动物药成分分析.docx

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1、动物药成分分析名词解释1、 动物药物：以动物体、组织、器官、分泌物、衍生物、代谢物等为原料，提取有效成分，制成治疗疾病的药物。2、 药用动物：指身体全部或局部可以入药的动物。3、 有效成分：有明显生物活性，发挥药效作用的化学成分。4、 无效成分：无明显生物活性，不发挥药效作用的化学成分。5、 微透析技术MD：是一种利用膜透析原理，微量地对细胞液进展连续性采样的型采样和色谱样品制备技术。6、 超滤：利用压力活性膜，在外界推动力压力或离心力作用下截留水中胶体、颗粒和分子量较大的物质，而水和分子量较小的溶质颗粒透过膜。7、 生物碱：广义上，生物界除了生物体必需的含氮化合物，如多肽、蛋白质和B 族维生

2、素等外，其他全部的含氮有机化合物都可视为生物碱。8、 甙类苷类：水解后能生成糖和非糖化合物的物质的统称。9、 原生甙：原存在于机体内的甙。10、次生甙：含有两个以上糖的原生甙，经水解后失去一局部糖而得到的甙。11、皂甙：是一类特别甙类，它的水溶液振摇后能产生大量长久不消逝的肥皂样泡沫。12、萜类：自然界存在的一类具有C H 通式的碳氢化合物，及其含氧饱和程度不等的衍生物的总称。5 8n13、单萜：含 2 个异戊二烯单位的萜类。14、二倍半萜：是萜类家族中最最少的一员，含5 个异戊二烯单位的萜类。15、四萜：含 8 个异戊二烯单位的萜类，分子中存在一系列共轭双键发色团，故具有颜色。在动物机体内主

3、要指类胡萝卜素。16、挥发油：亦称精油，是一类具有挥发性、可随水蒸气蒸馏出来的油状液体的总称。绪论1、 动物药的特点（1） 疗效确实（2） 生理活性强（3） 应用面广1) 治疗神经系统疾病冷静止痛：蝎子、林蛙油雌性输卵管2) 治疗心血管疾病强心降压：麝香、蝉乳、鹿茸中等剂量3) 治疗血液及造血系统疾病补血止血：水蛭、五倍子、阿胶提高血红蛋白4) 治疗呼吸系统疾病止咳平喘化痰：紫河车、地龙、蛇胆、凤凰衣蛋壳中的卵膜、猪蹄甲5) 用于微生物感染疾病消炎：蝉蜕、蜈蚣6) 用于治疗肿瘤：斑蝥、蝎子、蟾酥、蛇毒（4） 潜力大（5） 毒副作用小正确使用的前提下（6） 药物来源及使用广泛2、 动物药的入药局

4、部（1） 全身入药者昆虫类、软体动物：水蛭、海马、地龙、斑蝥、全蝎（2） 器官入药者：熊胆、獭肝、海狗肾、紫河车（3） 组织入药者：鸡内金、刺猬皮、乌贼骨（4） 衍生物入药者：鹿茸、羚羊角、山甲皮（5） 分泌物入药者：麝香、蜂王浆、蟾酥、龙涎香、蛇毒（6） 排泄物入药者：五灵脂复齿鼯鼠粪便、白丁香麻雀、望月砂野兔、夜明砂蝙蝠（7） 病理产物入药者：牛黄、珍宝、僵蚕、虫草、马宝、狗宝（8） 加工品入药者：阿胶、鹿茸胶、龟板胶、鹿胎膏、血余炭3、 动物药材市场特点：需求增长，但资源紧缺，产缺乏需，供需缺口连年加大，尤其是一些濒危品种的产物已趋枯竭，很多贵重动物药材价格开头大幅度上涨。4、 我国动物

5、药争论的趋势和特点解决措施（1） 重视药用动物生态坏境和生物学特征的争论，扩大药用动物种群数量，提高动物药材的质量。 原地复壮、引种放养、变野生为家养。（2） 争论动物药代替品 同属动物、人工合成品、药材加工副产品、相像疗效药品代替正品（3） 利用现代生物技术手段扩大药源。（4） 乐观开放海洋动物药的争论。（5） 加强动物保护学问宣传，制定合理的狩猎、捕获政策。（6） 对药用动物产品的初加工单位或企业加强治理，改善初加工条件，加强药用产品的深、精加工。第一章 动物药成分提取分别的一般方法1、 生物材料的保存方法及丧失活性的缘由（1） 保存方法1) 冷冻保存，-40急冻后-20冷冻保存2) 枯燥

6、保存3) 冷冻枯燥保存真空冷冻枯燥机4) 有机溶剂浸泡保存（2） 丧失活性的缘由1) 组织细胞自溶作用，使目的分子失活2) 微生物的污染，使目的分子失活3) 空气中的氧化作用，使分子构造发生变化4) 使用的工具和容器与目的分子发生化学变化2、 试述提取动物药有效成分常用的方法一、传统提取方法一 溶剂提取法（1） 定义：依据动物药中各种成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大，对杂质溶解度小的溶剂，将有效成分从药材组织内溶解出来。水（2） 溶剂的分类亲水性有机溶剂乙醇、甲醇 有机溶剂中性有机溶剂乙酸乙酯亲脂性有机溶剂乙醚（3） 选择溶剂的要点1) 对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；2)

7、不能与中药成分起化学反响而影响有效成分药效；3) 沸点适中，易回收；4) 廉价易得、安全无毒。（4） 溶剂提取方法1) 浸渍法：溶剂多为水或稀醇。适用于有效成分遇热易破坏、挥发或粘质多的药材；浸出率差，提取液易发霉变质。2) 渗滤法：粉碎药材潮湿药材装渗滤筒加液，排气，浸泡24h收集滤液浸出率高，且溶剂可套用；溶剂消耗量大，费时，操作麻烦。3) 煎煮法：便利简洁，效率高；含挥发性成分或有效成分遇热易破坏中药不适用，粘液质较多的中药煎煮后较粘稠不易过滤。4) 回流提取法：削减溶剂消耗，提高浸出效率；受热易破坏成分不适用，消耗量大，操作麻烦。5) 连续回流提取法：受热易分解成分不适用。（5） 影响

8、因素：粉碎度、温度、离子强度、酸碱度、时间。二 水蒸气蒸馏法：适用于具有挥发性的，能随水蒸气蒸馏而不被破坏的，与水不发生反响的，且难溶或不溶于水的成分。三 升华法四 传统提取方法的主要缺点（1） 可供选择的提取溶剂种类较少；（2） 提取温度高，时间长；（3） 提取步骤多，流程长，生产效率低，产物损失大；（4） 传统提取多承受静态提取，存在平衡浓度限制；（5） 溶剂/原料用量比大。二、现代提取方法一 超声波提取法（1） 原理：超声波具有猛烈的振动和击碎作用，可以把物体打成极为细小的微粒，起到起到助溶的作用。（2） 优点：效率高，时间短，可避开高温高压对有效成分的破坏，操作简洁便利。（3） 缺点：

9、应对超声波频率、超声时间、提取溶媒等条件进展考察，以提高提取效率。二 超临界流体萃取法（1） 超临界流体：指在高于临界压力和临界温度时所形成的单一相态，既不是气体，也不是液体， 但兼有气体和液体的某些性质，即兼有气体的低粘度，液体的高密度以及介于气、液之间较高 的集中系数，流体的外表张力为 0 等特征。（2） 原理：利用流体在临界点四周某区域内与待分别混合物中的溶质具有特别相平衡行为和传递性 能，且对溶质的溶解力量随压力和温度的转变而在相当宽的范围内变动，利用这种 SCF 作溶剂， 可以从多种液态和固态混合物中萃取出待分别组分。（3） 超临界流体萃取仪组成：泵、萃取池、收集器。（4） 优点1)

10、 无有机溶剂残留，产品纯度高，操作简洁，节能；2) 与色谱、光谱等器直接联用；3) 提取成分范围广。三 微波关心提取法： 微波提取过程中，微波辐射导致细胞内的极性物质，产生大量热能，使细胞内温度快速上升，液态水气化产生压力将细胞膜冲破，形成微小的孔洞；进一步加热，导致细胞内部水分削减，细胞收缩，外表消灭裂纹。孔洞和裂纹的存在使细胞外溶剂简洁进入细胞内，溶解并释放出胞内产物。留意：微波功率和辐射时间对提取效率具有明显的影响。为了削减高温的影响，可分次进展微波辐射，冷却至室温后再次进展其次次微波提取。经过提取的物料，可用另一种提取剂， 在微波辐射下进展其次次提取从而取得其次种提取物。四 酶法：选用

11、适当的酶，通过酶反响较温顺的将药物组织分解，到达提取、纯化有效成分的目的。应用：提取分别有效成分；构造分析；活性成分确实定。五 裂开提取法：通过对材料在适当溶剂中充分裂开而到达提取的目的。3、 试述分别纯化动物药有效成分方法一、 系统溶剂分别法：有效成分未知时可承受。由亲脂性到亲水性，或由低极性到高极性的次序组成溶剂系统，依次提取药料粗粉中各种不同的成分。二、 两相溶剂萃取法：利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中安排系数的不同而到达分别的方法。 安排系数：指在肯定温度和压力条件下到达平衡时，物质在两种相互接触不相溶的溶剂中的浓度的比值。 安排系数=在 A 液中的浓度溶解度/在B 液中的溶解

12、度 成分简单的中药：承受极性由低至高的溶剂依次进展萃取成分。（1） 简洁萃取法1) 仪器：分液漏斗2) 缺点：易发生乳化现象，需屡次萃取。（2） 连续萃取法1) 仪器：连续萃取器2) 优点：简洁且可避开乳化，溶剂用量不多而萃取效率高。（3） 液滴逆流安排法仪器：液滴逆流安排仪三、 沉淀法（1） 铅盐法 脱铅方法：H2S 法；中性硫酸盐法不彻底；大孔吸附树脂法。（2） 有机溶剂沉淀：乙醇、丙酮。（3） 酸碱沉淀法四、 透析与超滤（1） 透析：一种分别纯化技术，利用半透膜原理，将大分子物质与小分子物质分别开。（2） 常用半透膜：硫酸纸膜、玻璃纸膜、大棉胶膜、动物性膜。（3） 微透析技术特点1) 时

13、间区分性2) 空间区分性3) 供给不含蛋白质等大分子物质的游离态小分子化合物4) 样品不经预处理直接用于推测5 微透析样品的分析方法在线分析1) 微透析-高效液相色谱在线分析：适用于检测离子强度高的样品。2) 微透析-高效毛细管电泳在线分析：适用于检测离子强度低的样品。五、 盐析法：在中药提取液中，参加无机盐至肯定浓度，或达饱和状态，可使某些成分在水中溶解度降低，从而与水溶性大的杂质分别。常作盐析的无机盐：氯化钠，硫酸钠，硫酸镁，硫酸氨。六、 分馏法：对于完全能够互溶的液体系统，可利用各成分沸点的不同而承受分馏法。七、 结晶法：是分别和精制固体成分的重要方法之一，指利用混合物中各成分在溶剂中溶

14、解度不同来到达分别的方法。（1） 前提：结晶法所用的样品必需是已经用其他方法提得比较纯的时候才能承受此法精制。（2） 对结晶溶剂的要求1) 欲结晶物质在较高温度时的溶解度比低温下大3 倍以上；2) 杂质与结晶物在溶剂中溶解度相差较大；3) 沸点在 30-150；4) 结晶物在沸点不溶解，与溶剂不发生化学反响；5) 无剧毒，能形成良好结晶。（3） 操作：加热溶解形成饱和溶液低温放置结晶，也可分步结晶、重结晶。八、 色谱法 应用：分别混合物、精制化合物、鉴定化合物九、 电泳法4、 试验室中常用的层析技术的种类及原理（1） 吸附层析：物质沿洗脱液的前进方向移动，经过反复的吸附、解吸附的过程，由于吸附

15、剂对该物质的吸附力量的不同，物质的移动速度消灭差异。 吸附柱层析用于分别 吸附薄层层析用于鉴定根本操作：薄层涂布；点样；开放上行；显层试剂显色定位（2） 凝胶层析：当样品流经固定相凝胶时，不同分子大小的各组分进入网孔受阻滞程度不同，以不同速度通过层析柱，从而分别。 凝胶种类：葡聚糖凝胶、琼脂凝胶、聚丙烯酰胺凝胶 应用：分别纯化物质、脱盐、分子量测定等。（3） 离子交换层析：利用离子交换剂对各种离子有不同亲和力，来分别混合物中各种离子。 固定相：离子交换剂 流淌相：具有肯定pH 值和肯定离子强度的电解溶液。（4） 络合色谱：利用被分别组分与络合剂或整合剂在色谱柱前或柱内形成整合物的稳定性不同或与

16、流淌相、固定相作用力不同，因而安排系数不同，使组分分别。 一般用于分别金属或金属离子（5） 亲和层析：以共价键将具有生物活性的配位体结合到不溶性固体支持物或基质上作固定相，利用蛋白质或大分子与配位体之间特异的亲和力进展分别。 主要用于蛋白质和各种生物活性物质的分别、纯化。5、 制备型薄层层析与一般薄层层析有何区分制备型薄层层析一般薄层层析样品浓度5%-10%较低薄层厚度0.5-1mm200-250m点样方式虚线或实线点状显层局部显层完全显层洗脱洗脱不洗脱6、 层析技术的分类（1） 按两相物理状态分类流淌相气相色谱色谱气-液色谱气-固色谱（2） 按固定相液分相类色谱液-液色谱液-固色谱柱色谱：固

17、定相装在色谱柱内色谱平板色谱薄层色谱纸色谱（3） 按分别过程物理化学原理分类1) 吸附色谱2) 安排色谱气-液安排色谱液-液安排色谱正相安排色谱固定相：极性大；流淌相：极性小 反相安排色谱3) 离子交换色谱正相离子对色谱固定相：含离子对试剂的水溶液反相离子对色谱固定相：与水不溶的有机溶剂载体：均为硅胶4) 离子对色谱凝胶过滤色谱流淌相：水或水溶液 凝胶渗透色谱流淌相：有机溶剂5) 凝胶色谱6) 络合色谱7) 亲和色谱7、 在薄层层析中，影响 Rf 值的因素有哪些（1） 温度（2） 薄层的厚度（3） 开放时间和开放距离（4） 层析箱中溶剂蒸汽的饱和度（5） 边缘效应8、 选取材料应留意哪几个方面

18、（1） 生物的品种与部位（2） 生物材料的来源（3） 动物的生长期（4） 动物养分状况（5） 季节（6） 环境9、 试验室中承受哪些方法裂开生物材料（1） 机械法：通过机械切力的作用使组织细胞裂开。常用仪器：高速组织捣碎机、匀浆器、研钵、粉碎机（2） 物理法：通过各种物理因素使组织细胞裂开。常用方法：渗透压差法、加压裂开法、反复冻融法、超声波裂开法、冷热交替法（3） 生物化学法：应用化学试剂转变细胞膜的通透性，破坏蛋白质和脂类的结合，到达裂开细胞的目的。常用方法：酶法外源酶法和自溶法；外表活性剂处理法；有机溶剂法其次章 蛋白质1、 在蛋白质的提取过程中，应掌握哪些因素提高蛋白质的提取率并防止变

19、形（1） 溶剂pH 值：抽提液pH 值应在偏离等电点的稳定范围内；（2） 溶剂离子强度和极性：盐浓度应掌握在0.02-0.5mol/L 范围内；3温度：宜掌握在 0-10；（4） 提取液体积：提取液和抽提物的比例要适当，一般以3-5 倍为宜；（5） 添加保护剂。2、 试述蛋白质的分别纯化方法一、 利用溶解度的不同1) 盐析法：用于盐析的中性盐通常有硫酸铵最正确、硫酸钠和硫酸镁等。2) 等电点沉淀法：在加酸或加碱调整 pH 值的过程中，要一边搅拌一边渐渐加进，以防止局部过酸或过碱。3) 有机溶剂沉淀法 缺点：易引起蛋白质变性。 要求：把全部的机溶剂预冷到-10，整个操作在低温下进展，并且沉淀析出

20、后要尽快分别。4) 聚乙二醇沉淀法优点：沉淀的条件温顺，不易引起蛋白质变性，而且沉淀较完全，应用范围广。二、 利用分子大小和外形的不同1) 透析和超滤2) 密度梯度离心：依据分子量和密度的大小不同进展分别的。常用的梯度介质有蔗糖、甘油、聚蔗糖。离心承受水平转头高速进展。3) 凝胶层析三、 利用电离性质的不同（1） 离子交换层析1) 洗脱原则：第一种是制作pH 梯度；其次种是转变缓冲液的离子强度2) 洗脱方式：阶梯洗脱；梯度洗脱（2） 聚焦层析：以等电点的差异和离子交换行为作为依据。 固定相：多缓冲交换剂 流淌相：多缓冲剂（3） 制备电泳四、 利用吸附力量的不同：吸附力强移得慢。五、 利用生物功

21、能的专一性3、 试述蛋白质的纯度鉴定方法（1） 电泳法 显微电泳 区带电泳应用广1) 琼脂和琼脂糖凝胶电泳：电泳速度快，区带整齐，区分率高，重复性好。2) 聚丙烯酰胶凝胶电泳 电泳：样品用量少，区分率高，可进展双向电泳。3) SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳SDS-：依据是蛋白质分子量的不同，用于判定分子量大小的均一性。4) 浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳：用于测定自然蛋白质的分子量。5) 印迹转移电泳：通过凝胶电泳将分别的蛋白质，再次经过电泳转移到固相载体外表的过程。6) 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦：用于测定蛋白质的等电点。7) 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳：第一和其次两向的电泳相互垂直。8) 毛细管电泳（2）

22、 免疫法：检测混合物中抗原或抗体的组分及含量，特异性、区分率高。1) 免疫集中：依据抗原和抗体在琼脂介质中集中，并产生沉流反响的一种方法。2) 免疫电泳：微量免疫电泳、火箭免疫电泳单向定量免疫电泳、穿插电泳双向、亲和免疫电泳。3) 酶联免疫吸附ELISA：间接法、双抗原夹心法、竞争法、双抗体夹心法4) 免疫印迹：斑点杂交、原位杂交、Westernblot（3） 分光光度法：蛋白质浓度mg/ml= FOD280D/d（4） 高效液相层析法：高效凝胶液相层析、高效离子交换液相层析、高效亲和液相层析、高效聚焦液相层析、反相高效液相层析（5） 超速离心法1、 生物碱第三章 生物碱（1） 性状：多数为无

23、色结晶形固体，少数为无定形粉末；多数具有苦味；液体状及个别固定具挥发性。（2） 通常左旋体生理活性强于右旋体。2、 生物碱的分类（1） 按碱性：强碱性生物碱、中等碱性生物碱、弱碱性生物碱、酸碱两性生物碱前三者可与酸形成生物碱盐，生物碱盐易溶于水，可溶于甲醇或乙醇。（2） 按溶解性：亲脂性生物碱、水溶性生物碱3、 生物碱单体的分别方法（1） 利用生物碱碱性的差异pH 梯度法（2） 利用生物碱或生物碱盐溶解度的差异 无机酸生物碱盐溶解度有机酸生物碱盐溶解度 含氧酸生物碱盐卤代酸生物碱盐 小分子有机酸生物碱盐大分子有机酸生物碱盐（3） 利用生物碱特别官能团的性质（4） 利用色谱法进展分别 吸附色谱法

24、脂溶性、离子交换色谱法水溶性 吸附剂：硅胶、氯化铝、纤维素、聚酰胺 流淌相：苯、氯仿、乙醚4、 水溶性生物碱的分别方法（1） 沉淀法（2） 有机溶剂萃取法（3） 离子交换树脂法1、 甙类的定义及分类第四章 甙类苷类（1） 按甙键原子：氧甙、硫甙、氮甙、碳甙（2） 按甙元的化学构造：氰甙，葸醌甙，黄酮甙，木脂素甙，醇甙，酚甙，酯氰甙，吲哚甙等（3） 按甙类在机体内的存在状况：原生甙、次生甙（4） 其他1) 依据糖的名称：葡萄糖甙、鼠李糖甙、木糖甙2) 依据连接单糖基的数目：单糖甙、双糖甙、叁糖甙3) 依据连接的糖链数目：单糖链甙、双糖链甙4) 依据甙类的来源：人参皂甙、海参皂甙、三七皂甙5) 依

25、据具有特别的理化性质或生理活性：皂甙类、强心甙类2、 皂甙的提取、分别与精制（1） 提取：醇提取-正丁醇萃取法、甲醇/乙醇提取-丙酮/乙醚沉淀法、水提取法（2） 分别与精制：分段沉淀法、铅盐沉淀法、胆甾醇沉淀法、氧化镁吸附法、色谱分别法3、 皂甙的生物活性：溶血和鱼毒、杀虫和驱虫、对卵子及精子的抑制、抗生、抗肿瘤、抗年轻、抗病毒作用。1、 多糖的构造与其生物活性的关系第五章 多糖（1） 一级构造：多糖的糖组成和糖苷键类型的影响，多糖中的官能团对其生物活性的影响。（2） 高级构造：多糖的特定空间构像是其产生生物学活性所必需的，对功能的影响比一级构造重要。2、 多糖的理化特性与其生物活性的关系（1

26、） 溶解度：多糖溶于水是多糖发挥生物活性的首要条件。提高溶解度的措施：降低分子质量、引入支链、对支链进展修饰改造官能团（2） 分子量：分子量大小是多糖具备生物活性的必要条件。（3） 粘度 降低粘度的措施：引入支链破坏次级键、降解主链使分子链减小（4） 电荷密度：电荷密度降低会使多糖的某些活性下降。3、 多糖的生物功能：降血脂、抗炎、抗凝血、抗病毒、抗肿瘤、抗年轻作用。4、 多糖的提取方法（1） 水溶液提取法溶剂：水、稀酸、稀碱方法：渍浸法、渗滤法、回流提取法（2） 方法：酶法、微波提取法、超声波提取法、超声波酶提取法5、 多糖的分别方法（1） 分步沉淀法（2） 季铵盐沉淀法（3） 特异性沉淀法

27、（4） 盐析法（5） 超滤法（6） 色谱法：凝胶层析、离子交换层析第六章 萜类及挥发油1、 斑蝥素的定性、定量分析方法（1） 提取分别：热水提取，氯仿萃取（2） 定性分析1) 镜检法(物理法)，看晶型：丙酮棱柱形、氯仿针形、乙醇糠片状2) 显色法(化学法) 与对二甲氨基苯甲醛的反响 ：红棕色或棕色 与间苯二酚的显色反响：溶液变为黄色（3） 定量分析2、 斑蝥素、角鲨烯、类胡萝卜素的生理活性及其抗癌作用机理一、 斑蝥素（1） 生理活性1) 抗癌2) 杀虫剂作用3) 抗病毒及抗真菌4) 对皮肤及粘膜作用（2） 抗癌作用机理1) 诱导肿瘤细胞凋亡2) 降低癌素激素水平3) 增加机体的免疫功能4) 刺

28、激骨髓细胞DNA 的合成5) 抑制癌细胞DNA 及蛋白质的合成6) 促进白细胞从骨髓释放入循环池二、 角鲨烯（1） 生理活性1) 抗癌2) 强壮3) 抗菌4) 对皮肤的作用5) 增加机体免疫力6) 降血脂及软化血管（2） 抗癌机理1) 增加机体免疫力2) 抑制肿瘤细胞的生长3) 抑制致癌物质亚硝胺的生成三、 类胡萝卜素（1） 生理活性1) 抗癌2) 抗氧化3) 是维生素A 原4) 增加机体的免疫技能5) 在动物生产中的应用（2） 抗癌机理1) 转移辐射能2) 增加机体的免疫力3) 致肿瘤细胞分裂4) 保护细胞免受光损害5) 增加细胞间的信息传递6) 刺激外周血白细胞释放细胞分裂素3、 挥发油的提取方法：溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、超临界流体萃取法、超声波-水蒸气蒸馏提取、压榨法、针刺法、吸取法、裂开法。4、 挥发油的分别纯化方法：分馏法、色谱分别法、化学分别法5、