动物细胞培养和核移植技术上课用 PPT课件.ppt
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1、教学目标教学目标简述动物细胞培养的过程、条件及应用。简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。重点重点动物细胞培养的过程及条件。用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。难点难点用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。重点难点重点难点 植物细胞工程常用的技术手段植物细胞工程常用的技术手段有哪些?有哪些?那么动物细胞常用的技术手段那么动物细胞常用的技术手段 呢?呢?植物组织培养植物组织培养,植物体细胞杂交植物体细胞杂交问题探讨问题探讨 动物细胞工程:动物细胞工程:动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等动物细胞融合、生产单克隆抗体等 动物细
2、胞培养技术是其他动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的动物细胞工程技术的基础基础教学过程教学过程 从动物机体中取出相关的组从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。这些细胞生长和增殖。原理:细胞增殖 注意关键词:细胞贴壁细胞贴壁 接触抑制接触抑制 原代培养原代培养 传代培养传代培养动物细胞培养的过程:动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液10代细胞代细胞50代细胞代细胞传代培养传代培养无限传代无限传代单个细胞单个细胞加加培养液培养液(分解弹性纤维
3、)(分解弹性纤维)原代培养原代培养胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎细胞株细胞株细胞系细胞系动物组织细胞间隙中动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织定弹性和韧性的组织和器官。和器官。遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质已改变已改变细胞株:细胞株:原代细胞一般传至原代细胞一般传至1010代左右细胞代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到活到40504050代,这种传代细胞为细胞株。代,这种传代细胞为细胞株。细胞系:细胞系:细胞株传代至细胞株
4、传代至5050代后又出现细胞代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。容易传代培养。原代培养:原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第原代细胞。培养的第1 1代细胞与传代细胞与传1010代以内代以内的细胞称为原代细胞培
5、养。的细胞称为原代细胞培养。传代培养:传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养培养瓶中继续培养,称为传代培养。培养器皿动物细胞培养瓶内表面为什么动物细胞培养瓶内表面为什么要光滑、无毒?要光滑、无毒?1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养、营养(葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。等。)3、温度和、温度和PH 36.5+
6、0.5度;PH为7.2-7.4。4、气体环境:、气体环境:O2和和CO2(95%空气和空气和5%CO2)补充合成培养基补充合成培养基中缺乏的物质中缺乏的物质(1 1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。扰素、单克隆抗体等。(2 2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。(3 3)用于检测有毒物质)用于检测有毒物质(4 4)用于生理、病理、药理等方面的研究,)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据为治疗和预防疾病提供理论依据2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?、为
7、什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处?3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?个体?主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有:独特之处有:1、液体培养基、液体培养基 2、成分中有动物血清等、成分中有动物血清等因为这些
8、组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体或组织植物体或组织培养结果培养结果获得细胞获得细胞或细胞分泌蛋白或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动物血清葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养
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