消毒剂验证方案和验证报告.docx

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1、范例8消毒剂验证消毒剂验证方案和验证报告公司手消毒使用含0.1%的笨扎澳镂和75%的酒精；医用手套及接触产品的器械使用75%酒精。消毒剂消毒效果的验证方法如下：1采样时间：在消毒后立即采样。2采样方法：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指瑞往返涂擦2 次（一只手涂擦面积约30cm2）,并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入 10mL含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。3检测方法：3 . 1细菌总数检测：将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，用无菌吸份吸取1.0mL待 检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化

2、的45 -48的营养琼脂15mL18mL ,待琼脂凝固，置36 1温箱培养48h ,计数菌落教。采样结果计算方法：平板上菌落数x稀释倍数细菌总数（cfu/cm2） =采样面积3.2致病菌的检侧：3.2. 1金黄色荀萄球菌检讲：增菌、分离取采样液1mL ,接种于5mL SCDLP液体培养基中，于36 1增渭24h。取1白金耳上述增菌液，在血平板上作划线分离，36 1培养24h o观察菌落特征：在血珠脂平板上菌落形态为金黄色、圆形凸起、表面光滑、周围有溶血圈。（3）镜检：挑取典型菌落作涂片染色镜检，镜下为革兰阳性、成荀萄状排列的球菌。（4）生化反应：取可疑菌落作触酶、葡萄糖发酵、血浆凝固酶、甘露醇

3、发酵、新生霉素敏感试验.均 为阳 性者即为金黄色菊萄球菌。1)甘露醇发酵试验：取上述可疑菌落接种于甘露醇培养基，于36 1培养24h ,发酵甘 露醇产酸者为阳性。2 )血浆凝固试验： 玻片法：沽净玻片一端滴一滴灭菌生理盐水，另一端滴一滴血浆.用白金 耳挑取菌落分别与生理盐水和血浆混匀，5m内观察有无固体颗粒状物，若血桨出现凝块，生理盐 水均匀浑浊为阳性，两者均混浊为阴性。 试管法：吸取1 : 4新鲜血0. 5mL,放在灭菌小试管 中，再加入等量待检菌24h肉汤培养物，混匀后放入36 1孵箱中.同时以已知血浆凝固 酶阳性和阴性菌肉汤培养物作对照，每30s观察一次，6h内出现凝块者为阳性。3 .

4、2. 2.乙型溶血性链球菌检测(1 )增菌、分离：取样1mL ,接种于1 %葡萄糖肉汤，37 增菌24ho取1白金耳增菌液在血 平板上作划线分离，36 1培养24ho(2 )观察菌落特征：菌落形态为灰白色、半透明或不透明、针尖状突起，表面光滑、边缘整齐、 周围有B溶血圈。(3 )镜检：挑取典型菌落作涂片染色镜检，镜下为革兰阳性、呈链状排列的球菌。(4 )生化反应：取可疑菌落作如下生化试验，如触酶阴性、链激酶试验阳性、对杆菌肽敏感者， 即为乙型溶血性链球菌。链激酶试脸：吸取草酸钾血浆0.2疝(0. 02g草酸钾加5mL人血浆混匀，经离心沉淀，吸取上 清)，加入0.8mL灭菌生理盐水混匀后再加入待检菌24h肉汤培养物0.5mL和0.25%氯化钙 0. 25mL,混匀，放入36 1 水浴中，每2min观察一次(一般lOmin内可凝固)，待血浆 凝固后继续观察并记录溶化的时间，如2h内不溶化，移入孵箱观察24h的结果，如全部溶化为阳 性；24h仍不溶解者为阴性。杆菌肽敏感试验：将被检菌浓菌液涂于血平板上.用灭菌摄子取含菌0. 04单位杆菌肽纸片放 在平板表面上。同时以已知阳性菌株作对照，于36 士 1 18h24h ,有抑菌带者为阳性。4结果判定细菌总数Scfu/cn?,并未检出金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌为消毒合格。