临床检验基础第二章血液一般检验.pptx
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1、临床检验基础(第5版)第二章血液一般检验临床检验基础(第5版)通过本章学习,你将能够回答下列问题:1.红细胞计数的方法有哪些?如何评价这些方法?2.血细胞计数误差有哪些?如何减少这些误差?3.血红蛋白测定的方法有哪些?WHO 和ICSH 推荐的参考方法是什么?4.HiCN 测定法的检测原理是什么?如何评价血红蛋白测定方法?5.造成红细胞形态异常的人为原因有哪些?6.血细胞比容的测定方法有哪些?其原理分别是什么?各有何优缺点?7.什么是网织红细胞?ICSH 将网织红细胞分为哪几型?外周血液中以哪型网织红细胞为主?8.常见网织红细胞染色方法有几种?网织红细胞活体染色的原理是什么?9.如何评价出血时
2、间测定的临床应用价值?10.简述PT、APTT 测定的质量保证环节与临床意义。11.INR 是什么?有何临床价值?12.为什么PLT、PT 和APTT 能够作为手术前出血倾向的诊断指标?13.白细胞计数和白细胞分类计数的方法学评价是什么?14.白细胞计数时标本采集的质量保证有哪些?如何减少白细胞计数的固有误差?15.如何校正有核红细胞对白细胞计数的影响?16.显微镜法白细胞计数的质量考核与评价的方法有哪些?17.简述中性粒细胞的核象变化及其临床意义。18.如何评价血小板计数方法?19.什么是ABO 血型抗体?IgM 型血型抗体和IgG 型血型抗体的产生及生物学特性有何不同?20.常用的ABO
3、血型鉴定方法有哪几种?21.如何区分Rh阳性血型和Rh 阴性血型?常规鉴定Rh 血型的方法是什么?临床检验基础(第5版)血液一般检验是指血液检验项目中最基础和最常用的检验,主要包括手工法或仪器法血细胞计数及相关参数测定、血细胞形态学检查、止血凝血筛检试验、血型鉴定与交叉配血等。由于血液一般检验标本采集容易、检测便捷,目前仍然是筛检疾病的首要项目。临床检验基础(第5版)第一节红细胞检查红细胞是血液中数量最多的有形成分,其主要功能是作为携氧或二氧化碳的呼吸载体和维持酸碱平衡等。可通过检测红细胞参数和形态变化对某些疾病进行诊断或鉴别诊断。临床检验基础(第5版)一、红细胞计数红细胞计数(RBC)与血红
4、蛋白和血细胞比容结合,常作为诊断贫血、真性红细胞增多症及红细胞增多的主要指标之一。【检测原理】红细胞计数方法有显微镜法和血液分析仪法。显微镜法的检测原理:采用等渗稀释液将血液标本稀释一定倍数(200倍)后,充入改良牛鲍血细胞计数板中,在显微镜下计数一定区域(体积)内的红细胞数量,经换算求出每升血液中红细胞数量。临床检验基础(第5版)【方法学评价】红细胞计数的方法学评价见表2-1。常用红细胞计数稀释液组成与作用见表2-2。表 2-1 红 细 胞 计 数 的 方 法 学 评 价优点缺点方法传统方法,设备简单,成本低。费时费力,精密度低可用于血液分析仪异常检查结显微镜法果的复查操作便捷,易于标准化,
5、精密 成本高;环境条件要血液分析仪法求较高度高。适用于健康人群普查,大批量标本筛检表2-2常用红细胞计数稀释液组成与作用组成稀释液Hayem液作用NaCl、NaSO和HgCl2防腐。但在高球蛋白血症时,易造调节渗透压、增加红细胞悬浮性和成蛋白质沉淀而使红细胞凝集NaCl维持等渗,枸橼酸钠抗凝,甲醛固定和防腐。配制简单,稀释数小时后红细胞形状不变枸橼酸钠甲醛盐水溶液NaCl、枸橼酸钠和甲醛生理盐水1%甲醛生理盐水等渗,急诊时应用NaClNaCl和甲醛等渗、固定和防腐。急诊时应用临床检验基础(第5版)临床检验基础(第5版)【质量保证】血细胞计数质量保证的关键是控制计数误差。血细胞计数误差可来源于技
6、术误差、仪器误差和分布误差,可通过减小误差进行红细胞计数的质量控制(表2-3)。表 2-3 血 细 胞 计 数 误 差 的 种 类 及 其 减 小 方 式误差种类技术误差原 因误差减小方法规范操作、正确使用器材、提高操作技能采血部位不当、稀释倍数不准、充液不当、稀释的血液混合不均、血液凝固、器材处理及使用不当和细胞识别错误等器材(计数板、盖玻片、吸管等)校正各种器材仪器误差分布误差不准确、不精密等扩大细胞计数范围和(或)数量血细胞在计数室内分布不均匀等临床检验基础(第5版)1.技术误差 由于操作不规范和技术不熟练所造成的误差称为技术误差。血细胞计数常见的技术误差与原因见表2-4。表 2-4 血
7、 细 胞 计 数 常 见 的 技 术 误 差 与 原 因技术误差原因采血部位不当采血部位皮肤冻疮、发绀、水肿、感染等,使标本失去代表性稀释液或(和)标本量不准确。稀释倍数不准确吸管内有气泡。未擦去吸管外多余血液。血液加入稀释液后,吸管带出部分稀释血液。稀释液放置时间过长,挥发浓缩血液凝固充液不当过分挤压采血部位(组织液过多)、采血动作缓慢等造成血液凝固稀释的血液未混匀、充液过多或过少、充液不连续、计数室内有气泡、充液后盖玻片移动、操作台不平等均可造成细胞分布不匀稀释的血液混合不均 充液前振荡不充分,但过分振荡产生过多的气泡,也可造成混合不均当白细胞数量100109/L时,可对红细胞计数结果产生
8、影响冷凝集素和球蛋白增高可造成红细胞聚集,影响计数结果白细胞增多冷凝集素和球蛋白临床检验基础(第5版)2.仪器误差 由于仪器不精确所造成的误差。3.计数域误差 即使是技术熟练者,使用同一稀释血液多次充液(充计数室)计数,其结果也存在一定的差异,这种由于血细胞每次在计数室内的分布不完全相同所造成的误差,称为计数域误差或分布误差。临床检验基础(第5版)【参考区间】成年:男性(4.05.5)1012/L,女性(3.55.0)1012/L。新生儿(6.07.0)1012/L。医学决定水平:高于6.81012/L,应采取相应治疗措施;低于3.51012/L可诊断贫血;低于1.51012/L应考虑输血。临
9、床检验基础(第5版)【临床意义】1.生理性变化红细胞数量受到许多生理因素影响,但与相同年龄、性别人群的参考区间相比,一般在20%以内。红细胞生理性变化与临床意义见表2-5。临床检验基础(第 5 版)表 2-5 红 细 胞 生 理 性 变 化 与 临 床 意 义临床意义变化增多 缺氧,如新生儿(增高35%)、高山居民(增高14%)、登山运动员、剧烈运动和体力劳动等雄激素增高,如成年男性高于女性肾上腺皮质激素增多,如情绪波动(感情冲动、兴奋、恐惧等)长期重度吸烟静脉压迫时间2min(增10%)毛细血管血比静脉血测定结果增高(增高10%15%)日内差异,如同一天内上午7时的红细胞数量最高药物影响,如
10、应用肾上腺素、糖皮质激素药物等减低 主要见于生理性贫血生长发育过快,导致造血原料相对不足,如6个月2岁婴幼儿造血功能减退,如老年人血容量增加,如妊娠中晚期血浆量明显增多,红细胞被稀释而减低(减低达16%)长期饮酒(减低约5%)临床检验基础(第5版)2.病理性变化(1)病理性增多(表2-5-1)。表 2-5-1 红 细 胞 病 理 性 增 多 的 临 床 意 义类型临床意义相对性增多血容量减少使红细胞相对增多,如呕吐、高热、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤等包括继发性和原发性增多绝对性增多继发性增多主要见于组织缺氧、EPO代偿性增高,如严重的慢性心肺疾病、发绀型先天性心脏病、异常血红蛋白病等EPO非
11、代偿性增高,也可引起继发性红细胞增多,如肾癌、肝癌、子宫肌瘤、卵巢癌、原发性增多肾胚胎瘤、肾积水、多囊肾和肾移植术后等如真性红细胞增多症临床检验基础(第5版)(2)病理性减少:按病因不同可将贫血分为3大类。此外,药物也可引起贫血(表2-6-1)。1)红细胞生成减少:骨髓功能衰竭的再生障碍性贫血、急性造血功能停滞等。造血物质缺乏或利用障碍,如肾性贫血、缺铁性贫血(铁缺乏)、铁粒幼细胞贫血(铁利用障碍)、巨幼细胞贫血(叶酸、维生素B 缺乏性DNA 合成障碍)等。2)红细胞破坏过多:红细胞破坏过多的原因与临床意义见表2-6。3)红细胞丢失(失血):如急性、慢性失血性贫血。临床检验基础(第5版)表 2
12、-6 红 细 胞 破 坏 过 多 的 原 因 与 临 床 意 义原因临床意义红细胞内在缺陷膜缺陷酶缺陷如遗传性球形、椭圆形、口形、棘形红细胞增多症如遗传性红细胞G-6-PD缺乏症、遗传性红细胞丙酮酸激酶缺乏症等珠蛋白生成障碍性贫血、镰状细胞贫血,血红蛋白C、血红蛋白异常D、E(H b C,D,E)病(珠 蛋 白 合 成 减 少)不稳定Hb所致溶血性贫血(珠蛋白结构异常)、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(红细胞对补体过敏)红细胞外在异常如新生儿溶血病、血型不合输血后溶血病、药物性免疫性免疫反应引起的贫血溶血性贫血如微血管病性溶血性贫血、行军性血红蛋白尿、烧伤所致机械性损伤溶血性贫血疟疾和多种细菌所致溶
13、血性贫血、脾功能亢进所致溶血性贫血疾病所致溶血表2-6-1引起贫血的药物与机制药物机制抑制骨髓如阿司匹林、链霉素、消炎痛、洋地黄、苯妥英钠等引起维生素B,、叶酸吸收障碍如口服避孕药、雌激素、降糖灵、新霉素、异烟肼等引起铁吸收障碍引起溶血如皮质类固醇等如头孢类、氨基糖苷类抗生素、磺胺药、抗过敏药、维生素A/K、奎尼丁类、水杨酸类、呋塞米、异烟肼、利福平、驱蛔灵、马利兰等临床检验基础(第5版)临床检验基础(第5版)二、血红蛋白测定血红蛋白是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质,是红细胞内的运输蛋白。每个Hb分子含有4条珠蛋白肽链,每条肽链结合1个亚铁血红素,形成具有四级空
14、间结构的四聚体,以利于结合O 和CO。临床检验基础(第5版)【检测原理】HiCN 法检测原理:血红蛋白(SHb除外)中的亚铁离子(Fe+)被高铁氰化钾氧化为高铁离子(Fe3+),血红蛋白转化成高铁血红蛋白(Hi)。Hi 与氰化钾(KCN)中的氰离子反应生成HiCN。HiCN 最大吸收波峰为540nm,波谷为504nm。在特定条件下,HiCN 毫摩尔消光系数为44 L/(mmolcm)。HiCN在540nm处的吸光度与浓度成正比,根据测得吸光度可求得血红蛋白浓度。临床检验基础(第5版)【方法学评价】血红蛋白测定方法大致分为4类(表2-7)。1 9 6 6 年,ICSH 推 荐 HiCN 测定法作
15、为Hb 测定的标准方法。1978年,IFCC和IAP 在联合发表的国际性文件中重申了HiCN法。临床检验基础(第5版)表 2-7 血 红 蛋 白 测 定 方 法 及 基 本 原 理测定方法全血铁法测定原理Hb分子组成比重法、折射仪法血气分析法血液物理特性Hb与O,可逆性结合的特性比色法(临床常用)Hb衍生物光谱特点临床检验基础(第5版)HiCN测定法是WHO 和ICSH 推荐的参考方法,由于HiCN 试剂含有剧毒的氰化钾,各国均相继研发出不含氰化钾的血红蛋白测定方法,有的测定法已用于血液分析仪,但其标准应溯源到HiCN 量值。血红蛋白测定的方法学评价见表2-8。HiCN转化液的作用与评价见表2
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