血涂片的制备和细胞大小的测量 PPT课件.ppt

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1、一、目的要求一、目的要求一、目的要求一、目的要求 1.掌握血涂片的制备方法；2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态；3.掌握显微测微尺的使用方法。二、实验原理二、实验原理二、实验原理二、实验原理 涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对血液中各种细胞进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。根据测量结果计算各细胞及细胞核的体积根据测量结果计算各细胞及细胞核的体积 椭球形：椭球形：v=4v=4abab2 2/3 a-/3 a-长半径长半径 b-b-短半径短半径 圆球形：圆球形：v=4v=4r r3 3/3 r-/3 r-半径半径 圆柱形：圆柱形：v=rv=

2、r2 2h h r r-半径半径 h-h-高高 实验一、血涂片的制备和细胞大小的测实验一、血涂片的制备和细胞大小的测量量三、实验用品三、实验用品三、实验用品三、实验用品 1.器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、双凹片（推片）。2.试剂:Wrights染液：Wrights色素粉末0.1g，溶于60 ml甲醇。四、实验内容、方法与步骤四、实验内容、方法与步骤四、实验内容、方法与步骤四、实验内容、方法与步骤(见实验指导书见实验指导书)1.血涂片的制备与血细胞的观察 2.显微测微尺的使用五、实验报告五、实验报告五、实验报告五、实验报告 1.1.绘制各种不同类型的血细胞绘制各种不

3、同类型的血细胞,并说明它们的主要作用；并说明它们的主要作用；2.2.任选任选5 5个红细胞，测量其直径，并计算出平均值。个红细胞，测量其直径，并计算出平均值。采血前用70酒精棉球消毒人的指腹采血由于第一滴血中含单核白细胞较多，因此弃去第一滴血推片：挤出第二滴血置于载玻片的右侧再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。3045两玻片的角度以3045为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。染色待涂片在空气中完全干燥待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴后，滴加数滴WrightWrights s染液盖满血膜为止，染色染液盖满血膜为止，染色1

4、 13 min3 min。然后滴加等量。然后滴加等量蒸馏水，使其与染液均匀蒸馏水，使其与染液均匀混合，静置混合，静置101015 min15 min。用蒸馏水冲去染液，吸水用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜检。纸吸干，镜检。红细胞红细胞 也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，无细无细无细无细胞胞胞胞 核，也无细胞器，主要功能是运输和交换氧和二氧化碳。核，也无细胞器，主要功能是运输和交换氧和二氧化碳。核，也无细胞器，主要功能是运输和交换氧和二氧化碳。核，也无细胞器，主要

5、功能是运输和交换氧和二氧化碳。淋巴细胞淋巴细胞 白细胞的一种。由淋巴器官产生，机体免疫应答白细胞的一种。由淋巴器官产生，机体免疫应答白细胞的一种。由淋巴器官产生，机体免疫应答白细胞的一种。由淋巴器官产生，机体免疫应答功能功能功能功能 的重要细胞成分的重要细胞成分的重要细胞成分的重要细胞成分 单核细胞单核细胞 是体积最大的白细胞。其细胞核常偏位，呈多形是体积最大的白细胞。其细胞核常偏位，呈多形是体积最大的白细胞。其细胞核常偏位，呈多形是体积最大的白细胞。其细胞核常偏位，呈多形性，性，性，性，如卵圆形、肾形、马蹄形、不规则形等如卵圆形、肾形、马蹄形、不规则形等如卵圆形、肾形、马蹄形、不规则形等如卵

6、圆形、肾形、马蹄形、不规则形等 嗜中性粒细胞嗜中性粒细胞 即中性白细胞，呈圆形，胞质淡红色。即中性白细胞，呈圆形，胞质淡红色。即中性白细胞，呈圆形，胞质淡红色。即中性白细胞，呈圆形，胞质淡红色。胞核幼稚胞核幼稚胞核幼稚胞核幼稚 型的呈杆状或马蹄形，成熟的呈分叶状，三叶的型的呈杆状或马蹄形，成熟的呈分叶状，三叶的型的呈杆状或马蹄形，成熟的呈分叶状，三叶的型的呈杆状或马蹄形，成熟的呈分叶状，三叶的 较多见，中性粒细胞来源于骨髓的造血干细胞较多见，中性粒细胞来源于骨髓的造血干细胞较多见，中性粒细胞来源于骨髓的造血干细胞较多见，中性粒细胞来源于骨髓的造血干细胞 嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞 是白细胞的一种

7、，是白细胞的一种，是白细胞的一种，是白细胞的一种，嗜酸性粒细胞增多的嗜酸性粒细胞增多的嗜酸性粒细胞增多的嗜酸性粒细胞增多的原因很多：原因很多：原因很多：原因很多：1 1 1 1.变态反应性疾病：如哮喘、荨麻疹、食物过敏和血管神经性水肿。变态反应性疾病：如哮喘、荨麻疹、食物过敏和血管神经性水肿。变态反应性疾病：如哮喘、荨麻疹、食物过敏和血管神经性水肿。变态反应性疾病：如哮喘、荨麻疹、食物过敏和血管神经性水肿。2.2.2.2.各种皮肤病：如天疱疮、疱疹性皮炎等各种皮肤病：如天疱疮、疱疹性皮炎等各种皮肤病：如天疱疮、疱疹性皮炎等各种皮肤病：如天疱疮、疱疹性皮炎等 嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞 胞质内含有

8、较大的、椭圆形的嗜酸性颗胞质内含有较大的、椭圆形的嗜酸性颗胞质内含有较大的、椭圆形的嗜酸性颗胞质内含有较大的、椭圆形的嗜酸性颗粒。这类粒。这类粒。这类粒。这类 白细胞也具有吞噬功能。白细胞也具有吞噬功能。白细胞也具有吞噬功能。白细胞也具有吞噬功能。显微测微尺的使用显微测微尺的使用显微测微尺是用来测量在显微镜下所观察到的显微测微尺是用来测量在显微镜下所观察到的物体的长度、面积的工具，包括镜台测微尺、物体的长度、面积的工具，包括镜台测微尺、目镜测微尺两部分。目镜测微尺两部分。在使用的过程中，镜台测微尺起标定作用，利在使用的过程中，镜台测微尺起标定作用，利用它可以确定目镜测微尺旋钮上每小格代表的用它

9、可以确定目镜测微尺旋钮上每小格代表的实际长度。实际长度。目镜测微尺标定完成后，即可用于细胞样品的目镜测微尺标定完成后，即可用于细胞样品的测量。测量。每格又可分为10个小格，每小格的实际长度为0.01mm=10m总长0.1mm镜台测镜台测微尺微尺总长1mm共分为10格目镜测微尺目镜测微尺可以通过旋转旋钮可以通过旋转旋钮移动目镜测微尺中移动目镜测微尺中交叉线的位置交叉线的位置使用方法使用方法1.1.取下目镜取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜；旋上透镜；2.2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察用低

10、倍镜观察,调调节焦距看清镜台测微尺的刻度；节焦距看清镜台测微尺的刻度；3.3.移动镜台测微尺移动镜台测微尺,同时转动目镜同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近平行靠近,并将两尺的并将两尺的“0”0”点刻度线或某刻度线对齐点刻度线或某刻度线对齐.然后然后从左向右查看两尺刻度线另一重合处从左向右查看两尺刻度线另一重合处,记录重合线间目镜测记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数微尺与镜台测微尺的格数.按下式计算目镜测微尺每格等于按下式计算目镜测微尺每格等于多少微米。多少微米。4.4.移去镜台测微尺，换血涂片，测量细胞长度。移去镜台测微尺，换血涂片，测量细胞长度。细胞

11、长度细胞长度=目镜测微尺测量所占小格数目镜测微尺测量所占小格数目镜测微尺每目镜测微尺每 小格代表的实际长度小格代表的实际长度目镜测微尺的标定 naX=MX:目镜测微尺每格的实际长度a:镜台测微尺每格的实际长度n:镜台测微尺的刻度数。M:目镜测微尺的刻度数。例如：镜台测微尺一小格为10m，在目镜测微尺“0”点到另一点与镜台测微尺正好重合，镜台测微尺的刻度数为5小格，当目镜测微尺的刻度数也为当目镜测微尺的刻度数也为5 5小格，则小格，则目镜目镜测微尺每格的实际长度即为测微尺每格的实际长度即为10m（物镜10）；如目镜测微尺的刻度数为如目镜测微尺的刻度数为2020小格，则目镜测微尺每格的实际长度即为小格，则目镜测微尺每格的实际长度即为2.5m（物镜40）。