组织胚胎学绪论-PPT课件.ppt

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1、欢迎同学们参加欢迎同学们参加组织学与胚胎学的学习组织学与胚胎学的学习同学们好！同学们好！同学们好！同学们好！3/29/20241医学课件 绪绪 论论histology and embryology河北医大组胚教研室：河北医大组胚教研室：李陈莉李陈莉3/29/20242医学课件一、组织学的研究内容一、组织学的研究内容组织学组织学（HistologyHistologyHistologyHistology）定义：定义：定义：定义：是研究正常机体的细微结构及与其是研究正常机体的细微结构及与其机能的关系的学科，包括细胞、组织和器机能的关系的学科，包括细胞、组织和器官系统官系统3 3部分。部分。3/29/

2、20243医学课件研究内容：包括细胞、组织、器官系统细细细细胞胞胞胞是是人人体体形形态态结结构构的的基基本本单单位位，是是一一切切生生物物体体新新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态学基础。陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态学基础。特点：特点：特点：特点：形形形形态态态态各各各各异异异异、大大大大小小小小不不不不等等等等：人人体体具具有有许许多多形形态态各各异异、大大小小不不同同的的细细胞胞，参参与与机机体体的的各各种种机机能能活活动动。各各种种细细胞胞在在机机体体内内相相互互调调节节、相相互互协协同同，以以维维持持级级机机体体的的生命活动。生命活动。3/29/20244医学课件组组 织织(tiss

3、ue)组成：组成：组成：组成：由一些形态相似、功能相近的由一些形态相似、功能相近的由一些形态相似、功能相近的由一些形态相似、功能相近的细胞细胞细胞细胞 和和和和细胞外基质细胞外基质细胞外基质细胞外基质所组成。所组成。所组成。所组成。分类：分类：分类：分类：上皮组织上皮组织上皮组织上皮组织 结缔组织结缔组织结缔组织结缔组织 肌组织肌组织肌组织肌组织 神经组织。神经组织。神经组织。神经组织。3/29/20245医学课件基基本本组组织织上皮组织上皮组织结缔组织结缔组织肌组织肌组织神经组织神经组织3/29/20246医学课件器官和系统器官和系统(organ and system)器官器官：由：由：由：

4、由4 4 4 4大基本组织有机地组合大基本组织有机地组合大基本组织有机地组合大基本组织有机地组合形成器官。形成器官。系统系统：多个器官协调配合完成一定的生理功能多个器官协调配合完成一定的生理功能形成系统。如：形成系统。如：口腔、食道、胃、肠口腔、食道、胃、肠口腔、食道、胃、肠口腔、食道、胃、肠均由不同均由不同的组织发育、分化和结合而成，具有不同的形的组织发育、分化和结合而成，具有不同的形态结构特点，但却执行着共同的功能消化食态结构特点，但却执行着共同的功能消化食物、吸收营养、排出糟粕物、吸收营养、排出糟粕。3/29/20247医学课件 胚胎学胚胎学(embryology)定义定义：是研究人体发

5、生和生长规律的学科。是研究人体发生和生长规律的学科。是研究人体发生和生长规律的学科。是研究人体发生和生长规律的学科。研研究究内内容容：包包括括生生殖殖细细胞胞发发生生、受受精精、胚胚胎胎发发育育、胚胚胎胎与与母母体体关关系系、先先天天性性畸畸形等形等。3/29/20248医学课件在医学中的地位在医学中的地位组组织织学学与与胚胚胎胎学学是是一一门门医医学学基基础础学学科科，与与基基础础各各个个学学科科和和临临床床各各科科都都有有一一定定联联系系。尤尤其其与与解解剖剖学学、病病理理学学、生生理理学学、生生物物化化学学、免免疫疫学学均均有有密密切切的的联系。联系。胚胚胎胎学学为为妇妇产产科科学学、男

6、男性性学学、生生殖殖工工程程学学、儿儿科科学学等等临临床床学学科科提提供供必必要要的的基基础础知知识识，也也是是计计划划生生育与优生学赖以发展的学科之一。育与优生学赖以发展的学科之一。3/29/20249医学课件二、组织学与胚胎学的研究方法二、组织学与胚胎学的研究方法（一）常用显微镜（一）常用显微镜（一）常用显微镜（一）常用显微镜光学显微镜光学显微镜光学显微镜光学显微镜(light microscope,LM)(light microscope,LM)(light microscope,LM)(light microscope,LM)：光源为：光源为：光源为：光源为普通光线普通光线普通光线普通

7、光线荧光显微镜（荧光显微镜（荧光显微镜（荧光显微镜（fluorescence microscope)fluorescence microscope)fluorescence microscope)fluorescence microscope)光源为光源为光源为光源为紫外光或蓝紫光紫外光或蓝紫光紫外光或蓝紫光紫外光或蓝紫光激激激激光光光光共共共共聚聚聚聚焦焦焦焦扫扫扫扫描描描描显显显显微微微微镜镜镜镜(confocalconfocalconfocalconfocal scanning scanning scanning scanning microscopemicroscopemicrosco

8、pemicroscope）光光光光源源源源为为为为激光激光激光激光电电电电子子子子显显显显微微微微镜镜镜镜(electron(electron(electron(electron microscope,EMmicroscope,EMmicroscope,EMmicroscope,EM)：光光光光源源源源为为为为电电电电子子子子束束束束，电电电电磁磁磁磁场场场场作为透镜。作为透镜。作为透镜。作为透镜。电子显微镜电子显微镜电子显微镜电子显微镜 透射电子显微镜透射电子显微镜透射电子显微镜透射电子显微镜TEMTEMTEMTEM 扫描电子显微镜扫描电子显微镜扫描电子显微镜扫描电子显微镜SEMSEMSEM

9、SEM3/29/202410医学课件光学显微镜基本结构光学显微镜基本结构光学显微镜基本结构光学显微镜基本结构：1.1.照明灯照明灯照明灯照明灯(Lamp)(Lamp)2.2.聚光器聚光器聚光器聚光器(Condenser)(Condenser)3.3.载物台和切片夹载物台和切片夹载物台和切片夹载物台和切片夹(Mechanical stage and(Mechanical stage and specimen retainer)specimen retainer)4.4.推进器推进器推进器推进器(Mechanical(Mechanical stage adjustment knob)stage a

10、djustment knob)5.5.物镜物镜物镜物镜(Objectives)(Objectives)6.6.粗细螺旋粗细螺旋粗细螺旋粗细螺旋(Course and(Course and fine focus knob)fine focus knob)7.7.目镜目镜目镜目镜(Oculars)(Oculars)8.8.照相机等接口照相机等接口照相机等接口照相机等接口(Connection to camera,(Connection to camera,etc.)etc.)3/29/202411医学课件是一种高光敏度、高分辩率的新型生物学仪器。主要由激光光源、共聚焦成像扫描系统、光学系统和微机图

11、像分析系统四部分组成。可以检测、识别组织或细胞内微细结构及其变化，细胞的受体移动，膜电位变化，酶活性以及物质转运，并以激光对细胞及染色体进行切割、分离、筛选等。(二二)激光共焦扫描显微镜激光共焦扫描显微镜(confocalconfocal laser scanning microscope)laser scanning microscope)3/29/202412医学课件激光共聚焦扫描显微镜3/29/202413医学课件透射电子显微镜透射电子显微镜(transmission electron microscope(transmission electron microscope)TEMTEM3

12、/29/202414医学课件透射电镜照片扫描电子显微镜扫描电子显微镜（scanning electron microscopescanning electron microscope）SEMSEM3/29/202416医学课件3/29/202417医学课件3/29/202418医学课件普通组织标本制备技术普通组织标本制备技术（石蜡切片）石蜡切片）标本的制作标本的制作标本的制作标本的制作组织学的标本制作比较复杂，基本包括以下几个步骤：取取材材、固固定定、脱脱水、包埋、切片、染色水、包埋、切片、染色等。(二二)常用标本的制备技术常用标本的制备技术3/29/202419医学课件取材、固定：取材、固定

13、：为了尽可能使所获材料的形态结构接近活体状为了尽可能使所获材料的形态结构接近活体状态，故取材要迅速、准确，得到材料后应及时态，故取材要迅速、准确，得到材料后应及时用固定液固定用固定液固定(fixation)(fixation)。常用固定液为甲醛、乙醇等，它们可以使蛋白常用固定液为甲醛、乙醇等，它们可以使蛋白质迅速凝固，防止其分解和变性。质迅速凝固，防止其分解和变性。脱水、包埋、切片脱水、包埋、切片：为为使使组组织织与与包包埋埋剂剂相相融融合合，所所获获得得材材料料需需经经乙乙醇或丙酮脱水；醇或丙酮脱水；为为便便于于将将材材料料切切成成薄薄片片，需需将将其其包包埋埋在在石石蜡蜡或或火火棉棉胶胶内

14、内，然然后后再再用用切切片片机机将将其其切切成成厚厚约约5 510m10m的的薄片。薄片。3/29/202420医学课件3/29/202421医学课件 染色染色染色染色：切片需经染色后方可在显微镜下观察。切片需经染色后方可在显微镜下观察。染色与封片染色与封片：染色的 目的是使组织内不同的结构染上不同的颜色，以增加结构间的反差。染色后在载玻片上滴加树胶，盖上盖玻片，密封保存。3/29/202422医学课件苏木精苏木精、伊红染色伊红染色常规染色常规染色苏木精(hematoxylin)、伊红(eosin)染色（简称HEHE染色染色）技术苏木精苏木精：是蓝色的碱性染料，可将细胞核和是蓝色的碱性染料，可

15、将细胞核和细胞内的某些酸性物质染成蓝紫色；细胞内的某些酸性物质染成蓝紫色；伊红伊红：是红色的酸性染料，可将细胞质染成粉红色。3/29/202423医学课件嗜酸性嗜酸性(acidophiliaacidophilia):):与酸性染料亲与酸性染料亲和力强的性质；和力强的性质；嗜碱性嗜碱性(basophiliabasophilia):):与碱性染料亲和与碱性染料亲和力强的性质力强的性质 ；嗜中性嗜中性(neutrophilianeutrophilia):):对两种染料对两种染料亲和力都不强。亲和力都不强。3/29/202424医学课件HE染色标本嗜碱性嗜碱性嗜酸性嗜酸性甲苯胺蓝染色技术甲苯胺蓝染色技

16、术是蓝色的碱性染料。是蓝色的碱性染料。将细胞内、外的某些物质染成紫红色，将细胞内、外的某些物质染成紫红色，这种染色现象称这种染色现象称异染性异染性（metachromasiametachromasiametachromasiametachromasia)。3/29/202426医学课件肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料一种蓝色染料)染成紫红色染成紫红色3/29/202427医学课件硝酸银、氯化金染色技术硝酸银硝酸银硝酸银硝酸银、氯化金氯化金氯化金氯化金颗粒可附着在细胞结构的表面颗粒可附着在细胞结构的表面而呈棕黑色或棕黄色，常用于显示神经组织。而呈棕黑色或棕黄色，常用

17、于显示神经组织。亲银性亲银性亲银性亲银性(argentaffinargentaffin)：银染中，有些组织结银染中，有些组织结构可直接使硝酸银构可直接使硝酸银还原还原而显色而显色。嗜银性嗜银性嗜银性嗜银性(argyrophiliaargyrophilia)：有些组织结构不能直有些组织结构不能直接使硝酸银还原，必须加入接使硝酸银还原，必须加入还原剂还原剂方能显色。方能显色。3/29/202428医学课件银染标本嗜银细胞嗜银细胞冷冻切片技术冷冻切片技术(frozen section method)(frozen section method)目的目的目的目的：避免细胞、组织内某些物质被固定液所破坏

18、，：避免细胞、组织内某些物质被固定液所破坏，同时使组织变硬，快速得到切片。同时使组织变硬，快速得到切片。方法：方法：方法：方法：将新鲜组织投入液氮将新鲜组织投入液氮(-196)(-196)或固态二氧化或固态二氧化碳（干冰，碳（干冰，-70-70）内快速冻结，恒冷箱切片机）内快速冻结，恒冷箱切片机(cryostat)(cryostat)制成冷冻切片制成冷冻切片。优点优点优点优点：制片迅速，细胞内酶活性和脂类保存较好，：制片迅速，细胞内酶活性和脂类保存较好，常用于酶组织化学染色、免疫组织化学染色。常用于酶组织化学染色、免疫组织化学染色。缺点缺点缺点缺点：光镜下质量较差。：光镜下质量较差。3/29/

19、202430医学课件冷冻切片箱其他技术其他技术涂片涂片：血细胞、分离细胞或脱落细胞等可直接涂在玻片上；铺片铺片：疏松结缔组织可撕成薄片铺在玻片上；磨片磨片：牙和骨等坚硬组织可磨成薄片；以上标本再经固定染色后显微镜下观察。3/29/202432医学课件（三）电子显微镜技术（三）电子显微镜技术根根据据分分辨辨率率、放放大大倍倍数数以以及及功功能能等等不不同同可可分为两种：分为两种：透射电子显微镜透射电子显微镜，又称，又称透射电镜透射电镜或电镜或电镜；扫描电子显微镜扫描电子显微镜，又称，又称扫描电镜扫描电镜。3/29/202433医学课件透射电子显微镜技术透射电子显微镜技术 光源：电子束。光源：电子

20、束。光源：电子束。光源：电子束。透镜：电磁透镜（线圈）。透镜：电磁透镜（线圈）。透镜：电磁透镜（线圈）。透镜：电磁透镜（线圈）。固定液：戍二醛、锇酸。固定液：戍二醛、锇酸。固定液：戍二醛、锇酸。固定液：戍二醛、锇酸。染色：电子染色，醋酸染色：电子染色，醋酸染色：电子染色，醋酸染色：电子染色，醋酸 铀或柠檬酸铅等重金属盐。铀或柠檬酸铅等重金属盐。铀或柠檬酸铅等重金属盐。铀或柠檬酸铅等重金属盐。切片：切片：切片：切片：5050505080nm80nm80nm80nm的超薄切片。的超薄切片。的超薄切片。的超薄切片。原理：电子束通过电磁透镜打到样品上，产生透射电子，原理：电子束通过电磁透镜打到样品上，

21、产生透射电子，原理：电子束通过电磁透镜打到样品上，产生透射电子，原理：电子束通过电磁透镜打到样品上，产生透射电子，透射电子打到荧光屏上，透射电子打到荧光屏上，透射电子打到荧光屏上，透射电子打到荧光屏上，产生黑白像。产生黑白像。产生黑白像。产生黑白像。3/29/202434医学课件扫描电子显微镜技术扫描电子显微镜技术扫描电子显微镜技术要观察的组织表面扫描电子显微镜技术要观察的组织表面形貌，不需制成切片。形貌，不需制成切片。固定后的标本，在其表面喷镀金，在荧固定后的标本，在其表面喷镀金，在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构，如细胞表面的突起、微绒毛、纤结构，

22、如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。毛等。3/29/202435医学课件（三）组织化学与细胞化学（三）组织化学与细胞化学（histochemistry cytochemistry)是利用化学试剂与组织细胞内的某些物质呈现是利用化学试剂与组织细胞内的某些物质呈现是利用化学试剂与组织细胞内的某些物质呈现是利用化学试剂与组织细胞内的某些物质呈现化学反应，反应终产物在组织原位形成有色化学反应，反应终产物在组织原位形成有色化学反应，反应终产物在组织原位形成有色化学反应，反应终产物在组织原位形成有色沉淀物或重金属盐沉淀，通过显微镜进行观沉淀物或重金属盐沉淀，通过显微镜进行观沉淀物或重金属盐沉淀，通过显微镜进

23、行观沉淀物或重金属盐沉淀，通过显微镜进行观察。察。察。察。间接观察组织细胞内的化学成分进行定间接观察组织细胞内的化学成分进行定位、定性和定量研究位、定性和定量研究。例如过碘酸希夫反应，例如过碘酸希夫反应，例如过碘酸希夫反应，例如过碘酸希夫反应，简称为简称为简称为简称为 PASPASPASPAS反应反应反应反应(period acid Schiff(period acid Schiff(period acid Schiff(period acid Schiff reaction)reaction)reaction)reaction)该方法该方法该方法该方法是显示细胞内糖原或多糖的是显示细胞内糖原

24、或多糖的是显示细胞内糖原或多糖的是显示细胞内糖原或多糖的一种方法。如用一种方法。如用一种方法。如用一种方法。如用PASPASPASPAS反应显示肝细胞内的糖原。反应显示肝细胞内的糖原。反应显示肝细胞内的糖原。反应显示肝细胞内的糖原。3/29/202436医学课件3/29/202437医学课件（四）免疫组织化学或免疫细胞化（四）免疫组织化学或免疫细胞化学学（immunohistochemistryimmunohistochemistrycytochemistry)cytochemistry)利用抗原、抗体特异性结合的原理，检测组织和细胞利用抗原、抗体特异性结合的原理，检测组织和细胞利用抗原、抗体

25、特异性结合的原理，检测组织和细胞利用抗原、抗体特异性结合的原理，检测组织和细胞内多肽和蛋白质的分布。内多肽和蛋白质的分布。内多肽和蛋白质的分布。内多肽和蛋白质的分布。该方法先将蛋白质或多肽作为抗原，注入某种动物体该方法先将蛋白质或多肽作为抗原，注入某种动物体该方法先将蛋白质或多肽作为抗原，注入某种动物体该方法先将蛋白质或多肽作为抗原，注入某种动物体内，使其体内产生与所注入抗原相应的抗体；而后自内，使其体内产生与所注入抗原相应的抗体；而后自内，使其体内产生与所注入抗原相应的抗体；而后自内，使其体内产生与所注入抗原相应的抗体；而后自其血清中提取该抗体，并以荧光染料或铁蛋白或辣根其血清中提取该抗体，

26、并以荧光染料或铁蛋白或辣根其血清中提取该抗体，并以荧光染料或铁蛋白或辣根其血清中提取该抗体，并以荧光染料或铁蛋白或辣根过氧化物酶等标记；显色的地方就是抗原所在。过氧化物酶等标记；显色的地方就是抗原所在。过氧化物酶等标记；显色的地方就是抗原所在。过氧化物酶等标记；显色的地方就是抗原所在。优点：特异性强、灵敏度高。优点：特异性强、灵敏度高。优点：特异性强、灵敏度高。优点：特异性强、灵敏度高。3/29/202438医学课件3/29/202439医学课件（五）原位杂交技术（五）原位杂交技术即核酸（即核酸（DNADNA、RNARNA）的分子杂交组织化学技术，的分子杂交组织化学技术，是在转录水平检测基因的

27、活性（是在转录水平检测基因的活性（mRNA)mRNA)和基因和基因(DNA(DNA片断）的有无。片断）的有无。原理：原理：用带有标记物的已知碱基顺序的用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针核酸探针，与细，与细胞内待测的核酸按碱基配对的原则，进行特异性胞内待测的核酸按碱基配对的原则，进行特异性原位结合，通过对标记物的显示和检测而获得待原位结合，通过对标记物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对含量。测核酸的有无及相对含量。3/29/202440医学课件（六）细胞或组织培养技术（六）细胞或组织培养技术 (cell or tissue culture)(cell or tissue culture)将

28、将人人体体或或动动物物的的活活细细胞胞、活活组组织织在在体体外外培培养养，称称细胞细胞细胞细胞或或组织培养组织培养组织培养组织培养(cell or tissue culture)(cell or tissue culture)。细细胞胞在在体体外外生生存存，必必需需具具备备适适宜宜的的条条件件，包包括括营营养、养、O O2 2和和COCO2 2比例、渗透压、比例、渗透压、pHpH值、温度和湿度。值、温度和湿度。体体外外培培养养细细胞胞，可可人人为为的的给给以以各各种种不不同同条条件件，研研究究它它们们对对细细胞胞的的分分裂裂、分分化化、结结构构和和功功能能等等的的影影响响，并并可可用用显显微微摄摄影影等等记记录录细细胞胞的的生生长长过过程程和和动动态变化。态变化。3/29/202441医学课件（七）干细胞和组织工程（七）干细胞和组织工程干细胞：是指未分化的、具有增殖和自我更新能力，以及多向分化的潜能的细胞。组织工程：是利用细胞和组织培养技术，在体外模拟构建机体组织或器官的技术。目的是为受损组织或器官提供移植代替物。（八）图像分析术3/29/202442医学课件三、学习方法三、学习方法2.2.形态与机能的结合形态与机能的结合3.3.断面和立体的关系断面和立体的关系4.4.动态变化的概念动态变化的概念1.1.理论和实验密切联系理论和实验密切联系3/29/202443医学课件