药理学实验课 PPT课件.ppt

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1、实验目的实验目的（1）学习动物基本操作技能）学习动物基本操作技能小鼠的捉小鼠的捉拿、固定及不同给药途径的给药方法。拿、固定及不同给药途径的给药方法。（2）掌握药效学研究试验设计基本原则。）掌握药效学研究试验设计基本原则。（3）学习抗精神分裂症、抗惊厥药物作用研究方法。）学习抗精神分裂症、抗惊厥药物作用研究方法。（4）利用小鼠电刺激激怒实验，小鼠惊厥实验观察未知化）利用小鼠电刺激激怒实验，小鼠惊厥实验观察未知化合物或混合物的药物作用。合物或混合物的药物作用。（1 1）小鼠的捉拿与固定）小鼠的捉拿与固定 （2 2）给药途径）给药途径一一、实验基本实验操作技能实验基本实验操作技能实验内容实验内容右手

2、提起鼠尾右手提起鼠尾,左手拇左手拇指和食指捏住双耳及头指和食指捏住双耳及头部皮肤，无名指、小指部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及和掌心夹其背部皮肤及尾部尾部,便可将小鼠完全固便可将小鼠完全固定。定。单手捉持，用拇指和食单手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指抓住小鼠尾巴，用小指、无名指和手掌压住指、无名指和手掌压住尾根部，再用腾出的拇尾根部，再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠指、食指及中指抓住鼠耳及头部皮肤而固定。耳及头部皮肤而固定。注意事项：注意事项：小鼠捉拿与固定方法小鼠捉拿与固定方法注意事项：注意事项：1.1.取背部及后腿皮下，取背部及后腿皮下，注射时用左手拇指及食指注射时用左手拇

3、指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入，固定后射器将针头刺入，固定后即进行注射。即进行注射。皮下注射皮下注射给药途径给药途径注意事项：注意事项：1 1、针头刺入部位不宜太接近、针头刺入部位不宜太接近上腹部或太深，以免刺破内脏。上腹部或太深，以免刺破内脏。针头与腹腔的角度不宜太小，针头与腹腔的角度不宜太小，避免刺入皮下。避免刺入皮下。2 2、使用针头不宜太粗，避免、使用针头不宜太粗，避免药液注射后从注射孔流出。注药液注射后从注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位。射后可用棉球按一下注射部位。腹腔注射腹腔注射给药途径给药途径注意事项：注意事项：1.1.用左手拇指和食指

4、抓住鼠两耳用左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤，其他三指抓住背部和头部皮肤，其他三指抓住背部皮肤，将鼠抓持在手掌内，固定皮肤，将鼠抓持在手掌内，固定好动物，头部和颈部保持很平好动物，头部和颈部保持很平,右手取注射器进行灌胃。右手取注射器进行灌胃。2.2.灌时针头沿鼠口角通过食管进灌时针头沿鼠口角通过食管进入胃内。灌时如很通畅，则表示入胃内。灌时如很通畅，则表示针头已进入胃内；如动物有呕吐针头已进入胃内；如动物有呕吐动物或强烈挣扎，必须拔出后按动物或强烈挣扎，必须拔出后按上述方法重新操作。决不可进针上述方法重新操作。决不可进针不顺硬向里插。不顺硬向里插。灌胃给药灌胃给药给药途径给药途径注意事项：

5、注意事项：1.1.操作时先将动物固定在暴露尾部的鼠操作时先将动物固定在暴露尾部的鼠尾固定器中，使尾巴露出。尾部用尾固定器中，使尾巴露出。尾部用45455050的温水浸润半分钟或用的温水浸润半分钟或用75%75%酒精反酒精反复擦拭，使血管扩张，并可使表皮角质复擦拭，使血管扩张，并可使表皮角质软化。软化。2.2.采用右手持注射器连采用右手持注射器连4(1/2)4(1/2)号细针头，号细针头，对准血管中央以小于对准血管中央以小于3030角进针，一般角进针，一般尽量选用尾静脉下尽量选用尾静脉下1/31/3处，约距尾尖处，约距尾尖2-32-3厘米。当针头在尾静脉平行推进少许后，厘米。当针头在尾静脉平行推

6、进少许后，左手的三指将针头和鼠尾一起捏住并固左手的三指将针头和鼠尾一起捏住并固定。先缓注少量药液，如无阻力，表示定。先缓注少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。如出现针头已进入静脉，可继续注入。如出现白色皮丘说明未刺入血管，应拔出针头白色皮丘说明未刺入血管，应拔出针头重新穿刺。注射完毕后把尾部向注射侧重新穿刺。注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。弯曲以止血。静脉给药静脉给药给药途径给药途径二、药理学实验设计基本原则二、药理学实验设计基本原则 一、对照原则一、对照原则 1.1.阴性对照阴性对照 2.2.阳性对照阳性对照 3.3.模型对照模型对照 4.4.配对对照配对对照 5.5.组

7、间对照组间对照 6.6.历史对照历史对照二、随机原则二、随机原则 三、重复原则三、重复原则 1.1.重现性重现性 2.2.重复数重复数四、量四、量效关效关 系原则系原则五、单盲和双五、单盲和双 盲原则盲原则教学分组教学分组在一个教学单元内，根据学生人数，将学在一个教学单元内，根据学生人数，将学生分为生分为8 8组，每组组，每组2 25 5人，分为上、下两人，分为上、下两个班。个班。试验方案试验方案受试样品：受试药受试样品：受试药A,BA,B。上半班采用受试药上半班采用受试药A A试验，下半班采用受试验，下半班采用受试药试药B B试验。试验。建议样品：建议样品：A-A-洋金花水提取物；洋金花水提

8、取物；B-B-洋金花洋金花醇提取物。醇提取物。教学实验安排及内容教学实验安排及内容试验材料试验材料0.08%氯丙嗪，5%可拉明，1%苯巴比妥钠，生理盐水。小白鼠1822g，雄性，非同笼喂养。动物试剂、药品A药、B药。建议受试药A-洋金花水提物；B-洋金花醇提物。受试物YSD-4（或5）型药理生理多用仪及附件激怒盒，万用电表，小动物电子秤，鼠笼，1ml注射器，5号针头试验器材试验器材试验一电刺激小鼠电刺激小鼠激怒试验激怒试验 试验二抗惊厥试验抗惊厥试验 实验内容实验内容原理：原理：以弱电流或低电压刺激鼠足部，引以弱电流或低电压刺激鼠足部，引 起鼠间对峙、格斗和互咬等激怒反应，以起鼠间对峙、格斗和

9、互咬等激怒反应，以此为指标观察受试物的对狂躁动物的镇静此为指标观察受试物的对狂躁动物的镇静作用。作用。以氯丙嗪为阳性对照药、生理盐水为以氯丙嗪为阳性对照药、生理盐水为阴性对照药。阴性对照药。1 电刺激小白鼠激怒试验电刺激小白鼠激怒试验筛选指标：取异笼喂养的小鼠各一只，称重后，筛选指标：取异笼喂养的小鼠各一只，称重后，放入附件激怒盒的导电铜丝板上，把盖子盖上后，放入附件激怒盒的导电铜丝板上，把盖子盖上后，将电源打开，调节交流电输出旋钮，直至小鼠出将电源打开，调节交流电输出旋钮，直至小鼠出现激怒反应，刺激电压一般为现激怒反应，刺激电压一般为30V30V左右。左右。激怒反应表现为：两鼠对立、前肢离地

10、、对峙、激怒反应表现为：两鼠对立、前肢离地、对峙、互相嘶咬等，若刺激互相嘶咬等，若刺激1min1min以上仍未出现者弃之不以上仍未出现者弃之不用。以上方法挑选有激怒反应的合格小鼠四对，用。以上方法挑选有激怒反应的合格小鼠四对，编号。并记录刺激电压值。编号。并记录刺激电压值。小鼠筛选方法：小鼠筛选方法：实验步骤实验步骤第一对第一对小鼠小鼠第二对第二对小鼠小鼠第三对第三对小鼠小鼠第四对第四对小鼠小鼠生理盐水 0.08%氯丙嗪 4mg/ml(按原生药含量)A药或B药高浓度 2mg/ml(按原生药含量)A药或B药低浓度 给药：腹腔注射给药体积0.1ml/10g 给药20min后，先用万用电表调节刺激输

11、出电压至给药前引起激怒反应的阈电压，断开电源，将一对小鼠置于导电铜丝板上，再打开电源，刺激1min观察两对小鼠给药前后反应的差异。原理：原理：可拉明为中枢兴奋药，过量可引起惊厥。可拉明为中枢兴奋药，过量可引起惊厥。本试验以可拉明为惊厥模型，观察受试药物的本试验以可拉明为惊厥模型，观察受试药物的抗惊厥作用。抗惊厥作用。戊巴比妥钠为长效抗惊厥药。本实验以之戊巴比妥钠为长效抗惊厥药。本实验以之为阳性药。为阳性药。2 抗惊厥试验抗惊厥试验 1%苯巴比妥溶液 生理盐水 受试物高剂量组，4mg/mlA或B溶液受试物低剂量组 2mg/ml A或B溶液阴性阴性对照组对照组阳性阳性对照组对照组受试受试药物组药物

12、组给药方式：预防给药方式：预防 i.p.给药给药给药体积均为给药体积均为0.1ml/10g实验步骤实验步骤 造模方法：给药20min后 皮下注射5%可拉明（0.1ml/10gb.w.）观察并记录小鼠反应和死亡情况。表表1 1 受试物对电刺激小白鼠激怒作用的影响受试物对电刺激小白鼠激怒作用的影响原始记原始记录录表表2 2 受试物对可拉明致小鼠惊厥作用的影响受试物对可拉明致小鼠惊厥作用的影响原始记原始记录录按上下班统计数据，计算阳性率或死亡率，按上下班统计数据，计算阳性率或死亡率，并进行显著性差异比较。数据用表格表示，并进行显著性差异比较。数据用表格表示，示范表格如下：示范表格如下：结果处理结果处理实验结实验结果果 表表3 3 受试物对电刺激小鼠激怒作用的影响受试物对电刺激小鼠激怒作用的影响实验结实验结果果表表4 4 受试物对可拉明致小鼠惊厥作用的影响受试物对可拉明致小鼠惊厥作用的影响实验结实验结果果小鼠激怒反小鼠激怒反应说明了氯应说明了氯丙嗪的哪些丙嗪的哪些药理作用和药理作用和机制？机制？苯巴比妥钠苯巴比妥钠长效抗惊厥长效抗惊厥的原理是什的原理是什么？么？问题与思考问题与思考