而防滑，环境安静，卫生状况良好。5.2 采精前的准备5.2.1 用具的准备和消毒5.2.1.1用具的准备用具准备包括显微镜、假阴道、集精杯等，详见附录A。5.2.1.2用具的消毒凡是和精液可能接触的器械均应消毒处理。输精器械用2%的重碳酸钠和1.5%的碳酸钠溶液反复冲 洗后，再用清水冲2次3次，最后用蒸储水冲洗后悬于室内，自然干燥，使用前再用生理盐水冲洗2 次3次。毛巾、台布、纱

6、布、盖布等用肥皂水洗涤后，再用清水清洗，干燥备用。5.2.2 假阴道的安装将假阴道各部件充分洗涤干净，用蒸储水冲洗后，放在消毒柜中干燥，安装前将瓷盘用75%酒精消 毒。逐件检查各部件是否有破损、漏水、针眼。首先，将内胎光面向里，向外翻到外壳上，将集精杯安 2DB5134/T 40 2023装在假阴道上，用纱布套和皮圈固定其次,从外壳中央小孔在内胎与夹量间注入50C55C热水,约占1/2体积用消错的玻璃棒目取少凡士林或石蜡油,从外口向内均匀涂抹，涂抹深度为假阴道长 度的1/21内胎充气至压力适当（假阴道外口的内胎呈Y型，温度计插入时感到有一定阻力），用消毒 的温度计插入假阴道内检杳温度，以保证采

7、精时温度达到40C42。5.3人工采精人工采精最好选择发情母羊做台羊，也可以选择固定台羊。采精时，采精人员右手紧握假阴道，用 食指、中指夹好集精瓶，使假阴道活塞朝下，蹲于台羊的右后侧。待公羊爬跨台羊且阴茎伸出时，采精 人员用左手轻拨公羊包皮（勿触龟头），将阴茎导入假阴道（假阴道应与地面呈35 角）。公羊向上 一冲，说明已经射精。待公羊跳下，立即放掉假阴道内空气，并垂直放置。打开活塞上的气嘴，放出空 气，取下集精瓶，进行精液品质检查。种公羊每天可采精2次3次，第一、二次采精后休息2 h方可 进行第三次采精，每周休息Id。采精后要及时做好种公羊采精记录。6精液品质检查6.1 肉眼检查6.1.1 射

8、精量成年公羊每次射精量为0.5mL2mL,一般为1mL。6.1.2 色泽正常的精液为乳白色。凡呈深黄、灰、青、红和绿色或有絮状物者，均表示不正常，不能用于输精。6.1.3 气味正常的精液略有腥味。凡有腐臭味或异味者，均表示不正常，不能用于输精。6.1.4 云雾状肉眼观察采到的新鲜精液，可以看到由于精子活动所引起的像云雾状似的翻腾滚动。精子的密度越 大、活力越强，其云雾状越明显。6.2显微镜检查6.2.1方法用玻棒沾取少量原精液在载玻片上用400倍600倍的生物显微镜观察，可以评定精子的密度和活 力指标。6.2.2活力指标以五级评定。100%的精子做直线前进运动者为一级；80%为二级 60%为三

9、级；40%为四级；20%以下 者为五级。三级以上者可用于输精。6.2.3密度指标以“密、中、稀”评定。“密”，精子数充满视野，精子间无空袭；“中”：精子之间有明显的空 隙，彼此之间的距离大约1个2个精子“稀”，只有少数精子，精子之间的空隙超过2个以上。在 3DB5134/T 40 2023视野中没有君到精子的，用“无”标记。用于输精的精液，其精子密度至少是“中”.7精液稀释7.1 精液稀释液的配制7.1.1 生理盐水稀释液用注射用生理盐水或经过过滤消毒的0.9%氯化钠溶液作为稀释液。按照h 6稀糅输精0.3 mL7.1.2 葡萄糖-卵黄稀释液于100mL蒸馆水中加葡萄糖3 g,柠檬酸钠1.4g

10、,溶解后过滤3次4次，蒸汽灭菌，冷却至室温,加新鲜鸡蛋的卵黄20疝，青霉素10万U,链霉素10万U,充分混匀。按照L 6稀释输精0.3mL。7.2 稀释倍数在进行高倍稀释时需分两步进行，先低倍稀释，数分钟后再作高倍稀释。精液在稀释前必须进行活 力和密度检查，然后确定稀释倍数。稀释后的精液，每毫升精液的有效精子数不得少于7亿个。7.3 精液稀释操作精液与稀释液混合时，二者的温度必须保持一致，以防止精子受温度的剧烈变化而死亡。稀释前将 精液与稀释液同放入3 0c左右的温水中水浴5min左右，温度相同时再进行稀释。用消毒过的带有刻度 的注射器将稀释液沿着精液瓶缓慢注入，然后用玻璃棒缓慢搅动混合均匀。

11、在进行高倍稀释时需分两步 进行，先低倍稀释，数分钟后再作高倍稀释。7.4 精液的保存和运输低温保存的液状精液，可用广口保温瓶运送。把装有精液的安瓶或细管放入广口保温瓶后，贴上标 签，注明公羊号、采精时间、精液量、稀释倍数及其等级等内容。运输时应严防剧烈震荡，并尽量缩短 运输时间。精液如果不立即使用，用纱布包裹后，放入4左右的冰箱中保存待用。精液在采得以后稀 释愈早，及时输精，受胎效果愈好。但美姑山羊精液保存的时间较短，如果要长期保存精液，应制成冷 冻颗粒精液或冷冻的细管精液。8母羊同期发情8.1 方法同期发情通常采用放置孕激素阴道栓(CIDR)+注射孕马血清促性腺激素(PMSG)法。8.2 放

12、置孕激素阴道栓放置阴道栓时，首先用0.2%新洁尔灭消毒剂喷洒母羊外阴部消毒。然后用止血钳夹住羊用棉栓外 管，在导管前端涂上适量凡士林，分开阴门，将导管插入阴门，一手固定导管，另一手持止血钳夹住棉 栓外管缓慢向前推送，使阴道栓留于阴道内，拉线露出阴门外3cm左右，把导管抽出。8.3 注射孕马血清促性腺激素用孕激素制剂处理母羊lid,拉住阴道栓外露拉线，缓慢用力撤出阴道栓再注射孕马血清促性腺 4DB5134/T 40 202 3激素400 IU,2 d3 d后被处理的大多数母羊发情，发情的当天和次日各输精一次.9母羊发情鉴定9.1 外部观察法发情母羊常表现兴奋不安鸣叫不止、食欲减退、不停摆尾、母羊

13、间相互爬跨，静立反应，外阴充血 红肿、柔软而松弛。9.2 阴道检查法利用开腔器进行阴道发情检查。如果发现母羊阴道粘膜充血发红，阴道有分泌物（发情初期粘液较 少而稀薄，中期粘液增多，后期变得粘稠）子宫颈松弛、充血，子宫颈口开张，即可判定为发情。10输精10.1 输精前的准备10.1.1 器材的准备输精前应准备玻璃输精器、开腹器、输精管等器材。所有可能在操作中用到的器材均要消毒灭菌，其方法参照“采精前的准备”中关于器械的灭菌消毒方法。10.1.2 输精人员的准备输精人员应穿工作服，剪短磨光手指甲，洗净擦干双手，用75%酒精消毒，再用生理盐水冲洗。10.1.3 母羊保定把发情母羊牵到输精架上保定，并

14、将其外阴部擦洗消毒。生产中可采取一人背对羊头骑于母羊背上,抬起母羊的两后肢，固定好母羊，以便输精。10.1.4 冷冻精液的准备对于冷冻精液，要在3 7C水浴锅中快速解冻3 0min,并在显微镜下检查其活力，冷冻精液解冻后精 子活力0.3以上才能用于输精。每次输精0.2 5mL,有效精子数不少于5000万。10.1.5 新鲜精液的准备对于鲜精，要求精子活力0.7以上才能用于输精，鲜精每次输入直线前进运动的精子在7500万个 以上，即原精液的输精量为0.05mL0.10mL,或者稀释后精液的输精量为0.2 mL以上。10.2 输精方法输精时间在母羊发情后12h2 4h,采取开腔器方法输精。输精前将

15、母羊外阴部用来苏儿溶液擦洗 消毒。输精人员将开腔器闭合，按母羊阴门的形状缓慢插入，然后转动90。，打开开腔器。将输精器 前端缓慢插入子宫颈口内0.5cmL 0cm,用拇指轻轻推动输精器的活塞，注入精液。如果是初配母羊,阴道狭窄，采取阴道输精，输精的剂量加大一倍。刚输精后的母羊应休息lOmin左右，不要立即驱赶或 放牧,防止精液倒流在第一次输精后，间隔8h12 h再输精一次.5DB513 4/T 40 202 310.3 做好母羊配种记录，定期检查受胎情况。输精后的母羊要进行登记，包括母羊号、公羊号、输精时间等，以便于在下一个情期来临时观察该 母羊是否返情，计算预产期，方便饲养管理e6DB513

16、4/T 40 2023附录A（资料性）美姑山羊人工授精站所需仪器、设备表A1美姑山羊人工授精站所需仪器,设备品 名规格数量品 名规格数量羊输精器套1冰箱1羊开腹器个1干燥箱台1假阴道支2广口保温瓶个2假阴道内胎把2玻棒支2集精杯瓶2量杯个2普通显微镜台1容量瓶个2载盖玻片套5瓷盘个3医用凡士林盒1液氮罐个1温度计支3烧杯个2电子天平个1消毒脱脂棉花包1消毒锅台1消毒脱脂纱布卷1恒温水浴锅台1柠檬酸三钠瓶2手术剪个1葡萄糖瓶2镣子把2青（链）霉素瓶2一次性医用手套包1生理盐水瓶575%酒精瓶22%碘酊瓶1孕马血清促性腺激素（PMSG）瓶（1000IU）20孕激素阴道栓（CIDR）包（50个）1注1,表中所涉及同期发情和人工授精相关的试剂、药品、耗材数以50只母羊需求计算.7